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1. PRESENTACION...PAG 2
2. INTRODUCCIONPAG 3
3. OBJETIVOPAG 4
4. MARCO TEORICO.PAG 5
5. SECUENCIA DE LA PRACTICAPAG 6
6. MATERIALES.PAG 7
7. CONTENIDO...PAG 8 45
8. ESTADISTICA.PAG 46
9. CONCLUSIONPAG 47
10. LOGROS.PAG 48
11. RECOMENDACIONESPAG 49
12. BIBLIOGRAFIAPAG 50
PRESENTACIN
En esta oportunidad presentare el siguiente informe que rene fundamentos tericos
acerca de Bioqumica Clnica los cuales nos ayudan a realizar diferentes
interpretaciones de las distintas pruebas y tcnicas realizadas en este rea las cuales
las hicimos con las personas responsables del rea
INTRODUCCIN
La exactitud de los resultados obtenidos en el laboratorio clnico depende de la tcnica
del individuo que lleva a cabo el anlisis. La buena tcnica es algo ms que la habilidad
para usar la pipeta o seguir las instrucciones escritas. Incluye la preparacin correcta
de reactivos y especmenes, el manejo cuidadoso de los aparatos de vidrio y dems
equipo y sobre todo la comprensin de cada uno de los pasos y las dificultades que se
puedan encontrar. Es esencial el trabajo cuidadoso, meticuloso, ya que puede estar en
peligro el bienestar del paciente.
OBJETIVO
Procesar las muestras en menor tiempo posible para evitar resultados errneos.
MARCO TERICO
BIOQUIMICA:
La Bioqumica Clnica comprende el estudio de las bases bioqumicas, fisiopatolgicas
de enfermedades y la aplicacin de mtodos de Laboratorio para la evaluacin de la
funcin de los distintos rganos y tejidos como instrumento para el diagnstico, control,
tratamiento y prevencin de diversas patologas humanas esta materia trata de la
capacidad de integrar los resultados de laboratorio en base a una interpretacin clnica,
con conocimiento de conceptos bioqumicos, tcnicas y metodologa analticas en
diversas pruebas de laboratorio que permiten entender el funcionamiento de rganos y
sistemas, discernir las variaciones patolgicas y ayudar por consiguiente al diagnstico,
control de la evolucin, tratamiento, monitorizacin de frmacos y prevencin de la
enfermedad.
SECUENCIA DE LA PRCTICA
Introduccin al equipo
Tiempo de Practica:
Inicio: 2 enero del 2014
Final: 28 de febrero del 2014
MATERIALES
CONTENIDO
1. GLUCOSA
2. TOLERANCIA A LA GLUCOSA
3. UREA
4. CREATININA
5. DEPURACION DE CREATININA
6. COLESTEROL TOTAL Y FRACCIONADA
7. LDL COLESTEROL
8. HDL COLESTEROL
9. TRIGLICERIDO
10. TRANSAMINASAS
11. BILIRRUBINA
12. AMILASA
13. PROTEINURIA DE 24 HORAS
14. CALCIO
15. FOSFATASA ALCALINA
16. PROTEINAS TOTALES Y FRACCIONADAS
17. HEMOGLOBINA GLICOSILADA
18. PROTI U/LCR
19. ADENOSIN DEAMINASA SRICA(ADA)
1. GLUCOSA
Existen varios mtodos para la determinacin de la glucosa en sangre, el ms utilizado
es el mtodo ENZIMATICO.
Fundamento:
La glucosa es oxidada enzimticamente por la glucosa oxidasa a cido glucnico y
agua oxigenada, el agua oxigenada en presencia de per oxidasa produce la copulacin
oxidativa del fenol con la 4-aminofenazona, dando lugar a formacin de un cromgeno
rojo-cereza con absorbancia mxima a 505nm.
Tcnica:
Para suero o plasma:
En tres tubos de ensayo marcados: B (blanco), S (standard) y D (desconocido).
Colocar:
Standard
Muestra
R. de trabajo
2 ml
20 ul
2 ml
20 ul
2 ml
Valores normales:
De: 0.70 - 1.10 gr/dl
O: 70 - 110 mg/dl
Significacin Clnica:
Este examen se realiza esencialmente para poder apreciar las variaciones en la
concentracin sangunea de la glucosa que pueda reflejar alteraciones primarias del
metabolismo de los carbohidratos, al igual que ser manifestaciones secundarias que
acompaan a otras enfermedades.
La patologa ms comn relacionada con el metabolismo de los hidratos de carbono es
la diabetes mellitus (hiperglicemia = glucosuria).
2. PRUEVAS DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA
La prueba de la tolerancia a la glucosa es una prueba natural que permite establecer la
respuesta insulinica frente a un estmulo fisiolgico por la glucosa
El test (o prueba) de tolerancia oral a la glucosa, tambin denominado test (o prueba)
de sobrecarga oral de la glucosa, es una prueba mdica cuyo objetivo es diagnosticar o
excluir la diabetes y cuadros metablicos relacionados, como la resistencia a la
insulina.
Fundamento:
Tiene por objeto establecer la capacidad del sistema para manejar una dosis fija de
glucosa, administrada por va oral en condiciones standard.
Tcnica:
10
11
Tcnica:
Tcnica con reactivos separados
1ml
Muestra o standard
1 ul
250 ul
1 ml
Muestra o standard
10 ul
12
Tcnica en orina
Calculo de Resultados
Urea (g/l) = fx (D1-D2)
Valores Normales:
De 0.10 0.50 gr/dl
Significacin Clnica:
Una elevacin de la concentracin srica de la urea, se interpreta generalmente como
una posible disfuncin renal.
Sin embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valores sricos de urea se
encuentran ntimamente relacionados con la dieta y el metabolismo proteico.
4. CREATININA CINTICA AA
La creatinina, producto de la degradacin de la creatinina, es un compuesto
sumamente difusible cuya eliminacin del organismo se efecta atravez del rin y casi
exclusivamente por la filtracin.
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Fundamento:
La creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio tamponado, previa
desproteinizacin con el cido pcrico, obtenindose un cromgeno rojo. La velocidad
de esta reaccin bajo condiciones controladas es una medida de la concentracin de la
creatinina de la muestra puesto que se comporta como una reaccin cintica de primer
orden para la creatinina por otra parte se ha demostrado que los cromgenos no
creatinina que interfieren en la mayor parte de las tcnicas convencionales, reaccionan
dentro de los 30 segundos y los 5 segundos posteriores al inicio de la reaccin. El
incremento del color se debe exclusivamente a la creatinina.
Tcnica:
Tcnica para suero o plasma
1.2 ml
1.2 ml
0.2 ml
0.2 ml
Reactivo de trabajo
Standard
muestra
14
Clculos de Resultados:
Creatinina en suero (mg/l) = (D2-D1) * f
Valores Normales:
En suero: 8 - 14 mg/l o 0.8 1.4 mg dl
En orina: 0.9 -. 1.5 gr/24 hs
D.C.E.: 80 140 ml/minuto
Significacin Clnica:
La determinacin de la creatinina en suero y orina resultan ser parmetros muy
importantes tanto en el diagnostico como en el pronstico de nefropatas, obstrucciones
urinarias (por afecciones de prstata, vejiga y urter) y anurias reflejas que pueden
producir elevaciones de creatinina reversibles luego de reparar la afeccin.
15
16
Tcnica:
Rotular tres tubos de ensayo para el blanco (B) standard (S) y desconocido (D).
colocar:
Standard
20 ul
Suero
20 ul
R. de trabajo
2 ml
2 ml
2 ml
Calculo de resultados:
Colesterol g/l = D*f
Valores Normales:
De 120 200 gr/dl
Significado Clnico:
Los aumentos de colesterol se observan en:
Nefrosis ictericia obstructiva, diabetes mellitus, cirrosis biliar, arterioesclerosis, etc. Los
valores de colesterol disminuyen en las fases terminales de algunas enfermedades
conjuntivas, como cncer y tuberculosis como resultado del estado de desnutricin del
enfermo.
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7. LDL COLESTEROL
Fundamento:
Las lipoprotenas de baja densidad se separan del suero precipitndolas
selectivamente mediante el agregado de polmeros de alto peso molecular. Luego de
centrifugar, en el sobrenadante quedan las dems lipoprotenas (HDL y VLDL); el
colesterol ligado a las mismas se determina empleando el sistema enzimtico
colesterol oxidas/per oxidasa colorimetra segn Trinder.
Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en el sobrenadante, se obtiene
el colesterol unido a las LDL.
Tcnica:
200 ul
100 ul
Reactivo precipitante
100 ul
20 ul
2 ml
2 ml
2 ml
Sobrenadante
Standard
Reactivo de trabajo
18
Calculo de resultados:
LDL colesterol g/l = colesterol total (D * f)
Valores Normales:
Riesgo bajo o nulo: menores de 1.29 g/l
Riesgo moderado o elevado: valores entre 1.30 y 1.89 g/l
Riesgo muy elevado: de 1.90 g/l
Significado Clnico:
Diversos estudios epidemiolgicos han confirmado que el exceso de colesterol LDL con
respecto a un valor critico de 1.9 g/l debe de ser considerado como un factor de riesgo
para el desarrollo de la enfermedad cardiaca coronaria.
8. HDL COLESTEROL
Fundamento:
Las lipoprotenas de alta densidad (HDL) se separan precipitando selectivamente las
lipoprotenas de baja y muy baja densidad (el LDL y VLDL) mediante el agregado de
sulfato dextran de P.M. 500000 en presencia de los iones de magnesio.
En el sobre nadante separando por centrifugacin, quedan las HDL y se realiza la
determinacin del colesterol ligado a las mismas, empleando el sistema enzimtico
colesterol oxidasa/per oxidasa con colorimetra segn Trinder.
Tcnica:
19
100 ul
20 ul
2 ml
2 ml
2 ml
Sobrenadante
Standard
Reactivo de trabajo
Calculo de Resultados:
HDL colesterol g/l = D * f
Valores Normales:
No puede hablarse de valores normales en HDL, por ser determinado como un factor
de riesgo negativo, pues su correlacin con las enfermedades cardiacas coronarias es
inversa.
Pero sin embargo, algunos se estableci cifras normales que van establecidas segn el
sexo:
Mujeres (20-35 aos) = 0.35 0.80 g/l
Varones (20-35 aos) = 0.35 0.70 g/l
Significado Clnico:
Concretamente, los grupos con baja incidencia de enfermedades cardiacas coronarias,
tiene HDL colesterol elevado. Por lo tanto , su importancia es pronosticada, pero en
trminos de riesgo, se acepta que para un riesgo standard o normal de ECC, el
20
10 ul
10 ul
1 ml
1ml
1 ml
Muestra
Standard
Reactivo
trabajo
de
21
Calculo de Resultados:
TG g/l = D* factor
Valores Normales:
De 0.35 a 1.75 g/l
Significado Clnico:
La dieta, el estrs, la actividad fsica, etc. Producen el acelerado movimiento de los
cidos grasos en los distintos compartimientos del organismo. Por este motivo se
espera que vari la concentracin normal de triglicridos.
La persistencia de esta condicin se asocia con numerosas patologas, tales como
enfermedades hepticas, renal, hiperlipidemias esenciales, etc.
10. TRANSAMINASAS
Son enzimas ampliamente difundidas en el organismo, que catalizan la transferencia de
un grupo amino de un aminocido a un cetocido, en una de las ms importantes
reacciones del metabolismo proteico. El inters clnico est centrado en dos de ellas:
La transaminasa glutmico oxalacetica y la transaminasa glutmico pirvica.
Fundamento:
El piruvato formado reacciona con la 2.4-dinitrofenilhidrazina produciendo, en medio
alcalino. Un compuesto coloreado que se mide a 505 nm.
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Tcnica:
A. 30-37C
Tcnica con Reactivo nico
B. 25C
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Calculo de Resultados:
GOT (U/l) =
En cada caso deber emplearse el factor de clculo correspondiente de acuerdo a la
temperatura de reaccin seleccionada:
Factor (30-37C) = 1.746
Factor (25C) = 794
Valores Normales:
Temperatura
25C
30C
37C
Hombres
At18 u/l
At 25 u/l
At 38 u/l
Mujeres
At 15 u/l
At 21 u/l
At 32 u/l
Temperatura
25C
30C
37C
Hombres
Hasta 22 u/l
Hasta 29 u/l
Hasta 41 u/l
Mujeres
Hasta 17 u/l
Hasta 22 u/l
Hasta 31 u/l
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Significado Clnico:
Un aumento de la actividad ser evidencia de un deterioro de los tejidos en que se
encuentran, de los cuales resulta particularmente importante el corazn y el hgado.
En hepatitis virales la GPT es el enzima predominante debido a su gran concentracin
en el tejido heptico.
En cambio, se ha observado que luego de un infarto de miocardio se produce en suero
un marcado incremento de actividad de GOT. Debido a la liberacin de esta enzima en
el torrente sanguneo.
11. BILIRRUBINA
Es un compuesto tetrapirrolico pigmentado, producto por degradacin de los grupos
hemo de la hemoglobina en las clulas del sistema reticuloendotelial (medula sea,
bazo e hgado).
Esta sustancia circula normalmente por la sangre, unida a la albumina plasmtica o a la
globulina liberada por el sistema retculo endotelial.
Esta bilirrubina es insoluble en el agua y da la llamada reaccin indirecta, mientras
que la bilirrubina excretada por las clulas hepticas esta conjugada con cido
glucornico, es soluble en agua y da la llamada reaccin directa.
Fundamento:
La bilirrubina reacciona especficamente con el cido sulfanilico di azotado produciendo
un pigmento color rojo violceo (azobilirrubina) que se mide foto colorimtricamente a
530 nm.
Si bien la bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el diazorreactivo,
la bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere la presencia de un desarrollador acuoso
que posibilite su reaccin. De forma talque, para que reaccione la bilirrubina total
(conjugada y no conjugada) presente en la muestra, debe agregarse benzoato de
cafena al medio de la reaccin
25
Tcnica:
1.2 ml
1 ml
80 ul
80 ul
80 ul
de
Reactivo A
Agua destilada
Muestra
0.2 ml
Calculo de Resultados:
Bilirrubina total (mg/l) = (DO2M DO1BM) * f
Dnde:
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Valores Normales:
Bilirrubina total en suero o plasma:
prematuros
< 20 mg/l
<20 mg/l
14-87 mg/l
<80 mg/l
34-115 mg/l
<120 mg/l
15-120 mg/l
<160 mg/l
Sangre de cordn
Hasta las 24 hs
Hasta las 48 hs
Del 3er al 5to da
Los valores comienzan luego a disminuir para alcanzar el nivel promedio del adulto al
mes del nacimiento.
En los prematuros, los niveles tardan ms en alcanzar la normalidad, dependiendo del
grado de inmadurez heptica.
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
Significado Clnico:
Las alteraciones hepatocelulares u obstrucciones biliares pueden incidir en el
metabolismo de la bilirrubina y provocar hiperbilirrubinemias, a expensas de la fraccin
conjugada, dependiendo del paso metablico comprometido.
La tasa normal de bilirrubina en adultos esta aumentada por la liberacin de exceso de
hemoglobina (hper hemolisis), en la ictericia sea por la obstruccin de vas biliares
(colangitis, colecistitis, tumores del pncreas, tumores hepticos, etc.), sea hemoltica
por destruccin de hemates (anemia hemoltica aguda, policitemia, paludismo, etc.).
Sea hepatocelulares o parenquimatosa (insuficiencia heptica, hepatitis viral, cirrosis,
necrosis heptica, abscesos, etc.
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12. AMILASA
Fundamento:
La amilasa hidroliza el sustrato definido 2-cloro-p-nitrofenil-D-maltotriosido (CNP-G3)
para liberar 2-cloro-p-nitrofenol (CNP), formndose 2-cloro-nitrofenil-D-maltosido (CNPG2), maltotriosa (G3) y glucos, El CNP absorbe a 405 nm y la velocidad de aparicin
del color es directamente proporcional a la actividad enzimtica.
Tcnica:
A. 25-30C
En una cubeta mantenida a la temperatura seleccionada,
Colocar:
Reactivo A
2 ml
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Calculo de Resultados:
Amilasa (U/l) =
* factor
Temperatura
Reactivo A
Muestra
Factor
25-30C
2 ml
100 ul
1.628
1 ml
50 ul
1.628
2 ml
50 ul
3.178
1 ml
20 ul
3.953
37C
Dnde:
VT: volumen total
VM: volumen de muestra
b: paso ptico
CNP: coeficiente de absortividad milimolar del CNP
: Factor de conversin (absortividad milimolar a micromolar)
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Valores Normales:
Temperatura
25C
30C
37C
Suero hasta
24 U/l
100 U/l
125 U/l
540 U/l
680 U/l
Orina
hasta
Calculados
Estos valores de referencia se obtuvieron de una poblacin sana (n=40), de ambos
sexos, con edades comprendidas entre 17 y 40 aos, con una dieta mixta normal, sin
sntomas de enfermedad aparente.
Significado Clnico:
La amilasa producida principalmente en el pncreas exocrino y en las glndulas
salivales, escinde los enlaces 1-4 glucosidicos de los polisacridos (almidn y
glucgeno).
Se encuentra elevada en el suero de pacientes con pancreatitis aguda alcanzando los
valores ms elevados entre las 24 y 30 horas posteriores al ataque, declinando luego
para volver a los niveles normales entre las 24 y 48 horas siguientes.
Tambin se ve aumentada en este caso la excrecin urinaria de la enzima, persistiendo
la hiperamilasuria 3 a 5 das, luego de que la actividad srica ha alcanzado los niveles
normales.
Tambin es posible encontrar valores aumentados en cualquier caso de abdomen
agudo o intervencin quirrgica en regiones prximas al pncreas.
La parotiditis bacteriana y paperas se asocian tambin con elevaciones en los niveles
de amilasa srica.
30
3.2 ml
3.2 ml
0.8 ml
Agua blanda
Orina (sin diluir)
cido tricloroactico
Calculo de Resultados:
Volumen total * lectura 1000
Nota: de realizarse una dilucin de la orina, duplicar el total por la dilucin
efectuada.
Valores Normales:
De 0.1 a 0.5 gr/24 hs
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14. CALCIO
El calcio es uno de los cinco minerales ms abundantes del organismo.
Ms del 90% del mismo, se localiza en el tejido seo. El calcio es esencial en la
mayora de la reacciones de la coagulacin sangunea y en la regulacin de la
excitabilidad de las fibras musculares.
Fundamento:
El calcio con la cresolftalein complexona (Cfx) a PH 11, dando un complejo de
adicin color magenta que se mide fotocolorimetricamente a 570 nm.
Tcnica:
50 ul
3.5 ml
3.5 ml
Reactivo Cfx
Buffer
20 ul
20 ul
Muestra
Mezclar inmediatamente.
Luego de 10 minutos, volver a leer (S y D).
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Calculo de Resultados:
Corregir las lecturas restando los blancos internos correspondientes:
S - BS = S
D - BD = D
Calcio Srico mg/dl = D * f
Valores Normales:
En suero: 8.5 a 10.5 mg/dl
Significado Clnico:
La hipercalcemia est relacionada con distintas patolgicas hiperparatiroidismo,
neoplasias seas, intoxicaciones con vitamina D. no obstante, algunas hipercalcemias
pasan desapercibidas y solo son detectadas como resultado de pruebas bioqumicas
de rutina, este ltimo es el caso de pacientes asintomticos.
La hipocalcemia se asocia con desordenes tales como hipoparatiroidismo, deficiencia
de vitamina D, mala absorcin, etc. Y se presenta como crisis aguda o como una
patologa de comienzo gradual.
15. FOSFATASA ALCALINA
La fosfatasa alcalina es una enzima ampliamente distribuida en el organismo, cuya
funcin depende del tejido en el que se encuentre y cuya actividad se manifiesta
mediante la hidrolisis de los monosteres del cido orto fosfrico, en medio alcalino.
Fundamento:
La fosfatasa alcalina hidroliza al p-nitrofenilfosfato que es incoloro, liberando fosfato y
p-nitrofenol. El color amarillo del anin p-nitrofenolato desarrollando luego de 30
minutos de incubacin, es proporcional a la actividad fosfatsica de la muestra y se lee
a 405 nm.
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Tcnica:
A. Procedimiento I
Tcnica con reactivo nico
B. Procedimiento II
Tcnica con reactivos separados
1 ml
10 ul
Muestra
Pre incubar unos minutos luego agregar:
0.25 ml
Reactivo B
34
Calculo de Resultados:
Procedimiento I:
Fosfatasa alcalina (U/l) a 405 nm =
Procedimiento II:
Fosfatasa alcalina (U/l) a 405 nm =
Valores Normales:
Los adultos normales (edades entre 20 y 60 aos) se observan los siguientes rangos:
Temperatura
25C
30C
37C
45-213
65-300
Temperatura
25C
30C
37C
Hasta 450
Hasta 645
35
La IFCC recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia
eligiendo grupos de personas en base a criterios establecidos, acorde con el contexto
de su poblacin.
Significado Clnico:
La fosfatasa alcalina es una enzima ampliamente distribuida en el organismo. Hidroliza
los monosteres del cido orto fosfrico en medio alcalino.
En el adulto proviene en parte del hgado (fraccin termoestable) y en parte del hueso,
sistema reticuloendotelial y vascular (fraccin termolbil), dando lugar a distintas
isoenzimas.
La actividad srica de fosfatasa alcalina sea, en condiciones normales, alcanza su
mayor actividad en los nios en edad de crecimiento (llegando a triplicar los niveles del
adulto) debido a que esta isoenzima se localiza en los osteoblastos (relacionados con
la calcificacin y formacin de estructuras seas). Tambin es fisiolgico el aumento
que se produce al final del primer trimestre del embarazo, a expensas de la isoenzima
placentaria que en este periodo alcanza niveles mximos (aproximadamente el doble
de los valores normales).
Entre las patologas que afecta la actividad srica acerca de la fosfatasa alcalina se
pueden citar carcinomas, metstasicos en el hgado y en el hueso (productos de
enzima), colestasis billar, fenmenos osteoblsticos, trastornos de mala absorcin
acompaados de lesiones ulcerosas e incluso lesiones en vas de respiracin tales
como infarto agudo de miocardio, infarto pulmonar o renal.
16. PROTEINAS TOTALES Y FRACCIONADAS
Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares, ampliamente distribuidos
en el organismo. Actan como elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo
la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulacin, etc. Esta
multiplicidad hace que las protenas resulten ser imprescindibles para la vida.
Normalmente la protena ms abundante en el plasma es la albumina.
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Fundamento:
A. Para el caso de las protenas totales
Enlaces peptdicos de las protenas reaccionan con el ion cprico, en medio alcalino,
para dar un complejo color violeta con mximo de absorcin a 540 nm, cuya intensidad
es proporcional a la concentracin de protenas totales en la muestra.
B. Para la determinacin de albumina
La albumina reacciona especialmente sin separacin previa con la forma anionica de la
bromo cresolsulfon Ftalena (BCF). En presencia de exceso de colorante, en un medio
tamponado a PH 3.8. el aumento de absorbancia a 625 nm respecto del blanco de
reactivo es proporcional a la cantidad de albumina presente en la muestra.
Tcnica:
A. Protenas totales
Rotular los tubos del siguiente modo: B (blanco), S (standard) y D (desconocido).
Colocar:
B
S
D
50 ul
50 ul
50 ul
3.5 ml
3.5 ml
3.5 ml
Agua destilada
Suero patrn
Muestra
Reactivo EDTA/Cu
37
B. Albumina
Rotular 3 tubos de ensayo como para el caso de protenas totales
Colocar:
B
S
D
-
10 ul
10 ul
3.5 ml
3.5 ml
3.5 ml
Suero patrn
Muestra
Reactivo BCF
Calculo de Resultados:
A. Protenas totales gr/dl. = D * factor
B. Albumina gramos gr/dl = D*factor
Valores Normales:
Protenas totales = 6.1 a 7.9 gr/dl
Albumina = 3.5 a 4.8 gr/dl
Reacciona A/G = 1.2 a 2.2 gr/dl
38
Significado Clnico:
Los casos patolgicos como prdidas renales, desnutricin, infecciones prolongadas
etc. Suelen presentar hipoproteinemias mientras se absorba hiperproteinemias en
mieloma mltiple, endocarditis bacteriana y hemo concentraciones de diverso origen.
17. HEMOGLOBINA GLICOSILADA
La Hemoglobina (Hb) es una protena producida en los glbulos rojos y tiene como
funcin principal el transporte de las molculas de oxgeno desde los pulmones hacia
los tejidos y cada molcula que fabrica nuestro organismo, circula por sangre durante
aproximadamente tres meses.
Fundamento:
La hemoglobina es una protena que se encuentra en los glbulos rojos de la sangre y
sirve para transportar el oxgeno al resto de nuestras clulas y tejidos. Esta protena se
une a la glucosa circulante por el torrente sanguneo. El porcentaje de protena unida a
glucosa es lo que se denomina hemoglobina glicosilada o glicosilatada (HbA1). Esto
sucede tambin en las personas sin diabetes. Cuanto mayor es la cantidad de glucosa
en sangre ms se une a las protenas y su porcentaje de unin indica cual ha sido la
cantidad media de glucosa circulante durante el tiempo de vida del glbulo rojo. El
porcentaje de glicosilacin es proporcional al tiempo y a la concentracin de glucosa;
en otras palabras, los glbulos sanguneos ms viejos tendrn un mayor porcentaje de
hemoglobina glicosilada y aquellas personas mal controlados (con perodos de altas
concentraciones de glucosa sangunea tendrn un mayor porcentaje en su resultado.
Por el contrario, aquellas personas que han mantenido un buen control metablico,
vigilado y controlado tendrn un porcentaje de hemoglobina glicosilada en valores ms
cerca a los normales. La hemoglobina glicosilada tiene varias fracciones y de ellas, la
ms estable, la que tiene una unin con la glucosa ms especfica es la fraccin
HbA1C. La hemoglobina A1c es la ms importante, dado que su molcula de azcar es
la glucosa covalentemente enlazada al terminal amino de la cadena beta. Como las
concentraciones normales de glucohemoglobina excluyen marcadas fluctuaciones de la
glucosa sangunea durante las 3 o 4 semanas precedentes, la concentracin de
hemoglobina A glicosilada representa el ndice ms confiable de la media de la glucosa
sangunea durante un largo perodo de tiempo.
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Tcnica:
Hemoglobina lisada:
Hemoglobina total:
Hemoglobina fraccionada:
Calculo de Resultados:
% = hemoglobina glicosilada
Valores Normales:
Limite
Diabticos controlados
6% - 9%
40
Significado Clnico:
Seguimiento y control del paciente diabtico, considerndose como lmites de control
aceptable hasta un 7%. Entre el 7 y 9% se considera un deficiente control de la
diabetes y superior a 9% muy deficiente.
Cifras inferiores a 6,5% en pacientes diabticos, hacen pensar en un buen control de la
enfermedad.
Pacientes diabticos muy descompensados manifiestan valores superiores a 12% de
hemoglobina A1c.
18. PROTI U/LCR
Fundamento:
Las protenas presentes en la muestra reaccionan en el medio acido en el complejo
rojo de pirogalol-molibdato originando un nuevo complejo coloreado que se cuantifica
espectrofotomtricamente a 600 nm.
Tcnica:
20 ul
20 ul
1 ml
1 ml
1 ml
Estndar
Muestra
Reactivo
41
Clculo de Resultados:
Protena en orina de 24 horas:
Mg de protenas/24 hs = D/S*V*1000
Siendo V: volumen de la diuresis expresado en litros/24 horas
1000 = mg/l del standard
Protenas en orina ocasional:
Mg/dl protenas = D/S * 100
Protenas en lquido cefalorraqudeo:
Mg/dl protenas = D/S * 100
Valores Normales:
Orina de 24 hs: 30-140 mg/24 hs (hasta 160 mg/24 hs en embarazadas)
Orina ocasional: 25 mg/dl
LCR: 15-45 mg/dl en personas sanas, en personas de ms de 60 aos este rango se
extiende hasta 60 mg/dl
Significado Clnico:
Protenas en orina
Una cantidad de protenas plasmticas de pequeo peso molecular son filtradas
normalmente en forma libre a travs del glomrulo renal y luego son, en parte,
reabsorbidas por los tbulos renales.
Hay condiciones fisiolgicas o benignas donde se puede observar un aumento en la
excrecin urinaria de protenas como en el ejercicio violento, fiebre, hipotermia,
embarazo.
La medicin de las protenas urinarias es importante en la deteccin de patologa renal.
La proteinuria en la enfermedad renal puede resultar de una disfuncin glomerular o
tubular.
En el primer caso se da por un aumento en el pasaje a travs de los capilares del
glomrulo y caracterizada por la prdida de protenas plasmticas de igual o mayor
42
El reactivo est listo para usar o dejar por unos minutos el reactivo a
temperatura ambiente (los que se encuentran refrigerados)
Identificar los tubos de prueba, tanto para blanco de reactivo, standard y blanco
de muestras y muestras desconocidas.
Mida los volmenes indicados.
43
Blanco
Standard
Muestra
Blanco
muestra
-
250 ul
250 ul
250 ul
250 ul
10 ul
10 ul
Muestra
Adenosina
Buffer 6.5
Standard
Mezclar, tapar los tubos e incubar a 37C durante 60 minutos luego agregar:
Color 1
500 ul
500 ul
500 ul
500 ul
Muestra
10 ul
Color 2
500 ul
500 ul
500 ul
500 ul
Calculo de Resultados:
( )
44
Valores Normales:
Suero
11-22 ul
Liquido cefalorraqudeo
0-35 ul
Liquido pericardio
0-9 ul
Liquido pleural
0-40 ul
Liquido asptico
0-40 ul
Liquido articular
0-40 ul
Hasta 1.3
Significado Clnico:
La determinacin de la adenosina deaminasa srica ADA se utiliza para establecer la
actividad de la tuberculosis pulmonar, se le ha determinado como marcador evolutivo
de la respuesta al tratamiento convencional de TBC pulmonar.
La aplicacin ms til de esta tcnica es el diagnstico de la meningitis tuberculosa y
en el diagnstico diferencial entre la pleuresas tuberculosas y neoplsicas, ya que
aunque la ADA tambin esta elevada en el lquido pleural de los empiemas, artritis
rematoidea y algunos linfomas estas ltimas condiciones son ms fciles de diferenciar
clnicamente.
45
700
600
500
400
300
200
100
0
glucosa
urea
387
creatinina
406
colesterol total
266
HDL
133
LDL
133
triglicerido
234
fosfatasa alcalina
197
GOT
185
GPT
185
bilirrubina total
201
protenas
180
albumina
180
amilasa
18
calcio
14
proteinuria
68
depuracin de creatinina
146
hemoglobina glicosilada
50
ADA
17
otros
79
TOTAL:
3772
46
CONCLUSIN
47
LOGROS
48
RECOMENDACIONES
49
BIBLIOGRAFA
http://www.uba.ar/download/academicos/carreras/bio
quimica.pdf
http://bqa.ufsc.br/
http://www.wiener-lab.com.ar/wienerw/inde
50