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2001
TOXICOLOGA ANALTICA
Revista de Toxicologa, ao/vol. 18, nmero 003
Asociacin Espaola de Toxicologa
Pamplona, Espaa
pp. 177-180
177
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mico, ya que los niveles de deteccin y la sensibilidad son significativamente diferentes. Una vez separadas las fracciones "soluble"
e " insoluble", siguiendo el criterio adoptado por la Norma ISO/WD
16740, se estudian de forma comparativa dos procesos de especiacin de cromo: analizando en el mismo medio las dos formas de cromo (el cromo hexavalente mediante el procedimiento colorimtrico
de la difenl-carbazida, y el cromo total mediante GFAAS), o bien
separando previamente el cromo hexavalente con Amberlita LA-2,
determinando tanto el cromo hexavalente como el trivalente por
GFAAS. Los resultados obtenidos han permitido establecer, en primer lugar, las condiciones experimentales para la determinacin de
cromo en presencia de diferentes concentraciones de hierro por
GFAAS y, en segundo lugar, la influencia de la presencia de hierro
en la extraccin selectiva de cromo hexavalente con la resina de
intercambio inico.
TAN-10.
INTOXICACIN POR DICLOROBENCENO. DETERMINACIN POR MICROEXTRACCIN EN FASE SLIDA Y CROMATOGRAFA DE GASES-ESPECTROMETRA DE MASAS.
D. Olano, M. P. Gimnez, M. Menndez. Instituto Nacional de
Toxicologa. Sevilla. Apdo. 863.
Se presenta un caso de una mujer de 27 aos que ingresa en el hospital por presentar trastornos neurolgicos, gastrointestinales y drmicos desde haca dos meses. Haba estado tomando un reparado
antipolillas que contena p-diclorobenceno durante seis meses. Se
describe un mtodo de extraccin de p-diclorobenceno y su metabolito, 2,6-diclorofenol, en tejido graso y orina respectivamente,
usando microextraccin en fase slida de espacio en cabeza. Su
identificacin y cuantificacin se han llevado a cabo usando CGEM-EI. Las concentraciones en las matrices biolgicas se han determinado empleando como patrones internos sus respectivos compuestos deuterados.
TAN-11.
LA CG/EM-PCI EN EL ANLISIS DE COCANA Y SUS PRINCIPALES METABOLITOS EN SALIVA. P.Cmpora, A.M. Bermejo, M.J.Tabernero, P.Fernndez. Instituto de Medicina Legal. Seccin de Toxicologa Forense. Facultad de Medicina. Santiago de
Compostela.
La cocana y sus principales metabolitos, ecgoninametil ster
(EME) y benzoilecgonina (BEG), pueden ser determinadas en saliva por CG/EM-PCI, lo que convierte a esta muestra en una buena
alternativa a la sangre y/o orina, ya que su recogida es sencilla y sin
riesgos de manipulacin y ofrece informacin valiosa sobre el consumo reciente de esta droga. El procedimiento de extraccin en saliva fue lquido-lquido con Toxitubos A, y los analitos extrados
derivatizados con BSTFA-TMCS (1%). El anlisis por CG/EM fue
en modalidad de ion selectivo (SIM), utilizando para la ionizacin
qumica metano como gas reactivo (20 mL/min). La respuesta del
detector fue lineal para cada analito en un rango de concentraciones
de 25-1000 ng/mL, con unos coeficientes de variacin menores del
7%, y un rendimiento de extraccin mayor del 95%. Los lmites de
deteccin fueron de 0,9; 2,2; y 0,2 ng/mL para EME, cocana y
BEG, respectivamente. Se analizaron 46 muestras reales, resultando
19 de ellas positivas para EME (3,5-128,4 ng/mL), 19 para cocana
(7,8-513,3 ng/mL) y 43 para BEG (21,6-427,5 ng/mL). Conclusin:
La espectrometra de masas por ionizacin qumica positiva resulta
idnea para el anlisis de cocana y sus metabolitos en saliva, siendo el analito predominante en este fluido biolgico la benzoilecgo-
nina.
TAN-12.
LA CROMATOGRAFA DE GASES APLICADA A LA DETERMINACIN DE COCANA Y SUS METABOLITOS EN HUMOR
VTREO. P.Fernndez, A.M.Bouzas, M.Len, A.M. Bermejo,
M.J.Tabernero. Instituto de Medicina Legal. Seccin de Toxicologa
Forense. Facultad de Medicina. Santiago de Compostela.
Se propone un mtodo de cromatografa de gases con detector de
ionizacin de llama para la determinacin de cocana, benzoilecgonina y ecgoninametilester en humor vtreo, utilizando proadifn
como patrn interno. Tras someter las muestras a un proceso de
extraccin slido-lquido con columnas Bond Elut Certify, y a su
derivatizacin con BSTFA-TMCS (1%), se estudi la correlacin
entre los cocientes de reas de los compuestos/patrn interno y las
concentraciones, resultando ser lineal en el rango de 1-20 mg/mL.
Las rectas de calibrado obtenidas en humor vtreo fueron:
y=0,0384x-0,0063 para la cocana; y=0,0325x-0,0136 para la benzoilecgonina e y=0,0218x-0,0039 para la ecgoninametilester, con
unos coeficientes de correlacin de 0,9992; 0,9980 y 0,9963, respectivamente. Se estudi la precisin del mtodo, obtenindose
unos coeficientes de variacin por debajo del 10%. Los lmites de
deteccin y de cuantificacin resultaron ser aceptables, considerando los niveles de cocana y metabolitos encontrados en las muestras
reales analizadas. Las concentraciones de cocana en humor vtreo
procedente de sujetos intoxicados por esta droga, sola o con opiceos, oscilaron entre 0,24 y 3,96 mg/mL; las de benzoilecgonina, entre
0,24 y 4,52 mg/mL; y las de ecgoninametilester, entre 0,28 y 3,36
mg/mL.
TAN-13.
MTODO ENZIMTICO AUTOMATIZADO PARALADETERMINACIN DE ETANOL. P Var(*), M Rodrguez(*), V Carrera(**). (*)Dpto. Ingeniera Qumica. Universidad de Alicante.
Pedro.varo@ua.es. (**)Divisin de Toxicologa. Universidad
Miguel Hernndez.
La determinacin de etanol en cervezas sin alcohol mediante mtodo enzimtico ha sido recomendado por varios autores. Existen kits
comerciales para determinacin enzimtica de etanol en alimentos,
pero todos ellos presentan el inconveniente de aplicarse de forma no
automatizada. Es por ello que el disponer de mtodos rpidos automatizados y con un lmite de deteccin adecuado para el contenido
alcohlico de estas bebidas ha sido hasta ahora motivo de investigacin. Se ha utilizado el analizador Syva ETS Plus (Syva Co.) con
software versin 4.04. El sistema ETS Plus puede realizar la tcnica de Emit ETS Plus Alcohol Etlico para el anlisis cuantitativo de alcohol etlico en muestras de orina o suero/plasma. El mtodo se basa en la determinacin enzimtica de etanol con alcohol deshidrogenasa. En este trabajo se informa sobre la repetibilidad y
reproductibilidad de un mtodo enzimtico automatizado utilizado
en diagnstico clnico aplicado a la cuantificacin de alcohol etlico
en cervezas sin alcohol. En controles acuosos (0.05-0.06 % v/v etanol) se encontr una repetibilidad (r95) de 0.006, y una reproducibilidad (R95) de 0.011. En cervezas sin alcohol (alc.<0.5 % vol.),
r95 y R95 obtenidas fueron 0.017 y 0.038 respectivamente. El mtodo de ensayo propuesto es particularmente til para la determinacin de etanol en cervezas sin alcohol. La precisin obtenida es
comparable a otros mtodos.El lmite de deteccin es de 0.01% v/v.
TAN-14.
TAN-15.
UN SENCILLO SISTEMA DE GENERARACIN DE HIDRUROS ACOPLADO A ESPECTROSCOPIA DE EMISIN DE
PLASMA. H.Bueno, M.L.Lpez, J.L.Valverde. Colaboradores:
M.A.Serrano, S.Gonzalez. Instituto Nacional de Toxicologa.
Departamento de Barcelona.
La tcnica de hidruros conlleva la reaccin de una muestra acuosa
acidificada con un agente reductor como el borohidruro sdico. Es
frecuentemente utilizada para la deteccin sensible de elementos
como As, Sb, Se, Bi, Te Para la utilizacin de la tcnica de hidruros lo ms habitual es el acoplamiento de un sistema FIAS con EAA
o ICP. El acoplamiento de la tcnica de hidruros con ICP frente al
acoplamiento con EAA presenta la ventaja de la facilidad de anlisis (no necesita cambio de lmparas, presenta amplios rangos de
linealidad,). En este trabajo se presenta un sencillo sistema de tcnica de hidruros para ICP, en la cual, mediante el uso de una nica
bomba peristltica del equipo ICP y un colector acoplado donde se
produce la mezcla de muestra y agente reductor, se introducen en el
nebulizador los hidruros generados. Presentamos los rangos de linealidad obtenidos, lmites de deteccin y cuantificacin, as como la
precisin de resultados para los elementos que forman hidruros
mediante este sistema frente al sistema convencional de anlisis por
ICP.
TOXICOLOGABIOQUMICA
TB-1.
ACTIVIDAD HIDROLIZANTE DE PARAOXON Y SU DISTRI-
BUCIN EN 2891 MUESTRAS DE SUERO HUMANO. V. Carrera(1), I. Llopis(2), P. Varo(3), J. Sastre(2), Vilanova E(1). (1)Divisin de Toxicologa. Universidad Miguel Hernndez. E-03550Campus de San Juan. Alicante. v.carrera@umh.es. (2)Hospital Virgen de los Lirios.Alcoy. (3) Departamento de Ingeniera Qumica.
U. Alicante.
En este trabajo se midi la actividad hidrolizante de paraoxn por un
mtodo automatizado (autoanalizador HitachiR) de uso rutinario en
los laboratorios clnicos y adaptado previamente. Se estudi la distribucin de la actividad paraoxonasa en el suero procedente de
extracciones realizadas, en tubos con heparina sdica, a 2891 personas del rea de salud de Alcoy que acudieron a diversos centros para
la realizacin de exmenes rutinarios de salud en atencin primaria.
Los resultados obtenidos muestran que la media de la actividad
paraoxonasa en suero fue 70.2 16.5 UI/L. La actividad fue menor
en los nios de menos de 15 aos (p<0.0005) y en las personas
mayores de 56 aos (no significativo). Los valores fueron mayores
de la media en las mujeres que en los hombres (p<0.0005). La actividad srica humana mostr una distribucin unimodal en la poblacin estudiada en contraste con otros estudios en otras poblaciones
que mostraron una distribucin bimodal. AGRADECIMIENTOS:
FIS (95/0053-02). Beca postdoctoral FIS para I. Llopis.
TB-2.
ALTERACIN DE LA PARAOXONASA /ARILESTERASA
PLASMTICAEN ELCURSO DE LAEXPOSICIN CRNICA
A PLAGUICIDAS. AF Hernndez, MA, Gmez, G Pena*, F Gil, L
Rodrigo, A Pla, E Villanueva. Depto. Medicina Legal y Toxicologa,
Facultad de Medicina, Universidad de Granada. *Centro de Salud
Motril Este.
La Paraoxonasa/Arilesterasa (PON) constituye la misma expresin
proteica de dos actividades catalticas distintas (utilizando paraoxn
y fenilacetato como sustratos, respectivamente). La PON presenta
una distribucin polimrfica en la poblacin, existiendo al menos
tres fenotipos sricos distintos. Se ha sugerido que aquellos individuos que presentan un fenotipo BB (homozigotos para la alta actividad enzimtica) tendran una mejor proteccin frente a la exposicin crnica a organofosforados (OP) que los homozigotos de baja
actividad (AA). En el presente estudio se ha monitorizado la PON
(sus dos actividades catalticas) en un grupo de 105 trabajadores de
invernadero, con diferente grado de exposicin a plaguicidas, a lo
largo de un ciclo anual de fumigacin. No se observaron diferencias
significativas en la paraoxonasa de los diferentes grupos de trabajadores, ni tampoco en la de cada grupo a lo largo del ciclo. Aunque
las mujeres presentaron un valor superior al de los hombres, las diferencias no fueron significativas. La paraoxonasa no se correlacion
con ningn otro parmetro enzimtico estudiado y, en el caso de las
mujeres, se observ un descenso significativo con la edad. Por el
contrario, la arilesterasa (ArE) de los trabajadores expuestos a plaguicidas fue significativamente superior a la de los controles en todo
el ciclo de fumigacin, debido al efecto de la exposicin. Aproximadamente un 10% de la variabilidad de la ArE se explica por la
exposicin a plaguicidas. No se observaron diferencias significativas por sexo, aunque las mujeres presentaron valores ms altos. En
el anlisis de correlacin, la ArE mostr una asociacin directa con
la exposicin a plaguicidas (ms evidente en el momento de mxima fumigacin) y, en el caso de las mujeres, con la colinesterasa (r=
0.425). Agradecimientos. Este estudio ha sido financiado por el
Fondo de Investigaciones Sanitarias FIS-96/0232.