Rsum du Thme propos pour communication pour les Sixime journes

Scientifiques et Techniques Phytosanitaires

Thme:Prparation de conservateurs :Chitosane et Carboxymthylchitosane

partir dune biomasse marine

Propos par : Mr TAZDAIT Djaber Tl : 021-30-94-84 ou 051-95-43-31, Email :
djaber888@hotmail.com

Introduction
Lactivit humaine, particulirement industrielle, produit des quantits phnomnales
de dchets. Certains de ces dchets ont une grande valeur que la biotechnologie permet de
matrialiser.
Les dchets de la production commerciale piscicole et coquillire et de la
transformation des produits de la mer sont, synonymes de problme, mais ils offrent
galement dexcellentes possibilits dexploitation. Llimination de ces dchets a toujours
t dispendieuse et a souvent eu un impact nuisible sur lenvironnement. En effet, pendant
longtemps, les conserveries de crustacs produisaient de grande quantit de dchets qui
ntaient pas recycls et taient simplement rejets la mer, crant de srieux problmes de
pollution au voisinage des sites de production. Daprs les donnes statistiques fournies par la
FAO (Organisation des Nations Unies pour lAlimentation et lAgriculture), et titre
dexemple, la production globale de crevettes, toutes espces confondues, issues de la pche
et des levages aquacoles, a augment de 4 millions de tonnes durant lanne 1999. Ce qui
conduit, une augmentation invitable des dchets de lindustrie de la crevette, et avec elle
laugmentation des risques de pollution. Mais grce aux progrs techniques et au
dveloppement des marchs, il est maintenant possible, de transformer ce flux de dchets en
produits utiles et commercialisables
La dcouverte de la chitine et de son driv dactyl (chitosane) date du 18me sicle,
mais ce nest que dans les annes 1970 que ces polymres ont suscit un rel intrt.
Dans le rgne animal, la chitine est un lment structural important des tguments de
certains invertbrs tels que les insectes, les mollusques, les crustacs et les nmatodes. Dans
le rgne vgtal, elle nest signale que dans les parois des champignons et de certaines algues
chlorophyces. Cest un polymre de haut poids molculaire, form dunits de N- actylglucosamine.
En labsence de donnes statistiques concernant la consommation, dans notre pays, de
crustacs en gnral et celle des crevettes en particulier, on connat mal limpact ngatif que
peuvent avoir ces dchets sur notre environnement proche.
Dans cette optique, nous nous sommes attels, dans le cadre de ce travail, valoriser
les dchets, constitus de carapaces de crevette appartenant lespce Parapenaeus
longirostris communment appele crevette blanche, et typique de la mer mditerrane. Nous
avons dans un premier temps, optimis lextraction de la chitine par voie chimique. Laquelle
chitine, nous a servi pour prparer et caractriser deux de ces drivs savoir le chitosane et
le carboxymthylchitosane. Nous avons ensuite utiliss ces polymres comme agents
conservateurs, dans le cadre dune application dans le domaine agronomique visant
prolonger la dure de stockage dun fruit. Notre choix a port sur la tomate, car elle constitue
un fruit de large consommation dans notre pays. Par ailleurs, une bonne partie de la culture de
la tomate est ralise dans le sud, son acheminement vers les rgions du nord se fait par voie
terrestre, ce qui requiert une dure de conservation plus importante durant le transit.

92

I- Gnralits :
I.1 La chitine : La molcule de chitine fut dcrite pour la premire fois en 1811 par Henri
Braconot.La chitine est le deuxime biopolymre naturel le plus abondant dans la nature aprs
la cellulose (Shahidi et al., 1999 ; Weber, 2000 ; Rolland, Mumper, 2001). Sa biosynthse
annuelle dorigine marine est estime plus de 109 tonnes (Felt, 1999). Cest un biopolymre
biodgradable et biorsorbable, deux proprits primordiales notre poque o la protection
de lenvironnement joue un rle important. De plus, la chitine est non toxique et
biocompatible (Campana, Signini, 2001). Largement prsente au sein du rgne animal, elle
constitue le squelette polysaccharidique de plusieurs groupes : arthropodes, annlides,
mollusques et coelentrs (Kerkut, Gilbert, 1985). Ainsi le traitement annuel des rejets de
conserveries de crustacs fournit environ 37300 tonnes de chitine de par le monde.
a) Caractrisation de la chitine :
a.1) structure chimique : La chitine possde une structure chimique similaire celle de la
cellulose. La diffrence rside dans la substitution du groupement hydroxyle en position C2
par un groupement actamide (NHCOCH3) (Kerkut, Gilbert, 1985).
a.2) Degr de dactylation : Le degr de dactylation (DD) reprsente une caractristique
essentielle de la chitine. Il reprsente la fraction dunit glucosamine par rapport au nombre
total dunits.
b) Extraction de la chitine : La chitine coexiste avec des substances minrales et des
protines. Pour lextraire, il faut donc dtruire les premires par lacide chlorhydrique et les
deuximes par hydrolyse alcaline.
c) Drivs de la chitine :
c.1) Le chitosane : Le terme chitosane, loin de rpondre une seule et unique structure
chimique bien dfinie, sadresse toute une famille de copolymres composs de N-actyl-Dglucosamine et de D-glucosamine en proportions variables (Felt, 1999). Il est obtenu par
dsactylation totale ou partielle de la chitine. Dans la nature, le chitosane est rare et nest
prsent que dans les parois dune classe particulire de champignons, les Zygomyctes
(Rhizopus, Mucor, etc.) (Juang et al., 2002) et chez certains insectes comme dans la paroi
abdominale des reines termites (Seng, 1988). Nanmoins la majorit des chitosanes
commercialiss proviennent de la dsactylation alcaline de la chitine chaud (Fernndez,
Fox, 1997 ; Benesch, Tengvall, 2002). On parlera de chitosane si le D.D est suprieur 60%
(David et al., 2004).
c.1.1) Solubilit du chitosane :
Le chitosane est typiquement insoluble dans leau et les solutions alcalines. Il est
cependant, soluble dans les solutions minrales ou organiques dilues, except dans lacide
sulfurique et un moindre degr dans lacide phosphorique (Chenite et al., 2001).
c.2) Drivs carboxymthyls de la chitine et du chitosane :
Lintroduction de groupes carboxymthyles dans la chitine ou dans le chitosane
conduit la formation de drivs anioniques (Kurita, 2001).
c.2.1) O-carboxymthylation de la Chitine et du chitosane :
Cette raction touche prfrentiellement le carbone 6 des rsidus glucosamines
actyls ou pas. Elle est ralise en milieu alcalin en prsence de lacide monochloroactique .
c.2.2) N-carboxymthylation de la chitine et du chitosane :
Cette raction contrairement la prcdente est rgioslective, elle touche uniquement
les groupes amines de la chitine ou du chitosane. Ces derniers ragissent avec lacide
glyoxylique (OCHCOOH) en milieu acide formant la base de Schiff qui est convertie en Ncarboxymthyle chitosane par rduction au cyanoborohydrure de sodium (NaCNBH3) (Kurita,
2001).

93

II. Matriel et mthodes :

II.1 Prparation de la chitine et de ces drivs : Les carapaces de crevettes ont t
collectes dans des restaurants de la capitale. Ces dchets appartiennent lespce
Parapenaeus longirostris, identifie au niveau du Laboratoire Halieutique, Facult des
Sciences Biologiques, U.S.T.H.B.
II.1.1 Prtraitement des carapaces : Avant leur utilisation, les dchets de carapaces sont
dabord dbarrasss de leurs antennes et autres pattes. Ils subissent ensuite un prtraitement
selon Mukherjee (Mukherjee, 2001), qui consiste en un lavage nergique afin dliminer les
rsidus organiques (tissus) et bouillis pendant 1 heure. Aprs schage, les carapaces subissent
le quenching : ce traitement permet de casser la structure cristalline de la chitine contenue
dans la carapaces, facilitant ainsi son extraction. Il consiste placer les carapaces prpares
comme indiques ci-dessus dans ltuve 80C, pendant 48 heures. Elles sont ensuite
rapidement plonges dans un bain froid dactone, contenant de la glace.
II.1.2 Analyses physico-chimiques des carapaces :
II.1.2.1 Le taux de cendre : Le taux de cendre est dtermin selon le protocole suivant :
(Fernandez-Kim, 2004)
Placer 2g de carapaces broyes dans un creuset en verre, pralablement chauff pendant 15
minutes dans le four moufle, refroidi et pes. Le poids de la cendre est exprim en
pourcentage par rapport au poids initial.
II.1.2.2 La teneur en chitine : La dtermination de la teneur des carapaces en chitine est
ralise par dosage des rsidus N-actyle glucosamines librs par hydrolyse acide de la
chitine, ralise avec de lacide chlorhydrique 6N pendant 6heures (Loiseleur, 1963).
II.1.2.3 Teneur en protines : La dtermination de la fraction protique des carapaces a t
ralise par la mthode de Kjeldhl.
II.1.2.4 Dtermination de la densit apparente : La densit apparente est dtermine par le
rapport du poids dun chantillon son volume apparent. On utilise pour cela un pycnomtre
de volume connu.
II.1.3 Optimisation de lextraction de la chitine partir des dchets de carapaces :
II.1.3.1 Optimisation des conditions de la dminralisation :La dminralisation a t
ralise, par traitement des carapaces avec de lacide chlorhydrique. Trois paramtres ont t
optimiss, dans le cadre de ce travail savoir : la concentration dacide, le temps de raction,
le rapport poids/ volume, lagitation tant maintenue constante. La raction de
dminralisation est apprcie, par dtermination du taux de cendres, suivant le mme
protocole que prcdemment.
II.1.3.2 Optimisation des conditions de la dprotinisation : La dprotinisation a t
accomplie, en soumettant les carapaces dminralises suivant les conditions optimises, un
traitement alcalin par la soude. On procde de la mme manire que prcdemment, c'est-dire, que chaque paramtre est optimis en maintenant les autres paramtres de la raction,
constants. Dans ce cas, quatre paramtres ont t optimiss : la concentration de soude, le
rapport : poids de carapaces/ volume de soude, le temps de raction ainsi que la temprature.
Lagitation, a t toujours maintenue constante. Lapprciation de la dprotinisation, est
rendue possible, par dosage des protines dans le surnageant. La mthode choisie pour le
dosage des protines est la mthode Biuret (1949).
II.1.3.3 Post-traitement de la chitine : dcoloration et blanchiment : La dcoloration ainsi
que le blanchiment de la chitine extraite, ont t ralise selon la mthode de No et al.,
(1989), qui consiste tremper la chitine dans un bain dactone, pendant 10 minutes, au terme
des quelles, elle est rcupre et sche pendant 2 heures temprature ambiante. Ltape du
blanchiment quant elle, est ralise, en mlangeant la chitine dpigmente avec une solution
deau de Javel 0,315% (v/v), pendant 5 minutes avec un rapport masse/volume de (1/10). La

94

chitine est finalement rcupre, lave abondamment avec de leau du robinet, rince avec de
leau distille et sche ltuve 60C pendant 4 heures .
II.1.4 Prparation du chitosane : Nous avons prpar deux chitosanes suivant deux
protocoles diffrents.
II.1.4.1 Protocole 1 : Le chitosane a t obtenu selon la mthode de Kolodziejska, WojtaszPajak, (2000), par dsactylation de la chitine extraite par une solution de soude, selon le
mode opratoire suivant :
La chitine a t traite avec une solution de soude 50%, dont la proportion
masse/volume est 1/10, la solution est agite pendant 60 minutes 140C.
II.1.4.2 Protocole 2 : Dans ce cas, le chitosane a t prpar selon la mthode de Mirzadeh et
al., (2002). Dont voici les tapes :
La chitine est traite avec une solution de soude 50%, avec une proportion dun
gramme pour 50ml, la solution est agite pendant 3 heures 90C. Au terme de la raction, la
solution est filtre sur un tamis, le chitosane retenu est lav en continu, afin dliminer la
soude rsiduelle, et ce jusqu ce que le pH de leau du lavage atteigne la neutralit. Le
chitosane est rinc avec leau distille puis scher ltuve 80C.
II.1.5 Prparation du N.O Carboxymthyle chitosane : Le N.O Carboxymthyle chitosane
a t prpar selon la mthode de Hayes (1986) (Liu et al., 2001). 20g de chitosane sont
mlangs avec 200ml disopropanol sous agitation, 50,4 ml de NaOH (10M) sont alors
ajouts en six portions gales sur une priode de vingt minutes. On laisse ragir pendant
encore 45 minutes, avant dajouter 24g dacide monochloroactique en cinq portions gales
cinq minutes dintervalles. Le mlange est chauff pendant trois heures 60C, et ce avant
dincorporer 17 ml deau distille. Le pH est ajust 7 avec de lacide actique glacial. Enfin,
le mlange est filtr sur un tamis (140m), lav et sch ltuve 60C.
II.1.6 Caractrisation des produits prpars :
II.1.6.1 le taux de cendres : Le taux de cendres a t dtermin selon la mthode de No et
al., (1989), cite prcdemment.
II.1.6.2 Poids molculaire : Les mesures ont t ralises laide dun viscosimtre de type
Ubbelohde. Le poids molculaire moyen des polymres prpars dans le cadre de ce travail,
a t dtermin partir de lquation de Mark-Houwink (Sabnis, Block, 2000) : [] =
K.(M)a .O [] reprsente la viscosit intrinsque du polymre, K et a sont des constantes
qui dpendent de la temprature et du solvant utilis.
II.1.6.3 Degr de dactylation (DA) : Les mesures ont t ralises laise dun
spectrophotomtre infrarouge. Le degr dactylation de la chitine et des chitosanes a t
calcul suivant la formule suivante : DA = (A1655 / A3455 ) . 100 / 1,33.
II.2 Application du chitosane et de son driv carboxymthyl dans la protection dun
fruit : Lapplication mene dans le cadre de ce travail, consiste en la protection dun fruit, la
tomate en loccurrence, par le chitosane (C) et de son driv carboxymthyl (CC). Le but
tant de prolonger la dure de stockage du fruit aprs la rcolte.
II.2.1 Prparation des tomates : La tomate qui appartient lespce Lycopersicon
esculentum Mill, a t rcolte dans une exploitation agricole situe Bordj-El-Kiffan. Les
essais ont port sur 200 tomates matures et vertes, de tailles similaires et saines. Avant leur
traitement, les tomates sont dsinfectes par immersion dans une solution deau de Javel
10% pendant trois minutes, et sches lair libre.
II.2.2 Prparation des solutions de Chitosane et de carboxymthylchitosan :
Deux solutions 0,5% et 2% (P/V) de chaque polymre ont t prpares dans du HCl 0,25
N. Les solutions sont additionnes de Tween 80 avec une proportion de 0,1 (v/v) qui a la
proprit daugmenter la mouillabilit des solutions. Une solution qui sert de tmoin est
prpare, en mlangeant le Tween 80 toujours avec la mme proportion, avec de leau
distille strilise. Les tomates sont rparties en cinq lots comprenant chacun vint tomates.
95

Chaque lot est trait par immersion dans chaque solution de polymre et dans la solution
tmoin. Aprs schage lair libre, les lots sont stocks temprature ambiante (30C). Le
mme nombre de lots est prpar, dans ce cas le stockage se fait 20C.
II.2.3 suivi des paramtres physico-chimiques durant le stockage :
A)Les paramtres physiques : Le suivi des paramtres physiques suivants, a port sur cinq
tomates de chaque lot.
A1) le poids : Les mesures du poids sont ralises quotidiennement.
A2) Lindice de couleur : Lapprciation de la couleur est faite visuellement, en se rfrant
une chelle de 1 6 daprs The U.S. Department of Agriculture Visual Color Chart (El
Ghaouth et al., 1992). Les chiffres indiquent les diffrentes teintes quadopte la tomate au
cours du mrissement : 1 : vert ; 2 : vert cass ; 3 : virage au rose (1/3) ; 4 : virage au rose
(2/3) ; 5 : rouge clair ; 6 : rouge vif.
La dtermination de lindice de couleur est effectue tous les deux jours.
A3) la texture : (indice de fermet) Lapprciation de la texture est ralise de
manire subjective, par pressage avec le doigt ce qui permet dtablir une chelle de trois
points : (Worrell et al., 2002).
1 : fruit incompressible ;2 : fruit spongieux (dformation rversible) ; 3 : fruit mou
(dformation permanente).
Lapprciation de ce paramtre se fait galement tous les deux jours.
B)Les paramtres chimiques : Les mesures sont ralises tous les deux jours, et portent sur
les quinze tomates restantes de chaque lot.
B1) dosage de lacidit titrable : Lacidit a t dtermine selon la mthode de Brecht et
al., (1976), qui consiste titrer un chantillon de 25 g de tomate tritures, par une solution de
NaOH 0,1 N, jusqu pH = 8,1. Le volume de base vers est soigneusement not.
B2) Dosage des sucres rducteurs : Le dosage des sucres rducteurs a t effectu par le
3,5-DNS (acide 3,5-dinitrosalicylique).
B3) Dosage des sucres totaux :Le dosage des sucres totaux a t effectu par la mthode
Dubois et al., (1956) .
B4) Dosage de lacide ascorbique (vitamine C) : Nous avons opt dans le cadre de ce
travail, pour le dosage par le 2,6-dichlorophnol-indophnol (D.C.P.I.P). Le dosage est bas
sur loxydation de la vitamine C par une solution de (D.C.P.I.P) (sel de sodium dihydrat), qui
est rduit en son leucodriv, en milieu acide.

96

100
95
90
85
80
1

6 11 16 21 26

Priode de
stockage (jours)

C 2%
C 0,5%
CC 2%
CC 0,5%
Contrle

Fig3 : Variation de la perte de poids de la tomate

durant le stockage temprature ambiante.

Perte de poids (%)

Perte de poids (%)

III. Rsultats et discussion

III.1 Composition chimique des carapaces : Les carapaces de la crevette Parapenaeus
longirostris sont composes de 23,7 % de chitine par poids sec. Le taux de protines obtenu
est relativement lev de lordre de 40 % et ce contrairement au taux de cendres qui est
relativement faible de lordre de 20 %.
III.2 Optimisation de lextraction de la chitine :
III.2.1 Optimisation des conditions de la dminralisation :
Les conditions optimales de la dminralisation des carapaces de lespce
Prapenaeus longirostris obtenues sont : concentration de HCl gale 1,5 N, un rapport
volume dacide/ masse de lchantillon de (15/1), temps de raction gale 1 heure.
III.2.2 Optimisation des conditions de la deprotinisation :
Les conditions optimales inhrentes la deprotinisation sont les suivantes : pour un
gramme de carapaces dminralis, il faut 20ml de Na OH 2 M, pendant 2 heures 45C.
III.3 Caractrisation de la chitine et des chitosanes produits :
III.3.1 Poids molculaire : Le poids molculaire moyen de la chitine est compris entre 1,03
106 et 2,5 106 (Majeti et al., 2000). La chitine obtenue dans le cadre de notre travail, prsente
une masse molaire viscosimtrique de 3,38 105. Le poids molculaire (PM) du chitosane varie
selon sa source, mais aussi, selon la mthode de sa prparation. Les valeurs de PM des
chitosanes I et II, sont relativement faibles, compares ceux cites dans la littrature. On
remarque par ailleurs, que les PM des chitosanes sont similaires.
III.3.2Le Degr de Dactylation (DD) : Le degr de dactylation de la chitine obtenue est
relativement faible (35%). Le rsultat obtenu, suggre que la chitine prpare dans notre
travail, aurait subi, dans une certaine mesure, une dactylation, ce qui justifierait la valeur du
DD obtenue.
III.3.3 La densit apparente : La chitine extraite dans notre travail partir de la crevette
Parapenaeus longirostris est peu poreuse, car elle prsente une densit apparente gale
0,21, proche de celle de la chitine de crabe. La densit des chitosanes I et II est proche de
celle du chitosane de crabe, notamment celle du chitosane I.
III.3.4 Le taux de cendre : Les chitosanes I et II, prsentent une teneur en cendre de 0,19%
et 0,2% respectivement. La chitine quant elle prsente une teneur de 0,22%. La mesure du
taux de cendre est un bon indicateur de lefficacit de la dminralisation. Un chitosane de
qualit leve devrait avoir une teneur en cendre infrieure 1% (Fernandez-Kim, 2004). Il
en est de mme pour la chitine (Mansencal, 1999).
III.4 Application des polymres prpars dans le prolongement de la priode de
stockage de la tomate :
III.4.1 Variation du paramtre poids durant le stockage : La perte de poids du fruit
correspond en fait, une perte en eau, qui survient tout au long de la phase du mrissement.
La variation du poids du fruit en fonction du temps et montre sur les figures 3 et 4
100
95
90
85
80
1 7 13 19 25
Priode de
stockage (jours)

C 2%
C 0,5%
CC 2%
CC 0,5%
Contrle

Fig4 : Variation de la perte de poids de la tomate

durant le stockage 20C

97

Indice de couleur

Indice de couleur

Lutilisation de film protecteur de chitosane 0,5 et 2% (C0,5% et C2%) et le

carboxymthylchitosane aux mmes concentrations (CC 0,5% et CC2%), semble avoir un
effet sur la perte de poids durant le stockage de la tomate temprature ambiante, et ce par
rapport au contrle. Lemploi de ces biopolymres, semble rduire de prs de 8% la perte en
eau de la tomate durant son stockage. Les deux biofilms, semblent avoir un effet identique,
indpendamment de leurs concentrations (diffrence non significative). Lemploi de ces
biopolymres, semble rduire galement de 8% la perte en eau de la tomate durant son
stockage 20C, par rapport au contrle. Ceci indique, dune part, que leffet des deux
biofilms aux deux concentrations testes est le mme et que dautre part, la temprature ne
semble pas influencer cet effet.
III.4.2Variation du paramtre indice de couleur durant le stockage :

10
C2%

C0,5%

CC2%
1 5 9 13 17 21 25

CC0,5%

Priode de stockage
(jours)

Contrle

Fig 5 : Variation de lindice de couleur de la

tomate durant le stockage temprature ambiante.

8
6
4
2
0

C 2%
C 0,5%
CC 2%
1

6 11 16 21 26

CC 0,5%

Priode de stockage
(jours)

Contrle

Fig 6 : Variation de lindice de couleur de la

tomate durant le stockage 20C

Contrle

Fig7 : Variation de lindice de la fermet de

la tomate durant le stockage temprature ambiante.

29

CC0,5%

Priode de stockage
(jours)

CC 2%
24

1 5 9 13 17 21 25

C 0,5%
0
18

CC2%

C 2%

C0,5%

12

C2%

4
3
2
1
0

Indice de fermet

Indice de fermet

Le carboxymthylchitosane et le chitosane tests aux concentrations indiques en dbut de

texte, affectent la couleur de la tomate, temprature ambiante, (figure 5). Les lots de tomates
couvertes par les biofilms deviennent rouges plus tardivement que le lot du contrle. En effet,
la couleur rouge est adopte par les tomates couvertes vers le 18me jour pour les C2% et
C0,5%, vers le 17me jour pour le CC0,5% et enfin vers le 20me jour pour le CC2% et au bout
de 13 jours pour le contrle. On constate que leffet du carboxymthylchitosane est meilleur
que celui du chitosane. Concernant les rsultats des essais effectus 20C (figure 6), le
temps au bout duquel les tomates acquirent la couleur rouge, se voit prolonger de 8 jours
pour le contrle, de 10 jours, 9 jours, pour le C2%, C0,5%, respectivement et 11 jours pour
CC0,5% et CC2%. La temprature de stockage semble influencer la couleur des tomates. Au
vu de ces rsultats, lindice de couleur ne semble pas dpendre de la concentration des
biofilms.
III.4.3 Variation du paramtre indice de fermet durant le stockage :
Les rsultats des essais effectus temprature ambiante et 20C, sont consigns sur les
figures 7 et 8

Priode de stockage
(jours)

CC 0,5%
Contrle

Fig 8 : Variation de lindice de fermet de la

tomate durant le stockage 20C

98

C2%
C0,5%
27

17

CC2%

Priode de stockage
(jours)

CC0,5%

Acidit (mg d'acide

citrique/100ml
d'homognat)

300
200
100
0
0

Acidit titrable (mg

d'acide citrique/100
ml d'homognat)

A temprature ambiante, lindice de fermet de 3 (fruit mou), est atteint au bout dune priode
de 11 jours de stockage pour le lot non trait, au bout de 17 jours, pour les lots traits avec le
C 0,5% et C 2%, et au bout de 16 et 18 jours pour le CC 0,5% et le CC 2%, respectivement.
Lemploi des biofilms, semble influencer lindice de texture, en retardant le passage du fruit
dun tat de texture indformable, celui de texture molle. Le meilleur effet, tant obtenu
avec le CC2%. Par ailleurs, 20 C, lvolution de ce paramtre est diffrente .En effet, le
changement de texture concernant le contrle se produit au bout de 20 jours de stockage, celui
des lots traits avec le C 2% et C 0,5%, a lieu vers le 28me jour, et enfin celui des lots traits
avec le CC 0,5% et le CC 2%, a lieu vers le 29me et le 31me de stockage, respectivement
(figure 8).
III.4.4Variation de lacidit titrable durant le stockage : Lacidit titrable de la tomate
mature verte, varie selon la varit. Elle est comprise entre 320 et 450 mg dacide citrique /
100 ml dhomognat. Celle des tomates mures, est comprise entre 410 et 550 mg dacide
citrique / 100 ml dhomognat (Brecht et al., 1976). Dans notre cas, lacidit titrable des
tomates, mesure au stade mature vert (dbut de stockage), a une valeur moyenne de 107,28
mg dacide citrique/ 100 ml dhomognat. Elle atteint la valeur de 262,75 mg dacide citrique
/ 100 ml dhomognat au stade mr. Ces valeurs, sont en de de celles de la littrature
indiques ci-dessus. Les rsultats de lvolution de ce paramtre, temprature ambiante et
20C, sont montrs sur les figures 9 et 10.
300
250
200
150
100

Contrle

Fig 9 : Variation de lacidit titrable de la tomate

durant le stockage temprature ambiante.

C 2%
CC 0,5%
CC 2%
1

7 10 13

Priode de stockage
(jours)

C 0,5%
Contrle

Fig10 : Variation de lacidit titrable de la

tomate durant le stockage 20C.

Fig 11 : Variation de la teneur en A.A.R de la tomate

CC 2%
28

Contrle

C 0,5%
21

Priode de stockage
(jours)

CC0,5%

C 2%

14

27

17

CC2%

C0,5%

8
6
4
2
0
0

C2%

A.A.R (mg/ g de
poids frais)

10

A.A.R (mg/g de
poids frais)

A temprature ambiante, on remarque que, lacidit titrable se stabilise autour de

262,75 mg dacide citrique/ 100ml dhomognat, au bout du 13me jour de stockage pour le lot
non trait. Cette valeur est atteinte pour les lots traits avec les biofilms, et ce, au bout de 17
jours pour le lot trait avec le C 0,5%, au bout de 15 jours pour celui trait avec le CC 0,5%
et enfin, au 20me jour de stockage pour le lot trait avec le CC 2%. Le chitosane et le
carboxymthylchitosane 2%, semblent avoir la mme incidence. Les rsultats obtenus
20C, montrent que leffet des biofilms sest amlior. Notons, que le CC 2% et le C 2%,
exercent le mme effet cette temprature, et il demeure par ailleurs, le meilleur.
III.4.5 Variation de la teneur en acide ascorbique rduit durant le stockage :
Les rsultats de la variation de lA.A.R, des tomates traites avec les biofilms
temprature et 20C ambiante sont donns sur les figure11 et 12.

Priode de stockage
(jours)

CC 0,5%
Contrle

Fig 12 : Variation de la teneur en A.A.R de la

99

durant le stockage temprature ambiante

tomate durant le stockage 20C.

Une teneur en A.A.R de 5,64 mg/100g de poids frais, est obtenue au bout de 13 jours
de stockage pour le contrle. Cette teneur est maximale, elle correspond celle du fruit
ltat mr. Cette teneur, est atteinte au bout du 17me jour, pour le lots traits avec le CC 0,5%,
C 0,5% et le C 2% et au bout du 20me jour, pour le lot trait avec le CC 2%. Les biofilms
retardent donc le mrissement du fruit. Leffet des biofilms se voit amliorer 20C.

Priode de stockage
(jours)

Contrle

CC 2%
28

CC0,5%

C 0,5%
19

27

17

CC2%

C 2%

10

C0,5%

3
2
1
0
0

C2%

Sucres Rducteurs
(g/100g de poids
frais)

3
2
1
0
0

Sucres Rducteurs
(g/100g de poids
frais)

III.4.6 Variation de la teneur en sucres rducteurs durant le stockage :

Dans notre cas, la teneur des tomates en sucres rducteurs, varie au cours de leur
mrissement. On passe dune teneur moyenne de 0,5 g/100g de poids frais au stade vert
mature, 2 g/100g de poids frais au stade mr. Cette dernire valeur, est atteinte au bout de la
mme priode (17 jours) et ce pour tous les lots, y compris le contrle (figure 13). Ceci
indique, que les biofilms, nont aucun effet sur lvolution de la teneur des tomates en sucres
rducteurs, durant le stockage

Priode de
stockage (jours)

CC 0,5%
Contrle

Fig 13 : Variation de la teneur en sucres rducteurs Fig 14 : Variation de la teneur en sucres rducteurs
de la tomate durant le stockage temprature ambiante.
de la tomate durant le stockage 20C.

Priode de stockage
(jours)

Contrle

Fig 15 : Variation de la teneur en sucres totaux de la

tomate durant le stockage temprature ambiante.

CC 2%
28

C 0,5%
21

CC0,5%

5
14

27

17

CC2%

C 2%

10

C0,5%

15

C2%

teneur en sucres
totaux (g/100g de
poids frais)

15
10
5
0
0

Sucres Totaux
(g/100g de poids
humide)

Les biofilms semblent galement, ne pas exercer deffet sur lvolution de la teneur en
sucres rducteurs 20 C. Puisque cette teneur se stabilise au bout du 21me jour du stockage,
aussi bien pour les lots traits, que pour le lot du contrle (figure 14). Le seul effet constat,
cest celui de la temprature. En effet, la baisse de la temprature, a permis de retarder le
mrissement des tomates de 4 jours.
III.4.7 Variation de la teneur en sucres totaux durant le stockage :
La teneur en sucres totaux, varie durant le processus de mrissement de la tomate. Elle
passe de 1,3 g/100g de poids frais au stade mature vert, 12g/100g de poids frais, au stade
mr. Les rsultats du traitement des tomates, prsents sur la figure 15, indiquent que la
teneur en sucres totaux, atteint sa valeur maximale au bout de 13 jours pour le lot non trait,
ainsi que pour tous les traits. Ceci montre, que les biofilms utiliss, ne semblent pas exercer
un effet sur lvolution de la teneur en sucres rducteurs, au cours du mrissement des
tomates.

Priode de stockage
(jours)

CC 0,5%
Contrle

Fig 16 : Variation de la teneur en sucres

totaux de la tomate durant le stockage 20C.

100

A 20C, on remarque que, la valeur maximale de la teneur en sucres totaux, est atteinte
aprs 21 jours de stockage pour le lot non trait. Il en est de mme pour ce qui est des lots
traits, (figure 16). Ces biofilms, semblent, enfin, retarder la survenue du pourrissement et
rduisent galement son incidence. En effet, la proportion de tomates affectes par le
pourrissement, du lot non trait, est plus importante que celle observe dans les lots traits
avec les biofilms. Ce rsultat est en accord avec celui obtenu par El Ghaouth et al., (1992).
Ces biofilms semblent exercer un effet antifongique, contre le champignon Botrytis cinerea,
responsable du pourrissement.

Conclusion
La valorisation et lintrt ports ces deux biopolymres que sont la chitine et le
chitosane sont rcents : Ils datent dune trentaine dannes. Les proprits quils manifestent,
telles la biocompatibilit, bioactivit et biodgradabilit, ont permis dentrevoir de
nombreuses applications potentielles. Ce travail sest organis suivant deux axes : nous nous
sommes proposs dans un premier temps doptimiser lextraction de la chitine partir de
dchets de carapaces de crevettes. Ces dernires, rappelant le, prsentent un srieux problme
de pollution. Lanalyse de leur composition chimique, indique une forte teneur en protines de
lordre de 40%. Ces dernires peuvent faire lobjet dune valorisation, dans le but de les
utiliser comme complment alimentaire.
Nous avons dans un deuxime temps test le potentiel li lutilisation du chitosane et
de son driv carboxymthyl (carboxymthylchitosane), comme films protecteurs, pouvant
prolonger la dure de stockage des fruits. Notre choix sest port sur la tomate. Cette tude a
montr que lutilisation du carboxymthylchitosane 2% et 20C, a permis de retarder le
mrissement de la tomate, et ce, en affectant lvolution des paramtres physico-chimiques,
rvlateurs du processus de mrissement. Il a permis ainsi, de retarder la survenue de la
couleur rouge et de la texture molle de 11 jours par rapport au tmoin, et de retarder par
ailleurs, de 10 jours, la stabilisation de la teneur de la tomate en vitamine C. De plus, lemploi
de ce biofilm, a permis de retarder le pourrissement du fruit de 9 jours par rapport au tmoin.
Il est enfin, ncessaire deffectuer des tests supplmentaires portant sur loptimisation
de la concentration du biofilm par exemple, et dentamer des tudes de faisabilit, sur le plan
conomique, pour envisager son utilisation lchelle commerciale.

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