REPBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA

UNIVERSIDAD DEL ZULIA

FACULTAD EXPERIMENTAL DE CIENCIAS
DIVISIN DE ESTUDIOS BSICOS SECTORIALES
DEPARTAMENTO DE QUMICA

ESPECTROSCOPIA DE MASA

Presentado por:
Br. Oscar Daniel Noya Bracho
C.I. N 20.726.465

Maracaibo, octubre de 2012

Introduccin
Es una tcnica instrumental universal y

especifica, altamente sensible y que permite la

identificacin inequvoca de una sustancia. El principio de la espectrometra de masas es la

produccin de iones a

partir de compuestos neutros y la observacin de la subsiguiente

descomposicin de esos iones. Estos iones descompuestos (fragmentos que tambin poseen
carga) se mueven rpidamente y son clasificados de acuerdo a su relacin m/z (masa/n de
cargas del in). El espectrmetro de masas no solo clasifica los fragmentos, sino que adems
mide la cantidad de ellos que se forman.

Cuando a una molcula se le suministra una

determinada energa la molcula se descompone siguiendo un patrn concreto en el que se

obtienen siempre los mismos fragmentos y en la misma relacin de intensidad. Este patrn
concreto se representa grficamente en el espectro de masas, al que denomina por esta razn
huella digital de la sustancia. De esta forma, el espectro de masas permite la identificacin
inequvoca de las molculas.
La espectrometra de masas se fundamenta en la separacin de partculas moleculares o atmicas
por su diferente masa. El proceso de la espectrometra de masas comprende bsicamente cuatro
etapas:
- Ionizacin de la muestra
- Aceleracin de los iones por un campo elctrico
- Dispersin de los iones segn su masa/carga
- Deteccin de los iones y produccin de la correspondiente seal elctrica

Esquema
-Ionizacin de la muestra
- Aceleracin de los iones por un campo elctrico.
- Dispersin de los iones segn su masa/carga.
- Deteccin de los iones y produccin de la correspondiente seal elctrica
-Instrumentacin
-Sistema de entrada de muestras
-Acelerador
-Detector
-Analizadores
-Cmara de ionizacin
-Obtencin y anlisis de un espectro de masa
-Aplicaciones

Desarrollo
-Ionizacin de la muestra
La ionizacin de la muestra se consigue por bombardeo mediante electrones (e-) segn el
proceso: M + e- M+ + 2e- Aceleracin de los iones por un campo elctrico
Convertimos una fraccin significativa de los tomos formados en la etapa 1 en un flujo de
iones, generalmente positivos y de carga nica. La velocidad que adquieren viene regida por la
formula: v = [2eV/m]
Donde V es el potencial aplicado, e la carga del electrn y m la masa. Cuando las partculas
aceleradas se someten a la accin de un campo magntico (H) describen una trayectoria circular
de radio r alrededor de este campo, desarrollando una fuerza centrfuga mv2/r, la cual es igual a
la fuerza de atraccin del campo Hev.De esto deducimos que el radio es igual a:
r = (2Vm/H2e)
- Dispersin de los iones segn su masa/carga
Basndonos en la ecuacin anterior podemos calcular la relacin m/e que es:m/e = H2.r2/2V
Dado que la mayora de los iones formados en la segunda etapa tienen una sola carga y que el
resto de parmetros se mantienen constantes, la relacin m/e suele ser la masa del in. La utilidad
analtica de un espectrmetro de masas depende de la resolucin del instrumento, o capacidad del
mismo para separar dos partculas de diferente masa.
- Deteccin de los iones y produccin de la correspondiente seal elctrica
El ordenador al que est conectado el aparato recoge las distintas seales y las reproduce en
forma de espectrograma, formato de fcil interpretacin.

-Instrumentacin
Bsicamente un espectrmetro de masas costa esencialmente de las siguientes partes:
*Sistema de entrada de muestras.
*Cmara de ionizacin.
*Acelerador.
*Analizadores.
*Detector.
-Sistema de entrada de muestras
En el sistema de entrada de muestras, un micro mol o menos de muestra se convierte al estado
gaseoso por calentamiento a unos 400C y se introduce lentamente en la cmara de ionizacin.
La finalidad del sistema de entrada es permitir la introduccin de una muestra representativa en la
fuente de iones con la mnima perdida de vaco. En los espectrmetros de masas ms modernos
encontramos diferentes tipos de sistemas de entrada:
-Sistemas indirectos de entrada: es el sistema ms clsico y el ms simple, en el cual la muestra
se volatiliza externamente y se introduce en la regin de ionizacin que esta a baja presin. El
sistema de entrada es normalmente de vidrio para evitar posibles prdidas por adsorcin.
-Entrada por sonda indirecta: los lquidos y los slidos no voltiles se pueden introducir en la
regin de ionizacin mediante un soporte para muestra o sonda, el cual se inserta a travs de un
cierre de vaco. El sistema de cierre se utiliza para controlar la cantidad de aire que entra despus
de la insercin de la sonda en la regin de ionizacin. Las sondas tambin se usan cuando la
cantidad de muestra es limitada ya que se pierde mucha menos cantidad.
-Sistemas de entrada cromatrogrficos y de electroforesis capilar. Es un tipo de sistema de
entrada especial, est indicado su uso cuando al espectrmetro de masa va acoplado un sistema
de cromatografa de gases o de lquidos de alta eficacia o a columnas de electroforesis capilar que
permiten la separacin y determinacin de los componentes de mezclas complejas.

-Acelerador
En el sistema acelerador las partculas ionizadas producidas por el impacto de los electrones son
obligados a atravesar una primera ranura aceleradora por una pequea diferencia de potencial.
Entre esta primera y una segunda ranura existe una diferencia de potencial muy elevada que
imprime a las partculas su velocidad final, una tercera ranura acta como colimador del haz de
partculas.
-Detector
Los iones procedentes del sistema acelerador llegan al detector el cual generalmente est
constituido por un ctodo emisor que al recibir el impacto producido por las partculas cargadas
emite electrones. Estos electrones son acelerados hacia un dnodo el cual emite varios electrones
ms al recibir el impacto de cada electrn. Este proceso se repite varias veces hasta obtenerse una
cascada de electrones que llega al colector logrndose una corriente fuertemente amplificada, por
un procedimiento muy similar al que se utiliza en los tubos fotomultiplicadores. La corriente
obtenida puede amplificarse de nuevo por procedimientos electrnicos y se lleva a un sistema
registrador.
-Analizadores
Para la separacin de iones con diferente relacin m/e se dispone de varios dispositivos. Lo ideal
es que el analizador fuera capaz de distinguir entre diferencias muy pequeas de masa. Adems,
los analizadores deberan de permitir el paso del nmero suficiente para producir corrientes
inicas fciles de medir. Al igual que sucede con los monocromadores pticos, a los que los
analizadores son anlogos, estas dos propiedades no son compatibles y se debe de llegar a un
equilibrio que est regido por la resolucin del espectrmetro de masa.
Existen diferentes tipos de analizadores de masas
-Analizadores de sector magntico: los analizadores de sector magntico utilizan un imn
permanente o un electroimn para hacer que el haz procedente de la fuente de iones se desplace
con una trayectoria circular de 180, 90 o 60. Estos analizadores tambin son llamados de
enfoque simple.
Esquema de un espectrmetro de sector magntico.

-Espectrmetros de doble enfoque: este trmino se usa en los espectrmetros en los cuales las
aberraciones direccionales y las aberraciones de energa de una poblacin de iones se minimizan
simultneamente. El doble enfoque se consigue utilizando combinaciones de campos magnticos
y electrostticos cuidadosamente seleccionados.
-Espectrmetro de masa cuadrupolar: son normalmente menos caros y ms robustos que los de
sector magntico, adems tambin ofrecen la ventaja de emplear tiempos de barrido pequeos
(<100ms), lo cual es particularmente til para realizar barridos de picos cromatrogrficos en
tiempo real.
Diagrama de un espectrmetro de masa cuadrupolar.

-Analizadores de masas de tiempo de vuelo (TOF): en estos aparatos se producen los iones
positivos peridicamente por bombardeo de la muestra con impulsos de electrones, de iones
secundarios o de fotones generados por lser. Los iones producidos de esta forma son acelerados
en un tubo analizador libre de campo mediante un campo elctrico pulsante de 103 a 104 V. La
separacin de los iones en funcin de la masa se produce durante su recorrido hacia el detector,
situado al final del tubo. Estos aparatos presentan ventajas como la robustez, simplicidad, fcil
acceso a las fuentes de iones y el virtualmente ilimitado intervalo de masas, pero tienen no
obstante una sensibilidad y una resolucin limitadas.
- Analizadores de trampa de iones: es un dispositivo en el que los cationes o aniones gaseosos
pueden formarse y quedar confinados durante largos periodos de tiempo por la accin de campos
elctricos y/o magnticos. Los espectrmetros de trampa de iones son ms robustos, compactos y
ms econmicos que los anteriores.
-Transformada de Fourier (FT): Como sucede con los instrumentos de infrarrojo y de resonancia
magntica nuclear, los espectrmetros de masas de transformada de Fourier proporcionan
mejores relaciones seal/ruido, velocidades mayores y sensibilidad y resolucin ms elevadas, La
parte fundamental de un instrumento de transformada de Fourier es una trampa de iones en la
cual los iones circulan en rbitas bien definidas durante largos periodos. Tales cavidades se
construyen aprovechando el fenmeno de resonancia inica ciclo trnica. La resolucin es
espectrometra de masas de transformada de Fourier est limitada por la precisin en la medida
de la frecuencia ms que por las rendijas o las medidas de campo.

Se muestra un Diagrama de un analizador de masa de transformada de Fourier donde podemos

ver sus diferentes elementos, resear la situacin de la bomba de iones (turbo pump) cuya
funcin se seala arriba y que es parte fundamental de este instrumento.
-Cmara de ionizacin
-Impacto de electrones (EI)
Se somete a la muestra a una temperatura suficientemente elevada (normalmente mediante un
filamento caliente de wolframio o de renio) como para producir un vapor molecular, el cual
posteriormente se ioniza bombardeando las molculas originadas con un haz de electrones de
elevada energa. Pese a sus desventajas, esta tcnica es la que se ha usado para determinar la
mayora de los espectros que componen las colecciones de espectros.
Diagrama de fuente de impacto de electrones.

-Fuentes de ionizacin qumica (CI).

En la ionizacin qumica los tomos gaseosos de la muestra (tanto de un sistema de entrada
indirecto como de una sonda caliente) se ionizan al colisionar con los iones producidos al
bombardear con electrones un exceso de gas reactivo (normalmente metano). Normalmente se
utilizan iones negativos, aunque la ionizacin qumica de iones negativos se utiliza
ocasionalmente en aquellos analitos que contienen tomos muy electronegativos.

-Fuentes de ionizacin por campo (FI).

En las fuentes de ionizacin por campo, los iones se forman bajo la influencia de un campo
elctrico elevado (108 V/cm). Estos campos se producen al aplicar elevados potenciales (10 a 20
kV) a emisores especialmente construidos. Que estn formados por numerosas puntas finas cuyos
dimetros son menores a 1 m. A menudo estos emisores adquieren la forma de un fino hilo de
wolframio en el cual se han formado dendritas o filamentos microscpicos de carbono por
pirolisis de benzonitrilo en un campo elctrico elevado. El resultado de este tratamiento es la
aparicin de centenares de micro agujas de carbn que emergen desde la superficie del hilo. En
este caso el analito adquiere poca energa vibracional y rotacional por lo que tiene poca
fragmentacin.
-Fuentes De Desorcin
En las dos ltimas dcadas se han desarrollado numerosos mtodos de ionizacin por desercin
para tratar muestras no voltiles o termodinmicamente inestables. Estas tcnicas prescinden de
la volatilizacin y de la posterior ionizacin y en su lugar se suministra energa a la muestra
slida o lquida de diversas maneras, de modo que se provoca la formacin directa de iones
gaseosos. Como consecuencia se obtienen espectros muy simplificados.
-Fuentes de desorcin por campo (FD).
Esta fuente de ionizacin usa un emisor con mltiples puntas, similar al usado en las fuentes de
ionizacin por campo. En este caso el electrodo se coloca sobre una sonda que puede retirarse y
recubrirse con una disolucin de la muestra, despus de reinsertarla la ionizacin se produce tras
proporcionar un potencial elevado a este electrodo. En ocasiones es necesario calentarlo
hacindole pasar una corriente pero puede ocurrir una degradacin trmica antes de completarse
la degradacin.
-Desorcin/ionizacin por lser asistida por una matriz (MALDI).
Esta tcnica de reciente descubrimiento nos permite calcular pesos moleculares exactos de
extractos de biopolmeros polares en un intervalo de masas moleculares de varios cientos de
miles de Daltons. En esta tcnica se mezcla una disolucin acuoso/alcohlica de la muestra con
un exceso de una sustancia matriz que absorbe la radiacin. La disolucin resultante se evapora
en la superficie de una sonda metlica que se utiliza para la introduccin de la muestra. La

mezcla slida se expone a la accin de un haz de lser pulsante, provocando la sublimacin del
analito a iones que son introducidos en un espectrmetro de tiempo de vuelo para el anlisis de
masas.
-Ionizacin por electronebulizacin (ESI/MS).
Esta tcnica se ha convertido en una de las ms importantes para el anlisis de biomolculas de
pesos superiores a 100.000 Daltons. Se realiza en condiciones atmosfricas de presin y
temperatura. La disolucin de la muestra se bombardea a travs de una aguja capilar de acero
inoxidable a un flujo de algunos micros litros por minuto. Las agujas se mantienen a un potencial
de varios kV con respecto al electrodo cilndrico que rodea a dicha aguja. La niebla de finas
gotitas cargadas resultantes pasa a travs de un capilar de de solvatacin donde se produce la
evaporacin del disolvente y de las molculas del analito y donde estas adquieren la carga.
Debido a que las gotitas se vuelven ms pequeas por la evaporacin del disolvente, su densidad
aumenta producindose la desorcin de los iones en la atmsfera gaseosa
-Fuentes de bombardeo con tomos rpidos (FAB).
Con este tipo de fuentes, las muestras en un estado condensado, a menudo en una matriz de una
disolucin de glicerol, se ionizan por bombardeo con tomos de xenn o argn de elevada
energa. Tanto los iones positivos como negativos del analito son expulsados de la superficie de la
muestra por un proceso de desorcin.El haz de tomos rpido se obtiene pasar iones acelerados
de argn o xenn de una fuente o can de iones a travs de una cmara que contiene tomos de
argn o xenn a una presin de unos 10-5 torr. Setos experimentan una reaccin de intercambio
de electrones en resonancia con los tomos obtenindose un haz de tomos de alta energa. (
-Desorcin por plasma (PD).
El deterioro del 252Cf produce dos fragmentos de fisin que viajan en direcciones opuestas. Un
fragmento golpea la muestra anulando entre 1-10 iones analticos. El otro fragmento golpea un
detector y desencadena la puesta en marcha de la adquisicin de datos. Este mtodo es
especialmente interesante para molculas largas de origen biolgico.
-Espectrometra de masas de iones secundarios (SIMS).

Un haz de luz ionizado primitivo como 3He+,16O+, o 40Ar+ es acelerado y enfocado hacia la
superficie de la muestra y chisporrotea entrando dentro de la fase gas. Aproximadamente el 1%
del material chisporroteado entra en forma ionizada, el cual ya puede ser analizado. SIMS tiene la
ventaja que puede ser continuamente chisporroteado desde la superficie y determinar las
concentraciones analticas en funcin de la distancia desde la superficie original (perfil de
profundidad)
-Ionizacin por termonebulizacin (TS).
La ionizacin por termonebulizacin se usa para elementos reflectantes. Una muestra es
depositada encima de una cinta metlica, que puede ser de Pt o Re y una corriente elctrica
calienta el metal a altas temperaturas. La cinta es revestida de grafito que reduce la
desfragmentacin
-Obtencin y anlisis de un espectro de masas
Como consecuencia del bombardeo electrnico en la cmara de ionizacin, las molculas se
rompen en una serie de fragmentos, siempre que una misma molcula se rompa en las mismas
condiciones nos dar el mismo tipo y nmero de fragmentos y constituyen la fragmentacin
patrn. Gracias a esto se pueden determinar que es la muestra por comparacin y por otra parte,
la intensidad relativa de los distintos picos, permite deducir la proporcin en que cada
componente se encuentra en la muestra. El pico del espectrograma que aparece con valor ms
elevado de m/e corresponde a la molcula ionizada sin fragmentar y recibe el nombre de masa
patrn. Esta masa patrn nos permite determinar con rapidez y precisin la masa molecular,
siempre que se opere con una tensin de ionizacin no excesivamente elevada, la cual producira
la fragmentacin total de la molcula. El pico mayor del espectrograma de masa se llama pico
base. Normalmente la altura de este pico se toma como valor cien. Las intensidades de los dems
picos se expresan en porcentajes de la intensidad del pico base.
-Aplicaciones
Algunas aplicaciones son:
- Elucidacin de la estructura de molculas orgnicas y biolgicas.
-Determinacin del peso molecular de pptidos, protenas y oligonucleicos.

- Identificacin de los compuestos de cromatogramas en capa fina y papel.

-Determinacin de secuencias de aminocidos en muestras de poli pptidos y protenas.
-Deteccin e identificacin de especies separadas por cromatografa y electroforesis capilar.
- Identificacin de drogas de abuso y sus meta bolitos en sangre, orina y saliva.
- Control de gases en enfermos respiratorios durante los procesos quirrgicos.
- Pruebas para confirmar la presencia de drogas en sangre de caballos de carreras y en atletas
olmpicos.
-Datacin de ejemplares en arqueologa.
- Anlisis de partculas en aerosoles.
- Determinacin de residuos de pesticidas en alimentos.
-Control de compuestos orgnicos voltiles en el agua de suministro
Aplicaciones cualitativas
- Determinacin del peso molecular de todas las sustancias que pueden volatilizarse por la
posicin del pico correspondiente a la masa patrn.
-Determinacin de la formula molecular. Si el instrumento es de gran resolucin bastar la
determinacin precisa de su masa molecular para poder atribuirle una frmula emprica. Otras
veces puede determinarse por la relacin entre las alturas del pico correspondiente a la masa
patrn y la de los picos de los istopos. Existe una tercera forma que sera con la regla del
nitrgeno, segn la cual todas las sustancias orgnicas con peso molecular par deben de contener
un nmero par o ningn tomo de N y los de nmero impar deben de contener un nmero impar.
Por el contrario los fragmentos moleculares por rotura de enlace, tienen una masa impar si
contienen cero o nmero par de tomos de N y masa par si el nmero de tomos de N es impar.
-Identificacin de compuestos por su fragmentacin patrn: la fragmentacin de la mayor parte
de las molculas produce un gran nmero de picos que permiten la identificacin de numerosos
compuestos y el reconocimiento de ciertos grupos funcionales de ellos. Se han descrito una serie

de reglas generales que rigen los procesos de fragmentacin, los cuales son de gran utilidad para
la determinacin de los espectros.
- Identificacin de productos de reaccin o de productos metablitos: se usa en cintica qumica y
en farmacologa pudindose llegar a identificar impurezas y metabolitos a concentraciones de
pocas partes por milln.
- Caracterizacin y anlisis de polmeros: el polmero se piroliza en condiciones controladas y los
productos voltiles se hacen pasar a un espectrmetro para su anlisis.
-Anlisis de sangre: gracias a la rapidez del mtodo, se puede emplear incluso como control
durante un proceso quirrgico. As se puede determinar a gran velocidad las concentraciones
hemticas de monxido y dixido de carbono, oxgeno, nitrgeno, gases anestsicos (como el
NO).
- Estudiar la abundancia de istopos: Esta fue la finalidad con la que fue creada la tcnica y en la
actualidad se usa para anlisis por dilucin de istopos, estudios con trazadores isotrpicos,
estudiar la edad de las muestra por su proporcin de istopos con la ventaja frente a los
radiactivos que se pueden medir los istopos no radiactivos.
-Aplicaciones cuantitativas
Para la determinacin cuantitativa de los componentes de una mezcla es conveniente que cada
uno de ellos presente por lo menos un pico que difiera claramente de los dems. La calibracin se
realiza por comparacin de los picos con patrones adecuados. Las alturas de los picos son
directamente proporcionales a las presiones parciales de los componentes volatilizados en la
muestra.
Las aplicaciones cuantitativas de la espectrometra de masas para anlisis cuantitativo son de dos
tipos:
-Determinacin cuantitativa de especies moleculares o tipos de especies moleculares en muestras
orgnicas, biolgicas y ocasionalmente inorgnicas: normalmente tales anlisis se llevan a cabo
haciendo pasar la muestra a travs de una columna cromatrogrfica o de electroforesis capilar y
posteriormente por el espectrmetro.

- Determinacin de la concentracin de elementos en muestras inorgnicas y, en menor medida,

de muestras orgnicas y biolgicas: las concentraciones de analito en este caso se obtienen
directamente a partir de las alturas de los picos de los espectros de masas. Se crean curvas de
calibrado que nos permiten el anlisis cuantitativo gracias a la existencia de picos nicos para
cada componente y cada valor de m/z.

Conclusin
La espectrometra

de

masas es

una

tcnica

experimental

que

permite

la

medicin

de iones derivados de molculas. El espectrmetro de masas es un instrumento que permite

analizar con gran precisin la composicin de diferentes elementos qumicos e istopos atmicos,
separando los ncleos atmicos en funcin de su relacin masa-carga (m/z). Puede utilizarse para
identificar los diferentes elementos qumicos que forman un compuesto, o para determinar el
contenido isotpico de diferentes elementos en un mismo compuesto. Entre las ventajas y
desventajas se pueden nombrar:
Ventajas de la espectrometra de masas.
-Capacidad de identificacin (desde tomos a molculas muy complejas)
- Es cualitativa y cuantitativa huella dactilar de nuestra sustancia a medir [ sustancia ]
(concentracin de la sustancia)
-Permite analizar mezclas complejas
-Posee una gran sensibilidad: [concentracin] de ppq (partes por cuatrilln).
- Es universal y especfica (muestras slidas, lquidas o gaseosas).
- Permite determinar el peso molecular de la sustancia analizada
-Suministra informacin estructural de la molcula analizada
- Suministra informacin isotpica

-Es muy rpida (espectro en dcimas de segundo)

- Tcnica en fin muy evolucionada y automatizada.
Desventajas de la espectrometra de masa
- Necesidad de disponer de la muestra en fase vapor sin descomposicin loque implica que la
sustancia a analizar sea:
-Es una tcnica destructiva.

- Es necesario un alto vaco (10-6torr).

- Dificultad operativa
- Dificultad de analizar sustancias de alto peso molecular.

Bibliografa

FUNDAMENTOS DE QUMICA ANALTICA DOUGLAS A. SKOOG, DONALD M.

WEST, F. JAMES HOLLER, STANLEY R. CROUCH
M. MACHTINGER. R. ROSET. QUMICA ANALTICA GENERAL DE GASTN
CHARLOT TOMO IV. EJERCICIOS. TORAY-MASSON. 1977.
R. W. RAMETTE EQUILIBRIO Y ANLISIS QUMICO FONDO EDUCATIVO
INTERAMERICANA, 1983.