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BIOTECNOLOGIA
MANAUS, AM
2014
BIOTECNOLOGIA
MANAUS, AM
2014
SUMRIO
1.
INTRODUO .................................................................................................... 5
2.
3.
4.
5.
4.1
BIOPROCESSOS ....................................................................................... 14
4.2
6.
FERMENTAO .............................................................................................. 27
6.1
7.
8.2
8.3
8.4
8.5
8.6
8.7
8.8
8.9
8.10
8.11
SADE
LISTA DE FIGURAS
FIGURA 1: Representao grfica da localizao da Biotecnologia Industrial e de
sua interao com outros ramos do conhecimento ..................................................................... 6
FIGURA 2: Etapas fundamentais de um tpico Bioprocesso ..................................... 16
FIGURA 3: Esquema simplificado de um tpico Bioprocesso................................... 17
FIGURA 4: Processo fermentativo genrico.............................................................. 18
FIGURA 5: Principais tipos de metabolismos capazes de fornecer e captar energia. 24
FIGURA 6: Os trs destinos catablicos possveis do piruvato formado na fase de
pagamento da gliclise ............................................................................................................. 25
FIGURA 7: As diversas fases do crescimento microbiano e a produo de
metabolitos ............................................................................................................................... 27
FIGURA 8: Tipos de fermentao e a respirao ...................................................... 30
FIGURA 9: Um processo tradicional, a produo de vinagre (Mtodo de Orlans) . 32
FIGURA 10: Biorreator de mtodo submerso ........................................................... 33
LISTA DE TABELAS
1. INTRODUO
que
anos a.C.), produo de po, utilizando fermentos, no Egito (4.000 anos a.C.) e produo
de vinhos na Grcia (2.000 a.C.). (SCHMIDELL, LIMA, et al., 2003)
Suas aplicaes na indstria constituem o objetivo primordial da Biotecnologia
Industrial. A (Fig. 1), adaptada de um artigo publicado pelo Prof. Rainer Jonas, uma boa
representao grfica da "localizao" da Biotecnologia Industrial e de sua interao com
outros ramos do conhecimento. (SCHMIDELL, LIMA, et al., 2003)
FIGURA 1: Representao grfica da localizao da Biotecnologia Industrial e de sua
interao com outros ramos do conhecimento.
FONTE:
https://bancadapronta.wordpress.com/2013/09/18biotecnologia-um-panora-masobre-a-produo-de-
proteinas-recombinantes/
Produto da
fermentao
Etanol (no utilizado
em bebidas)
cido 2-cetoglucnico
Microrganismo
Aplicao
Qumica fina
ENERGIA
INDSTRIA
Manufatura de cido
ascrbico
Vacinas e medicamentos
para uso veterinrio
Suplemento alimentar
SADE
Biopesticida
AGRICULTURA
cido Glutmico
Cotesia flavipes 10
Metarhizium anisopliae
Brevibacterium sp.
Aditivo alimentar
ALIMENTAO
cido glucnico
Aspergillus niger
Produtos farmacuticos
SADE
cido Ltico
Rhizopus oryzae
ALIMENTAO/SADE
cido ctrico
Aspergillus niger, A.
wentii
Clostridium
acetobutylicum
baculovirus anticarsia
Alimentos e produtos
farmacuticos
Alimentos, medicamentos
Solventes, intermedirios
qumicos
Biopesticida
INDSTRIA
Biofertilizantes
AGRICULTURA
Pectinase, protease
Saccharomyces
cerevisiae
Pseudomonas sp.
Setor
Amilase bacteriana
Aspergillus niger,
aureus
Bacillus subtilis
Protease bacteriana
B. subtillis
Dextrano
Leuconostoc
mesenteroides
Gluconobacter
suboxydans
Sorbose
Cobalamina (vitamina
B12)
Acetona-butanol
A.
Streptomyces olivaceus
ALIMENTAO
INDSTRIA
INDSTRIA
ALIMENTAO
PECURIA
SADE
ALIMENTAO/SADE
AGRICULTURA
Insulina, interferon
E. coli recombinante
Terapia humana
SADE
Incio de cultura
Levedura
de
Lactobacillus
bulgaricus
Candida utilis
ALIMENTAO
Suplemento alimentar
SADE
Antibiticos
SADE
Antibiticos
SADE
Antibiticos
SADE
Protena microbiana
Penicilina
Cefalosporina
Eritromicina
po,
Penicillium
chrysogenum
Cephalosparium
ecremonium
Streptomyces erythreus
montculos de terra, relva e pedra vulcnica. Permanecendo, assim, por algum tempo, o gosto
e a textura desse alimento se modificavam, e podia at adquirir maior valor nutritivo, sem
apresentar sinais de decomposio. Mesmo sem entender muito bem o que se passava, esses
povos estavam usando a fermentao. (AMORIM e LEO, 2005)
As mudanas que ocorriam naturalmente no trigo levaram fabricao do po. A
moagem primitiva do trigo e de outros gros resultava em uma espcie de mingau grosso.
Acidentalmente, descobriu-se que, da combinao daquela massa com certos resduos
orgnicos, depositados nas pedras quentes, onde ela era assada, surgia um produto mais
consistente, volumoso e saboroso. (AMORIM e LEO, 2005)
A fabricao do po uma tradio milenar dominada pelos povos orientais, muito
antes de chegarem ao Ocidente. Sabe-se que os povos da Mesopotmia e, depois, do Egito
conheciam, h pelo menos 6 000 anos, a tcnica do preparo desse produto. Eles utilizavam a
espuma formada nos barris destinados fabricao de cerveja para fazer o po crescer.
(AMORIM e LEO, 2005)
Cenas de panificao tambm foram encontradas em murais, nas runas de Menfis,
h 3000 anos a.C. (AMORIM e LEO, 2005)
Grandes consumidores de vinho, os romanos antigos conheceram vrias tcnicas para
obter o fermento de panificao. Eles usaram o levedo selvagem, que flutuava no ar, ou
aquele que aparecia naturalmente nas cascas das uvas. Mas no se conseguia, ainda, entender
o que estava acontecendo de fato, porque os minsculos seres responsveis pela maravilha
eram invisveis a olho nu. (AMORIM e LEO, 2005)
Os romanos sabiam, ao certo, que o fenmeno era um mistrio extraordinrio, um
processo notvel, e as palavras usadas para design-lo comprovam esse fato. O verbo
fermentar derivado da palavra latina fervere. (AMORIM e LEO, 2005)
A palavra latina fervere significa etimologicamente o estado de ebulio, relativo
condio de borbulhamento gasoso (aparecimento de bolhas devido produo de dixido de
carbono pela ao das leveduras sobre sucos, caldos de frutas ou de cereais). (AMORIM e
LEO, 2005)
No sentido tecnolgico, significa todo processo em que atuam microrganismos,
controlados pelo homem, sobre substratos orgnicos atravs de suas enzimas, produzindo
determinadas substncias de utilidade para o homem. Essas substncias ou produtos de
fermentao vo desde alimentos modificados e bebidas alcolicas, a outros produtos
industriais, como solventes, cidos orgnicos, steres, aminocidos, polissacardeos, enzimas,
vitaminas, antibiticos e hormnios. (AMORIM e LEO, 2005)
10
Entretanto, nos primrdios dos tempos no eram conhecidos os agentes causadores das
fermentaes. Somente no sculo dezessete, o pesquisador Antonie Van Leeuwenhock
(um dos precursores no uso do microscpio) atravs da visualizao em microscpio
de gotas de cerveja fermentada (1680), descreveu a existncia de seres to minsculos
que eram invisveis a olho nu. (AMORIM e LEO, 2005)
Somente 200 anos mais tarde, em 1857 Louis Pasteur, aps investigaes detalhadas
sobre as leveduras da cerveja e do vinho, concluiu que a causa das fermentaes era a
ao desses seres minsculos, os microrganismos, caindo por terra a teoria, at ento
vigente, que a fermentao era um processo puramente qumico. Pasteur concluiu que
11
Foi ainda Pasteur que provou que cada tipo de fermentao era realizado por um
microrganismo especfico e que estes podiam viver e se reproduzir na ausncia de ar.
Em 1923, Pfizer inaugurou a primeira fbrica para a produo de cido ctrico por via
fermentativa. O processo envolvia uma fermentao utilizando fungo Aspergillus
niger, pelo qual acar era transformado em cido ctrico. (MALAJOVICH, 2012)
12
alimentcias
microbianas
(protenas
de
organismos
unicelulares).
(MALAJOVICH, 2012)
13
14
primeira
linhagem
de
clulas-tronco
embrionrias
humanas.
(MALAJOVICH, 2012)
Incio do Sculo XXI Sequenciamento do primeiro cromossomo humano.
Pesquisadores descobrem que as clulas-tronco podem ser induzidas a se diferenciar em
diversos tipos celulares. O rascunho do sequenciamento do genoma humano anunciado
simultaneamente por Collins, do Consrcio do Genoma Humano, e Venter, da Celera Inc.
Sequenciados tambm o genoma da mosca Drosophila melanogaster, o primeiro genoma de
uma planta (Arabidopsis thaliana) e, no Brasil, o de uma bactria que ataca os ctricos
(Xylella fastidiosa). Em diversos pases inicia-se a utilizao de clulas-tronco adultas para o
tratamento experimental de diversas doenas (leucemia, mal de Chagas, diabetes e anemia
falciforme). (MALAJOVICH, 2012)
Em 2008 pesquisadores japoneses desenvolvem a primeira rosa azul, geneticamente
modificada. (MALAJOVICH, 2012)
2010 Autorizada na Unio Europeia a comercializao da batata transgnica Amflora
(BASF) para uso industrial. Pesquisadores do Instituto Craig Venter constroem a primeira
clula sinttica. (MALAJOVICH, 2012)
4.1 BIOPROCESSOS
consideradas
expresses
sinonmias:
processos
fermentativos
com
15
BIOPROCESSOS
PROCESSOS QUMICOS
Catalisadores no especficos
Condies brandas de T, P e pH
Condies drsticas de T, P e pH
Maiores volumes
Menores volumes
16
FONTE: PEREIRA JR, N.; BON, E. P. D. S.; FERREIRA, M. A. Tecnologia de Bioprocessos. v. 1 - Sries em
Biotecnologia.
17
FONTE: PEREIRA JR, N.; BON, E. P. D. S.; FERREIRA, M. A. Tecnologia de Bioprocessos. v. 1 - Sries em
Biotecnologia.
Um processo fermentativo pressupe a transformao de uma determinada matriaprima ou de um produto pela ao de microrganismos ou de enzimas. Dessa forma. a
multiplicao de um microrganismo para emprego industrial ou alimentar tambm
considerado um processo fermentativo. Afinal seu crescimento transforma de alguma forma o
meio em que se encontra. (SOUSA, 2000)
18
FONTE: http://www.eq.ufrj.br/biose/nukleo/aulas/Microbiol/eqb353_aula_09.pdf
Denominam-se
"biorreatores",
"reatores
bioqumicos",
ou
ainda
"reatores
biolgicos", os reatores qumicos nos quais ocorrem uma srie de reaes qumicas
catalisadas por "biocatalisadores". Esses biocatalisadores podem ser enzimas ou clulas vivas
(microbianas, animais ou vegetais). Assim, logo de incio, pode-se classificar os biorreatores
em dois grandes grupos:
Grupo 1: Biorreatores nos quais as reaes ocorrem na ausncia de clulas vivas, ou
seja, so tipicamente os "reatores enzimticos"; (PEREIRA JR, BON e FERREIRA, 2008)
Grupo 2: Biorreatores nos quais as reaes se processam na presena de clulas
vivas". (PEREIRA JR, BON e FERREIRA, 2008)
Embora no seja totalmente generalizado, h alguns autores, porm, que utilizam
denominao "reatores bioqumicos" para se referirem apenas ao primeiro grupo, restringindo
assim a denominao "reatores biolgicos" apenas aos reatores que operam com clulas vivas.
19
Com relao aos reatores com clulas vivas, pode-se afirmar que os mais
amplamente conhecidos e com uso bastante difundido, so os reatores com microrganismos,
os quais vm sendo empregados desde a dcada de 1940 para a produo industrial de uma
grande diversidade de produtos, tais como enzimas, antibiticos, vitaminas, cidos orgnicos,
solventes, ou ainda no tratamento de resduos orgnicos industriais ou domsticos. (PEREIRA
JR, BON e FERREIRA, 2008)
Embora se fale globalmente em "reatores com microrganismos", muito importante
destacar que, do ponto de vista da engenharia, dependendo do tipo de microrganismo
utilizado, tais reatores podem ter caractersticas bastante distintas no que se refere aos
fenmenos de transporte que ocorrem no reator (calor, massa e quantidade de movimento).
Assim, por exemplo, reatores que operam com organismos unicelulares como bactrias e
leveduras possuem, em geral, um comportamento reolgico bastante distinto daqueles que
empregam fungos filamentosos (bolores). (PEREIRA JR, BON e FERREIRA, 2008)
Deve-se mencionar ainda os biorreatores que operam com elevadas concentraes
celulares ("high cell density cultures"), o que propicia altas velocidades de converso do
substrato em produto. Um exemplo dessa situao a fermentao alcolica, na qual se opera
com cerca de 30g clulas/litro de meio (matria seca). Particularmente, no caso de
biorreatores que empregam microrganismos recombinantes, em virtude de uma possvel baixa
produo especfica da protena heterloga de interesse, busca-se operar com concentraes
celulares da ordem de l00 g/L o que exige condies especiais de operao. (PEREIRA JR,
BON e FERREIRA, 2008)
Outro campo de recente desenvolvimento o cultivo de clulas animais e vegetais,
tendo alcanado rpido progresso nos ltimos dez anos, constituindo-se hoje num dos grandes
temas de aplicao da Biotecnologia Moderna. Assim, pode-se citar o emprego de
biorreatores com clulas animais para a produo de uma srie de produtos ligados sade
humana e animal, tais como vacinas virais, anticorpos monoclonais, hormnios e fatores de
crescimento. (PEREIRA JR, BON e FERREIRA, 2008)
No que se refere s clulas vegetais, h exemplos de produo de princpios ativos de
medicamentos, como morfina e quinina, e outros produtos de utilizao na indstria
cosmtica. Os reatores que empregam clulas animais ou vegetais, em geral possuem vrias
particularidades, tendo em vista as diferentes caractersticas apresentadas por este tipo de
clulas em relao s clulas microbianas, destacando-se entre elas a elevada sensibilidade ao
cisalhamento, caracterstica que, em casos extremos, leva necessidade da utilizao de
biorreatores no-convencionais, como reatores "air-lift", ou ainda os reatores com
20
A. Microrganismo:
Segundo CUNHA (2010) o microrganismo desempenha papel fundamental em um
processo fermentativo industrial, uma vez que o agente transformador do sistema,
responsvel pela converso de determinado substrato em produto de interesse. importante
que o microrganismo empregado no processo apresente algumas caractersticas como:
No ser patognico;
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5. MICRORGANISMOS INDUSTRIAIS
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23
24
25
26
27
FONTE: http://debiq.eel.usp.br/~joaobatista/AULA12010.pdf
6. FERMENTAO
Aps a glicose ter sido quebrada a cido pirvico, este pode ser completamente
degradada na respirao, ou pode ser convertido a um produto orgnico na fermentao.
(CUNHA, 2010)
Os microrganismos capazes de se desenvolver em ausncia de oxignio e de
qualquer outro aceptor final de eltrons exgeno conseguem oxidar substratos atravs de um
processo denominado fermentao. Neste processo, a oxidao do substrato acompanhada
28
Resumindo a fermentao:
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30
FONTE: http://bbioestudante.blogspot.com.br/2011/05/fermentacao-processo-anaerobio.html
7. TIPOS DE BIOPROCESSOS
7.1.1
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7.1.2
PROCESSOS DE SUPERFCIE
Os processos em superfcie so aqueles em que a biomassa (massa de clulas) situase na superfcie do meio lquido, em contato direto com o ar atmosfrico, que fornece o
oxignio necessrio populao celular. O meio de cultivo colocado em recipientes rasos,
de modo a oferecer grande rea ao desenvolvimento do agente. A diminuio da concentrao
de nutrientes nas camadas superficiais faz com que cheguem superfcie, por difuso, os
nutrientes existentes nas camadas mais profundas. Tambm, por difuso, o(s) produto(s) do
metabolismo se dispersa(m) no meio em fermentao. Pelo exposto, a difuso e a relao
entre a rea oferecida e o volume de meio desempenham papel importante no estudo de
bioprocessos operados em superfcie. Este tipo de Bioprocesso limita-se, via de regra, aos
fungos filamentosos, que tendem formar pelcula micelial na superfcie do meio. No entanto,
registra-se a produo clssica de vinagre pelo processo Orleanense (Fig. 9), que realizada
por determinadas espcies de bactrias aerbicas do gnero Acetobacter. Pelo fato de as taxas
de transferncia de massa de nutrientes serem reduzidas, os tempos de fermentao so
consideravelmente longos. Adicionalmente, os processos em superfcie so de difcil
operacionalidade e considerados anti-econmicos, pois resultam em alto custo de produo
devido custosa manipulao com esterilizao (incluindo ambiente), enchimento,
esvaziamento e limpeza das vrias bandejas necessrias produo em larga escala.
(PEREIRA JR, BON e FERREIRA, 2008)
FONTE: http://slideplayer.us/slide/374889/
33
FONTE: http://slideplayer.us/slide/374889/
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8. OS BIOPROCESSOS NA INDSTRIA
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(poligalacturonase)
como
na
desmetoxilao
dos
compostos
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- Amidos e acares;
- Cervejaria;
- Laticnios e derivados;
- leos e gorduras;
- Panificao e biscoitaria;
- Vinicultura;
- Sucos de frutas.
8.10
8.11
BENS DE SADE
41
42
CONCLUSO
43
BIBLIOGRAFIA
PEREIRA JR, N.; BON, E. P. D. S.; FERREIRA, M. A. Tecnologia de Bioprocessos. 1a. ed.
Rio de Janeiro: Escola de Qumica/UFRJ, v. 1 - Sries em Biotecnologia, 2008. 62 p.