ADN polimerasa

Las ADN polimerasas son enzimas polimerasas (celulares o virales) que intervienen en el proceso de replicacin
del ADN. Llevan a cabo la sntesis de la nueva cadena de
ADN emparejando los desoxirribonucletidos trifosfato
(dNTP) con los desoxirribonucletidos complementarios
correspondientes del ADN molde. Los dNTP que se usan
en la replicacin del ADN contienen tres fosfatos unidos
al grupo hidroxilo 5' de la desoxirribosa y dependiendo de
la base nitrogenada sern dATP, dTTP, dCTP o dGTP.
La reaccin fundamental es una transferencia de un grupo
fosfato en la que el grupo 3'-OH acta como nuclelo
en el extremo 3' de la cadena que est en crecimiento. El
ataque nucleoflico se produce sobre el fosfato (el ms
prximo a la desoxirribosa) del desoxirribonuclesido 5'
trifosfato que entra, liberndose pirofosfato inorgnico y
alargndose el ADN (al formarse un nuevo enlace fosfodister). A diferencia de la mayora de procesos biolgicos que ocurren en la clula en los que slo se separa un
grupo fosfato (P), durante la replicacin se separan los
dos ltimos grupos fosfato, en forma de grupo pirofosfato (PP)...

Funcin correctora exonucleasa 3' 5' de las ADN polimerasas.

Las ADN polimerasas tambin realizan otras funciones

durante el proceso de replicacin. Adems de participar
en la elongacin, desempean una funcin correctora y
reparadora gracias a su actividad exonucleasa 3', que les
conere la capacidad de degradar el ADN partiendo de
un extremo de ste. Es importante que existan estos mecanismos de correccin ya que de lo contrario los errores producidos durante la copia del ADN daran lugar a
mutaciones.

Este proceso se puede resumir en una ecuacin qumica:

(DNA) + dNTP (DNA) + PP

A pesar de que la ADN polimerasa slo tiene un sitio activo para emparejar los cuatro dNTPs diferentes, la unin
correcta de los pares de bases A:T, C:G es posible basn1 ADN polimerasas de E. coli
dose en la geometra de stos: si la unin es incorrecta se
produce un desplazamiento del fosfato haciendo ms
difcil su unin al extremo 3'-OH y ralentizando as el rit- (ADN polimerasa en celulas procariotas) Las principales
mo de catlisis, lo que da lugar a que la ADN polimerasa ADN polimerasas en E. coli son las ADN Pol I, ADN Pol
II, ADN Pol III, y cada una de ellas est especializada en
aada preferentemente las bases correctas.
una o ms de estas funciones segn cul sea su papel en
Las ADN polimerasas pueden aadir hasta 1000 la replicacin. La procesividad se relaciona con cunto
nucletidos por segundo. Esto es debido a su naturale- tiempo permanece unida la ADNpol al ADN cuando esza, es decir, el nmero de nucletidos que son capaces t agregando nucletidos. As, la ADN Pol I que es poco
de aadir cada vez que se asocian al molde de ADN que procesiva (aade entre 20 y 100 nucletidos por acontecivan a copiar. Dado que la adicin de los nucletidos es miento de unin), es la encargada de la eliminacin de los
un proceso que dura unos milisegundos, la velocidad de cebadores y el relleno del espacio que dejan con ADN
catlisis va a depender del tiempo que la ADN polimerasa (actividad exonucleasa 3' 5' y actividad polimerasa 5'
permanece unida al ADN, esto es, de su procesividad.
3'). La ADN Pol II est encargada de la reparacin de
El crecimiento de la cadena se produce en direccin 5' los quiebres producidos en el ADN (actividades polime 3', ya que se requiere de un grupo 3'-OH libre para rasa 5' 3' y exonucleasa 3' 5'), la ADN Pol III que
el inicio de la sntesis puesto que ste es el que realiza el es muy procesiva es la principal encargada de la elongaataque nucleoflico sobre el fosfato del dNTP, de forma cin del ADN (actividad polimerasa 5' 3') durante la
que las ADN polimerasas requieren de un iniciador 3'- cual tambin realiza tareas de correccin (actividad exoOH (que puede ser de ADN o ARN) llamado cebador nucleasa 3' 5'). Notar que actividad correctora y de
que es sintetizado por la ARN primasa. El extremo 3' del reparacin no son lo mismo. Slo la ADN pol I y beta
cebador se denomina extremo cebador.
tienen actividad de reparacin, en cambio todas las poli1

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merasas tienen actividad correctora (poseen 2 sitios activos: un sitio de polimerizacin y otro de correccin). Por
qu ocurre? Cmo se da cuenta la DNApol de que hubo
un error en la replicacin del ADN? Ocurre por el fenmeno de tautomerizacin. Los nucletidos cambian a su
forma qumica alternativa, la DNApol las confunde con
otro nucletido y lo elonga. Cuando este vuelve a su conformacin ms estable provoca un cambio en el ancho de
la hebra (20A) y termina abrindose. Esto es detectado
por la polimerasa, quien cambia conformacionalmente y
deja la hebra posicionada en el sitio de correccin. Las
ADN Pol IV y V, identicadas en 1999, estn involucradas en una forma poco comn de reparacin del ADN.

3 ADN POLIMERASA DEL FAGO 29

el complejo lo conforman las subunidades y cuya su
funcin es la de aumentar la procesividad de la ADN Pol
III; la subunidad sujeta la ADN Pol III al ADN.

Actividad correctora exonucleasa 3' 5' de la subunidad de

la holoenzima ADN Pol III.

2 ADN polimerasas eucariticas

Hay 13 tipos aunque las ms importantes son dos:
ADN polimerasa (alfa): se encuentra en el ncleo celular, se inhibe por adicolina y en humanos
presenta 4 subunidades, aunque las ms importantes
son dos:
Subunidad mayor (130 kDa): tiene actividad
polimerasa.
Subunidad menor (48 kDa): tiene un centro
activo de primasa para sintetizar el cebador
necesario para la replicacin. Como todas las
polimerasas poseen un dominio comn, representado como una mano, en la cual se incluye
un dominio exonucleasa. Por lo tanto s posee
una facultad correctora.

Holoenzima ADN Pol III de E. coli.

A diferencia de lo que ocurre con la ADN Pol I, que slo debe aadir unos 5-10 nucletidos una vez eliminado el cebador, es importante que la ADN Pol III s sea
muy procesiva, y por esa razn suele formar parte de un
complejo denominado holoenzima ADN Pol III que le da
una mayor procesividad. Este complejo consta de diversas subunidades polipeptdicas encargadas cada una de
una funcin, y que constituyen en su conjunto un dmero
asimtrico: una mitad se encarga de la sntesis de la hebra
adelantada y la otra mitad de la hebra rezagada. El corazn cataltico lo componen las subunidades que corresponden a dos copias de la ADN Pol III, la subunidad
con actividad correctora exonucleasa 3' 5' y la subunidad cuya funcin podra ser la de ensamblar las otras
dos; las subunidades mantienen la estructura dimrica;

ADN polimerasa (sigma): se localiza en el ncleo celular y se inhibe mediante alidilcolina. Tiene
una o dos subunidades dependiendo del organismo.
Tiene una alta capacidad de polimerizacin y actividad correctora de errores (exo 3'5'). Carece de
actividad primasa.
La primasa (que es parte de la molcula de ADN polimerasa ) sintetiza cebadores de ARN y adems comienza
la elongacin con ADN de las dos cadenas. Despus se
produce un cambio de polimerasa y entra la ADN polimerasa , que contina la sntesis.

3 ADN polimerasa del fago 29

El fago 29 sintetiza una ADN polimerasa propia. Esta
enzima es muy utilizada en biologa molecular para mltiples procedimientos de desplazamiento de amplicacin
de ADN, y tiene una serie de caractersticas que la hacen
particularmente adecuada para esta aplicacin.

Reaccin en cadena de la polimerasa

La propiedad de las ADN polimerasas para replicar hebras de ADN se utiliza para la reaccin en cadena de la
polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en ingls,
para obtener un gran nmero de copias de un fragmento de ADN particular, amplicndolo para propsitos de
investigacin. En los procesos de PCR se requiere la utilizacin de polimerasas termoestables, como la polimerasa
Taq, debido a que es necesario aplicar altas temperaturas
para desnaturalizar la molcula de ADN.

Bibliografa

La Replicacin.

6 TEXT AND IMAGE SOURCES, CONTRIBUTORS, AND LICENSES

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6.1

Text

ADN polimerasa Fuente: http://es.wikipedia.org/wiki/ADN%20polimerasa?oldid=76706783 Colaboradores: Youssefsan, PACO, Joseaperez, Moriel, Zwobot, Cookie, Tano4595, Aracne, El Moska, Niqueco, Taragui, Xuankar, Rembiapo pohyiete (bot), Orgullobot, RobotQuistnix, Yrbot, BOT-Superzerocool, YurikBot, GermanX, KnightRider, Eskimbot, Paintman, F.A.A, Ignacio Icke, Retama, Otacon,
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Csar Benito Jimnez
Archivo:Holoenzimapol3.jpg Fuente: http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/d/dc/Holoenzimapol3.jpg Licencia: CC-BYSA-2.5-es Colaboradores: http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Replicacion/Replicacion.htm#Inicio Artista original: Csar Benito Jimnez

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