!"#$%!

"#$"%&

&'6-(0.=.(*+6%7,'+.0,%-6*%)2A)+',+6
Pipetear en cubetas

Mtodo GLDH

Muestra / !+.(%

Mtodo completamente enzimtico para

determinaciones cinticas de urea

!#)*%

8 x 50ml
9 x 3ml

Estuche completo
Estndar

45+606%1,2,3
La urea es hidrolizada en presencia de agua y ureasa para producir
amonio y dixido de carbono. El amonio producido en esta reaccin se
combina con 2-oxoglutarato y NADH en presencia de glutamatodeshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD+. La prueba ha
sido mejorada de forma que la GLDH es la enzima lmite. La
disminucin de la absorbancia es proporcional a la concentracin de
urea dentro de los intervalos de tiempo dados. Ya que la prueba
cintica es muy rpida, ha sido diseada para ser realizada
preferiblemente en analizadores.
&'.*-.7.6%0(%1,%'(,--./*
ureasa

!!"

2-oxoglutarato + NH4+
+ NADH

!!"

2 NH4+ + CO32-

GLDH

L-glutamato + H2O + NAD+

!+.(%

120 mmol/l
750 mmol/l
# 40 kU
# 0,4 kU

9%:%?<%=1%@2A)+',+6
2-Oxoglutarato
NADH
?%B%C%=1%#)+D*0,'
Urea

25 mmol/l
1,2 mmol/l
80 mg/dl
13,3 mmol/l

&'(7,',-.6*%0(1%'(,-+.E6
!#)*% y !+.(% estn listos para usar y se pueden aplicar directamente
en analizadores automatizados (procedimiento partida con substrato).
El '(,-+.E6% 0(% +',A,F6 (procedimiento partida con muestra) se
prepara mezclando 4 partes de !#)*% con 1 parte de !+,-%.
Ej: 40 ml !#)*% + 10 ml !+,-%.
#)+,A.1.0,0%0(1%'(,-+.E6
Cuando se almacenan los reactivos entre 2...8C, se mantienen estables hasta la fecha de caducidad, an despus de abrir. Se debe
evitar la contaminacin de los reactivos.
El '(,-+.E6%0(%+',A,F6 se mantiene estable por 5 das entre 15...25C
y por 4 semanas entre 2...8C.
42()+',
Suero, plasma, excepto plasma heparinato de amonio, orina.
Diluya la orina 1 + 100 con agua destilada (resultados X 101)
#*),G6
Longitud de onda:
Paso ptico:
Temperatura:
Medicin:

340nm, Hg 334 nm, 365 nm

1 cm
25C, 30C 37C
Contra blanco de reactivo (Br).
Slo se necesita un blanco de reactivo por
serie. Cintica de 2 puntos.

H,16'()%0(%'(I('(*-.,%4,5
Suero: 10 - 50 mg/dl o
Orina: 20 - 35 g/24h o

!+.(%

10 l
1000 l

250 l

250 l

Mezcle, lea la absorbancia de la muestra/!+.(% despus de 30

segundos (A1). Active el cronmetro y lea exactamente 1 minuto
despus (A2). Calcule la diferencia de absorbancia:
$AMuestra/!+.(% = (A2 - A1) - $ABr.
&'6-(0.=.(*+6%7,'+.0,%-6*%=2()+',
Pipetee en las cubetas
Blanco de
reactivo (Br)
Muestra / !+.(%
Reactivo de trabajo

--1000 l

Muestra
!+.(%

10 l
1000 l

Mezcle, lea la absorbancia de la muestra/!+.(% despus de 30

segundos (A1). Active el cronmetro y lea exactamente 1 minuto
despus (A2). Calcule la diferencia de absorbancia:
$AMuestra/!+.(% = (A2 - A1) - $ABr.
8,1-216)%0(%1,%-6*-(*+',+.6*%0(%2'(,
@2('6L%71,)=,
C = 80 X $A muestra / $A !+.(%
[mg/dl] o
C = 13,3 $A muestra / $A !+.(%
[mmol/l]
M'.*,

86*+(*.06)
9%:%;<%=1%#*>.=,)
!#)*%
Buffer Tris (pH 7,8)
ADP
Ureasa
GLDH
!+,-%

Muestra

Mezcle, incube por 1 minuto aproximadamente.

!+,-%

&'()(*+,-./*%0(1%()+2-3(
10521
!"#$%
10104
!&'(%

Urea + 2 H2O

Blanco de
reactivo (Br)
--1000 l

1,7 8,3 mmol/l

333 - 583 mmol/24h

J*+('I('(*-.,)
La prueba no es influenciada por hemoglobina hasta 500 mg/dl,
triglicridos hasta 2000 mg/dl, bilirrubina hasta 60 mg/dl, glucosa
hasta 500 mg/dl y cido ascrbico hasta 30 mg/dl.
#)K2(=,%0(%7.7(+(6
Por favor utilice nicamente el estndar recomendado por HUMAN
(dentro del estuche o disponible por separado !"#$% 10104)

C = 80,8 X $A muestra / $A !+.(%

C = 1340 X $A muestra / $A !+.(%

[mg/dl] o
[mmol/l]

N,-+6'()%0(%-6*E(').6*%7,',%O!P%Q%2'(,
C (BUN) = 0,466 X C (urea)
C (urea) =2,14 X C (BUN)
8,',-+('R)+.-,)%0(%1,%(F(-2-./*
Linearidad
La prueba es lineal hasta 300 mg/dl 50 mmol/l.
La linearidad depende del analizador utilizado.
Muestras con concentraciones superiores deben diluirse 1 + 1 con
agua destilada y se debe repetir la prueba. Multiplique los resultados
por 2.
Los datos tpicos de ejecucin de la prueba pueden ser encontrados
en el informe de verificacin, accesible va
www.human.de/data/gb/vr/su-urluv.pdf
www.human-de.com/data/gb/vr/su-urluv.pdf
86*+'61%0(%-,1.0,0
Se pueden emplear todos los sueros control con valores de urea
determinados por este mtodo.
Recomendamos el uso de nuestro suero control HUMATROL de
origen animal nuestros SERODOS de origen humano.
$2+6=,+.>,-./*
Proposiciones para la aplicacin de los reactivos sobre analizadores
estn disponibles sobre demanda. Cada laboratorio tiene que validar la
aplicacin en su propia responsabilidad.
P6+,)
Todos los reactivos contienen azida de sodio (0,095%) como
preservativo. No ingerir, evitar el contacto con la piel y las membranas
mucosas.
S.+(',+2',
1. Kassirer, J. P., New Eng. J. Med. T9U, 385 (1971)
2. Talke, H., Schubert, G. E., Klin. Wochenschr. ;C, 174 (1965)
3. Tietz, N. W., Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd. Edition
(1987), 676 - 679, W. B. Saunders Company Philadelphia
4. MacKay, E. M., MacKay, L. L, J. Clin. Invest. ;, 295 (1927)
5. Sarre, H., Nierenkrankheiten, Georg Thieme Verlag Stuttgart
(1959)

SU-URLUV
INF 1052101 E
10-2005-6

Human Gesellschaft fr Biochemica und Diagnostica mbH

Max-Planck-Ring 21 - D-65205 Wiesbaden - Germany
Telefon: +49 6122 9988 0 - Telefax: +49 6122 9988 100 - eMail: human@human.de