BICARBONATE

REACTIFS BIOLABO
www.biolabo.fr

Mthode enzymatique

FABRICANT :
BIOLABO SA,

Ractif pour le dosage quantitatif du dioxyde de carbone total

dans le srum ou le plasma humains.

02160, Maizy, France

REF 99832

R1 8 x 30 mL Ractif de travail R2 1 x 30 mL Etalon

REF 99852

R1 6 x 100 mL Ractif de travail R2 1 x 30 mL Etalon

CODE CNQ : IX

SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES

Tel : (33) 03 23 25 15 50

IVD USAGE IN VITRO

Fax : (33) 03 23 256 256

INTERET CLINIQUE (1)

PREPARATION DES REACTIFS

Le CO2 total dans le plasma est constitu de CO2 dissout en solution

aqueuse, de CO2 faiblement li aux groupements amines des protines,
de bicarbonate HCO3-, de petites quantits dions CO32- et dacide
carbonique (H2CO3). Environ 90% du CO2 dans le plasma est sous
forme de bicarbonate.
La mesure du CO2 total, conjointement avec les trois paramtres
principaux de lionogramme (Na+, K+, Cl-), et avec les valeurs du pH et
des gaz du sang, est utilise pour valuer la concentration en HCO3- et
explorer les perturbations de lquilibre acido-basique, rsultant dun
dysfonctionnement mtabolique ou respiratoire.

Ajouter sans dlai au contenu dun flacon R1 le volume d'eau

dminralise frache indiqu sur l'tiquette.
Agiter doucement jusqu' complte dissolution (environ 2 minutes).
De manire limiter la contamination du ractif avec le CO2, utiliser
uniquement de l'eau frachement dminralise qui n'a pas t stocke
plus d'un jour. Ne pas pipetter avec la bouche.

PRINCIPE (4)(5)
Mthode enzymatique pour quantifier le CO2 total en tant que
bicarbonate et gaz dissout. Le schma ractionnel est le suivant :
PEPC
Oxaloactate + H2PO4
HCO3 + Phosphoenolpyruvate
Oxaloactate + NADH

MDH

Malate + NAD +

La diminution de l'absorbance due loxydation du NADH en NAD+ est

directement proportionnelle la concentration en CO2 total dans le
specimen et est mesure 380 nm.

Srum non hmolys. Les spcimens doivent tre collects en condition

anarobie. Prfrer lhparine comme anticoagulant.
Ne pas conserver les spcimens plus dune heure 2-8C.

REACTIF DE TRAVAIL

Phophonolpyruvate
NADH
Phosphonolpyruvate carboxylase (PEPC)
Malate dshydrognase (MDH)
Tampon pH (20C) 8.0 + 0.1
Conservateur
flacon R2

Stocker dans le flacon dorigine bien bouch 2-8 C et labri de

la lumire.
Ractif (flacon R1) et Etalon (flacon R2): Transvaser la quantit
ncessaire, bien reboucher le flacon et stocker 2-8C.
Avant ouverture, les ractifs sont stables jusqu' la date de
premption indique sur ltiquette du coffret, sils sont utiliss et
conservs dans les conditions prconises.
Aprs reconstitution, le ractif de travail est stable 4 mois en
labsence de contamination dans le flacon dorigine bien rebouch.
Ne pas utiliser le ractif sil est trouble ou si labsorbance 380 nm
est < 1,000.
Ne pas utiliser le ractif de travail aprs la date de premption
indique sur ltiquette du coffret.

PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (2) (6)

REACTIFS
flacon R1

STABILITE ET CONSERVATION

8,0
1.6
> 1000
> 200
66

mmol/L
mmol/L
IU/L
IU /L
mmol/L

Hmoglobine : Aucune interfrence jusqu 1,5 g/L.

Bilirubine:
Aucune interfrence jusqu 300 mg/L.
Lipmie :
Ne pas utiliser de srum lipmiques.
Young D.S. a publi une liste des substances interfrant avec le dosage.

REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES

ETALON

Bicarbonate de sodium

INTERFERENCES (3)

27

mmol/L

1. Equipement de base du laboratoire danalyses mdicales.

2. Srums de contrle normaux et pathologiques.
3. Eau dminralise pour la reconstitution du ractif.

PRECAUTIONS

CALIBRATION

Les ractifs BIOLABO sont destins du personnel qualifi, pour un

usage in vitro.
Vrifier lintgrit des ractifs avant leur utilisation.
Utiliser des quipements de protection (blouse, gants, lunettes).
Ne pas pipetter avec la bouche.
En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment
leau et consulter un mdecin.
Les ractifs contiennent de lazide de sodium (concentration < 0,1%)
qui peut ragir avec les mtaux tel que le cuivre ou le plomb des
canalisations. Rincer abondamment.
La fiche de donnes de scurit peut tre obtenue sur simple
demande.
Elimination des dchets : respecter la lgislation en vigueur.
Par mesure de scurit, traiter tout spcimen comme potentiellement
infectieux. Respecter la lgislation en vigueur.

Etalon du coffret (flacon R2) ou tout calibrant raccord sur une

mthode ou un matriau de rfrence.
La frquence de calibration dpend des performances de lanalyseur et
des conditions de conservation du ractif.
Il est recommand de calibrer nouveau dans les cas suivants :
1. Changement du lot de ractif.
2. Aprs oprations de maintenance sur lanalyseur.
3. Les valeurs de contrle sortent des limites de confiance, mme aprs
utilisation dun nouveau flacon de contrle.
Version : FT 99832 18 09 2008

CONTRLE DE QUALITE

CODE CNQ : IX

Tout srum ou solution de contrle titr pour cette mthode.

Programme externe de contrle de la qualit.

Il est recommand de contrler dans les cas suivants :

Au moins un contrle par srie.

Au moins un contrle par 24 heures.

Changement de flacon de ractif.

Aprs oprations de maintenance sur lanalyseur.

Lorsquune valeur de contrle se trouve en dehors des limites
indiques, appliquer les actions suivantes :
1. Rpter le test en utilisant le mme contrle.
2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, prparer un
contrle fraichement reconstitu et rpter le test.
3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, utiliser un autre
calibrant ou un calibrant fraichement reconstitu et rpter le test.
4. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, calibrer nouveau
en utilisant un autre flacon de ractif et rpter le test.
5. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le
service technique BIOLABO ou le revendeur local.

Ramener le ractif et les spcimens temprature ambiante.

Mesurer dans des tubes 37C,
(30C) :

Blanc

Etalon

Dosage

Ractif de travail (flacon R1)

1 mL

1 mL

1 mL

Eau dminralise

10 OL
10 OL

Etalon

10 OL

Spcimen
Bien mlanger et incuber 5 minutes 37C (30C).

Utiliser une cuve de 1 cm de trajet optique et lire labsorbance 380 nm contre

de leau dminralise.

Remarque : des procdures spcifiques sont disponibles pour les

analyseurs automatiques. Contacter le service technique BIOLABO.

CALCUL (2)

INTERVALLES DE REFERENCE (2)

Bicarbonate

MODE OPERATOIRE (TECHNIQUE MANUELLE)

Le rsultat est dtermin daprs la formule suivante :

(mEq/L)

(mmol /L)

Artriel

21-28

[21-28]

Veineux

22-29

[22-29]

(Abs Blanc Abs Essai)

CO2 total (*) =

Il est recommand au laboratoire de dfinir ses propres intervalles de

rfrences pour la population concerne.

(*)

(Abs Blanc Abs Etalon)

x concentration de lEtalon

Le CO2 total est environ 10 % plus lev que le Bicarbonate.

REFERENCES

PERFORMANCES (7)

(1)

Analyse manuelle
Intra-srie
N = 20

Taux
faible

Taux
lev

Inter-srie
N = 20

Taux
faible

Taux
lev

Moyenne mmol/L

12,4

38,2

Moyenne mmol/L

12,4

38,2

S.D. mmol/L

0,9

0,7

S.D. mmol/L

0,4

2,1

C.V. %

7,4

1,8

C.V. %

3,1

5, 5

(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
(7)

Analyse automatise
Intra-srie
N = 20

Taux
faible

Taux
lev

Inter-srie
N = 20

Moyenne mmol/L

10

40

Moyenne mmol/L

10

40

S.D. mmol/L

0,7

0,6

S.D. mmol/L

0,8

1,6

C.V. %

7,3

1,4

C.V. %

8,0

3,9

Taux
faible

Taux
lev

Limite de dtection : environ 3 mmol/L

Sensibilit pour 1 mmol/L : environ 0.010 Abs
Comparaison avec ractif du commerce :
Analyse manuelle : y = 1,004 x + 0,31
r = 0,9744
Analyse automatise : y = 0,96 x + 0,40
r = 0,96

TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R. Ashwood,
W.B. Saunders (1999) p. 1104-1124.
Clinical Guide to Laboratory Test, 3rd Ed., N.W. TIETZ (1995) p. 84-85.
YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995) p. 384 3-88.
Norris KA, Atkinson AR, Smith WG. Clin Chem 1975; 21:1093.
Forrester RL, Wataji JJ, Silverman DA, Pierre JK. Clin Chem 1976; 22:p.243245
Henry RJ. Clinical Chemistry: Principles and Technics. Harper and Row New
York 1974.
National Committee for Clinical Laboratory Standards. User evaluation of
Precision Performance of Clinical Chemistry Devices. NCCLS, 1984, NCCLS
Publication EP5-T.

Made in France
Version : FT 99832 18 09 2008

LIMITE DE LINEARITE
La raction est linaire jusqu 50 mmol/L (50 mEq/L).
Au-del, diluer le spcimen avec de leau frachement dminralise
exempte de CO2 et refaire le dosage en tenant compte de la dilution
dans le calcul du rsultat. La limite de linarit dpend du rapport de
dilution spcimen/ractif.

Fabricant

Date de premption

IVD

Usage in vitro

Temprature de conservation

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