TCNICAS

BACTERIOLGICAS
BSICAS
SEMINARIO
MICROBIOLOGA GENERAL
Bioqca. MARA CELIA GMEZ OMIL DE MONZN

FLORA NORMAL o HABITUAL

HONGOS
VIRUS
BACTERIAS

NACIMIENTO

DISPONIBILIDAD

Son aquellos microorganismos (bacterias, hongos , parsitos y

virus) que habitualmente encontramos sobre la superficie o en
el interior del cuerpo de las personas y animales sanos.

Se adquiere durante y poco despus del nacimiento y cambia

de constitucin en forma permanente a lo largo de la vida.

La composicin de esta flora vara con la disponibilidad de

nutrientes, el pH, la concentracin de O2 ,colonizacin por
otros MO,receptores, etc.

FLORA COMENSAL o HABITUAL

MICROORGANISMOS OPORTUNISTAS
Forman parte de la flora habitual o saprofita.
En determinadas ocasiones y coincidiendo con
un descenso en las defensas del hospedador
pueden provocar procesos infecciosos.

MICROORGANISMOS PATGENOS

Provienen del Exterior y

llegan al organismo por
una puerta de entrada
causando infecciones
exgenas.

Provienen del Propio

Organismo. Son
bacterias oportunistas,
que integraban la flora
normal, y que por
determinados factores
alcanzaron la capacidad
de producir infecciones
endgenas.

En cualquier caso , para iniciar la infeccin, los microorganismos deben

fijarse o adherirse a las clulas y colonizar el epitelio

FLORA NORMAL
VAS RESPIRATORIAS
Streptococcus Staphylococcus Haemophilus Neisseria Enterobacterias y
otros

VAS URINARIAS
Staphylococcus coag neg- Enterobacterias Lactobacillus Streptococcus
Bacillus y otros

PIEL Y MUCOSAS
Staphylococcus coag neg- Enterobacterias Streptococcus Bacillus y otros

APARATO GENITAL
Enterobacterias Enterococcus Lactobacillus Anaerobios y otros

SOSPECHA DE INFECCIN
REAS ESTRILES

BRONQUIOS

ESTMAGO

TRACTO
GENITAL
SUPERIOR

TRACTO
URINARIO
ALTO

SANGRE

DIAGNSTICO BACTERIOLGICO
DIAGNSTICO DIRECTO
OBSERVACIN DEL AGENTE CAUSAL
RECUPERACIN EN MEDIOS DE CULTIVO
DIAGNSTICO INDIRECTO

DETECCIN DE AG o AC (RESPUESTA INMUNE)

PRODUCTOS DEL METABOLISMO DEL AGENTE
INFECTANTE

DIAGNSTICO BACTERIOLGICO
RDEN MDICA

RECOLECCIN

TRANSPORTE Y CONSERVACIN

PROCESAMIENTO

AISLAMIENTO - IDENTIFICACIN

SENSIBILIDAD ANTIBITICA

INFORME FINAL

DIAGNSTICO CLNICO

TRATAMIENTO

MUESTRAS MICROBIOLGICAS
MUESTRAS APROPIADAS

REPRESENTATIVAS

DE CALIDAD

SIN CONTAMINACIN

DEL MEDIO AMBIENTE

FLORA PROPIA DEL PACIENTE

MOMENTO ADECUADO

ANTES DE LOS ATB

CUADRO CLNICO

OBTENCIN DE MUESTRAS
BACTERIOLGICAS
EMISIN ESPONTNEA
MAT. FECAL ORINA - ESPUTO

HISOPADOS
SECRECIONES FARNGEAS VAGINALES URETRALES

PUNCIONES
LCR SANGRE LIQ PLEURAL LIQ.
ARTICULARES ABSCESOS

BIOPSIAS RASPADOS CATTERES

 ESPUTO
ORINA
SECRECIONES DEL
ENDOMETRIO
SECRECIONES
SINUSALES
PARA SU OBTENCIN
SE ATRAVIESA FLORA
HABITUAL

PROFUNDAS SIN COMUNICACIN AL

EXTERIOR

PIEL
MUCOSAS
MATERIA
FECAL
SECRECIONES

PROFUNDAS CON COMUNICACIN AL

EXTERIOR

SUPERFICIALES

MUESTRAS BACTERIOLGICAS

SANGRE
LCR
LQUIDOS
ARTICULARES
PUNCIN
PLEURAL
PUNCIN
PERICRDICA
SON
NORMALMENTE
ESTRILES

MUESTRAS BACTERIOLGICAS
URINARIAS
UROCULTIVO

RESPIRATORIAS
ESPUTO BAL ASPIRADOS TRAQUEALES LQUIDOS PLEURALES

BIOLGICAS GENERALES
EXUDADOS DE FAUCES PUNCIONES ASPIRACIONES LCR LQUIDOS PERITONEALES

SANGRE
HEMOCULTIVOS CATTERES - RETROCULTIVOS

PIEL Y TEJIDOS BLANDOS

ABSCESOS LQ ARTICULARES -

GASTROINTESTINALES
COPROCULTIVOS -

GENITALES
EXUDADOS VAGINALES Y URETRALES

HISOPOS
ALGODN
LOS RESIDUOS GRASOS INHIBEN A CHLAMYDIA
LOS PALITOS DE MADERA INACTIVAN A UREAPLASMA spp

ALGINATO
TXICOS PARA NEISS. GONORRHOEAE Y CULTIVOS CELULARES
UTILES PARA RECUPERAR CHLAMYDIA

TOMA DE MUESTRAS

REPRESENTATIVAS

SIN
CONTAMINACIN

CANTIDAD
SUFICIENTE

MOMENTO
ADECUADO

CONSERVACIN Y
TRANSPORTE
ADECUADOS

TOMA DE MUESTRAS
NOMBRE DEL PACIENTE
TIPO DE MUESTRA ZONA DE OBTENCIN
DIAGNSTICO PRESUNTIVO ENFERMEDAD DE BASE
NOMBRE DEL MDICO
SALA Y CAMA
FECHA Y HORA DE OBTENCIN DE LA MUESTRA
TRATAMIENTO ANTIBITICO

MUESTRAS
UNA MUESTRA INADECUADA
CONTAMINADA
MAL OBTENIDA
ESCASA
MAL CONSERVADA
TRANSPORTE INAPROPIADO

RESULTADOS CONFUSOS

AFECTA EL
CORRECTO
TRATAMIENTO
DEL PACIENTE

TRANSPORTE DE LA MUESTRA
MEDIOS DE
TRANSPORTE

STUART
CARY BLAIR
AMIES

RECIPIENTES

ESTRILES
BIEN CERRADOS

TRANSPORTE
EXTERNO

COMERCIALES
TRIPLE ENVASES

CONSERVACIN DE LAS MUESTRAS

TODAS LAS MUESTRAS DEBEN ESTAR PROTEGIDAS
DE EFECTOS DAINOS HASTA SER PROCESADAS
CONTAMINACIN DESTRUCCIN DESECACIN CALOR - INHIBICIN DE
CRECIMIENTO

LO IDEAL ES EL PROCESAMIENTO INMEDIATO

REFRIGERAR: ORINA ESPUTOS CATTERES

PARA PROLONGAR LA SUPERVIVENCIA SE UTILIZAN LOS MEDIOS DE

TRANSPORTE

NO REFRIGERAR: HEMOCULTIVOS LCR EXUDADOS MAT

FECAL

Transporte externo
Triple envase

No se envan placas con

cultivos

PROCESAMIENTO

MUESTRA
EXMEN DIRECTO
Macro y
Microscpico

COLORACIONES
Gram ZN
GIEMSA KYNYOUN

SIEMBRA EN
MEDIOS DE
CULTIVO:
LQUIDOS Y
SLIDOS
ENRIQUECIDOS SELECTIVOS
DIFERENCIALES -

IDENTIFICACIN
BACTERIANA
CLSICA O
COMERCIAL
ANTIBIOGRAMA

CONCEPTOS A TENER EN CUENTA

INCULO : Es la cantidad de MO introducidos en tejidos vivos o
medios de cultivo.
SIEMBRA DE LA MUESTRA
MEDIOS LQUIDOS Y SLIDOS
INFECCIN

COLONIA (POBLACIN HOMOGENEA) agrupacin de bacterias

BACTERIAS QUE PROVIENEN DE UNA SOLA CLULA
FORMAN UN CULTIVO PURO
UFC: Unidades Formadoras de Colonias
CEPA: CULTIVO PURO FORMADO POR DESCENDIENTES DE UNA SOLA BACTERIA

IDENTIFICACIN BACTERIANA
PRUEBAS BIOQUMICAS QUE PERMITEN COLOCAR A LA BACTERIA AISLADA EN UNA
ESPECIE POR SUS CARACTERSTICAS TAXONMICAS (ASPECTOS MORFOLGICOS,
CULTURALES Y GENTICOS)

EXMEN DIRECTO
FRESCO
CALIDAD
MUESTRA
REACCIN INFLAMATORIA

PARSITOS
LEVADURAS
BACTERIAS

CONTAMINACIN

EXMEN EN FRESCO

COLORACIONES
GRAM
CRISTAL VIOLETA LUGOL DECOLORANTE - SAFRANINA

ZIHEL NEELSEN
FUCSINA FENICADA ALCOHOL CIDO AZUL DE METILENO

GIEMSA
GIEMSA DILUIDO

KINYOUN
ZIHEL NELSEEN MODIFICADO ( SIN CALENTAMIENTO)

COLORACION DE GRAM

COLORACIN DE GRAM

COLORACIN DE ZIEHL NEELSEN

COLORACIN DE ZIEHL NEELSEN

COLORACIN DE GIEMSA

COLORANTE DE WRIGT diluido

COLORACIN DE GIEMSA

LlEISHMANIASIS
Histoplasma capsulatum

COLORACIN DE KINYOUN
Nocardias

ooquistes

LA TCNICA ES IGUAL A LA DE ZIEHL NEELSEN PERO NO SE CALIENTA

SIEMBRA DE MUESTRAS
SE REALIZA SIEMPRE CON ASEPSIA PARA NO
INTRODUCIR MO CONTAMINANTES EN LA
MUESTRA.

MEDIOS
LQUIDOS

PLACAS DE
PETRI

TUBOS CON
MEDIOS
SLIDOS

SIEMBRA
MEDIO
LQUIDO

AGOTAMIENTO
ESTRA

PARA
RECUENTO
DE COLONIAS

INSTRUMENTOS PARA SEMBRAR

ANSA CALIBRADA
ANSA DE SIEMBRA POR
PICADURA
PIPETA PASTEUR
JERINGA
HISOPO
VERTIDO EN PLACA

SIEMBRA
Siembra para inoculacin:
Se toma una pequea porcin de la muestra y se la
dispersa en el medio de cultivo.
Se puede inocular en medio lquido o en medio slido.

Siembra para aislamiento:

Se utiliza para obtener cultivos puros.
Se siembra en placas de Petri que contienen medios de
cultivo slidos.

TCNICAS DE CULTIVO
De lquido a placa: dos formas:
a) Estra en placa, Ansa de cultivo o ansa de
vidrio.
b) Extensin en placa.

De lquido a tubo:
a) En tubo inclinado. Aumenta la superficie.
b) En Tubo no inclinado. Por picadura.
c) Semislido. Por picadura.

TCNICAS DE SIEMBRA
Siembra en estra o zig-zag

Siembra por estra mltiple

Siembra de los cuatro
cuadrantes
Siembra de los tres giros.

TCNICAS DE SIEMBRA
EN MEDIO LQUIDO

DESDE UNA
MUESTRA
BIOLGICA

A
PARTIR
DE UNA
COLONIA

DESDE UNA
SUSPENSIN
BACTERIANA

CON HISOPO , CON PIPETA O JERINGA , CON ANSA O

POR VERTIDO

TCNICAS DE SIEMBRA
EN MEDIO SLIDO

EN PLACA

EN TUBO

EN UNA SOLA
DIRECCIN, SIMPLE O
POR AGOTAMIENTO.

POR PUNCIN

EN 3 o 4 DIRECCIONES
POR DILUCIN

ESTRIADO EN BISEL

SIEMBRA POR AGOTAMIENTO

EXUDADO DE FAUCES

CON HISOPO

CULTIVOS
TEMPERATURA

ENTRE 35 Y 37
ATMSFERA
AEROBIOSIS ANAEROBIOSIS MICROAEROFILIA
CON HUMEDAD
TIEMPO DE INCUBACIN
24 a 48 hs

ESTUDIO DE LAS COLONIAS

CARACTERSTICAS MACROSCPICAS
SWARMING

COLOR HEMLISIS
TEXTURA: CREMOSAS SECAS
COLORACIONES DE LAS COLONIAS
GRAM Y ZIEHL NEELSEN

IDENTIFICACIN BACTERIANA COMERCIAL/ MANUAL

MARCHAS BIOQUMICAS DE
IDENTIFICACIN

TSI AGAR

PRUEBAS BIOQUMICAS

OXIDASA
CATALASA

COAGULASA

PYR

Cmo hacemos?

MTODO DE DIFUSIN
Las pruebas de sensibilidad a los
antimicrobianos evalan la capacidad
de un frmaco antibacteriano para
inhibir in vitro el dasarrollo bacteriano.
Esta capacidad puede determinarse por
el mtodo de dilucin o por el mtodo
de difusin

QUIEREN UN RECREO??????