Escola Universitria Vasco da Gama

Bioqumica I
Relatrio Prtico

Teste de Fehling
Teste de Bial

Dolores Gonanvez
Joo Santos
Maria Mal
Rodrigo Torres

1. Introduo
Prende-se o seguinte relatrio com experincias realizadas com o intuito de identificar,
a partir do teste de Fehling, hidratos de carbono com poder redutor, e identificar
pentoses a partir do teste de Bial.
A capacidade de um hidrato carbono ser redutor reside nas caractersticas do grupo
carbonilo livre.
No mdio alcalino, o cobre proveniente de CuSO4 (Fehling A : CuSO4 dissolvido em
H2O) encontra-se na forma de hidrxido cprico, e forma-se um sal correspondente,
Na2SO4.. Quando Cu(OH)2 (de cor azul) aquecido e existe presena de um composto
redutor forma-se xido cuproso (de cor avermelhada) sob a forma de um precipitado.
NaOH
+calor+R
CuSO4
Cu(OH)2
Cu2O (cor avermelhada)
Por sua vez, o teste de Bial caracteriza-se pela apresentao, mediante condensao, de
um produto de cor azulada originado pela reao de furfural , derivados da pentose, na
sua reao com HCl e com orcinol . Isto uma reao caracterstica das pentoses e dos
cidos urnicos.

2. Materiais e Mtodos

Teste de Fehling
Materiais

9 Tubos de Ensaio
Pipetas Graduadas de diferentes volumes
Micropipeta
Pipeta de Pasteur
Estante de Tubo de Ensaio
Pompete
Agitador de solues
Banho Maria

Reagentes
Soluo aquosa de amido 0,2%
Soluo aquosa de sacarose a 1%
Soluo aquosa de D-xilose a 1%
Soluo aquosa de glicina a 1%
Soluo aquosa de D-glucose a 1%
Soluo aquosa de D-galactose a 1%
Soluo aquosa de metil--D-glucsido a 1%
Soluo aquosa a D-frutose 1%
Soluo aquosa a lactose 1%
Soluo de Fehling A (dissoluo de 34,65g de CuSO4.5H2O em gua e
diluio a 500mL)
Soluo de Fehling B (dissoluo de 125gde KOH e 173g de
NaKC4H4O6.4H2O tartarato duplo de sdio e potssio, sal de Rochelle em
gua e diluio a 500mL)

Mtodos
Pipetou-se 1mL da soluo de Fehling A e 1mL de soluo de Fehling B para cada um
dos 9 tubos de ensaio.Misturou-se.
Pipetou-se de seguida, 0,5mL da soluo amostra para cada um dos tubos de ensaio,
devidamente identificados e misturou-se no sgitador de solues.
Transferimos a estante de tubos de ensaio para o banho Maria e aqueceu-se fervura
durante 5 minutos.

Teste de Bial

Materiais

9 Tubos de Ensaio
Pipetas Graduadas de diferentes volumes
Micropipeta
Pipeta de Pasteur
Estante de Tubo de Ensaio
Pompete
Agitador de solues
Banho Maria
Reagentes

Soluo aquosa de amido 0,2%

Soluo aquosa de sacarose a 1%
Soluo aquosa de D-xilose a 1%
Soluo aquosa de glicina a 1%
Soluo aquosa de D-glucose a 1%
Soluo aquosa de D-galactose a 1%
Soluo aquosa de metil--D-glucsido a 1%
Soluo aquosa a D-frutose 1%
Soluo aquosa a lactose 1%
Reagente de Bial (dissoluo de 0,5g de resorcinol em 330mL de cido
clordrico concentrado e diluio a 1L com gua)

Mtodos
Pipetou-se 3mL do reagente de Bial para cada um dos 9 tubos de ensaio.
Pipetou-se de sguida, 0,15mL da soluo amostra para cada um dos tubos de ensaio,
devidamente identificados e misturou-se no sgitador de solues.
Transferimos a estante de tubos de ensaio para o banho Maria e aqueceu-se fervura
durante 30segundos.

3. Resultados

Teste de Fehling

As solues B, C, D, E, F e G apresentam-se com formao de um precipitado

avermelhado.
As solues A, H e I apresentam-se com uma cor no relevante para o teste em questo.

Teste de Bial

As solues A, C, D, E, G e I deram uma cor amarela esverdeada.

As solues B, F e H apresentam-se com uma cor no relevante para o teste em questo.

4. Discusso

Teste de Fehling

As solues que apresentam um precipitado avermelhado, neste teste, so positivas,

sendo portanto redutoras.
O amido um polissacardeo no redutor e como tal no apresenta precipitado.
A soluo (E) uma soluo aquosa de leite em p portanto tem lactose que um
dissacardeo redutor, o resto das substncias so redutoras excepo da sacarose e de
metil--D-glucsido. Portanto o amido, a sacarose e o metil--D-glucsido devem
corresponder aos tubos A, H e I. Se assim no for, a alterao dos resultados deve-se ao
facto de NaOH e KOH se alterarem quando expostos ao ar e devido s impurezas
existentes no frasco do reagente.

Teste de Bial

O resultado positivo para pentoses ou nucletidos contendo pentoses quando o

resultado de cor verde ou azul, e para hexoses ou dissacardeos quando o resultado
uma cor amarela esverdeada.
Os resultados so, portanto, inesperados, uma vez que de acordo com estes resultados
no haveria nenhuma pentose. No entanto sabemos que xilose uma pentose (deveria
ter ficado verde ou azul), e os nicos que deviam ser negativos seriam o amido, uma vez
que um polissacardeo, a glicina, que um aminocido sem pentoses e o metil-alfa-Dglucsido, que devem ser portanto as solues B, F e H.
As restantes amostras teriam que ser positivas, porque a lactose e a sacarose so
dissacardeos, e a glucose, a galactose e a frutose so hexoses. Estes resultados podem
dever-se a falhas no desenvolvimento do teste por um erro na manipulao das
substncias ou erro na pipetao dos ml dos reagentes que depositamos no tubo, uma
vez que houve algumas falhas de pipetao por anomalias dos materiais disponveis no
laboratrio.

5. Bibliografia

http://www.veterinaria.uabjo.mx/manuales/MANUAL%20DE%20PRACTICA
%20DE%20BIOQUIMICA.pdf

http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biolmol/pdfs/20%20REACCIONES%20COLOREADAS%20DE%20AZ%C3%9A
CARES.pdf

http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biolmol/pdfs/21%20DETERMINACI%C3%93N%20GL%C3%9ACIDOS.pdf