HEMOCULTIVO

Desarrolla el procedimiento a seguir para el cultivo de bacterias y hongos

presentes en muestras de sangre, a fin de detectar microorganismos causantes
de infecciones.
Se aplica a todas las muestras todas las muestras de sangre recolectadas en
frascos Bact Alert.
El cultivo se basa en la deteccin de microorganismos que desarrollan en los
frascos Bact Alert. Los frascos cuentan con un colorante en su parte inferior,
ste se encuentra absorbido a partculas de carbn, este colorante tiene la
capacidad de virar segn el pH del medio, herramienta que se utiliza para la
deteccin de crecimiento microbiano. Tienen en su exterior un estiquer con un
cdigo de barra el cual servir para obtener una identificacin nica de botella
y paciente.
Por lo general se indican en caso de funguemia o micobacteriemia en Huesped
Inmunocomprometido Severo, en paciente HIV positivo para investigacin de
Salmonella o Micobacterias, o en cualquier Huesped para investigar Brucella
spp
Los frascos Bact Alert vienen listos para su uso y se conservan a temperatura
ambiente.
Los estndares de reflectancia para la calibracin de las celdas se guardan en
su caja cuando no se los usa.
Se utilizan muestras de sangre recolectada en el correspondiente frascos Bact
Alert.
Si se solicita hemocultivo PARA KOCH Y HONGOS se deriva la muestra
Si se solicita hemocultivo PARA BRUCELLA se incuba por 20 dias:
Si se solicita hemocultivo PARA GERMENES COMUNES O SALMONELLA:
Se le pide al mdico que obtenga por lo menos un frotis para Gram. Se hace
inocular un frasco Bact Alert aerbico.
Llevar el tubo al equipo. Observar todos los das, por una semana, si existe
desarrollo bacteriano. En ese caso se producir una cada en el pH virando el
indicador absorbido en el fondo de la botella. Este cambio de color ser
detectado por el sensor ubicado en el fondo de la celda. De inmediato se
activar una alarma, indicndonos la presencia de un cultivo positivo. En este
caso, el frasco debe ser removido a la brevedad. Desde el Men Principal,
resaltar UNLOAD POSITIVES y presionar ENTER. Remover todas las botellas

de las celdas iluminadas, presionar Esc para volver al men principal. De

inmediato realizar Gram e informarlo al mdico.
En los cultivos negativos, no habr una disminucin en el pH, no cambiar el
color ni se activar el sensor. Al cabo de cinco das sin deteccin de crecimiento
microbiano, la muestra se considera negativa y el frasco debe ser removido del
equipo.
El tiempo de incubacin programado en el Instrumento es de 5 das. Si se trata
de pacientes transplantados, HIV positivos o sospecha de endocarditis o
grmenes fastidiosos, cambiar el tiempo de incubacin a 30 das.
En caso de sospecha de Brucelosis, se debe cambiar el tiempo de incubacin a
20 das ( este microorganismo es altamente contagioso ) . Si el equipo indica
que es un hemocultivo es positivo, debe trabajarse bajo cmara de
bioseguridad biolgica.
Los HEMOCULTIVOS PARA KOCH se derivan.
Los HEMOCULTIVOS PARA HONGOS (tcnica de lisis centrifugacin) se
obtiene en tubos especiales con heparina , se inoculan con 9 ml de sangre para
pacientes adultos y 1,5 ml para peditricos y se derivan.
Los RETROCULTIVOS son obtenidos por el medico o por el personal de
enfermera autorizado por el mismo. Debe obtenerse para RETROCULTIVO
CUALITATIVO 10 ml de sangre en frasco de hemocultivo aerobio y enviar
conjuntamente un frasco con 10 ml de sangre PERIFERICA . Incuban 5 das
Si se decide la extraccin de vial positivo, primero se debe imprimir los datos
correspondientes a la muestra y paciente al que pertenece y ubicacin en la
serie.
Luego de extraer el frasco se extrae una alcuota
procede a:

con jeringa estril

y se

Rotular un portaobjeto y realizar con la alcuota un frotis para coloracin de

Gram
Extremar las precauciones en el manejo de jeringas y agujas.
Si se observan bacilos Gram negativos:
Sembrar en CLDE, Agar Chocolate (ACH) y Agar Sangre (AS). Hacer
Antibiograma tentativo. ( colistin, meropenem, piperatazo, imipenem,
gentamicina, amicacina, cefotaxima, ceftacidima, ciprofloxacina)

Si se observan cocos Gram positivos en acmulos:

Sembrar media placa de Agar Sangre y hacer una estra en agar DNAsa y
Manitol salado. Solo se hace cefoxitina (Oxacilina) tentativa y en caso de
encontrar Estafilococos en otra muestra clnica relacionada con la serie o en la
serie se completa el antibiograma con oxacilina, rifampicina, TMS, vancomicina
y gentamicina.

Si se observan cocos Gram. Positivos en cadena:

Se procede a sembrar un A. Sangre y A.chocolate. Se colocan sendos disco de
Optoquina, Oxacilina de 1 Ug para screening de la sensibilidad a betalactmicos y Bacitracina. Vancomicina, ampicilina y Bilis-Esculina.

Si se observan grmenes con morfologa de anaerobios se deriva

Si se observa mezcla de grmenes G. Positivos y G. Negativos:
Sembrar CLDE , A.chocolate y
tentativos

A. Sangre. No se hacen Antibiogramas

Si no se observan bacterias:
Es posible que se trate de un Falso Positivo, o bien que se trate de bacterias
pequeas o filamentosas que se confunden con el background. Antes de
decidir que es negativo, hacer una observacin en fresco para ver
Campilobacterias o bacterias filamentosas mviles, tras lo que se inoculan los
medios adecuados para el subcultivo. Si el examen en fresco tambin es
negativo, se procede a reingresar el frasco al Instrumento siempre que no
hayan pasado ms de dos horas de haberlo extrado. Inocular un A. Chocolate
y Caldo BHI, los que se observan por tres das para ver crecimiento.
Si se observan levaduras: Sembrar Agar Sab. y A. Sangre. Luego con colonia
fresca sembrar en Agar Morfologa y Crhom Agar

H e m o c u ltiv o
P O S IT IV O

N o s ig n ific a tiv o s

C lin ic a m e n te
s ig n ific a tiv o

Id e n tific a c i n y A T B

C o n ta m in a n te s

B a c te r ie m ia
tr a n s ito r ia

N o e s tu d ia r

E s tu d ia r

Grmenes que raramente son contaminantes

HEMOCULTIVOS
GRMENES QUE NUNCA SON CONTAMINANTES
GRUPO

S. pneumoniae
H.influenzae
N.meningitidis
Brucella spp
M. tuberculosis

N.gonorroheae
HACEK

P.multocida
S.moniliformis
L.monocytogenes
Bacteroides, Prevotella,
Porphyromonas,
Fusobacterium

GRUPO
B

S.aureus
S.pyogenes
S.agalactiae
S. grupo C y G
Enterobacterias
BNF (principalmente Pae y Aba)
C.albicans
Enterococcus ???

Grmenes que en la mitad de las veces son clnicamente significativos

GRUPO C

S. viridans
Clostridium spp (excepto C. septicum)
C. tropicalis y parapsilosis
Grmenes que generalmente son contaminantes
GRUPO D

SCN
Difteroides
Bacillus spp
P.acnes

Aislamientos de los:
GRUPO C

GRUPO D

Evaluar todos estos parmetros en conjunto

Clnica compatible
N de aislamientos
Aislamiento en una muestra estril (vlvula cardaca, lquido articular, LCR, etc)
Aislamiento precoz (> 48 hs, probable contaminante)