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ALUMNA:
CURSO:
CICLO:
PROFESOR:
Biotecnologa General
X-B
TRUJILLO PER
2014
Saintpaulia ionantha Wendi violeta africana es una planta ornamental de gran inters
dentro del comercio y la jardinera, esta planta es originaria del este de frica pero se
encuentran ampliamente distribuidas por todo el mundo a travs de las asociaciones de
floricultores y aficionados. Las violetas son plantas muy apreciadas porque presentan gran
diversidad morfolgica y con una amplia gama de tonalidades de flores que van desde
violeta prpura a blancas. En la actualidad, se conocen ms de 20 especies y cientos de
variedades, las que se propagan por germinacin de semillas o en forma vegetativa por
esquejes, aunque actualmente se vienen desarrollando diversas tcnicas de cultivo in
vitro para obtener violetas africanas a gran escala, a partir de pequeas porciones de
peciolo y tejido foliar (Badillo J, 2009).
El objetivo de esta prctica fue obtener plntulas a partir del cultivo invitro de explantes
deSaintpaulia ionantha violeta africana, como tambin , evitar su contaminacin.
MATERIAL Y METODOS
Medio de cultivo
El medio de cultivo de Murashige y Skoog, fue proporcionado por el profesor, el cual
preparamos y dispensamos en cinco frasquitos de penicilina.
Colecta del material biologico
Para el desarrollo de la prctica, previamente se adquirieron las plantas de violeta
africana y se las conservo en el jardn botnico durante 2 semanas con la finalidad de
disminuir cualquier problema de contaminacin (hongos, bacterias, polvo, etc.). Se
procedi a recolectar hojas de la planta de violeta africana y se colocaron inmediatamente
en un depsito con agua de cao, para evitar la deshidratacin. Se determin el explanto y
se extrajeron 6 cuadraditos de las hojas obtenidas de aproximadamente 1 cm2. Los tejidos
a cultivar in vitro , seguidamente se transfirieron a un depsito para su esterilizacin.
Esterilizacin del lugar de trabajo
Se desinfect la mesa de trabajo ,con hipoclorito de sodio y se limpiaron con alcohol , todos
aquellos frascos y materiales que se iban a utilizar. En un frasco se coloc algodn y se
agreg alcohol de 96 ,el cual sirvi para colocar las pinzas y bisturi a utilizar.
En otro frasco se agreg alcohol al 70 % y en otro , hipoclorito de sodio al 1%, ambos para
la desinfeccin de los explantes. Tambin se colocaron dos mecheros separados 20 cm uno
del otro. Por ltimo, se usaron mascarilla y gorro para el cabello, durante la manipulacin
de los explantes, disminuyendo de esta manera, cualquier contaminacin.
Desinfestacin de los explantos
En una placa Petri estril se colocaron los explantes con alcohol etlico de 70 por 30
segundos,
hipoclorito de sodio al 1% por dos minutos, inmediatamente se enjuag con agua destilada
por 5 veces nuevamente.
Iniciacin del cultivo
Con la ayuda del bistur se transfirieron , cuidadosamente para no daar el material, cada
uno de los explantes a un frasquito de penicilina con medio de cultivo. Para evitar cualquier
contaminacin, se flame la boca del frasquito y su tapa antes de abrirlo y cerrarlo, como
tambin las pinzas con las que se trabajaron. Se rotularon y colocaron en un ambiente
adecuado para su desarrollo.
RESULTADOS
Luego de 2 semanas, se logaron obtener 1 frasquito de penicilina con explante sin ningn
tipo de contaminacin. Los otros 4 frasquitos con explante se contaminaron con algn tipo
de hongos. Los explantes a las tres semanas an no se han desarrollado a plntulas.
DISCUSION
La asocacion explante medio y las condiciones fisicas en que normalmente se incuban los
cultivos conforman un ambiente propicio para la
proliferacio de microorganismos
(bacterias, hongos), los cuales pueden destruir tales cultivos ,competir con l explante por el
medio de cultivo o modifcarlo(Villamizar,2005).
Para establecer cultivos asepticos es conveniente, trabajar en ambientes adecuados ,
esterilizar los medio de cultivo mas comunmente en un autoclavea una presion de 1 atm ,
durante
CONCLUSIONES
El medio de cultivo result ser el adecuado para el crecimiento de los explantes, teniendo
en cuenta los componentes tales como el agua destilada que representa el 95% del medio
nutriente; como la fuente de carbono la sacarosa, ya que los explantes no son
completamente auttrofos, y no pueden cubrir sus necesidades con la fotosntesis que
puede realizar in vitro. El buen desarrollo del explante tambin depende de muchos
factores tales como: las condiciones aspticas,
iluminacin, etc.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS