Biotecnologa

y biorremediacin
Dr. Luis Wong Vega

 La

biorremediacin puede ser definida

como el uso de organismos vivos,
componentes celulares y enzimas
libres, con el fin de realizar una
mineralizacin (compuesto orgnico
blanco --> CO2 + H2O), una
transformacin parcial, la humificacin
de los residuos o de agentes
contaminantes y una alteracin del
estado redox de metales.

 La

biorremediacin es llevada a cabo

fundamentalmente mediante el uso de
microorganismos y, en menor medida, de
plantas.

La biorremediacin es un fenmeno
comn en la naturaleza, cuando en un
ambiente o ecosistema se produce una
alteracin del equilibrio como es el caso
de una gran tala de rboles, ello origina un
aumento considerable de materia orgnica
en el suelo.

Los factores que gobiernan la

biorremediacin son complejos y pueden
variar enormemente dependiendo de la
aplicacin.
En muchos casos puede llegar a ser difcil
distinguir entre los factores biticos y
abiticos que contribuyen con la
biorremediacin.

En este caso los

factores fsicos y
biticos tratan de
reponer el dao, se
produce entonces un
aumento de organismos
saprfitos los cuales
ocasionan una gran
mineralizacin de la
materia cada, adems
el resto de esa materia
puede ser reciclada o
humificada.

En general existen dos

estrategias para ayudar
a un ecosistema a
remediarse:
a) la primera es agregar
nutrientes de forma de
estimular las
poblaciones naturales y
as aumentando su
actividad y
b) la segunda es
introduciendo
microorganismos
exgenos dentro del
ecosistema como forma
de remediacin.

 En

este ltimo
caso con las
nuevas tcnicas de
la ingeniera
gentica se pueden
emplear
microorganismos
genticamente
modificados,
hacindolos ms
eficientes en la
biorremediacin.

Los mbitos principales de la biorremediacin

moderna son:
1. Biorremediacin de hidrocarburos
provenientes de combustibles fsiles.
2. Biorremediacin de Hidrocarburos
Aromticos Polinucleares
3. Biorremediacin de compuestos
xenobiticos
4. Biorremediacin de metales pesados

Biorremediacin de combustibles fsiles

La descomposicin microbiana de estos
hidrocarburos es de considerable importancia
econmica y ambiental por los perjuicios que
ocasionan.
Una de las principales causas de
contaminacin del ambiente son los
derrames de petrleo.

 Estos

combustibles
causan graves
problemas de
contaminacin
tanto al usarlos
como al
producirlos y
transportarlos.

Biorremediacin de
Hidrocarburos Aromticos
Polinucleares
Los hidrocarburos aromticos
polinucleares (HAPs)
constituyen un grupo de
contaminantes considerado de
estudio prioritario debido a sus
propiedades mutagnicas,
txicas y cancergenas. En los
ltimos aos la acumulacin de
estos ha ido aumentado.

Los compuestos
policclicos
aromticos
conforman una
familia grande de
especies
qumicas muy
peligrosas.

La transferencia de
genes episomticos
(contenidos en un
plsmido) entre bacterias
superficiales y
endofticas, ha permitido
crear cepas endofticas
que metabolizan
totalmente el tolueno, un
compuesto aromtico
muy txico y muy difcil
de catabolizar.

Biorremediacin de compuestos xenobiticos

Se denomina compuesto xenobiticos (xeno, vocablo
que significa extrao) a aquellos compuestos
sintetizados artificialmente por sntesis qumica con
fines industriales o agrcolas. Aunque estos
compuestos pueden ser semejante a los compuestos
naturales muchos son desconocidos en la
naturaleza. As, los organismos capaces de
metabolizarlos no podran existir en la naturaleza.

 Algunos

de los xenobiticos ms
conocidos son los plaguicidas entre los
que se incluyen herbicidas, insecticidas,
nematicidas, funguicidas, etc..

La persistencia de xenobiticos, en su forma txica activa o

derivados igualmente txicos, en el suelo es larga.

Biorremediacin de metales
pesados
Otra importante rea de
contaminacin es la que
originan los metales
pesados. En este caso, el
mecanismo bioqumico
microbiano o vegetal, no es
la degradacin del tomo
contaminante, sino que se
produce un cambio en el
estado de oxidacin del
metal para su
detoxificacin.

Metales pesados txicos.

Este cambio en el estado de oxidacin

permite seguir varias estrategias de
biorremediacin:
a) El metal se vuelve menos soluble y
precipita lo que hace que sea menos
utilizado por los organismos del ambiente.
b) Hace que se vuelva por el contrario ms
soluble por lo que puede ser removido por
permeabilidad.
c) Permite que pueda haber una
volatilizacin del tomo.
d) Hacerlo en si menos txico para los
organismos del medio.

La biorremediacin de suelos envenenados con

metales pesados, usando bacterias modificadas
genticamente, es un campo en fuerte desarrollo.

Sus aplicaciones incluyen hasta la

descontaminacin de desechos
radioactivos.

Ingeniera Gentica Vegetal

y Fitorremediacin

La contaminacin ambiental
por metales y xenobiticos
es un problema global y el
desarrollo de mtodos de
biorremediacin para la
limpieza de suelos
contaminados, basada en el
uso de plantas
transgnicas, es de singular
inters e importancia.

Fitorremediacin es un trmino
general usado para describir varios
mecanismos mediante los cuales las
plantas alteran la composicin
qumica de la matriz del suelo en el
que estn plantadas.

La palabra proviene del prefijo

griego phyto (que significa planta) y
del la raz latina remidium (que
significa corregir o remover lo malo).

Lo malo se refiere al dao

antropognico (hecho por el
hombre) al arrojar al medio
contaminantes tales como solventes
orgnicos, metales pesados,
pesticidas o radionclidos.

Plantas hiperacumuladoras
pueden concentrar metales
pesados en sus partes una
relacin de, al menos, 0.1%
metal / biomasa seca.

La Fitoacumulacin o
fitoextraccin consiste en la
traslocacin de los metales
pesados o compuestos
inorgnicos, desde la
rizosfera hasta las propias
partes de la planta (brotes,
hojas, races, etc), los cuales
pueden ser separados y
eliminados adecuadamente.
En el otro caso, algunos
compuestos pueden ser
neutralizados qumicamente y
eliminados (algunos pueden
ser volatilizados).

La fitorremediacin acta atravs de diversos

mecanismos, tales como la inmobilizacin del
elemento txico (fitoestabilizacin) o mediante
su remocin (fitodecontaminacin).

La ingeniera gentica de
plantas ha creado un nuevo
campo para la
Fitorremediacin, pues la
posibilidad de emplear
genes detoxificadores para
incrementar esta capacidad
en plantas transgnicas,
abre enormes perspectivas
para su uso en el
tratamiento y recuperacin
de suelos.

Tecnologas de Ingeniera
Gentica de Plantas para la
Fitorremediacin estn
disponibles solo para un
grupo limitado de
problemas ambientales,
tales como en el caso de la
acumulacin de arsnico,
un elemento altamente
txico generado por
algunas actividades
industriales y sobre todo
por la minera.

La remocin de arsnico
por fitorremediacin
emplea un
hiperacumulador natural
de este metal: una
variedad de helechos, los
cuales lo extraen del suelo
y acumulan una gran
cantidad de este metal en
los tejidos de sus partes
areas.

 Esquemas

muy sofisticados, basados

en la accin combinada de dos genes
de detoxificacin, han sido diseados
en plantas transgnicas, desarolladas
para la remocin de mercurio o
arsnico por fitorremediacin.

Esquema de
detoxificacin
metablica de
Mercurio (Hg) y
Arsnico (As).

Dhankher et al. examined the

effects of coexpressing two
bacterial genes, arsenate reductase
(arsC) and y-glutamylcysteine
synthetase (y-ECS), in Arabidopsis
plants. They observed that plants
expressing SRS1p/ArsC and
ACT2p/ y-ECS together showed
substantially greater arsenic
tolerance than wild-type plants or
plants expressing y-ECS alone. In
addition, when grown on arsenic,
these plants accumulated 4-17-fold
greater fresh shoot weight and
accumulated 2- 3-fold more arsenic
per gram of tissue than wild-type
plants or plants expressing y-ECS
or ArsC alone.

Nature Biotechnology,
DOI:10.1038/nbt747, October 7,
2002).

En plantas que de manera

natural hiperacumulan zinc
(Zn) en sus hojas,
aproximadamente diez
genes claves en la
homeostasis celular son
expresados a la vez, a
niveles muy altos. Los
mismos se conocen y ya
estn siendo modificados y
empleados para estos fines.

La enzima AtCpNifS regula la

acumulacin y el metabolismo
en los plastidios, tanto del azufre
(S) como del selenio (Se).
AtCpNifS es una enzima de
localizacin cloroplstica,
proveniente de Arabidopsis
thaliana, que forma azufre
elemental y alanina, a partir de
cistena (Cys) o selenio
elemental y alanina a partir de
selenocistena (SeCys).
Su expresin en plantas que
acumula selenio est siendo
analizada para limpiar estos
metales de suelos altamente
contaminados.

 Reaccin

de detoxificacin del Selenio

intermediada por la Cistena.

Se han diseado diversas estrategias de

ingeniera metablica, bastante exitosas,
para la fitorremediacin del Selenio en
plantas transgnicas.

Plantas transgnicas de
Brassica juncacea que
sobreproducen protenas
denominadas
fitoquelatinas
(protenas que fijan
metales) han demostrado
una alta capacidad de
detoxificar cadmio (Cd).

Different transgenic mustard plants

that overproduce phytochelatins were
shown to have increased cadmium
tolerance and accumulation: Plant
Physiology 119:73-79 (1999); Plant
Physiology 121:1169-1177 (1999).

Plantas transgnicas que sobre-expresan genes de

la enzima ATP-sulfurilasa acumula grandes
cantidades de molibdeno (Mo), tungsteno (W) y
vanadio (V), en un proceso que involucra captura
de azufre y activacin de mecanismos de
generacin de oxianiones.

 La

ingeniera gentica de plantas,

para su uso en la fitorremediacin,
necesita de anlisis adicionales que
lleven al descubrimiento de ms
genes involucrados en estos
procesos.

As mismo, necesita de:

a) resultados de estudios sobre
el desarrollo de poblaciones
segregantes y
b) datos sobre la bioquimica de
la concentracin de
multielementos y sus perfiles,
en diferentes tipos de plantas.
Toda esta informacin es
necesaria para tener una visin
completa sobre los
mecanismos moleculares que
dirigen la hiperacumulacin de
metales en especies vegetales
detoxificadoras de suelos.

Preocupaciones en torno a la
biorremediacin

La biorremediacin es un campo
reciente, en donde se comienza a
tener las herramientas necesarias
para utilizarla pero, como todo lo que
toca a la biotecnologa, es un tema
controvertido e influenciado por el
desconocimiento pblico.
Los temores sobre lo que pueda
pasar si se liberan al medio genes
nuevos o modificados son reales.
Pueden estos microorganismos o
plantas modificar las poblaciones
naturales? Hasta que punto?

Se piensa que cepas modificadas genticamente y que

sean liberadas en el medio podran difundirse a otros
lugares no contaminados o bien una vez hubieran hecho
su faena descontaminadora degradando todo el
contaminante, estas persistiran all, aumentando el
riesgo de transferencia gentica horizontal (pasndoles
los genes a otras especies).

Por un lado, no se ha
probado este tipo de
transferencia en casos
de plantas transgnicas
y, por otro, los
organismos
transgnicos se disean

con controles para

prevenir esta
posibilidad.

Por ejemplo, utilizando una cepa suicida

modificada genticamente. La cepa degradadora
contiene un gen letal tal como la colicina E3Rnasa
debajo el control de un promotor regulado por un
represor dependiente de un corepresor ( que sera
el hidrocarburo a degradar). Es decir un control
negativo reprimible. De esta manera si el
microorganismo se va del lugar de accin o el
contaminante es totalmente degradado, al no
existir corepresor en el medio, el represor no
podra actuar y por lo tanto se expresara el gen
letal matando a la clula. Sin embargo si se
mantiene en la zona contaminada y queda
contaminante para degradar el represor reprimir el
gen letal.

Otro tipo de control de riesgo seran las cepas biosensoras.

Consiste en hacer otra fusin gnica entre un promotor
regulado por un activador inducido por el contaminante y un gen
reportero fcil de detectar, como es el caso del gen lux. Esta
cepa biosensora nos permitira monitorizar in situ como va el
proceso de degradacin mediante la produccin de
bioluminiscencia (ms luz producida indicar mayor grado de
degradacin). En estas cepas se busca aumentar la eficiencia
metablica de las vas degradativas espcficamente.

Tiene sentido la
investigacin en
biorremediacin
en la Repblica
Dominicana?

El tercer lugar ms contaminado

del mundo es Haina (Repblica
Dominicana). Los restos de una
planta de reciclaje de bateras de
vehculos, ya clausurada, afectan
todava a una poblacin de 85.000
habitantes, que viven inmersos en
restos de cidos, plomo, etc.

Plantas como el gandul

(Cajanus cajan) o el cajuil
(Anacaridum occidentale)
tienen un gran potencial
como especies tropicales
potencialmente tiles
para la biorremediacin,
pues poseen tolerancia a
suelos de diferente
naturaleza (alcalinos, con
alto contenido en
aluminio y otros metales,
etc) y crecen con
bastante facilidad.

Los niveles de contaminacin del Ro Ozama son

extremadamente altos. Su limpieza puede hacerse empleando
medios como microorganismos detoxificantes.

Este proceso comprende

procesos de digestin y
fermentacin bsicamente
realizada por bacterias,
modificadas
genticamente o no.
El resultado final es la
produccin de CO2 y
Metano, con lo que se
logra una disminucin del
contenido de sustancia
orgnica.

Conclusiones..

La biorremediacin es una prctica que est

tomando importancia a nivel mundial dado que el
aumento de la actividad industrial est degradando
cada vez ms los ecosistemas naturales.
El empleo de microorganismos conocidos y de
especies vegetales para el tratamiento de desechos
potencialmente txicos ya es una prctica habitual
en pases desarrollados.
Las herramientas de la Ingeniera gentica ha abierto
un nuevo campo de posibilidades en cuanto a la
biorremediacin de condiciones muy complejas.
Para los pases en desarrollo, la biorremediacin no
es un lujo sino una necesidad.

!!!Muchas Gracias!!!