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ESCOLA DE QUMICA
PRODUO DE BIOMASSA
Protena unicelular o termo aceito para definir material celular microbiano para
utilizao como alimento ou rao. Vrios microrganismos so considerados para este
tipo de aplicao, dentre eles, principalmente leveduras e microalgas.
Comparada com os mtodos tradicionais de produo de protenas para
alimentao humana e animal, a produo de protena unicelular para o mesmo fim
apresenta algumas vantagens:
- os microrganismos tm de forma geral, tempo de gerao extremamente curto
- alto contedo em protena
- podem ser utilizadas diversas fontes de carbono, inclusive resduos industriais
- os microrganismos podem ser facilmente modificados
- as instalaes para produo ocupam reas limitadas
- a produo independe de fatores climticos.
Hoje em dia h um grande interesse na produo de biomassa devido s condies
de m ou subnutrio a que est sujeita grande parte da populao de pases
subdesenvolvidos, alm de haver previses de falta de alimento no futuro que atenda ao
aumento populacional. No caso dos pases desenvolvidos h interesse para o preparo de
alimentos compostos nas tcnicas modernas para produo de ovos, frangos, etc.
Seleo do microrganismo:
Os microrganismos para uso como fonte de protena para alimentao humana ou
animal devem apresentar algumas caractersticas bsicas, tais como, no ser patognico,
apresentar bom valor nutritivo, aceitabilidade como alimento, no produzir compostos
txicos, apresentar baixos custos de produo (alta velocidade de crescimento, baixa
exigncia nutricional, facilidade de separao).
Microrganismos :
Saccharomyces cerevisiae
Kluyveromyces fragilis
Spirulina sp.
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1. Meios de cultivo :
-Leveduras:
a) Saccharomyces cerevisiae
Acar cristal
(NH4)2SO4
KH2PO4
MgSO4.7H2O
Extrato de levedura
..............20 g/l
................5,0 g/l
................3,5 g/l
................1,0 g/l
................1,0 g/l
pH 5,0-6,0
Autoclavar a 0,5 atmosfera por 15 minutos.
b) Kluyveromyces fragilis
Soro de leite desengordurado e desproteinizado
Extrato de levedura
Esterilizao : 0,5 atm/ 15 minutos.
Preparo do soro:
2 litros de leite tipo B
Adicionar H3PO4 : pH 4,5 a 80C
Colocar na geladeira para precipitar
Decantar e usar o soro no preparo do meio.
-Algas:
Spirulina sp.
KNO3
....................... 2,5 g/l
K2SO4
....................... 1,9 g
NaHCO3
....................... 15,15 g/l
K2HPO4
....................... 0,5 g/l
Na2CO3
....................... 8,9 g/l
NaCl
....................... 0,92 g/l
MgSO4.7H2O ....................... 0,25 g/l
CaCl2.2H2O ....................... 0,05 g/l
gua destilada q.s.p. 1000 ml.
.............. 1 l
.............. 5 g/l
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1) cido pcrico saturado (16 g de cido pcrico por litro). Aquecer para dissolver e
resfriar para cristalizar. O lquido sobrenadante o que ser utilizado.
2) carbonato de sdio (25 g de Na2CO3 por 100 ml)
Procedimento:
. Tomar 1 ml da amostra e diluir adequadamente em balo volumtrico com a soluo 1.
. Colocar 2 ml da amostra diluda em tubo de Folin-Wu e adicionar 1 ml do reagente 2.
. Agitar e colocar em banho-maria por 20 minutos.
. Resfriar e diluir at 25 ml com gua destilada. Misturar por inverso.
. Ler contra um branco, com 2 ml de cido pcrico e 1ml de Na2CO3, a 520 nm.
Padro:
10 mg de lactose em 10 ml de cido pcrico.
Tomar alquotas de 0.0, 0.2, 0.6, 1.0, 1.4 e 1.8 ml.
Diluir a 2 ml com cido pcrico, adicionar 1ml de Na2CO3, aquecer e prosseguir
segundo a tcnica acima.
4. Determinao da biomassa:
-contagem de clulas viveis e totais em cmara de Neubauer
-contagem de colnias por plaqueamento
- determinao de peso seco
- determinao da densidade ptica (absorbncia)