MTODO COPROPARASITOSCPICO DE FAUST

MTODO COPROPARASITOSCPICO DE FAUST

1-A qu tipo de CPS pertenece ste mtodo?
Tcnica de flotacin y gravitacin.
2-Qu finalidad tiene el hacer la suspensin de las heces?
La suspensin se hace para tener una muestra representativa, tener incluidos cualquier
forma parasitaria encontrada en las heces.
3-Qu finalidad tiene el realizar el colado de la suspensin de las heces?
La finalidad del colado es para tener una solucin homognea.
4-Cul es la finalidad de los lavados con agua de la materia fecal?
Concentrar cada vez ms las formas parasitarias despus de cada centrifugacin.
5-Para qu y por qu se utiliza la solucin de sulfato de zinc a densidad de 1.18
Baum?
Porque permite la flotacin de huevos de helmintos y protozoarios debido a que su
densidad es mayor.
6-Qu ventajas presenta ste mtodo con respecto a otros CPS, razones por las que se
utiliza de rutina en la mayora de los laboratorios clnicos?
7-Qu formas parasitarias se pueden recuperar con ste mtodo?
Protozoarios y huevos de helmintos.
8-Qu desventajas presenta ste mtodo con respecto a otros CPS?
Que mediante la centrifugacin pueden perderse algunas estructuras parasitarias.
Los huevos de helmintos como Taenia sp, Ascaris lumbricoides no fertilizados y de
trematodos como Fasciola hepatica y Paragonimus mexicanus, as como los quistes de
Balantidium coli, por ser pesados tienden a sedimentar, por lo que ste mtodo no los
recupera.
9-Actualmente, cmo se realiza el mtodo?
El mtodo aun no se encuentra estandarizado, pero cada laboratorio se acomoda de acuerdo
a sus normas, aunque muchos ya omiten el tamizaje de la muestra y hacen la mezcla en un
solo tubo. Se espera que ya se estandarice el procedimiento para una mejor obtencin de
resultados a un mismo nivel y mejore la calidad del mismo.

10-Qu es un conservador qumico?

Los agentes conservadores son sustancias que, por separado o mezcladas entre s, son
capaces de inhibir, retardar o detener los procesos de fermentacin, enmohecimiento,
putrefaccin y otras alteraciones biolgicas de la materia.

11-Cules son los componentes del conservador PAF y cmo actan cada uno de ellos
en la materia fecal?
Nombre comn
Componentes
Estadios
de
los Tipo de muestra de
parsitos que conserva heces para la que se
recomienda
PAF
(fenol-alcohol- Fenol, solucin salina Trofozoitos,
quistes, Para todo tipo de
formol)
isotnica,
formol, ooquistes, huevecillos y consistencia de heces
alcohol etlico al 95% y larvas
agua destilada
12-Qu ventajas nos proporciona ste conservador en el trabajo rutinario?
1. Se pueden recolectar 3 o ms muestras en el conservador, lo que permite realizar un
CPS seriado.
2. Al ser mayor la cantidad de heces, la muestra es ms representativa, es decir hay
mayor probabilidad de encontrar formas parasitarias, an cuando la parasitosis sea
leve o moderada.
3. Se hace un solo procesamiento de la muestra en lugar de 3, que redunda en un
ahorro de tiempo y econmico para el laboratorio.
4. Se facilita el manejo de la muestra ya que con el conservador se desinfecta y
desodoriza la misma.
5. Se puede procesar la muestra en otro da, cuando en el presente se tengan
demasiadas muestras.
6. La persona a analizar, no tiene que acudir al laboratorio en tres ocasiones, sobre
todo si el laboratorio se encuentra lejos de su domicilio, beneficindole en ahorro de
tiempo y dinero.
7. A nivel comunitario se pueden hacer muestreos a gran escala y luego procesar las
muestras de acuerdo al tiempo que se tenga.
8. Se puede realizar otro preparado de la muestra para su verificacin o investigacin,
en el caso de encontrarse con parsitos no comunes o no frecuentes en el medio. E
incluso se puede remitir la muestra a un centro de investigacin.
13-Qu formas parasitarias preserva el PAF?
Trofozoitos, quistes, ooquistes, larvas y huevecillos.

MTODO COPROPARASITOSCPICO PARA MUESTRAS PRESERVADAS

CON MIF (MIFC).

Cuestionario
1. A qu tipo de mtodo CPS pertenece el MIF?
Al mtodo CPS de concentracin por sedimentacin.

2. Qu funcin desempea el ter etlico anhidro en este

mtodo?
Por tener una densidad menor ( =1) a la densidad de las estructuras parasitarias (1.05
1.15), ocasiona que estas precipiten o sedimenten agilizando este proceso en la centrifuga.
Tambin acta como un saponificador eliminando los corpsculos de grasa facilitando la
identificacin microscpica de formas parasitarias.
3. Qu funcin desempea el conservador MIF en este
mtodo y cules son sus componentes?
Sus componentes son: solucin de merthiolate rojo, solucin madre de yodo yoduro al
5% - 10% respectivamente, glicerina y agua destilada.
Contribuye a prolongar el tiempo crtico del anlisis de das a meses y mejora la
recuperacin e identificacin de las formas parasitarias.
4. Qu formas parasitarias se pueden recuperar con este
mtodo?
Huevos de helmintos como Taenia sp, Ascaris lumbricoides no fertilizados y de trematodos
como Fasciola heptica y Paragonimus mexicanus, as como los quistes de Balantidium
coli, ooquistes, larvas y trofozoitos.
5. Qu ventajas y desventajas presenta este mtodo con
respecto al CPS de Faust?
Ventajas
Hace una buena concentracin de las estructuras parasitarias en el fondo del tubo conico
debido al proceso de sedimentacin centrifugacin.
Para todo tipo de consistencia de heces.
Se recuperan estructuras parasitarias tales como quistes de protozoarios, larvas y
huevecillos de helmintos.
Los componentes del MIF como el lugol y la eosina que contiene el merthiolate rojo,
colorean a las formas parasitarias en tonos amarillo, naranja, rosado rojizo, dependiendo
de la madurez y tipo de la estructura parasitaria y del tiempo que tenga eta en el
conservador. Las estructuras no parasitarias tales como clulas vegetales, fibras vegetales,
etc., tienden a teirse de caf, por lo que se pueden diferenciar muy bien de las parasitarias.
Es sencillo y fcil de realizar
No se invierte mucho tiempo para su realizacin
Desventajas
Es relativamente caro por requerir de varios reactivos, los tubos conicos son ms caros que
los que generalmente se usan en el laboratorio y no tan fcil de conseguir en el mercado.
Por el tamao de los tubos y su dimetro, se requieren de centrifugas con camisas
adecuadas para ellos.
Algunos investigadores dicen que el ter y la centrifugacin puede destruir los trofozoitos.
OBSERVACIN DE PROTOZOARIOS INTESTINALES Y CAVITARIOS

1-Describa la morfologa de los trofozotos y quistes de los siguientes

protozoarios:
Entamoeba histolytica, Entamoeba coli y Balantidium coli .
Entamoeba histolytica
En el trofozoto se distinguen dos capas, el ectoplasma, que es hialino y se
encuentra en estado de gel, y el endoplasma, que est en fase sol y contiene
los organelos del parsito. El movimiento de los trofozotos se debe a que las
protenas de actina y miosina, las cuales se contraen en el extremo contrario a la
direccin de su desplazamiento. Es una fase que le permite desplazarse debido a
que su citoplasma se proyecta en direccin de su movimiento; tal proyeccin se
denomina seudpodo. Cuando el trofozoto no encuentra alguno de los factores
ambientales que le favorecen, se redondea y comienza a sintetizar un polisacrido
constituido de N-acetilglucosamina (quitina). Luego se reproducen sus ncleos;
primero se sintetiza otro a partir del que posee el trofozoto, que en ese momento
se le conoce como quiste inmaduro binucleado; despus se duplican los dos
ncleos y entonces se observa un quiste maduro tetranucleado.
Entamoeba coli
El trofozoito mide entre 15 y 50 m; si se observa vivo en heces diarreicas se
reconoce un citoplasma viscoso y vacuolado y en ocasiones no es facil diferenciar
el ectoplasma del endoplasma ni tampoco el nucleo; se desplaza mediante
movimientos lentos y emite seudopodos cortos y romos. El quiste mide de 10 a 30
m de diametro, muestra una doble pared refractil y el citoplasma carece de
vacuolas. En preparaciones tenidas con Lugol los nucleos se observan con
facilidad, ocho en promedio, aunque el numero puede ser menor o mayor; el
endosoma y la distribucin de la cromatina periferica siguen los mismos patrones
que el trofozoito.
Balantidium coli
El trofozoito mide 80 a 150 m de largo 60 a 120 m de ancho. Los cilios, al
igual que los flagelos de otros protozoarios, estn formados por microtubulos
cilindricos y rectos dispuestos en pares, uno central y nueve alrededor del central.
Los microtubulos, cuya composicion es de y tubulina, se mueven de manera
sincronizada, son mucho mas cortos que los fl agelos y se encuentran en mayor
cantidad. El quiste tiene forma esferica o ligeramente ovoide, y mide de 40 a 60
m; sin embargo, el tamano puede variar, al punto de que llegan a medir mas de
200 m y estan cubiertos por una pared quistica. Es importante mencionar que
durante el enquistamiento los cilios no desaparecen ni se retraen, como los fl
agelados que se enquistan. El quiste es viable a temperatura ambiental durante 1
a 2 dias.
2-Indique cul es el microhabitat en el hospedero humano, de cada uno de
los protozoarios anteriores.
Los tres tipos de parsitos mencionados se desarrollan principalmente en la luz
del intestina grueso siendo expulsados por las heces fecales

3-Qu enfermedad producen cada uno de los protozoarios arriba

mencionados?
Entamoeba histolytica: amibiasis
Entamoeba coli: amibiasis (Comensal)
Balantidium coli: balantidiasis
4-De manera breve explique el ciclo vital de cada uno de los protozoarios
anteriormente mencionados.
Entamoeba histolytica: Los quistes entran por va bucal y avanzan por el tubo
digestivo hasta llegar al estmago (fi gura 4-3). En este sitio, el pH del jugo
gstrico y las enzimas hidrolticas destruyen la pared del quiste del parsito sin
afectar su citoplasma, de manera que al pasar al duodeno se libera en la fase de
trofozoto con cuatro ncleos. De inmediato se divide cada ncleo para dar lugar a
un trofozoto con ocho ncleos. Este estado del parsito es tan inestable que cada
ncleo se separa y origina ocho pequeos trofozotos uninucleados que se
denominan metaqusticos. Cada trofozoto metaqustico migra por la luz intestinal
hasta alcanzar el intestino grueso, el cual posee un pH de 8.0 a 9.0 y est
deshidratado (ambiente adverso para la sobrevivencia de los trofozotos). En ese
punto comienza la transformacin de trofozoto en quiste. Los quistes abandonan
el organismo humano junto con las heces en fase de quiste tetranucleado; pueden
expulsarse tambin en la forma de quistes binucleados o uninucleados si el
trnsito intestinal de la persona infectada es relativamente rpido.
Entamoeba coli: Despues de que el quiste ingresa al huesped por via oral, es
deglutido y transportado hacia el estomago, despus llega al intestino delgado y
en todo este trayecto la accin del acido gastrico y de enzimas digestivas llevan a
cabo la tarea de reblandecer y debilitar la pared quistica. Este conjunto de eventos
fisico-quimicos contribuira a que emerjan las formas moviles, los trofozoitos,
mismos que continuaran su viaje ayudados por el peristaltismo para ser
transportados en el contenido digestivo a otros segmentos intestinales, en los
cuales dependiendo de la especie se dirigirn a la luz del intestino grueso y ahi se
pondr iniciar ciclos de multiplicacion y colonizacion.
El proceso de enquistamiento se lleva a cabo en la luz del intestino, y este se
efectua cuando los trofozoitos tienen que enfrentar condiciones que no le son
favorables para su supervivencia.
Balantidium coli: La fase infectante de B. coli en el humano es el quiste, yocurre
cuando este ingiere alimentos y bebidas contaminadas. Cuando el parasito llega al
estomago la pared quisticase destruye, pero emerge el trofozoito, el cual se
desplaza con gran movilidad debido a la presencia de los cilios hasta alcanzar el
intestino grueso; en la luz intestinal se divide en repetidas ocasiones por fi sion
binaria o por conjugacion. Cuando encuentra un ambiente deshidratado, se
favorece su enquistamiento, mas especifi camente a nivel de recto y sigmoides.
Debido al peristaltismo, el quiste se expulsa junto con las heces. Si las
evacuaciones son diarreicas, la fase del parasito expulsado es el trofozoito, debido
a que un ambiente hidratado favorece su presencia y no alcanza a enquistarse.

5-Diga los mtodos de diagnstico directo que pueden utilizarse para la

identificacin de los protozoarios anteriores, as como la muestra biolgica y
las etapas o formas diagnsticas que se hallaran con cada uno de ellos.
En los tres tipos de parsitos podemos identificarlos por mtodos
coproparasitoscpicos directos o cualitativos como faust, en los tres tipos
podemos encontrarlos como trofozotos en heces diarreicas y como quiste en
heces semislidas y solidas.
6-Diga qu otras amibas intestinales pueden establecerse en el humano y
describa la morfologa de la etapa diagnstica de las mismas.
Son las ms numerosas . Entre ellas la de mayor patogenicidad y de mayor
importancia medica es: Entamoeba histolytica.
Amebas no patgenas intestinales (comensales): E. coli, E dispar, E hartmanni ,
Endolimax nana y Iodamoeba butschlii. Entamoeba gingivalis es un comensal de
la boca.
7-Cul es la diferencia entre un protozoario parsito y uno comensal?
El comensal tiene la cualidad de que se aloja en el husped se alimenta de l pero
sin llegar a provocarle algn dao, sin embargo, el parasito protozoario si ocasiona
dao al alojarse en el husped y alimentarse de el.
8-Qu ventajas presentan el uso de las tcnicas de tincin permanente en
la identificacin de los protozoarios intestinales?
Permite observar de mejor manera las estructuras internas de los parsitos para
as poder confirmar el diagnostico de la parasitosis.

9-Diga qu tcnicas de tincin permanente existen para la identificacin de

los protozoarios anteriormente mencionados.
Los tres tipos se pueden teir con lugol, otra tincin es la eosina-hematoxilina y es
muy til cuando se encuentra en tejido el parasito
10-Clasifique a los protozoarios anteriores de acuerdo a sus rganos de
locomocin.
Los tres tipos de parsitos tienen su forma de locomocin a travs de
pseudpodos
1.-Describa morfologa del trofozoito de Trichomonas Vaginalis.
Trofozoito: presenta un tamao 10-20 m de longitud y una morfologa piriforme.
Posee 5 flagelos: cuatro son anteriores y libres, y el quinto se dirige hacia la parte

posterior del cuerpo celular asociado a la superficie celular formando una

membrana ondulante que no tiene porcin libre del flagelo.Carece
de mitocondrias y posee en su lugar unos orgnulos denominados cuerpos
paracostales y paraxostilares. Reproduccin por divisin binaria longitudinal,
pudiendo alcanzar millones de individuos en poco tiempo. No
presentan reproduccin sexual.
2.-Describa la morfologa del quiste y del trofozoito de Giardia lamblia
Trofozoto: miden 10 - 12 m de longitud, son piriformes, con superficie dorsal
convexa y ventral cncava. Sus movimientos en espiral dan la impresin de "una
hoja de rbol que cae". Carecen de mitocondrias y peroxisomas, y presentan
mitosomas minsculos <2 m y nuclolos
Quiste: ovales, miden entre 11-14 m de longitud y contienen 4 ncleos y
estructuras residuales de la forma vegetativa (axonemas, restos de disco adhesivo
y cuerpos medianos). La resistente pared qustica est formada por una capa
filamentosa externa y una capa membranosa interna. Su grosor es de 0.3 - 05 m.
3.-Indique el micro hbitat en el hospedero humano de cada uno de los
parsitos mencionados
La enfermedad se contrae principalmente a travs de alimentos y agua
contaminados con materia fecal de hospederos infectados. No debe ser excluido
el potencial zoontico derivado de la convivencia con ganado lechero y animales
de compaa infectados.
4.-Que enfermedad produce cada uno de los protozoarios arriba
mencionadas
Giardia lamblia produce Giardiasis
Trichomonas vaginalis produce Tricomoniasis
5.-De manera breve explique el ciclo vital de cada uno de los protozoarios
anteriormente mencionados

T. vaginalis vive exclusivamente en el tracto urogenital de los seres humanos. En

las mujeres se encuentra en la vagina y en la uretra, mientras que en los hombres
puede hallarse en la uretra, la prstata y el epiddimo.Para su desarrollo ptimo un
pH de 5,5, por lo que no va a ser capaz de sobrevivir en una vagina sana, cuyo pH
ser de 4-4.Una vez que prospera la infeccin el propio parsito producir un
aumento de la alcalinidad del medio para favorecer su crecimiento. Desde este
momento, los trofozoitos se dividirn incrementando su nmero. En el momento en
el que se produzca un contacto sexual los trofozoitos estarn en disposicin de
infectar al nuevo hospedador.
Giardia lamblia vive en forma de trofozoito en la luz del intestino
delgado (principalmente en el duodeno) adherido a las vellosidades intestinales
por medio de los discos bilobulados. Se alimenta y se reproduce hasta que el
contenido intestinal inicia el proceso de deshidratacin, momento en el que
comienza el enquistamiento del trofozoito. Pierde los flagelos, adquiere una
morfologa ovalada, se rodea de una pared qustica y madurez. Los quistes
expulsados junto a las heces ya son infectantes. Cuando dichos quistes son
ingeridos por un nuevo hospedador, llegan al duodeno, donde se disuelve la pared
qustica, dando as lugar a un individuo tetranucleado que se divide

inmediatamente en dos trofozoitos binucleados que se anclan al epitelio intestinal,

cerrando as su ciclo vital.

6.-Diga los mtodos de diagnostico directo que pueden utilizarse para la

identificacin de los protozoarios anteriores, asi como la muestra biolgica y
las etapas o formas diagnosticas que se hallaran con cada uno de ellos
Giardia lamblia:
Observacin microscpica de trofozotos (en materia fecal acuosa - mediante el
examen directo en fresco, con solucin salina y lugol) y quistes (en materia fecal
slida o semislida - se utilizan exmenes coproparasitoscpicos de concentracin
por flotacin), estudios de baja sensibilidad y alta especificidad. Si resultan
negativos, se opta por ELISA para captura de coproantgenos. - Tcnicas basadas
en la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
Trichomonas vaginalis:
El pH de la secrecin vaginal normal oscila ente entre 3.8 y 4.2. Un pH mayor a
4.5 se observa en aproximadamente 80 % de las mujeres con vaginosis
bacteriana y tricomoniasis.
7.-Diga que otros protozoarios flagelados intestinales y cavitatorios pueden
establecerse en el humano y describa la morfologa de la etapa diagnostica
de las mismas.
Entamoeba histolytica: quiste, infectantes, son esfricos y miden 10 - 15 m.
Presentan 1 - 4 ncleos con las mismas caractersticas del trofozoto, cuerpos
cromatoidales de bordes curvos y una masa de glucgeno cuando son inmaduros.
Entamoeba dispar: Quiste uninucleado de 12-14 um con cromatina nuclear
perifrica fina y uniformemente distribuida y cariosoma central compacto y
pequeo
8.-Diga que tcnicas de tincin permanentes existen para la identificacin
de los protozoarios anteriormente mencionados.
Coloracin tricromica
Hematoxilina eosina
9.-Cuales son las caractersticas tintoriales de Giardia lamblia y de
Trichomonas vaginalis con las tcnicas de tincin mencionadas
anteriormente.
Coloracin tricromica tiene afinidad para diferenciar el ncleo celular, el
citoplasma y las fibras de colgeno.
Hematoxilina eosina: El mtodo es la aplicacin de la tincin de hematoxilina, que
por ser catinica o bsica, tie estructuras cidas (basofilas) en tonos azul y
prpura,