DEPARTAMENTO CIENCIAS DE LA VIDA Y AGRICULTURA

CARRERA DE INGENIERA AGROPECUARIA

SANTO DOMINGO

Asignatura:

Microbiologa

Estudiante:

Pallasco O. Nelly M.

Nivel:

Tercero

Docente:

Ing. Gustavo Nez J. M.Sc

Prctica:

No. 2

Fecha:

30 de octubre de 2014

Grupo:

Tema:

Informe de Esterilizacin de material de laboratorio

Perodo
Octubre 2014 Enero 2015

I.

INTRODUCCION:
La esterilizacin consiste en s de destruir los microorganismos y
esporas,

para

ello

se

requiere

desinfectar

esos

medios

vegetativos que pueden ocasionar enfermedades, sin la

correcta eliminacin de estos microorganismos estos pueden producir una serie de

alteraciones en el medio que los rodea.
II.

OBJETIVOS:
Objetivo general:

Conocer las tcnicas y principios de esterilizacin de materiales, instrumentos y

otros insumos de laboratorios y preparar un medio de cultivo.
Objetivos especficos:
Cumplir las recomendaciones de utilizacin de las tcnicas de esterilizacin
especficas para cada elemento.

III.

REVISION DE LITERATURA:

ESTERILIZACION
En el aire, agua y el suelo existe la presencia de patgenos que contaminan de
forma indirecta los objetos encontrados a su alrededor provechando as

su

desarrollo haciendo imposible estudiarlos debido a que al contaminarse ya no es un

cultivo puro.
Por ello se recurre a la esterilizacin para poder destruir estos microorganismos de
un material determinado, siendo factible su resultado existen tres formas o mtodos
para llevar acabo la esterilizacin correctamente segn el agente que se presente:
1.-Agentes fsicos:
Calor: Tanto en hmedo destruye a los microorganismos por desnaturalizacin de
protenas utilizando la autoclave que trabaja con el vapor a presin.
Seco: Este destruye microorganismos

por

la oxidacin de los componentes

celulares, que requiere la incineracin teniendo como agente fsico el aire caliente
(horno).
Radiaciones: Utiliza los rayos gama, rayos X y rayos ultravioleta para la
esterilizacin de materiales termolbiles como los materiales de plstico y no
ionizantes como la luz ultravioleta.
Mecnicos: Utiliza equipos de filtracin y sedimentacin permitiendo la remocin
de los microorganismos dentro del lquido o gas que los retiene en la base de algn
material.

2.-Agentes qumicos: Algunas sustancias tienen el poder de ser esterilizantes

debido a su capacidad de las reacciones qumicas que daan componentes
celulares de los microorganismos tales como membranas, protenas entre otros.
Gaseoso: Utiliza gases para su esterilizacin como por ejemplo: xido de etileno
No gaseoso: Aldehdos (Glutaraldehido), Acido peractico y perxido de hidrogeno.
(Murray, 1999)
Proceso de esterilizacin
Para estar seguros que un objeto fue esterilizado de manera que no existan
microorganismos se puede utilizar indicadores fsicos, qumicos o biolgicos que
deben estar ubicados en cada carga a esterilizar entre los cuales se destacan
indicadores:
Indicadores Fsicos:
Medidores de presin, termmetro, termgrafo indican la temperatura que alcanza
el objeto y permite registrar el tiempo.
Fotografa tomada de bancos fotogrficos en Internet

1) Productos para el control de esterilizacion. Recuperado el 30 de Octubre de 2014,

de http://www.forintrasa.com.ar/indicadores-quimicos-de-esterilizacion.php
Indicadores qumicos:
Son cintas adhesivas con una sustancia qumica que cambian de color cuando el
objeto esta esterilizado, aunque no son muy confiables debido a que solo cambia de
color cuando ha llegado a la temperatura indicada pero eta no permite calcular el
tiempo.

Fotografa tomada de bancos fotogrficos en Internet

2) Insumos para la esterilizacion. Recuperado el 30 de Octubre de 2014, de

http://www.tropak.com.ar/insumos/cintastestigo.html
Indicadores biolgicos:
Sirven para controlar la esterilizacin por vapor a presin ya sea en calor seco o
con xido de etileno, se deben colocar cerca del objeto a esterilizar donde el vapor
no llegue tan fcilmente luego se lo incuba por 24 horas promedio, en condiciones
adecuadas para luego observar, y

ver si existe evidencia de crecimiento

microbiano, en caso contrario de que no se presente signos de vida microbiana la

esterilizacin fue correcta.
Fotografa tomada de bancos fotogrficos en Internet

3) Indicadores biologicos para esterilizacion: http://www.biolene.com/indicadoresbiologicos.php

Almacenamiento del material esteril
Los materiales pueden estar esteriles por mucho tiempo segn se manipulen y su
exposicion en el ambiente.Estos pueden dejar de ser esteriles cuando:
Se rompen accidentalmente por la manipulacion,al estar en un ambiente humedo
ocasionando que el material del empaque se deteriore con la humedad, manipular
estos materiales sin proteccion personal.

Cuando guardamos estos objetos debemos tener en cuenta el acceso de personal

en las areas esterilizadas, matener limpio el lugar, regular la temperatura entre un
promedio 30 y 60%., usar anaqueles cerrados, al usar el autoclave dejar reposar los
materiales hasta que su temperatura este al ambiente. (Clavel & Aulacio, 1992)

IV.

MATERIALES Y EQUIPOS:
Equipos:
Estufa de incubacin
Estufa de esterilizacin
Cmara de flujo laminar
Autoclave
Cocineta elctrica
Materiales:
Pipetas volumetricas - automticas
Probetas
Vasos de precipitados
Erlenmeyer
Matraces
Kit de diseccin
Mechero de alcohol
Reactivos e insumos:
Alcohol antisptico
Metanol
Etanol
cido actico
Formol
Jabn liquido

V.

PROCEDIMIENTO:

1.- Se procedi a desinfectar las cajas petri que estaban reposando en la estufa con
los microorganismos ya muertos

Foto tomada por: Vera

Cinthya
2.-Se desech los microorganismos de la caja petri en una bolsa destinada para
esos desechos

Foto tomada por: Vera Cinthya

3.- Se lav las cajas petri para proceder a encapucharlas con papel destraza

Foto tomada por: Vera

Cinthya

4.- Se coloc las cajas encapuchadas a esterilizar en la estufa a 20 min con una
temperatura de 120 C.

Foto tomada por: Palomino

David

VI.

RESULTADOS:

Para que los objetos a usar en la preparacin de medios de cultivos deban estar
bien esterilizados usar el papel adecuado de lo contrario al exponerse
temperaturas la caja petri en estos casos puede romperse y

a altas

no quedara

esterilizado.
Al encapuchar las cajas petri estas deben permanecer en su paquete luego de ser
esterilizadas hasta cuando vayamos a verter el medio de cultivo.
VII.

CONCLUSIONES:

Al terminar esta prctica se aprendi a empacar el material de laboratorio para su

correcta esterilizacin, esto sirve para protegerlos de la suciedad, polvo y bacterias
obteniendo un ptimo rendimiento.
VIII.

RECOMENDACIONES:

El material debe ser esterilizado para poder ser usado antes de cultivar
microorganismos porque de lo contrario podran crecer otros organismos que no son
requeridos.
Seguir los pasos establecidos por el tutor para esterilizar cualquier tipo de objetos.

IX.

BIBLIOGRAFIA:

Bibliografa
Biolene. (s.f.). Recuperado el 30 de Octubre de 2014, de Indicadores biologicos para
esterilizacion: http://www.biolene.com/indicadores-biologicos.php
Clavel, L., & Aulacio, P. (1992). Manual de metodos generales 2da Edicion.
Venezuela: Universidad Central de Venezuela.
Murray, P. (1999). Manual of Clinical Microbiology. 7th edition. Washington, DC.:
American Society for .
S.A, F. (s.f.). Productos para el control de esterilizacion. Recuperado el 30 de Octubre
de 2014, de http://www.forintrasa.com.ar/indicadores-quimicos-deesterilizacion.php
Tro-pak. (s.f.). Insumos para la esterilizacion. Recuperado el 30 de Octubre de 2014,
de http://www.tropak.com.ar/insumos/cintastestigo.html
OMS, Manual de bioseguridad en el laboratorio, ISBN 92 4 3546 50 3, 2005

X.
1

CUESTIONARIO
Describa que materiales requieren esterilizarse con calor hmedo y cuales con
calor seco:

Se esteriliza con calor hmedo o con autoclave a medios de cultivos, agua

destilada, tierra, as tambin sirve para esterilizar agujas, pinzas y jeringas.

El calor en seco se lo utiliza para esterilizar objetos que soporten

temperaturas de 160C o ms durante cuatro horas

A que temperatura se somete:

En hmedo (Autoclave):
3 minutos a 134 C
10 minutos a 126 C
15 minutos a 121 C
25 minutos a 115 C.
En seco:

50-60 C por 30 minutos