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Actividades antioxidantes del extracto de romero (Rosmarinus officinalis

L.), aceite esencial de semillas negro (Nigella sativa L.), el cido
carnsico, cido rosmarnico y sesamol
Naciye Erkan, Guler Ayranci, Erol Ayranci
Departamento de Qumica de la Facultad de Artes y Ciencias de la Universidad de Akdeniz, 07058 Antalya, Turqua
Recibido el 24 de agosto de 2007; recibido en forma revisada 20 de noviembre 2007; aceptado 30 de enero 2008

Resumen
Actividades antioxidantes de tres compuestos puros: el cido carnsico, cido
rosmarnico y sesamol, as como dos extractos de plantas: extracto de romero y aceite
esencial de semillas negras, fueron examinados mediante la aplicacin de DPPH y
ABTS + ensayos de barrido radical con el tiocianato frrico prueba. Los tres mtodos de
ensayo han demostrado que el extracto de romero tena una actividad antioxidante ms
alta que el aceite esencial de semillas negras. El orden de la actividad de los
antioxidantes de compuestos puros mostr variaciones en diferentes pruebas. Esto se
atribuy a factores estructurales de los compuestos individuales.
Tambin se determinaron los contenidos fenlicos del aceite esencial semilla negra y
extracto de romero. Se encontr que el extracto de romero tiene un contenido fenlico
alto que el aceite esencial de semilla negra. Este hecho se utiliz para explicar la mayor
actividad antioxidante de extracto de romero.
1. Introduccin
Ha habido un inters creciente en el uso de antioxidantes naturales, tales como
tocoferoles, flavonoides y romero (Rosmarinus officinalis L.) extractos para la
conservacin de productos alimenticios en los ltimos aos (Bruni et al., 2004;Frutos y
Hernndez-Herrero, 2005; Hras, Hadolin, Knez,Y Bauman, 2000; Williams, Spencer, &
Rice-Evans, 2004), debido a que estos antioxidantes naturales evitan los problemas de
toxicidad que pueden derivarse del uso de antioxidantes sintticos, tales como
hidroxianisol butilado (BHA),hidroxitolueno butilado (BHT) y galato de propilo (PG)
(Amarowicz, Naczk, y Shahidi, 2000; Aruoma, Halliwell, Aeschbach, y Loligers, 1992).
Las plantas, incluyendo hierbas y especias, tienen muchos fotoqumicos que son
potenciales fuentes de antioxidantes naturales, por ejemplo, diterpenos fenlicos,
flavonoides, taninos y cidos fenlicos (Dawidowicz, Wianowska, Y Baraniak, 2006).
Estos compuestos tienen actividades antioxidantes, antiinflamatorias y anticancergenas
(Lee, Hwang, y Lim, 04). Los compuestos fenlicos tambin se cree que son capaces de
regenerar tocoferol endgeno en la bicapa de fosfolpidos de las partculas de
lipoprotenas de nuevo a su forma antioxidante activa (Rice-Evans,Miller, y Paganga,

1996). El mayor nivel de atencin entre las hierbas y especias como fuentes de
antioxidantes se ha centrado en el romero. En estudios anteriores, la salvia (Salvia
officinalis L.) y el romero mostraron tener patrones similares de compuestos fenlicos y
su actividad antioxidante se atribuye principalmente a su cido carnsico, carnosol y
componentes cidos rosmarnico (Frankel, Huang, Aeschbach, y Prior, 1996; Okamura,
Fujimoto, Kuwabara, y Yagi, 1994; Thorsen Y Hildebrandt, 2003).
Semilla Negro (Nigella sativa L.) es otra planta que se utiliza como una fuente de
antioxidante. Se ha utilizado tradicionalmente, especialmente en el Oriente Medio y la

India, para el tratamiento de asma, tos, bronquitis, dolor de cabeza, reumatismo, fiebre,
influenza y eczema (Burits y Bucar, 2000) y por su antitumoral, antihistamnica,
antidiabtico, antiinflamatorio y actividades antimicrobianas. Muchas de estas
actividades se han atribuido a quinona constituyentes en la semilla. A principios
experimentalmente estudios demostraron la inhibicin de la no enzimtica la
peroxidacin lipdica en liposomas tanto por el fijo petrleo y timoquinona que es el
compuesto principal en aceite esencial de semilla negra (Houghton, Zarka, de las Heras,
y Hoult, 1995).
Sesamol es uno de los componentes de lignanos, que son una clase de compuestos
inusuales encontrados en el aceite de ssamo (Yoshida Y Takagi, 1999) y se estn
estudiando entre los principales componentes antioxidantes en las semillas de ssamo.
Ha sido conocido por muchos aos que el aceite de ssamo es altamente resistente al
deterioro oxidativo en comparacin con otros aceites comestibles (Mohamed y Awatif,
1998), posiblemente debido a la presencia de componentes antioxidantes de lignanos,
incluyendo sesamol.
Es importante comparar las actividades antioxidantes de extractos de plantas, que puede
contener ms de un componente antioxidante, como las de los antioxidantes
individuales puros, con el fin de determinar la posible sinergia y la interaccin entre los
antioxidantes. Sin embargo, debido a la complejidad de la actividad antioxidante en los
alimentos, la evaluacin de las actividades de los compuestos puros y extractos de
plantas matrices vegetales de complejos deben basarse en los datos obtenidos en las
mismas condiciones experimentales. Prueba de la actividad en ms de un ensayo es
deseable porque los diferentes mtodos miden caractersticas diferentes del
antioxidante. Varios enfoques se utilizan para probar las antioxidantes en los alimentos
y los sistemas biolgicos. Algunos consisten de oxidacin de un sustrato lipdico o
lipoprotena bajo la norma condiciones y evaluacin de la actividad por diversos
mtodos a determinar la cantidad de oxidacin que se inhibe. Algunos de ellos, que se
llaman mtodos de captura de libres radicales, medir la capacidad de los antioxidantes
para interceptar los radicales libres, como revisado por Frankel y Meyer (2000).
El propsito del presente trabajo es determinar las actividades antioxidantes de cido
carnsico, cido rosmarnico y sesamol como compuestos antioxidantes puros y de
extracto de romero y de aceite esencial de semilla negro como matrices vegetales
complejas mediante ensayo radical DPPH, ABTS + ensayo radical, prueba tiocianato
frrico (FTC) en una emulsin de cido linoleico y medicin del contenido de fenoles
totales.

2. Materiales y mtodos
2.1. Materiales
Todos los disolventes utilizados en los experimentos eran de grado HPLC y comprado
de Merck. 1,1-difenil-2-picrilo-hidracilo (DPPH), cido carnsico radical (90%), y el
cido linoleico se obtuvieron de Sigma, mientras que 2,20 -azino-bis (3-etil
benzotiazolina-6-sulfnico) sal de diamonio (ABTS) y sesamol eran de Fluka. Trolox y
cido rosmarnico (97%) fueron de Aldrich. Todos los dems reactivos fueron de grado
analtico.
Hojas de romero se obtuvieron de Akdeniz del campus de la universidad en mayo y se
seca a 25-30 C durante 3 das sin la aplicacin de cualquier tratamiento trmico para
minimizar la prdida de componentes activos. Las hojas secas se separaron de la ramas
y mantenidos en congelacin a -20C hasta su uso.
La semilla negra fue adquirida de un mercado local y almacenado en congelador a -20 C
hasta su uso.
2.2. Preparacin y anlisis de extracto de romero
Las Hojas de romero secas se mezclan en una licuadora y a continuacin, se sometieron
a extraccin Soxhlet utilizando metanol como disolvente. Cincuenta gramos del
material vegetal y Se utilizaron 250 ml de metanol en la extraccin. El metanol que
contiene el extracto se filtr luego a travs de papel filtro Whatmanl (GF / A, 110 mm) y
el disolvente se separ por destilacin de vaco a 40 C en un evaporador rotatorio. El
restante extracto se sec finalmente en un horno de vaco a 30 C durante dos horas para
asegurar la eliminacin de cualquier disolvente residual.
El Extracto final era un polvo de color verde oscuro. Se analiz para el cido carnsico
y cido rosmarnico por HPLC como se describe a continuacin y se mantuvo en un
congelador a 20 C bajo Atmsfera de N2 hasta su uso.
El anlisis por HPLC del extracto de romero para el cido carnsico y cido rosmarnico
se realiz de acuerdo con el procedimiento descrito por Okamura et al. (1994). El
anlisis se realiz con una serie de instrumentos 1100 HPLC Agilent equipado con un
muestreador automtico. La columna era un Hypersil Tipo ODS C18 con un tamao de
partcula 5 um y 4.6 x 250 mm de dimetro, se utiliza con Hypersil ODS 4,0 x20 mm de
dimetro interno 5 cartuchos de guardia ul.
La separacin se llev a cabo isocrticamente con una fase mvil que consta de 0,1% (w
/ v) acuosa orto-fosfrico cido y acetonitrilo (40:60) a una velocidad de flujo de 1
ml /min. Temperatura de la columna era de 27 C. El detector era una DAD (230,4 nm)
y el volumen de inyeccin fue de 5 ul.
2.3. Preparacin y anlisis de aceite esencial de semilla negro
El Aceite esencial de semilla negro se prepar de acuerdo con el procedimiento descrito
por Burits y Bucar (2000); 75 g de semilla negro fueron aplastados y la extraccin se
aplic utilizando alrededor de 220 ml de ter de petrleo (pe = 40-60 C) en un aparato

Soxhlet. Se continu la extraccin para cuatro horas y repetirse hasta que se recogi
suficiente aceite.
El disolvente se elimin entonces a presin reducida y temperatura. El residuo de color
marrn en el matraz se destilado a vapor con un aparato Clevenger. Extraccin del
destilado acuoso con n-hexano y la eliminacin del disolvente del extracto bajo vaco
produjo lo aceite esencial. Se analiz por HPLC para timoquinona, como se describe a
continuacin, y se mantienen en congelador a 20 C bajo Atmsfera de N2 hasta su
uso.El anlisis por HPLC del aceite esencial de semilla negro para timoquinona se
realiz de acuerdo con el procedimiento presentado por Ghosheh et al. (1999). La
columna era un Bono Alfa Tipo de C18, 10 um, 300 x 3,9 mm. La fase mvil isocrtica
Consisti en H2O: metanol: 2-propanol en la proporcin de N.
2.4. DPPH ensayo de captacin radical
De Este ensayo se llev a cabo segn lo descrito por Blois (1958) con algunas
modificaciones; 1,5 ml de varias diluciones de los materiales de prueba (antioxidantes
puros o extractos de plantas) eran mezclados con 1,5 ml de una solucin metanlica de
DPPH 0,2 mM. Despus de un perodo de incubacin de 30 min a 25C, la absorbancias
a 515 nm, la longitud de onda de mxima absorcin de DPPH, Se registraron como
muestra A, utilizando un Cary 100 Bio UV / VIS. Un experimento en blanco
Tambin se llev a cabo aplicando el mismo procedimiento a una solucin sin el
material de ensayo y la absorbancia se registra como Ablanco.
La actividad de captacin de radical libre de cada solucin era a continuacin, calculada
como porcentaje de inhibicin de acuerdo con la siguiente ecuacin:
% De inhibicin = 100(A blanco _Asample)/ A blanco
Actividades antioxidantes de los compuestos de ensayo o extractos se expresaron como
IC50, definida como la concentracin del material de ensayo requerida para causar una
disminucin del 50% en inicial Concentracin de DPPH.
2.5. ABTS + ensayo de captacin de radical
Este ensayo se llev a cabo de acuerdo con el procedimiento de descrito por Re et al.
(1999). ABTS + catin radical era producido por reaccin de 7 ABTS acuosa mM con
2,45 mM (concentracin final) de persulfato de potasio y manteniendo la mezcla en la
oscuridad a temperatura ambiente durante 16 h. Azul-verde ABTS + se form al final de
este perodo.La solucin se diluy con etanol hasta una absorbancia de 0,70 0,02 a
734 nm, la longitud de onda de mximo de absorbancia en la regin visible. Los
materiales de ensayo se disolvieron en etanol y se diluy con tal que, despus de la
introduccin de un volumen exactamente medido de cada dilucin en el ensayo, se
produjo una disminucin de 10-90% en la absorbancia de la solucin en blanco a 734
nm. Des pues de aadir 35 ul de la solucin de ensayo a 3,5 ml de solucin de ABTS
+teniendo A734 = 0,70 0,02, absorbancia se registr hasta 6 min en intervalos de 1
min. Los resultados se expresaron como Trolox capacidad antioxidante equivalente

(TEAC) en 1, 4 y 6 min. TEAC se define como la concentracin mM de un Trolox

solucin cuya actividad antioxidante es equivalente a la actividad de la solucin de
ensayo 1,0 mM. Con el fin de encontrar los valores TEAC, una curva de respuesta de
concentracin separada para las estndar soluciones Trolox se prepar.
2.6. Prueba tiocianato frrico (FTC)
El anlisis de la actividad antioxidante usando tiocianato frrico se realiz de acuerdo
con el procedimiento presentado por Lee et al. (2004); Se disolvi 0,006 g de cada
material de ensayo en 0,12 ml de etanol y 2,88 ml de una linoleico 2,51% solucin de
cido en etanol. Despus, 9 ml de un fosfato 0,04 M tampn (pH 7,0) se aadieron a
esta solucin. La mezcla de se mantuvo a 40 C en un tubo de ensayo con tapn en la
oscuridad durante 72 h. Una parte alcuota de 0,1 ml fue tomada de la mezcla de cada
24 h y se diluy con 9,7 ml de etanol al 75%, seguido de la adicin de 0,1 ml de
tiocianato de amonio 30%.
Exactamente 3 min despus de la adicin de 0,1 ml de 0,02 M en FeCl2 3,5% de HCl, la
absorbancia para el color rojo se midi a 500 nm. La relacin de esta absorbancia a la
absorbancia de un espacio en blanco sin ningn material de ensayo se tom como una
medida de la capacidad del material de ensayo para inhibir la peroxidacin de lpidos
que es, a su vez, una medida de la actividad antioxidante.
2.7. El contenido total de fenlicos
Se determin el contenido de fenoles totales de extractos de plantas el uso de FolinCiocalteu (FCR) de acuerdo con el procedimiento reportado por Singleton, Orthofer, y
Lamuela-Raventos
(1999) con algunas modificaciones. Un mili litro de cada solucin de extracto de la
planta, preparado en etanol a una concentracin de 0,1 mg / ml se mezcl con 7,5 ml de
FCR que se diluy 10 veces con agua destilada. Despus de reposar a temperatura
ambiente durante 5 min, 7,5 ml de 60 mg / ml de se aadi una solucin acuosa de
Na2CO3. La mezcla se mantenido a temperatura ambiente durante 2 h y luego la
absorbancia midi a 725 nm. Los resultados se expresaron en glico equivalentes de
cido (GAE), determinada utilizando un separado preparado absorbancia frente a la
curva de concentracin para el cido glico.
3. Resultados y discusin
3.1. Anlisis de extractos de plantas
El anlisis por HPLC de extracto de romero mostr que contena aproximadamente el
6% de cido carnsico y 8% de cido rosmarnico. Se encontr en el aceite esencial de
semilla negra aproximadamente 12% de timoquinona por anlisis de HPLC. Contenido
total de fenol en el extracto de romero fue de 162 mg/ g de cido glico y en el aceite
esencial de semilla negra fue 28,2 mg / g, respectivamente.
3.2. DPPH captacin de radical

DPPH es una demostracin radical estable una absorbancia mxima a 515 nm. Se puede
someterse fcilmente por una reduccin antioxidante (AH) que se puede demostrar por
el siguiente reaccin (Frankel y Meyer, 2000), DPPH.+ _ AH.DPPH _ H +A
Debido a la facilidad y conveniencia de esta reaccin,ahora tiene un amplio uso en la
evaluacin de captacin de radical libre (Siddhuraju, 2007; Thaipong, Boonprakob,
Crosby,
Cisneros-Zevallos, y Bryne, 2006; Wu, Shiau, Chen, y Chiou, 2003). La desaparicin
del radical DPPH se toma la absorcin a 515 nm por la accin de los antioxidantes
como una medida de la actividad antioxidante.
En el presente estudio, la capacidad de los materiales de prueba (antioxidantes puras y
extractos de plantas) para barrer DPPH fue evaluado sobre la base de sus valores de
CI50, se ha definido anteriormente como la concentracin de material de ensayo para
disminuir la absorbancia a 515 nm (o concentracin) de la solucin de DPPH a la mitad
de su valor inicial. Se obtuvieron estos valores IC50 utilizando una curva de calibracin
preparada representando grficamente el porcentaje de inhibicin los valores calculados
por la ecuacin. (1) como una funcin de la concentracin del material de ensayo. Los
valores de CI50 de cido carnsico, cido rosmarnico, sesamol, extracto de romero y El
aceite esencial de semilla negra se dan en la Tabla 1. Se puede observar que cido
carnsico muestra la actividad antioxidante ms alta entre los antioxidantes puros de
acuerdo con la DPPH. Por otro lado, la actividad antioxidante de romero extracto es casi
10 veces ms eficaz (en DPPH en los basureros) que el de aceite de semilla negra. Esto
puede ser atribuido a la mayor contenido fenlico de la antigua (162 mg GAE / g) que la
de este ltimo (28,2 mg GAE / g). La estrecha correlacin entre la actividad
antioxidante fenlico y contenido de extractos obtenidos de los distintos atractivos
naturales fuentes, se ha demostrado por muchos trabajadores (Liu et al., 2007;
Verzelloni, Tagliazucchi, y Conte, 2007). Ella Se inform de que el disolvente utilizado
en la extraccin puede tambin ser importante en la actividad antioxidante del extracto,
dependiendo del contenido fenlico. Por ejemplo (Liu et al. 2007) encontraron que los
compuestos fenlicos y flavonoides contenidos de un endoftico Xylaria sp. Fueron
mayores en metanol extractos que en extractos de hexano.
Con respecto a la actividad antioxidante, basado en el DPPH prueba de compuestos
puros, parece sorprendente que carnsico cido, con dos grupos hidroxilo fenlicos,
tiene un antioxidante mayor potencia que el cido rosmarnico, con cuatro fenlico
grupos hidroxilo (vase la Fig. 1 para la estructura de los compuestos puros).
Resultados inesperados similares, basados en el nmero de grupo hidroxilo fenlico en
la estructura de antioxidante molcula, se inform en la literatura. Por ejemplo, en el
trabajo de Brand-Williams, Cuvelier y Berset (1995) el comportamiento cintico y el
poder antirradical (basado en 1 /
Los valores de IC50) de 20 compuestos hacia su reaccin con

DPPH, No se encontraron resultados interesantes. El cido ascrbico, que contiene

ningn grupo hidroxilo fenlico y conocido como un pobre antioxidante, reaccion
rpidamente con DPPH, Alcanzando una constante estado en menos de 1 minuto,
mientras que el cido rosmarnico y tocoferol, que contiene 4 y 1 grupos -OH fenlicos,
respectivamente, mostraron slo comportamientos cinticos intermedios, llegar a un
estado estacionario despus de 5 y 30 min, respectivamente.
De nuevo, en el mismo trabajo, se encontr que el cido cafeico, llevando dos grupos
-OH fenlicos, tenan un antirradical mayor potencia que el cido rosmarnico, llevando
4 fenlico OH grupos. Es evidente que el nmero de grupos -OH fenlicos presente en
la estructura de una molcula antioxidante no es siempre es el nico factor que
determina su actividad antioxidante.
Las posiciones de los grupos OH fenlico, la presencia de otro funcional grupos en toda
la molcula, como dobles enlaces y su conjugacin a los grupos -OH y grupos
cetnicos,
Tambin juegan un papel importante en las actividades antioxidantes y tienen ha
demostrado por Rice-Evans et al. (1996) en su amplio estudio sobre relaciones de
actividad-estructura antioxidante de flavonoides y cidos fenlicos. En general, el factor
anterior se puede llamar como la tensin en el fenlico
Grupos -OH. Se ve en la Fig. 1 que la tensin en el fenlica
Grupo -OH est aumentando en el orden siguiente: rosmarnico cido <sesamol <cido
carnsico. En cido carnsico, dos grupos OH fenlico adyacentes son tensas con un
grupo carboxlico adyacente. En sesamol, -OH fenlico grupo se cuela con dos tomos
de oxgeno, aunque no adyacente. As, el orden del grado de tensin en fenlico
Grupos -OH de antioxidantes se refleja en su antioxidante la actividad de acuerdo con el
presente ensayo DPPH. Recientemente, el la polaridad y la hidrofobicidad de
antioxidantes, adems de la factores antes mencionados, se encontr que jugar
importante papeles en su actividad, especialmente en sistemas de biomembrana
(Wu, Huang, Lin, Ju, y Ching, 2007). Por supuesto, en el presente estudio, es difcil
llegar a conclusiones generales sobre relaciones de actividad-estructura antioxidante con
el nmero limitado de molculas antioxidantes bajo consideracin.
3.3. ABTS + captacin de radical
Este mtodo mide la actividad antioxidante de tanto antioxidantes solubles en agua y
solubles en lpidos, as como lengeta
Tabla 1
Actividades de eliminadores de Radical cido carnsico, cido rosmarnico, sesamol,
extracto de romero y aceite esencial de semilla negra.

Muestra

actividad de los radicales de captacin

DPPH
ABTS+ (TEAC, mM Trolox)
1 min
4 min
6 min

El extracto de romero
aceite esencial de semilla
negro

IC50 (lM)
54,0 1.4b

15,51,1

515 20.1b

2,0 0,7

33,1 1,7

5,6 1,0

72,3 3, 3

3,6 0,4

15,61,
1

15,7 1,0
2,5 0,6

2,5
0,6

5,9 1,2

El cido carnsico
El cido rosmarnico
sesamol

5,7
1,7

3,7 0,7

3,7
0,2
A.-Los resultados se dan como la media de tres mediciones con intervalos de confianza
del 95%.
B.- Los datos presentados en unidades ug /ml. Para el cido carnsico, cido
rosmarnico y sesamol, TEAC se define como la concentracin mM de una solucin de
Trolox cuya actividad antioxidante es equivalente a una solucin de 1,0 mM. Para
romero y para semilla negra, TEAC se define como la concentracin de antioxidante
Trolox cuya la actividad es igual a 1,0 mg / ml de solucin de muestra.
Extractos de fuentes naturales, a travs del valor TEAC, se define en la seccin de
materiales y mtodos. Superior Valores TEAC demuestran mayor actividad
antioxidante. Para obtener valores TEAC, una curva de calibracin para cada material
de ensayo se deriva de la inhibicin por ciento (calculado de la ecuacin. (1) frente a la
concentracin parcela. Luego, utilizando las curvas de calibracin para cada material de
ensayo y para Trolox, Trolox capacidad antioxidante equivalente (TEAC) se obtuvo
para cada material y stos se dan en
Tabla 1. El tiempo de respuesta de estos valores parece ser muy pequeo, en 1-6 min, lo
que indica que la reaccin de entre ABTS + y el inhibidor es casi completa dentro de 1
min. Entre los antioxidantes puros, el ms alto la actividad se ve para el cido carnsico
(Tabla 1) de acuerdo con
Valores TEAC. Esto est de acuerdo con la prueba de DPPH resultados. El cido
rosmarnico es intermedio y sesamol es el antioxidante ms dbil entre los tres
compuestos puros de acuerdo con esta prueba. Cabe recordar que para antioxidante
inverso se observ para cido rosmarnico y sesamol segn el ensayo de DPPH. Es
espera que se originan a partir de interacciones especficas de cido rosmarnico y
sesamol con los radicales DPPH y ABTS +. Estos desajustes del orden actividad
antioxidante entre los dos mtodos tambin se observan en la literatura, por lo general
sin ninguna explicacin satisfactoria (por ejemplo, Wuet al., 2007).
TEAC resultados muestran que el extracto de romero es un tanto ms potente
antioxidante que el aceite esencial semilla negra

(Tabla 1), un resultado de acuerdo con los resultados de pruebas DPPH que se han
explicado sobre la base de la fenlico mayor contenido de extracto de romero que el
petrleo semilla negra. Dorman,
Peltoketo, Hiltunen y Tikkanen (2003) reportaron ligeramente valores TEAC inferiores
(aproximadamente 10-14) para el extracto de romero que nuestros valores de
aproximadamente 15. La diferencia puede ser resultado de utilizando diferentes
disolventes para la extraccin de las dos obras, acetona en la obra de Dorman et al.
(2003) y metanol en nuestro trabajo. Ya hemos mencionado la importancia del tipo de
disolvente utilizado en la extraccin, como se demuestra por el reciente trabajo de Liu et
al. (2007) en el que la variacin fenlico Se determin el contenido en extractos de la
misma sustancia obtenido utilizando diferentes disolventes en la extraccin.
3.4. La actividad antioxidante en un sistema de cido linoleico
La prueba de tiocianato frrico determina la actividad antioxidante con la medicin de
la cantidad de perxidos formado en una emulsin de cido linoleico de antioxidante
durante de incubacin (Lee et al., 2004; Singh, Maurya, deLampasona,
Y Cataln, 2007), como se describe en seccin de los materiales y mtodos. Las
absorbancias de los sistemas con varios antioxidantes y sin ningn material de ensayo
como control de los sistemas a 500 nm se representaron grficamente como una funcin
del tiempo en la Fig. 2. El perodo de incubacin fue de 72 horas a 40 C. Se ve que
absorbancia aumenta con el tiempo, el mayor incremento estar en las primeras 24 h para
cada sistema. Como era de esperar, la absorbancias ms altos son vistos por el sistema
de control sin cualquier material de ensayo en todo momento. Con el fin de ser ms
cuantitativo, las proporciones de absorbancia de cada sistema de material de prueba a la
de control del sistema en 24, 48 y 72 h fueron perodos recogidos en la Tabla 2. Esta
relacin se utiliza como una medida de antioxidante actividad. Obviamente, cuanto
menor sea la relacin, mejor es la actividad antioxidante. Una orden interesante de
antioxidante actividad, muy diferente de la determinada por
Pruebas DPPH y ABTS + visto en la Tabla 1, se observ carnos por la prueba de FTC
visto en la Tabla 2. Las crecientes rdenes de actividad antioxidante se puede dar como
cido rosmarnico <carnsico cido <sesamol para los antioxidantes puros y blackseed
aceite esencial <extracto de romero para la planta extractos. El orden de los
antioxidantes puros puede explicarse sobre la base de su hidrofobicidad y por lo tanto su
solubilidad en emulsiones de cido linoleico, de acuerdo con la observacin de que los
antioxidantes polares son ms activos en el aceite a granel sistemas, mientras que los
antioxidantes no polares (hidrfobos) son ms activos en los lpidos en suspensin en
sistemas acuosos como reportado por Frankel y Meyer (2000). Cuando las estructuras
de los tres compuestos en la fig. 1 se comparan, se
Se ve que el compuesto ms hidrfobo es sesamol con un solo grupo -OH hidrfilo,
seguido por carnsico cido con dos grupos -OH y un grupo -COOH y luego viene
cido rosmarnico con cuatro grupos -OH y un - Grupo COOH. Cabe sealar que la

solubilidad o la hidrofobicidad no fue un factor en las pruebas anteriores de DPPH y

ABTS +. El extracto de romero tena un antioxidante ms alta la actividad que el aceite
esencial blackseed por un factor de alrededor de 2, de acuerdo con la prueba de FTC.
Este resultado muestra un paralelismo con los resultados de DPPH y las pruebas de
ABTS +. Sin embargo, el factor fue mucho mayor en las pruebas anteriores, alrededor
de 10 en el ensayo de DPPH y aproximadamente 6 en el ensayo ABTS +. La
disminucin del factor en la prueba de FTC puede atribuirse de nuevo presumiblemente
a la mayor hidrofilicidad de romero extraer, con un contenido fenlico superior, en
comparacin con blackseed aceite esencial.
4. Conclusin
Se encontr que, entre los dos extractos estudiados, extracto de romero tena mayor
actividad antioxidante que el aceite esencial de semilla negra de acuerdo con los tres
ensayos de actividad de antioxidantes Esto se atribuy a la mayor contenido fenlico a.
El fin de la actividad antioxidante de los tres antioxidantes puros; cido rosmarnico,
carnsico cido y sesamol, mostraron variaciones en las tres pruebas.
Estas rdenes eran, cido rosmarnico <sesamol <carnsico cido en el DPPH prueba,
sesamol <cido rosmarnico <carnsico cido en el ensayo ABTS + y cido rosmarnico
<carnsico cido <sesamol en la prueba FTC. Estas variaciones eran atribuidas a los
factores estructurales del individuo antioxidantes.
Con los resultados actuales que eran difcil llegar a ninguna conclusin sobre los
aditivos o sinrgicos contribuciones de antioxidantes individuales a la actividad
antioxidante general de extractos de plantas ya que no todos sus componentes
antioxidantes son conocidos. Aunque, se encontr extracto de romero que contena
aproximadamente 6% de cido carnsico y aproximadamente 8% rosmarnico cido,
tambin puede contener algunos otros componentes antioxidantes. Por otra parte, el
aceite esencial era semilla negra encontrada que contiene una cantidad considerable de
timoquinona como un componente antioxidante que tiene una hidroquinona estructura
con bajo contenido fenlico. Esto es confirmado por su actividad antioxidante ms bajo
que el extracto de romero.

Se observ concordancia entre los resultados obtenidos por el mtodo de DPPH, ABTS
y fenoles totales; para determinar la actividad antioxidante ya que en todos la mejor
actividad fue presentada por P. ligularis en su extracto metanlico, adems los otros
extractos de las otrasespecies mantuvieron cierta relacin
Agradecimientos

Nos gustara dar las gracias a los proyectos de investigacin cientfica unidad de la
Universidad de Akdeniz para el apoyo de este trabajo a travs del Proyecto
2005.01.0200.001.
Referencias:

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