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LA BIORREMEDIACIN COMO MEDIDA CORRECTORA

EN LOS IMPACTOS AMBIENTALES DE AGUA


CONTAMINADA CON METALES PESADOS

AGUA

PAULA ARROYO HERNNDEZ

INSTITUTO DE MEDIO AMBIENTE, FACULTAD DE


BIOLOGA Y CIENCIAS AMBIENTALES, UNIVERSIDAD
DE LEN

Paula Arroyo Hernndez


Nacida en Burgos el 29 de Junio de 1978
Centro actual de trabajo:
Dpto. de Ecologa, Instituto de Medio Ambiente.
Facultad de Ciencias Biolgicas y Ambientales. Campus de Vegazana s/n.
CP. 24071 - LEN

Licenciada en Ciencias Ambientales. Especialidad Gestin Ambiental. Facultad de


Ciencias Biolgicas y Ambientales. Universidad de Len, Campus de Vegazana, s/n. 24071 Len.

Formacin Complementaria:
MASTER Europeo en Gestin del Medio Ambiente organizado por la Cmara de
Comercio Industria y Navegacin de Gijn, Asturias Business School, European School of
Management, ESCP-EAP Madrid y la Fundacin Asturiana de Medio Ambiente. Duracin 500
horas, Octubre 2001-Junio 2002.
Programa de Doctorado con Mencin de Calidad, Universidad de Len.
Programa 079, Ecologa y Tecnologa Ambiental, coordinadores: Dra. D Camino
Fernndez Alaz (Dpto. Ecologa, Gentica y Microbiologa) y Dr. Roberto Fraile Laiz (Dpto.
Fsica, Qumica y Expresin Grfica). Noviembre-2003 a Junio-2004.

Experiencia laboral
Beca Leonardo da Vinci, Noviembre 2002-Mayo2003. He disfrutado de esta beca de casi seis meses
de duracin en el Parco Naturale Adamello Brenta (Provincia Autnoma del Trentino, Italia), donde
colabor con el Grupo di Ricerca e conservazione di fauna fundamentalmente dentro del mbito del
proyecto de reintroduccin de oso pardo en los Alpes (LIFE URSUS PROYECT). Junto a esto, he
colaborado en la realizacin del plano faunstico del Parque con el GIS (Arcview).
Prcticas de Mster Europeo de Gestin del Medio Ambiente en la empresa DU PONT IBRICA.
Desde el mes de mayo de 2002 hasta septiembre de 2002 colabor en la implantacin de ISO 14001
en tres de sus plantas (Sontara, Planta de produccin de productos fungicidas y planta de THF)
redactando procedimientos, revisando documentacin, participando en una auditora interna y en la
auditoria externa de certificacin, etc. Tambin trabaj en proyectos de educacin ambiental con los
programas de gestin de habitats y biodiversidad, elaboracin de planes de vigilancia ambiental y
gestin de residuos, actualizacin de estudios de minimizacin de residuos peligroso y otras labores
de gestin ambiental.
Prcticas profesionales realizadas en la empresa DEFOR XXI S.A. con actividad econmica de
Trabajos forestales y Medioambiente. Realizando Estudios Preliminares de Impacto Ambiental para

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proyectos de repoblacin, colaboracin en Proyectos forestales, trabajo con fotos catastrales. Perodo
de prcticas del 01/7/2001 al 31/7/2001.
Prcticas profesionales en la empresa SAMESA (Servicios Avanzados Medioambientales S.A), con
actividad econmica Comercio Mayor Interindustrial, en la ciudad de Gijn. Colaborando en proyectos
de Ingeniera ambiental y contacto con agentes comerciales. Perodo de prcticas del 1/8/2001 al
31/8/2001.

Participacin y Colaboracin en Proyectos de Investigacin


Contrato con la Diputacin Provincial de Len para la participacin en el proyecto
Inventario de instalaciones de saneamiento y depuracin de la provincia de Len, Marzo
2004 a Octubre 2004, coordinado por Dr, Estanislao Luis de Calabuig (Catedrtico de Ecologa,
Universidad de Len) y Gemma Ansola (Profesora titular, Universidad de Len). Realizacin de un
Sistema de Informacin Geogrfica para la provincia de Len en relacin a los sistemas de depuracin
y redes de saneamiento de los distintos ayuntamientos de la provincia.
Responsable del Proyecto de investigacin La Biorremediacin como medida correctora
en los impactos ambientales de aguas contaminadas con metales pesados, Universidad de
Len, Departamento de Ecologa, Gentica y Microbiologa, rea de Ecologa, coordinado por Dr.
Estanislao Luis de Calabuig (Catedrtico de Ecologa, Universidad de Len) y Dra. Gemma Ansola
(Profesora titular, Universidad de Len). Mayo-2003 a Diciembre 2004.
Colaboracin en el proyecto Life de reintroduccin del oso pardo en los Alpes Centrales
italianos LIFE URSUS PROYECT en el Parco Naturale Adamello Brenta (Provincia Autnoma del
Trentino, Italia) con el Grupo di Ricerca e conservazione di fauna coordinado por el Dr. Andrea
Mustoni. Mi colaboracin se desarroll en el periodo de Octubre-2002 a Abril-2003.
Colaboracin en el proyecto de investigacin Aplicacin de la directiva marco del agua
a los lagos de la comunidad de Castilla y Len. Bases cientficas para la definicin de
ecotipos indicadores de calidad y condiciones de referencia (Referencia LE 33/03)
subvencionado por la Junta de Castilla y Len, con una duracin de 3 aos (Enero-2003 a Diciembre2005). La participacin se concret en la realizacin de muestreos ictiolgicos en las lagunas durante
el periodo Agosto/Septiembre 2003 y Agosto/Septiembre 2004.

Relacionados con el anillamiento de aves:


Participacin en el proyecto Valoracin de la comunidad de vertebrados en el valle de la
Oncina. Montejos del Camino (Len). 2004. Realizado por el Grupo Ibrico de Anillamiento para
la Diputacin Provincial de Len.
Colaboradora en el Estudio de marcaje, seguimiento, recogida de muestras biolgicas y
cuantificacin de las poblaciones de Codorniz (Coturnix coturnix) en la provincia de Len.

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Dentro del programa nacional de la Federacin Espaola de Caza Delegacin Territorial de Burgos.
Ao 2003.
Colaboradora en el proyecto Contribucin al conocimiento de la migracin e invernada de
aves. Divulgacin y estudio de paseriformes en humedales de la provincia de Len.
Diseado y desarrollado por G.I.A.-Len. Financiado por la Excelentsima Diputacin Provincial de
Len. Ao 2003 (en curso).
Colaboradora en el Anillamiento y marcaje especial para el seguimiento, caracterizacin
fenotpica y estudio fenolgico de la poblacin nidificante del Colirrojo Tizn (Phoenicurus
ochruros) en la Comarca de Omaa (Len), diseado y desarrollado por el GIA-Len (Grupo
Ibrico de Anillamiento). Aos: 2002 y 2003 (en curso).

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La Biorremediacin como medida correctora en los impactos ambientales de agua
contaminada con metales pesados.
P. Arroyo*, G. Ansola, E. de Luis Calabuig, *Instituto de Medio Ambiente, Dpto. de Ecologa,
Universidad de Len, C/ La Serna 56, 24007 Len.

Abstract

La Fitorremediacin es el uso de plantas para su empleo in situ o en otro lugar para la


descontaminacin de suelos y agua.
El objetivo de este estudio fue investigar la eficacia de diferentes sustratos con distintas
caractersticas, y diferentes flujos y caudales para eliminar contaminantes, metales pesados, de agua
contaminada.
Junto a estas variables, se estudi la eficacia de diferentes macrfitos (Typha angustifolia).
La eliminacin de Zinc es mucho ms efectiva que la del Arsnico en todos los mesocosmos. As
mismo, la eliminacin de metales pesados es mayor cuando entran en los sistemas de depuracin los
macrfitos.
Introduccin
Los humedales son ecosistemas caracterizados por la presencia de plantas hidrfilas como juncos,
carrizo, eneas y otras.
El Convenio de Ramsar define loshumedales como:

"Son humedales las extensiones de marismas, pantanos y turberas, o superficies cubiertas de


agua, sean stas de rgimen natural o artificial, permanentes o temporales, estancadas o corrientes,
dulces, salobres o saladas, incluidas las extensiones de agua marina cuya profundidad en marea baja
no exceda de seis metros" (Artculo 1.1 de la Convencin).
Los humedales se encuentran entre los ecosistemas ms productivos del mundo. Proporcionan el
soporte de agua y productividad primaria de la cual dependen para su supervivencia un nmero
incontable de especies de plantas y animales.
Son una alternativa ms barata econmicamente que los tratamientos tecnolgicos como los fangos
activos o los filtros (M. Scholz y J. Xu, 2001).
Los humedales artificiales se han empleado ampliamente para el tratamiento de aguas residuales
urbanas. As mismo, se han aplicado al tratamiento pasivo de contaminacin difusa incluyendo los
drenajes cidos de minas. Su capacidad para eliminar metales de drenajes cidos de minas ha sido
ampliamente documentado (E. Stoltz y M. Greger, 2001; M. Leblanc, C. Casiot, F. Elbaz-Poulichet y C.
Personn, 2002).
Adems, los humedales junto con su importante funcin de hbitats para la vida silvestre pueden ser
usados como reas recreacionales. Como seala P.L.Younger, uno de los principales intereses del
empleo de los humedales artificiales como sistema de tratamiento de aguas contaminadas es la
posibilidad de integrarlos en el paisaje y conseguir una buena conexin con los ecosistemas presentes
en la zona.
Los humedales son un complejo sistema de plantas, microorganismos y sustrato que juntos funcionan
como un filtro biogeoqumico.

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Las plantas de estos humedales juegan un importante papel en esta actividad de depuracin (Quian,
Zayed, Zhu, Yu y Ferry, 1999).
Los macrfitos acuticos son el principal componente en la mayora de los humedales de tratamiento
de aguas contaminadas. Los sistemas de depuracin basados en macrfitos consisten generalmente
en un monocultivo o policultivo de macrfitos, dispuestos en tanques, lagunas o zanjas poco
profundas y con un tiempo de retencin superior al de los sistemas convencionales (Ansola, 2003). La
eleccin del tipo de planta depende de su adaptabilidad al clima de la regin, de su capacidad de
transporte de oxgeno de la superficie a la rizosfera, de su tolerancia a altas concentraciones de
contaminantes as como de su capacidad para asimilarlo, de su alta presencia en la zona donde se va
a instalar el sistema, de la facilidad para recolectarlas y posterior transporte y su fcil autogeneracin
(Ansola, 2003).
La eliminacin de metales pesados en humedales es el resultado de diferentes procesos
biogeoqumicos, que incluyen procesos aerbicos y anaerbicos en la columna de agua, en la
superficie de plantas vivas y en descomposicin y en el sustrato (A. Sobolewski, 1999). Adems esta
eliminacin se debe principalmente a procesos microbiolgicos (V.I. Groudeva, S.N. Groudev, A.S.
Doycheva; 2000).
Los drenajes cidos de minas son un problema ambiental de primer orden. Es necesario investigar
para conseguir una adecuada gestin de los mismos reduciendo o en su caso minimizando su impacto
ambiental.
Se trata de aguas que, en su mayor parte, presentan altas concentraciones de diferentes metales
pesados (Fe, Cd, As, Zn, Cu, S,) resultado de los procesos de extraccin y tratamiento del mineral.
El objetivo principal de este proyecto de investigacin es la profundizacin en el conocimiento y
aplicacin de la biorremediacin como medida correctora en los impactos ambientales de agua
contaminada con metales pesados y en particular de los drenajes cidos de minas de gran inters
para la provincia de Len por su tradicin minera.
Junto a este objetivo genrico, y como objetivos ms especficos, se plantean:
Disear y construir una planta piloto experimental.
Conocer la capacidad de distintas especies vegetales propias de humedales para
acumular, degradar, neutralizar, etc. metales pesados en busca de aquellas especies
con las que el rendimiento sea mayor.
Conocer la influencia y la relevancia de la naturaleza del sustrato (Batty 2003) y del
caudal del afluente.
Conocer qu papel juega el flujo superficial y el flujo subsuperficial, si existen
diferencias en el resultado final de los contaminantes presentes en el efluente o estas
diferencias como apuntan algunos autores, son irrelevantes.
Calcular los rendimientos y eficacia en la depuracin de estas aguas contaminadas
con metales pesados combinando las variables citadas (caudal, tipo de sustrato,
especie vegetal, tipo de flujo).
Determinar la poblacin bacteriana asociada a la rizosfera de las plantas y que
interviene en la reduccin y eliminacin de los metales pesados para lo cual se
buscar conocer la secuencia del DNA de las bacterias presentes y posteriormente se
realizar un anlisis comparativo con la base de datos E.M.B.L. para su identificacin.

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Material y Mtodo
Se ha diseado y construido una planta piloto para el desarrollo de este proyecto. Dicha planta est
situada en el Instituto de Medio Ambiente, Universidad de Len. Consta de una serie de cubetas de
PVC constituyendo cada una de ellas un mesocosmo y una unidad experimental.
El diseo experimental es de tipo factorial. El nmero de unidades experimentales es de 8 con tres
rplicas para cada unidad, lo que hace un total de 24 unidades experimentales.
Estas unidades se disponen entremezcladas de forma aleatoria sistemtica.
La planta se ubica en la fachada sur del edificio. Las condiciones de insolacin, temperatura y
humedad son las mismas para todas las unidades experimentales.
En la primera fase del estudio los factores o variables con los que se trabaja son el caudal
(1 ml/min y 2 ml/min), el flujo (subsuperficial y superficial) y el tipo de sustrato (arlita y grava silcea).
Se emplean dos sustratos inertes muy diferentes entre s. La arlita, arcilla expandida con una
estructura altamente porosa (46 % de porosidad) que se fabrica a partir de arcilla pura, el tamao de
las partculas oscila en un rango de entre 1 y 2 cm. Y gravas silceas con un rango de tamaos entre 1
y 2 cm al igual que la arlita.
La mitad de las cubetas tienen un flujo superficial. Se han rellenado con grava o arlita hasta una
altura de 35 cm y tienen la salida de efluente a una altura de 55 cm, logrndose as un flujo
superficial.
La otra mitad de las cubetas se han rellenado con el sustrato hasta 55 cm de altura, presentando un
flujo subsuperficial, con entrada por la parte superior y salida por la parte inferior.
El sistema entr en funcionamiento en abril de 2004 por lo que todava se encuentra en fase de
estabilizacin.
Se trabaj con agua contaminada de forma artificial con arsnico y zinc con una concentracin
media de 20 ppm y 15 ppm respectivamente.
En esta primera fase es sistema funcion sin macrfitos para conocer la influencia en la depuracin
del tipo de sustrato (arlita y grava silcea). As como la importancia de las otras dos variables antes
sealadas, el tipo de flujo y el caudal.
Las muestras de agua se recogieron en botes de polipropileno y se filtraban inmediatamente a travs
de filtros de 0,45 um Millipore. Estas muestras se acidificaban con cido ntrico.
Los elementos considerados, arsnico y zinc, se analizaron con la tcnica de ICP.
En la Figura 1 se muestra el sistema en esta primera fase con las 24 cubetas, los distintos flujos,
caudales y sustratos.

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2 ml / min

Altura cubeta: 60 cm
Diametro: 16 cm
Flujo Superficial:
Altura sustrato 35 cm
Lamina de agua 55 cm
Flujo Subsuperficial:
Altura sustrato 55 cm

Arlita

2 ml / min
Grava silcea

1 ml / min

1 ml / min

1000
litros
1000l

Figura 1. Esquema de la planta.

Fotografa 1. Planta piloto en instalacin situada en el Instituto de Medio Ambiente.

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Fotografa 2. Detalle de los tubos de PVC protegidos para evitar su congelacin.

La segunda fase del experimento se realiz plantando 12 individuos de Typha angustifolia de forma
aleatoria sistemtica de forma que hubiera 12 microecosistemas como controles y 12 con vegetacin.
Se ha eliminado la variable del caudal y en este experimento slo se trabaja con un caudal de 1
ml/min.
Se aadi al tanque de agua un fertilizante NPK 18+11+18 (Universol, Water Soluble Fertilizer,
3:2:3). De forma que por cada 1000 litros de agua se aade 1 kg de dicho fertilizante.
En la Figura 2 se muestra el esquema de esta segunda fase con las plantas de Typha angustifolia.

/
Altura cubet
1000
litrosa: 60 cm
D iam etro:16 cm
Flujo Superficial:
Altura sustrato 35 cm
Lam ina de agua 55 cm
Flujo Subsuperficia l:
Altura sustrato 55 cm

Figura 2. Esquema de la planta con los individuos de Typha angustifolia.

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Resultados y Conclusiones
Los resultados ms interesantes obtenidos en la primera fase del estudio se reflejan a continuacin.
En la Grfica 1 se muestran los datos referidos a la concentracin de Zinc. En la Grfica 2 y para esa
misma fase, los resultados referidos a la concentracin de Arsnico en el efluente para cada
mesocosmo.
El tratamiento estadstico de los datos muestra como en los meses de abril y mayo no existen
diferencias significativas en la eliminacin de zinc. En el caso del arsnico no existen diferencias
significativas en abril. Esto se debe a que es sistema estaba en fase de inicio y estabilizacin. Con el
paso del tiempo, y ya en el mes de junio, si que existen diferencias significativas y una clara
interaccin da las variables tiempo y tratamiento.
Interaccin Tiempo-Tratamiento
2-way interaction
F(28,64)=4,63; p<,0000
16

TRAT
2AFSCV

Concentracin de Zn (ppm)

14

TRAT
2GFSCV
TRAT
2AFSSCV

12

TRAT
2GFSSCV

10

TRAT
2AFSSV

TRAT
2GFSSV

6
4

TRAT
2AFSSSV
Abril

Mayo

Junio1

Junio2

Junio3

TRAT
2GFSSSV

TIEMPO

Grfica 1. Interaccin tiempo-tratamiento. Se mide la concentracin de Zinc en las muestras de agua.


El sistema funciona sin vegetacin.
interaccin tiempo-tratamiento
2-way interaction
F(28,64)=2,72; p<,0005
26

TRAT
2AFS

24

TRAT
2GFS

Concentracin de As (ppm)

22
20

TRAT
2AFSS

18

TRAT
2GFSS

16

TRAT
1AFS

14
12

TRAT
1GFS

10

TRAT
1AFSS

8
6

Abril

Mayo

Junio1

Junio2

Junio3

TRAT
1GFSS

TIEMPO

Grfica 2. . Interaccin tiempo-tratamiento. Se mide la concentracin de Arsnico en las muestras de


agua. El sistema funciona sin vegetacin.

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En la segunda fase, los macrfitos (Typha angustifolia) desempean un importante papel en la
eliminacin de los metales pesados, reducindose de forma significativa las concentraciones tanto de
arsnico como de zinc, en este segundo caso de forma ms notable.
En el caso de la eliminacin de Zinc existen diferencias significativas a lo largo de los diferentes
muestreos, pero no entre tratamientos ni en la interaccin tiempo-tratamiento.
Para la eliminacin de Arsnico con macrfitos, sucede como para el Zinc. Existen diferencias
significativas a lo largo de los diferentes muestreos, pero no entre los distintos tratamientos.
El ciclo biolgico de los macrfitos empleados es una explicacin de estos resultados.
Si consideramos el porcentaje de reduccin tanto del zinc como del arsnico, vemos como en el
primer muestreo, el ltimo de junio, es cuando esta reduccin es mayor. Se trata del momento en el
cual las eneas estn en pleno crecimiento vegetativo.

interaccin tiempo-tratamiento
2-way interaction
F(35,80)=1,35; p<,1385

Concentracin de Zn (ppm)

16
14

TRAT
2AFSCV

12

TRAT
2GFSCV

10

TRAT
2AFSSCV

TRAT
2GFSSCV

TRAT
2AFSSV

4
2

TRAT
2GFSSV

TRAT
2AFSSSV

-2

junio4

julio1

julio2

julio3

agosto1

agosto2

TRAT
2GFSSSV

TIEMPO

Grfica 3. Interaccin tiempo-tratamiento. El sistema funciona con vegetacin.

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interaccin tiempo-tratamiento
2-way interaction
F(35,80)=,86; p<,6779
23
22

Concentracin de As (ppm

21
TRAT
2AFSCV
TRAT
2GFSCV
TRAT
2AFSSCV
TRAT
2GFSSCV
TRAT
2AFSSV
TRAT
2GFSSV
TRAT
2AFSSSV
TRAT
2GFSSSV

20
19
18
17
16
15
14
13
12
junio4

julio1

julio2

julio3

agosto1

agosto2

TIEMPO

Grfica 4. Interaccin tiempo-tratamiento. El sistema funciona con vegetacin

La eliminacin de Zinc es en cualquier caso mucho ms efectiva que la del Arsnico. Estos resultados
concuerdan con los de otros trabajos realizados, como el de Eva Stolz y Maria Greger (2001) que
miden la concentracin de Zn y As en distintas partes de las plantas. En este estudio se refleja como
para diferentes especies vegetales y distintas partes de las mismas la concentracin de Zn es siempre
mayor que la de As.

Perspectivas futuras
Como se ha sealado el principal objetivo de este estudio era profundizar en el conocimiento sobre la
biorremediacin y las variables que sobre la misma tienen una mayor repercusin en cuanto a su
eficacia descontaminadota.
Las perspectivas futuras son muy amplias ya que es necesario seguir investigando con diferentes
macrfitos, sustratos, caudalesen busca de los mejores rendimientos.
Junto a esto el siguiente paso en nuestra investigacin y de acuerdo con V.I. Groudeva, S.N. Groudev,
A.S. Doycheva; entre otros, que sealan como los procesos microbiolgicos son fundamentales en
esta eliminacin de los metales pesados, se inicia la investigacin para llegar a determinar la
poblacin bacteriana asociada a la rizosfera de las plantas para lo cual se buscar conocer la
secuencia del DNA de las bacterias presentes y posteriormente se realizar un anlisis comparativo
con la base de datos E.M.B.L. para su identificacin.
Referencias y bibliografa
Ansola, G., 2003. Utilizacin de humedales artificiales en la depuracin de aguas residuales. In El
agua, un bien para todos. Conservacin, recuperacin y usos. 6as Jornadas Ambientales. Salamanca.
Ed. P. Ramos, S.A., pp. 145-170.
Ansola, G. Gonzlez J. M, Cortijo, R., De Luis, E., 2003, Experimental and full-scale pilot plant
constructed wetlands for municipal wastewaters treatment, Elsevier, Ecological Engineering.

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Convenio de Ramsar, o Convencin relativa a los Humedales de Importancia Internacional
especialmente como Hbitats de Aves Acuticas, firmado en la ciudad de Ramsar, Irn, el 2 de febrero
de 1971.
Directiva Marco de Aguas de la Unin Europea (DMA) - D 2000/60/CE Groudeva V.I., Groudev S.N., Doycheva A.S., 2000, Bioremediation of waters contaminated with crude
oil and toxic heavy metals, Elsevier, Ecological Engineering.
Manyin T., Williams F., Stark Lloyd, 1997. Effects of iron concentration and flow rate on treatment of
coal mine drainage in wetland mesocosms: An experimental approach to sizing of constructed
wetlands. Ecological Engineering 9 171-185.
Qian J., Zayed A., Zhu Y., Yu M., and Terry N., 1999. Phytoaccumulation of trace elements by wetland
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LeBlanc M.; Oehlander B.; Landin J.; 2003. Research Project of the European Commission Fifth
Framework Programme. Passive In-situ Remediation of Acid Mine / Industrial Drainage (PIRAMID).
Batty L.C., Younger P.L., 2003, The use of waste materials in the passive remediation of mine
water pollution.
Fotografas 1 y 2 tomadas por Jose Manuel lvarez.

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