Ciclo celular y senescencia

Dos sistemas, el p16lnk4a/pRB y p53/p21waf1 estn involucrados en el proceso de la senescencia y sus efectos
bloquean el ciclo celular. Un componente importante del primer sistema es la induccin del gene que codifica
para la protena p16lnk4a, que es un inhibidor de la kinasas CDK4 y CDK6. Estos dos ltimos, miembros de la
familia de las CDK (cyclin-dependent kinase), controlan los puntos de transicin que se encuentran entre cada una
de las diferentes fases del ciclo celular, las fases G1, S, G2 y M76. La protena Prb bloquea la transicin de G1 a S y
su actividad es inhibida cuando es fosforilada por las kinasas CDK4 y CDK6; la induccin de p16lNk4a inmoviliza el
ciclo celular inhibiendo la fosforilacin de pRB.El segundo sistema acta cuando la senescencia es independiente
del primer sistema y su accin sobre la proliferacin celular es ms global, siendo uno de sus mayores
componentes la activacin del factor transcripcional p53, que una vez activado estimula la transcripcin de
numerosos genes, entre los cuales se encuentra el que codifica para la protena p21WAF1 33 Esta ltima bloquea
el ciclo celular a dos niveles: por una parte inhibe al antgeno PCNA ( proliferation cell nuclear antigen), un factor
esencial en la replicacin del ADN; por otra parte bloquea el conjunto de las CDK. En las clulas senescentes, la
protena p53 es activa y los niveles de expresin de p21 y p16 son elevados, por otra parte la protena pRB es
hipofosforilada4,118. El antgeno T del virus SV40, una oncoprotena, se asocia a p53 y pRB inactivndolas,
bloqueando la accin de estos dos sistemas contra la senescencia y aumentando la duracin de vida de las
clulas139. En clulas humanasen cultivo, el momento de la induccin de la senescencia es determinada por el
nmero de divisiones celulares que han efectuado, ms que por el tiempo cronolgico que han pasado en
cultivo83. As, si el nmero de divisiones celulares son artificialmente disminuidas, entonces el nmero de
divisiones que sern ejecutadas, ser la misma por un tiempo cronolgico ms largo. Si una poblacin celular es
congelada 20 divisiones antes de la senescencia y aos ms tarde es vuelta a colocar en cultivo, las clulas
tendrn las 20 divisiones que le restan, lo que implica la existencia de un reloj mittico capaz de contar el nmero
de divisiones celulares. La naturaleza de este reloj ha permanecido por mucho tiempo en el plano especulativo y
algunos mecanismos han sido propuestos, tales como la disminucin progresiva de la metilacin del genoma; la
acumulacin aleatoria de mutaciones en los genes; la acumulacin de protenas incorrectamente replicadas y las
prdidas progresivas de zonas heterocrmaticas en el genoma. En 1973, Olovnikov fue el primero en sugerir que
el acortamiento de las extremidades de los cromosomas limita la duracin de vida de las clulas y segn su
modelo, el acortamiento de los cromosomas conduce a la eliminacin de genes esenciales que hacen que
disminuya la vitalidad de las clulas100. Sin embargo se sigue pensando que la senescencia es inducida por
mecanismos menos destructores, pero ms complejos. Es un hecho de que existen en las clulas humanas
sistemas que reparan daos en el ADN, los cuales, una vez activados, bloquean la divisin celular y ponen en
marcha los mecanismos de reparacin del acido nucleico. Cuando estos daos son causados, por ejemplo, por
rayos gamma, que originan rupturas en los cromosomas, estos sistemas producen un estado similar a la
senescencia. En el curso de esta transicin, que est acompaada de una activacin de p53 y una induccin de
p21WAF1 y p16INK4a, el ciclo celular se encuentra irreversiblemente bloqueado30. Ahora bien, los telomeros son
susceptibles a rupturas en el ADN que podran potencialmente inducir la activacin de estos sistemas que sern
bloqueados por un complejo denominado telosoma, que protege la extremidad de los telomeros. Este modelo de
mecanismo propone que cuando un telomero se hace demasiado corto, el telosoma se disocia o cambia de
conformacin y que este evento induce a la senescencia, exponiendo los telomeros a los sistemas de vigilancia de
la integridad del genoma. Aqu cabe preguntarse cuales son las protenas integrantes de los telosomas y su
particular papel que juegan en la induccin de la senescencia. El conocimiento que se tienen acerca de la
estructura del telosoma es fruto de los estudios que se han llevado a cabo en levaduras. El de la levadura
Saccharomycescerevisae est constituido por ocho protenas diferentes y una de ella es Rap1p, que forma
homodimeros que reconocen la secuencia de repeticiones telomericas, permitiendo asi la formacin de un
complejo ms grande constituido por la protenas Rif1p, Rif2p,Sir2p,Sir3p y Sir4p,12 lo que sugiere que la
formacin de este complejo confiere a la cromatina una estructura ms compacta que la hace inaccesible a
factores de transcripcin, la telomerasa y los sistemas de vigilancia de la integridad del genoma. Cuando el
telomero se acorta y el nmero de molculas Rap1, a los cuales est asociado, es insuficiente, este complejo se
disocia o cambia de conformacin, lo que permite el acceso de la telomerasa114. En las clulas humanas, el factor
Rap1p es remplazado por dos ortlogos, los factores hTRF1 y hTRF2 (TRF: TTAGG repeat factor). El papel del

primero es similar al de Rap1, es decir, controlar el acceso de la telomerasa a nivel de cada uno de los
telomeros17,128, mientras que el segundo bloquea la activacin de los sistemas de vigilancia de la integridad del
genoma y es esencial para la formacin de la estructura en lazo tipo T o T-loop, la cual protege la extremidad
de los telomeros. El T-loop se origina, como ya hemos visto, por un repliegue de los telomeros y por la insercin
de la extensin simple cadena 3 en la seccin doble cadena de los telomeros, donde ella se hibrida a la cadena de
la cual es complementaria. La introduccin de una mutante dominante negativa de hTRF2 conduce a la
destruccin del bucle T; a la activacin de p53; a la induccin de la SA--galactosidasa y a la detencin del ciclo
celular,mimetizando la senescencia44,60. La activacin de la p53 y la induccin de lasenescencia son
dependientes de la funcionalidad del gen que codifica para ATM (ataxia-telangiectasia mutation), una quinasa
activada por la presencia del daos en el ADN75. Ahora bien, la quinasa ATM puede asociarse a p53 y activarla
por fosforilacin en su dominio amino terminal64, lo cual sita la funcin de la quinasa entre el reconocimiento
de los telomeros que han estado expuestos y la activacin de la p5315. Por otra parte, una molcula que podra
participar en la activacin de la p53 es la poly(ADP-ribose)polymerase (PARP)23,113, enzima que utiliza una
estructura en dedos de zinc para buscar interrupciones en la doble hlice de ADN. Despus de identificar un
defecto, la PARP sintetiza un plimero de ADP-ribosa, la cual se une entre otras protenas a la p53, formando con
est ltima un complejo el cual es esencial para la activacin de la p53. Su inhibicin conduce, por lo tanto, a la
prolongacin de la duracin de vida de las clulas117,129.