DETETORES USADOS EM CLAE

Uma instrumentao melhor requerida para a CLAE, em relao

sensibilidade dos detectores, para monitorizao do efluente que sai da coluna.
Infelizmente as propriedades fsicas ou fsico-qumicas da amostra e fase mvel so,
muitas vezes, similares. Algumas solues para o problema de deteco tm sido
procuradas no desenvolvimento da CLAE:
- Medidas diferenciadas de propriedades gerais de ambas: amostras e fase mvel
- Medidas de uma propriedade da amostra que no apresentada pela fase mvel.
- Deteco aps a eliminao da fase mvel.
Uma variedade de detectores tem sido desenvolvida para CLAE, baseando-se em
uma destas solues. Um detector ideal para a CLAE seria aquele com as seguintes
caractersticas:
a) Alta sensibilidade e baixo limite de deteco
b) Resposta rpida a todos os solutos
c) Insensibilidade a mudanas na temperatura e na vazo da fase mvel.
d) Resposta independente da fase mvel
e) Pequena contribuio ao alargamento do pico pelo volume extra da cela do detector.
f) Resposta que aumente linearmente com a quantidade do soluto
g) No destruio do soluto.
h) Segurana e convenincia de uso.
i) Informao qualitativa do pico desejado.
Infelizmente, no existe um detector que apresente todas estas propriedades, a no ser
que ele seja desenvolvido.
Item
Princpio de
operao
Tipo
Quantidade
mn
detectvel
(g/mL)
Sensibilidade

temperatura
Sensvel
vazo da fase
mvel
til com
gradientes
Aplicaes

Propriedades dos detectores

Detector
Detector por Detector por
espectrofotomtrico ndice de
fluorescncia
(UV-VIS)
refrao
Absorbncia de luz
Mudanas no Emisso
na faixa do UV-VIS ndice de
fluorescente
refrao da
aps excitao
fase mvel
com luz
Seletivo
Universal
Altamente
seletivo
Fixo: 10-10
10-7
De 10-9 at
Var: 10-9
10-12

Detector
eletroqumico
Oxidao ou
reduo em
potencial fixo
Seletivo
10-12

Baixa

Alta

Baixa

mdia

No

No

No

Sim

Sim

No

Sim

No

Compostos que
absorvem na regio
de trabalho

Compostos
em geral

Compostos ou
derivados que
fluorescem

Espcies que
se oxidam ou
se reduzam

DETECTORES POR ABSOBNCIA NO ULTRAVIOLETA E NO VISVEL

Nos detectores espectrofotomtricos o seu funcionamento baseia-se na
absorbncia de luz por parte da amostra ao passar atravs dela qualquer radiao
eletromagntica; normalmente isto ocorre no ultravioleta at o infravermelho, em um
dado comprimento de onda. Existem dois tipos de detectores de luz ultravioleta: o de
comprimento de onda varivel (espectrofotmetros), que no s de aplicao mais
variada e sensvel, mas tambm mais caro, e o chamado fotomtrico que funciona com
um ou dois comprimentos de onda fixos. Este ltimo sensvel, econmico e mais que
suficiente para se conseguir bons resultados com todos os compostos que absorvem luz
no comprimento de onda em que ele funciona. Este tipo de detector normalmente
insensvel a variaes de vazo e temperatura. A maioria dos detectores de comprimento
de onda fixo, oferecidos no mercado, operam em um comprimento de onda de 254 nm e
um de 280 nm, resultado da absorbncia de luz em 254 nm e da emisso de luz em 280
nm por uma substncia fosforescente. Em timas condies, pode-se atingir
sensibilidades de at 0,001 unidades de absorbncia e, se o composto absorve
intensamente na faixa de UV, possvel detectar quantidades de amostras da ordem de
nanogramas (10-9 g). Quando se aplica gradiente na fase mvel e ela apresenta variao
significativa de absorbncia para o UV, necessrio utilizar a cela de referncia para
compensar esta variao. Se a fase mvel no absorve ou se a absorbncia constante,
pode-se deixar a cela de referncia vazia ou cheia com um dos componentes da fase
mvel. A Figura 1 mostra o desenho de uma clula para CLAE.

Figura 1- Clula do detector de ultravioleta para CLAE.

Espectrofotmetros de comprimentos de onda varivel UV-VIS, cobrindo a faixa
de 190-800 nm, atravs de monocromador que seleciona o comprimento de onda
desejado do feixe de luz emitido pelas lmpadas de deutrio (UV) ou tungstnio (VIS),
oferecem vrias vantagens sobre os instrumentos de comprimento de onda fixo:
a) Apresenta alta absorbncia para vrios componentes devido escolha de
comprimento de onda e, consequentemente, tem maior sensibilidade.
b) Permite maior seletividade, desde que um determinado comprimento de onda pode
ser escolhido, onde o soluto de interesse absorve bastante e outros no.
c) Promove eficincia em eluio por gradiente atravs da habilidade de selecionar um
comprimento de onda onde os componentes da fase mvel no apresentam uma
variao de absorbncia para diferentes concentraes.

d) Permitir obter o espectro de absorbncia de cada componente em separado aps parar

a vazo da fase mvel.
Anlises em diferentes comprimentos de onda tambm so possveis com os
detectores espectrofotomtricos atravs de um conjunto de fotodiodos. Esses
fotodiodos, seletivos a determinados comprimentos de onda, em grande nmero, cerca
de 250, permitem levantar o espectro da substncia durante a eluio. Este detector
denominado detector de rede de diodos (diode array detector), cujo esquema se encontra
na figura 2. Os detectores de rede de diodos eram, at a alguns anos, pouco sensveis,
mas na atualidade, com a melhora dos computadores com programas dedicados para
este fim, com o aumento da sensibilidade dos diodos e com correes da aberrao da
rede de difrao, eles aumentaram sua sensibilidade e aplicabilidade.
Na figura 3 pode-se observar um espectro de absoro, obtido em trs dimenses por
microcomputador acoplado ao detector de rede de diodos, da eluio de uma mistura de
trs esteris, obtido em intervalos de 5 segundos.

Figura 2- Esquema de um detector

de rede de diodos.

Figura 3 - Espectro de absoro da eluio de uma mistura de trs esterides, varreduras

em intervalos de 5 segundos.

DETECTORES POR NDICE DE REFRAO

o segundo detector mais usado na CLAE. Este detector acompanha
continuamente a diferena de ndice de refrao entre a fase mvel pura e o efluente que
sai da coluna contendo os componentes da amostra. Para solutos que no absorvem no
UV ou visvel e, consequentemente, no so detectados por detectores fotomtricos, a
melhor escolha o detector por ndice de refrao. A resposta deste detector universal
e sua sensibilidade moderada, geralmente da ordem de micrograma (10-6 g). Este nvel
de concentrao corresponde a uma diferena no ndice de refrao entre a amostra e a
fase mvel de aproximadamente 10-7 unidades de ndice de refrao. Para observar esta
diferena necessrio um controle de temperatura de aproximadamente 0,001 C, o que
normalmente conseguido por circulao de gua, de uma boa fonte termostatizada,
atravs do refratmetro ou um bom controle da temperatura ambiente.
Alm deste problema com a temperatura, existem ainda outros: a sensibilidade
s variaes de vazo e mudanas na composio da fase mvel, que impedem o uso de
gradiente por ser difcil encontrar um par de solventes com ndices de refrao
idnticos. Qualquer mudana na composio da mistura mudar o ndice de refrao da
fase mvel, ento, o lado da referncia ter que mudar, o que quase impossvel. A
figura 4 apresenta o esquema de um tipo de detector por ndice de refrao.

Figura 4- Esquema de um detector refratomtrico por deflexo

DETECTORES POR FLUORESCNCIA
A espectroscopia de fluorescncia um mtodo de deteco dos mais sensveis
da atualidade, especfico para compostos que fluorescem. Em boas condies possvel
detectar quantidades da ordem de picogramas (10-12 g), o que comparvel aos
detectores por captura de eltrons em CG. Uma alta intensidade de fluorescncia
esperada de compostos que sejam conjugados simetricamente ou que no podem
produzir estruturas fortemente inicas.
A fase mvel empregada nos detectores de fluorescncia deve ser
cuidadosamente selecionada, pois a intensidade de emisso depende do meio em que se
encontra a amostra. Isto dificulta algumas de suas aplicaes, tais como anlise
quantitativa e eluio por gradiente, nas quais se deve selecionar os componentes da
fase mvel para no atrapalhar a fluorescncia.
Os detectores para fluorescncia tambm podem proporcionar espectros de
emisso das amostras retidas momentaneamente na sua cela. Desde que uma fonte de
UV necessria em ambos os detectores, por absorbncia no UV e por fluorescncia,
eles podem ser combinados em um s detector.

Figura 5- Esquema de um detector por fluorescncia

DETECTORES ELETROQUMICOS
Mtodos eletroqumicos de deteco oferecem a mais promissora soluo para o
problema de desenvolvimento de um detector para CLAE suficientemente sensvel e
no baseado em absorbncia de luz. Eles oferecem vantagens de alta seletividade, alta
sensibilidade e serem muito bons para as anlises de traos. importante destacar que,
neste tipo de deteco, a amostra tem que ser constituda de ons ou compostos que
sofram ou oxidao ou reduo (detectores polarogrficos). Este detector seletivo,
porque detecta somente as espcies que se oxidam (ou reduzem) em um potencial
inferior ou igua1 ao fixado. Os detectores eletroqumicos so bons para as modalidades
de cromatografia que usam fases mveis aquosas, tais como a cromatografia por troca
inica, por excluso ou com fase reversa por pares de ons ou ate com fase reversa com
compostos oxidveis na fase gua-lcool.
DETETORES POR ABSORBNCIA NO INFRAVERMELHO
A absorbncia no infravermelho pode ser usada como detector universal ou
especfico. A sensibilidade destes detectores, oferecidos no comrcio, muito pequena
para as quantidades de amostra normalmente usadas, mas eles so usados com sistemas
de CLAE por excluso. Usando a tcnica de parar a vazo com a amostra na cela e tirar
o espectro de infravermelho, dar uma imagem analtica completa da amostra. Este tipo
de detector limitado pela fase mvel que deve ser transparente no comprimento de
onda utilizado.
DETECTORES DE RADIOATIVIDADE
Os detectores de radioatividade so projetados especificamente para detectar
solutos radiomarcados conforme so eludos da coluna. Quase todos detectores deste
tipo no so encontrados comercialmente, com exceo dos que detectam as partculas
- do 32P e do 14C.
Para o segundo, que funciona atravs de cintilao lquida, h necessidade da
adio de um coquetel de cintilao. Detectores radioqumicos tm uma grande faixa de
resposta, so insensveis a troca de fases mveis, podendo ser usados com eluio por
gradiente. Aplicaes cromatogrficas com emissores de e de - forte (tais como 131I,
210Po e 125Sb), usando sistemas de cintilao ou mesmo contador Geiger, tm sido
publicadas.

DETECTORES DE ESPECTROMETRIA DE MASSAS

Os espectrmetros de massas so um tipo de detector para CLAE que pode
combinar sensibilidade, versatilidade e universalidade e seu potencial de utilizao
muito grande. A maior dificuldade na utilizao destes detectores o interfaceamento
com o sistema de CLAE e o seu alto custo quando comparado aos outros detectores
mais usados.
OUTROS DETECTORES
Detectores baseados em outras propriedades do soluto (como, constante
dieltrica, densidade, presso de vapor, viscosidade etc.) tm sido apresentados para
serem usados na CLAE. Vrios destes detectores so baseados em propriedades que
dependem da temperatura, fazendo sua resposta depender da variao trmica.

DETECTORES DE CROMATOGRAFIA GASOSA

Numerosos mtodos tm sido descritos para deteco dos vapores orgnicos
eludos num cromatgrafo a gs. Os principais mtodos de deteno so classificados de
acordo com as propriedades fsicas que configuram o mecanismo de deteco. Os
detectores so classificados como: universal, seletivo e especfico. Os detectores de
ionizao de chama e condutividade trmica respondem na presena de todos os
compostos orgnicos e so, portanto considerados detectores universais. Outros
detectores respondem somente na presena de um heterotomo em particular (por
exemplo, fotomtrico de chama e termoinico so considerados detectores especficos).
O de captura de eltrons considerado seletivo, pois detecta qualquer substncia que
apresente grupo atmico capaz de captar eltrons.
Detector
Ionizao de chama
Condutividade
trmica
Captura Eletrnica

Seletividade
Maioria dos compostos orgnicos
Universal

Haletos, nitratos, nitrilas, perxidos,

anidridos, organometlicos.
Fotomtrico de chama Enxofre, fsforo, estanho, boro, arsnio,
germnio, selnio, cromo.
Termoinico
Fsforo, nitrognio, enxofre, boro,
estanho, antimnio, arsnio, chumbo.
Fotoionizao
Alifticos, aromticos, cetonas, steres,
aldedos, aminas, heterociclos, compostos
organo-enxofre, alguns organometlicos.

Detectabilidade
100pg
1ng
50fg
100pg
10pg
2pg

DETECTOR DE IONIZAO DE CHAMA

Apresenta grande aplicabilidade, alta sensibilidade, estabilidade e uma
excepcional resposta linear. Os ons so gerados pela combusto de compostos
orgnicos na chama. No uma queima que gere dixido de carbono e gua, mas uma
ionizao propiciada pela alta temperatura da chama de hidrognio. Um coletor tipo
eletrodo cilndrico colocado a poucos milmetros da parte superior da chama o lugar
em que a corrente inica medida, atravs do estabelecimento de um potencial entre o
setor de formao dos ons e o eletrodo coletor. Pequenos sinais de corrente so
ampliados e passados para o registrador. o desempenho do detector influenciada pela
adequada mistura de ar e hidrognio na chama.
DETECTOR DE CONDUTIVIDADE TRMICA
O funcionamento est baseado no princpio de que o corpo quente perde calor a
uma velocidade que depende da composio dos gases que o rodeiam. A perda de calor
pode ento ser usada como uma medida da composio do gs. Nesses detectores, o
corpo quente um filamento de um metal (Pt, W, Ni, etc), encerrado dentro de um bloco
metlico. O gs a ser analisado passa atravs do filamento, o qual aquecido por uma
corrente eltrica constante. A velocidade das molculas que batem no filamento
funo do peso molecular e, como resultado, quanto menor a molcula, maior a sua
velocidade e mais alta ser sua condutividade trmica. Hidrognio molecular e hlio so
as molculas que tem a maior condutividade trmica. Com o gs de arraste puro, fluindo
no detector, a perda trmica constante e tambm a temperatura do filamento. Se a
composio do gs muda, a temperatura do filamento se altera causando uma
correspondente mudana em sua resistncia eltrica. O circuito empregado nesses
detectores corresponde a um circuito normal de uma ponte de Wheatstone.
utilizado na separao de gases e hidrocarbonetos
DETECTOR DE CAPTURA ELETRNICA
Trata-se de um dos detectores mais populares devido a sua alta sensibilidade e
utilidade para anlise de uma grande quantidade de compostos com atividade txica e
biolgica. muito utilizado para anlise de traos de pesticidas, herbicidas, poluentes
gerados por processos qumicos industriais, drogas e outros compostos biologicamente
ativos em fludos biolgicos. O princpio de deteco usado o decaimento de istopos
radioativos que produzem partculas beta. Tais partculas colidem com as molculas do
gs de arraste produzindo eltrons que formam uma corrente chamada de corrente de
fundo. Molculas que contem tomos eletronegativos, principalmente os halognios,
capturam os eltrons de baixa energia, produzidos no detector, diminuindo assim a
corrente de fundo que registrada como um sinal que, por sua vez, constitui o registro
fsico relacionado com a concentrao do soluto.
Os detectores comerciais desse tipo usam 3H ou 63Ni como fonte de
radioistopos. Dos dois tipos, o de trtio usualmente o preferido devido sua baixa
energia de radiao beta (0,018MeV), comparado com o istopo de nquel (0,067MeV).
A principal vantagem da fonte de 63Ni a sua estabilidade em altas temperaturas (at
400C) comparada com 225C para trtio. Altas temperaturas de operao minimizam
contaminaes procedentes do sistema cromatogrfico.

DETECTOR FOTOMTRICO DE CHAMA

Este detector usado para compostos fosforados e sulfurados, e atua atravs da
medida do espectro de emisso de luz, emitida por estes compostos quando queimados
em chama rica de hidrognio. Essas espcies quemiluminescentes emitam luz a
comprimentos de onda caractersticos para cada elemento. Quando espcies contendo
fsforo ou enxofre entram na chama, a emisso ocorre e a luz transmitida atravs de
um filtro (que seleciona o espectro de emisso a ser medido) para um fotomultiplicador.
Os compostos fosforados emitem luz verde, e os sulfurados emitem luz azul.
DETECTOR TERMOINICO
O TSD um detector de ionizao onde, pela adio de um sal de metal alcalino
(o rubdio) na chama, observa-se um incremento na resposta do detector para certos
elementos, tais como fsforo, nitrognio, enxofre, boro, como tambm para alguns
metais, por exemplo, estanho, antimnio, arsnio e chumbo. A seletividade da resposta
do detector dependente da chama, da temperatura e da composio do sal. Medidas
precisas dos gases da chama so essenciais para a sensibilidade do detector. Esse
detector muito utilizado em anlises ambientais e biomdicas para deteco de
resduos de pesticidas e drogas, onde alta sensibilidade e seletividade so parmetros
necessrios. A seletividade do TSD se deve ao fato que somente ons procedentes da
ionizao da amostra, com potencial igual ou menor que o potencial de ionizao dos
tomos de rubdio, contribuir para corrente eltrica.
DETECTOR DE FOTOIONIZAO
Um dispositivo que excita os eltrons atingindo os tomos com ftons, causando
a ionizao dos tomos, a carga dos tomos ionizados ento medida por um circuito
eletrnico.

CLASSIFICAO DOS DETECTORES

Detector

Tipo

Gases

Seletividade

Inonizao de
chama

Fluxo de
massa

Hidrognio e
ar

Condutividad
e trmica
Captura de
eltrons

Concentrao Referncia

Maioria dos
compostos
orgnicos
Universal

Nitrogniofsforo
Fotometria de
chama

Fotoionizao

Condutividad
e
Eletrolitica

Concentrao Make-up

Haletos, nitratos,
nitrilas, perxidos,
anidridos,
organometlicos
Fluxo de
Hidrognio e Nitrognio,
massa
ar
fsforos
Fluxo de
Hidrognio e Sulfonados,
massa
ar
fosforados, tin,
possivelmente boro, arsnico,
oxignio
germnio, selnio,
cromo
Concentrao Make-up
Alifaticos,
aromaticos,
cetonas,
esteres, aldeidos,
aminas,
heterociclicos,
organosulforados,
alguns
organometalicos
Fluxo de
Hidrogenio ,
Haletos,
Massa
oxygenio
nitrogenados,
nitrosaminas,
sulforados

Faixa de
deteco
100 pg

Faixa
dinmica
107

1 ng

107

50 fg

105

10 pg

106

100 pg

103

2 pg

107

BIBLIOGRAFIA

<http://www.ifrj.edu.br/webfm_send/546> Acessado em 03 de maio de 2013

<http://w3.ufsm.br/larp/media/introd_gc.pdf> Acessado em 04 de maio de 2013
<http://www.pucrs.br/quimica/professores/arigony/cromatografia_FINAL/detectores_cg
.htm> Acessado em 04 de maio de 2013

Tcnicas Analticas instrumentais IC375

Cromatografia
Prof.: Dari Cesarin Sobrinho

Detectores utilizados em cromatografia

Leonardo Vitor Belo Pazutti

201020011-8

Seropdica, 06/05/2013