Metformina (50 microM) inhibi la oxidacin mitocondrial de glutamato +

malato en clulas de hepatoma por 13 y 30% despus de 24 y 60 h de

exposicin respectivamente, pero la oxidacin de succinato se vio afectada. La
metformina tambin caus la inhibicin dependiente del tiempo de complejo 1
en mitocondrias aisladas, mientras que en las partculas sub-mitocondriales
inhibicin fue inmediata, pero requiere concentraciones muy elevadas de
metformina (K (0,5), 79 mM). Estos datos son compatibles con la acumulacin
de potencial de la membrana impulsada lenta del frmaco cargado
positivamente dentro de la matriz mitocondrial conduce a la inhibicin de la
inhibicin 1. metformina complejo de la gluconeognesis a partir de L-lactato
en hepatocitos de rata aislados fue tambin tiempo y dependiente de la
concentracin, y acompaado por los cambios en los niveles de metabolitos
similares a los inducidos por otros inhibidores de la gluconeognesis que
actan en complejas 1. hgados-Freeze sujetada de ratas tratados con
metformina mostraron cambios similares en las concentraciones de
metabolitos.
La inhibicin del complejo I fue confirmada por estado reducido 3 de respiracin de
mitocondrias aisladas que consumen glutamato + malato como sustratos para el
complejo I
Aunque la metformina ha estado en uso clnico desde hace dcadas, los primeros
pasos que median su accin antidiabtica todava no estn claras. Se establece que la
metformina inhibe la actividad enzimtica del complejo I de la cadena respiratoria y
por lo tanto perjudica tanto la funcin mitocondrial y la respiracin celular
( 2 - 4 ). Alteracin mitocondrial en el nivel del complejo I se hace responsable de las
concentraciones de lactato en plasma elevados en pacientes tratados con metformina
( 5 , 6 ), que en casos muy raros puede agravar la acidosis lctica ( 7 ). Hay pruebas
de que la inhibicin del complejo I tambin podra ser la causa de la accin de la
metformina beneficioso antihiperglucmico ( 2 , 8 ), pero este asunto espera
clarificacin final.

La evolucin de la metformina
Actualmente, la metformina agente anti-hiperglucmicos (dimetilbiguanida) es
el tratamiento de primera lnea para los pacientes con diabetes tipo II (DM2) en
todo el mundo. Su historial mdico se remonta a la utilizacin de Galega
officinalis (lila la francesa), que fue utilizado en la medicina china y tambin en
Europa para el tratamiento de la halitosis medieval y poliurea [ 1 , 2 ]. Ms tarde,
esta planta tambin fue descrito para tratar los sntomas de la diabetes hasta
principios de los aos 1930 en Francia [ 3 ]. La investigacin a finales de 1800
encontr que Galega officinalis era rica en guanidina, que tena propiedades
hipoglucemiantes en animales que pueden explicar las plantas de accin
antidiabtica [ 4 ]. Sin embargo, se encontr que el uso clnico de guanidina para

ser txica, pero un derivado de isoprenilo, conocido como galegine, tena menos
efectos secundarios y fue utilizado para el tratamiento de la diabetes en los seres
humanos en los aos 1920 [5 ]. Casi al mismo tiempo, dimetilbiguanida (ahora
conocido como metformina) tambin fue sintetizado y los niveles de glucosa en
sangre bajos efectivamente in vivo [ 6 ], pero su aplicacin clnica en el
tratamiento de la diabetes se vio obstaculizada por el descubrimiento de la
insulina en la misma dcada. No fue hasta la dcada de 1950 metformina, as
como la ms potente derivados de biguanida fenformina y buformina, utilizado
clnicamente para el tratamiento de diabetes tipo 2 [ 7 ]. Inicialmente, los ltimos
frmacos fueron los ms utilizados, sin embargo fenformina y buformina se
correlacionaron con la acidosis lctica potencialmente mortal que llev a su
suspensin en la dcada de 1970 [ 8 ]. Mientras tanto, el uso de metformina
comenz a prosperar debido a su alto ndice teraputico.
Clnicamente se ha demostrado que la metformina trabaja para suprimir la
gluconeognesis heptica, lo que reduce los niveles de glucosa en sangre en
pacientes con diabetes tipo 2 mal administrado [ 9 ]. Cabe sealar, sin embargo,
que los mecanismos moleculares por los que la metformina consigue estos efectos
todava se discuten en gran medida. Sin embargo, una premisa que prevalece es
que debido a su carga positiva, la metformina se acumula dentro de la matriz
mitocondrial celular e inhibe el complejo I de la cadena respiratoria mitocondrial
(como lo hace fenformina), lo que resulta en una acumulacin de la produccin de
ATP [ 10 , 11 ]. Esto a su vez, conduce a la activacin de la protena activada por
AMP enzima de deteccin de energa quinasa (AMPK), que inhibe los procesos
que consumen energa y cambia el metabolismo celular hacia la produccin de
energa para restaurar la homeostasis de la energa [ 12 ]. De hecho, los resultados
de activacin de AMPK metformina mediada por la modulacin de abajo
objetivos que mejoran la absorcin de glucosa en el msculo esqueltico [ 13 ] e
inhiben los genes que regulan la gluconeognesis heptica [ 14 ], lo que puede
explicar las observaciones clnicas antes mencionadas de esta droga.
a metformina entrada en la clula a travs de difusin pasiva est limitada
debido a su naturaleza hidroflica. Por lo tanto, la metformina requiere el uso de
transportadores de cationes, tales como los transportadores de cationes orgnicos
(PTU), para facilitar su absorcin celular [ 73 ]. Actualmente, OCT1 y OCT2 que
son codificadas por los genes SLC22A1 y SLC22A2, respectivamente, son
reconocidos como los principales transportadores de metformina y son altamente

expresado en el hgado, el intestino, los riones y [ 74 ]. Por ejemplo, los ratones

que son null para OCT1 muestran una reduccin significativa en la absorcin de la
metformina heptica, lo que sugiere que el transportador de OCT1 es esencial para
la acumulacin de metformina en el hgado, que es el tejido diana principal de
esta droga [ 75 ]. Adems, el anlisis microarry ha puesto de manifiesto que el
grado de expresin OCT1 puede ser variable al comparar tumor vs tejidos
humanos normales, lo que sugiere que las respuestas teraputicas a la metformina
en pacientes con cncer puede ser diferente en funcin de su tipo de tumor [ 76 ].
Por el contrario, muchos in vitro modelos (lneas celulares experimentales que
se inmortalizan) tienen una baja expresin de los PTU, y por lo tanto requieren
milimolares (mM) concentraciones de metformina para provocar efectos
fisiolgicos similares in vivo [ 73 ]. Aunque los informes indican que este
problema puede ser evitado mediante la mejora de la expresin ectpica de PTU
ADNc en las clulas diana [ 77 , 78 ]. Sin embargo, un informe reciente de
Segal et al. [ 79 ] ha indicado que OCT1 se expresa en mltiples lneas celulares
de cncer de ovario, y que desmontables de siRNA mediada de expresin OCT1
atenuado la capacidad de la metformina (0-10 mM) para inhibir su supervivencia .
La sntesis qumica de la metformina, descrita originalmente en 1922 y reproducida
posteriormente en varios estudios y publicaciones, consta de la reaccin
de clorhidrato dedimetilamina con la 2-cianoguanidina (diciandiamida) y calor.31

Metformina, descubierta en la dcada de 1920 aparecieron en el mercado en 1957.Pertenece a una de

las principales familias de productos actan sobre la resistencia a la insulina en pacientes que sufren
de diabetes tipo 2.
El objetivo de su accin es la mitocondria1, ms concretamente complejos 1, la reduccin del punto de
NADH entrada que permite la preservacin de la gradiente de protones necesaria para la produccin
de ATP a nivel de la membrana mitocondrial.Sin embargo, se desconoce la Diana molecular de la
metformina en complejo 1.
Metformina se considera que tiene como una accin de clula dominante la activacin de la quinasa
AMP (AMPK) al que se atribuye la inhibicin de la neoglucogenesis heptica por metformina. Por
ltimo, la metformina acta selectivamente sobre el hgado; una protena de transporte del

transportador de cationes orgnicos (OCT), familia, OCT1, estar en control de la entrada de la

metformina en los hepatocitos.2.3

Figura. Metformina mecanismos de accin.

Una obra que acaba de ser publicada en J Clin Invest4 cuestiona el papel de la AMPK en la accin de la
metformina en neoglucogenesis heptica. Metformina contina bloqueando la produccin de glucosa
heptica.2 esto se observa en la presencia y la ausencia de subunidades catalticas AMPK en cultivos
primarios de hepatocitos de ratn en concentraciones comparables a los obtenidos bajo tratamiento en seres
humanos. Es un efecto rpido, sensible en cuanto la 4 hora. La inhibicin de la produccin heptica de toma
lugar independientemente de la presencia o ausencia de glucosa en hepatocitos AMPK-deficiente, la ausencia
de fosforilacin de CRTC2, mediador central de la neoglucogenesis en el hgado y sin modificacin de los
niveles de Fosfoenolpiruvato carboxicinasa (PEPCK) y glucosa 6-fosfatasa, por el contrario fuertemente
alterado en la ausencia de LKB1. Estos datos indican que la regulacin basal de la fosforilacin de CRTC2 es
dependiente de LKB1, pero independiente de la AMPK. Fosforilacin de CRTC2 es abolida en la ausencia de
AMPK o LKB1, pero sin abolir la accin de la metformina, tanto en la produccin de glucosa y en la inhibicin
de la glucosa-6-fosfatasa. Se obtuvieron resultados comparables en vivo; Metformin mejora sensibilidad a la
insulina tanto en ratones deficientes y control. Adems, los ratones deficientes son normoglucmicos,
responde normalmente a la glucosa y tener sangre insulina niveles comparables a los de los ratones de
control, lo que indica una sensibilidad a la insulina normal.
El efecto de la metformina en ratones deficientes as parece independiente del efecto de la AMPK y
CRTC2 fosforilacin observada en los ratones de control. En este modelo, es independiente de los
genes que controlan la neoglucogenesis, lo que sugiere un efecto inhibidor sobre los flujos de
neoglucogenic que un efecto sobre los genes de transcripcin neoglucogenesis ms. 5

Propiedad

Valor

Fuente

punto de fusin

223-226 C

No

disponible
solubilidad en agua

Totalmente soluble como la sal HCl

No
disponible

logP

-0,5

No
disponible

pKa

12.4

Complejos de la Cadena de Transporte de

Electrones
El NADH se oxida por una serie de transportadores catalticos
redox que son protenas integrales de la membrana mitocondrial
interna. El cambio de energa libre en varios de estos pasos es
muy exergnico. Acoplados a estos pasos de oxidacin y
reduccin es un proceso de transporte en el que protones (H +) de
la matriz mitocondrial son transportados al espacio entre las
membranas mitocondriales interna y externa. La redistribucin de
protones lleva a la formacin de un gradiente de protones a travs
de la membrana mitocondrial. El tamao del gradiente es
proporcional al cambio de energa libre de las reacciones de
transferencia de electrones. En presencia de ADP, los protones
fluyen hacia bajo de su gradiente termodinmico desde el espacio
entre las membranas mitocondriales interna y externa de regreso
a la matriz mitocondrial. Este proceso se facilita por un
transportador de protones en la membrana mitocondrial interna
conocido con el nombre de ATP sintasa. Como su nombre implica,
el transportador esta acoplado con la sntesis de ATP.
El flujo de electrones a travs de la cadena de transporte de
electrones mitocondrial se lleva a cabo por medio de varios
complejos enzimticos. Los electrones entran en la cadena de
transporte primariamente a partir del NADH citoslico a NADH
mitocondrial pero tambin pueden ser provedos por el succinato
(al FADH2mitocondrial) o por el transportador glicerol fosfato a
travs de FADH2 mitocondrial.

El glicerol fosfato transportador es un mecanismo de

secundaria para el transporte de electrones de mitocondrial NADH
citoslico a los transportistas de la fosforilacin oxidativa
itinerario. El principal electrones NADH citoplsmico lanzadera es
la transportador malato-aspartato (ver ms abajo). Dos son
enzimas que participan en este servicio. Una de ellas es la versin
de la citoslico enzima glicerol-3-fosfato deshidrogenasa (siglas
en Ingls: GPD1) que tiene como un sustrato, NADH. La segunda
es la forma de la mitocondria la enzima (siglas en Ingls: GPD2)
que tiene como uno de sus sustratos, FAD +. La neto resultado es
que hay una conversin continua de la glicolticas intermedios,
DHAP y glicerol-3-fosfato, con la consiguiente transferencia de los
electrones de la reduccin de NADH citoslico a la mitocondria
oxida FAD+. Dado que los electrones mitocondrial de las
FADH2 pienso en la va de fosforilacin oxidativa en la coenzima Q
(a diferencia de NADH-ubiquinona oxidorreductasa [compleja I])
slo 2 moles de ATP se generarn a partir de la gliclisis. GAPDH
es gliceraldehdo-3-fosfato deshidrogenasa.

Diagrama del flujo de electrones a partir del NADH o del

succinato al oxigeno (O2) en la cadena de transporte de electrones
de la fosforilacin oxidativa. El complejo I contiene FMN y entre
2224 protenas hierro-azufre (Fe-S) en 57 agregados. El
complejo II contiene FAD y 78 protenas Fe-S en 3 agregados y el

citocromo b560. El complejo III contiene citocromo b, citocromo c1 y

una protena Fe-S. El citocromo c esta asociado con el complejo III
por interaccin electrosttica, el aceptor final de electrones es el
complejo III. El complejo IV contiene citocromo a, citocromo a3 y
dos iones de cobre. Mientras dos electrones pasan a travs de las
protenas del complejo I, cuatro protones (H +) son transportados al
espacio nter membrana de la mitocondria. Igualmente, cuatro
protones son transportados al espacio nter membrana mientras
cada par de electrones fluye a travs de los complejos III y
mientras cuatro electrones se utilizan para reducir al O 2 a H2O en
el complejo IV. La energa libre que se libera mientras los
electrones fluyen a travs del complejo II es insuficiente para
acoplarse al transporte de protones. Estos protones son
regresados a la matriz de la mitocondria, siguiendo su gradiente
de concentracin, pasando a travs de la ATP sintasa acoplando el
flujo de electrones y el transporte de protones a la sntesis de ATP.
Con excepcin del NADH, succinado, y CoQ todos los
componentes de la va son protenas integrales de la membrana
mitocondrial interna cuyos cofactores sufren reacciones redox. El
NADH y el succinato son solubles en la matriz mitocondrial,
mientras que la CoQ es un pequeo transportador que transfiere
electrones entre las deshidrogenasas primarias y el citocromo b.
La CoQ esta tambin restringida a la fase de membrana debido a
su carcter hidrofbico.
Como se ha indicado anteriormente y se muestra en el
diagrama, las protenas mitocondriales de transporte de
electrones son agrupados en complejos multiproteicos conocidos
como complejos I, II, III, y IV. Complejo I, tambin conocida como
NADH:
CoQ
oxidoreductasa
(tambin
NADH-ubiquinona
oxidorreductasa o NADH deshidrogenasa), se compone del NADH
con FMN como cofactor, ms no hemo de hierro protenas que
tienen por lo menos un centro de hierro azufre. Hay un total de 45
subunidades proteicas en complejo I. Complejo I es responsable
de transferir electrones de NADH a CoQ. La E o para la
transferencia ltimo es 0.42V, correspondiente a un G de 19
kcal / mol de electrones transferidos. Con su energa libre muy
exergnica cambiar, el flujo de electrones a travs del complejo I
es ms que adecuado para conducir sntesis de ATP.