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TRABAJO RECEPCIONAL
MONOGRAFIA
PRESENTA
Daniel Onofre Santos Garca
ORIZABA, VER.
MAYO, 2014
AGRADECIMIENTOS
NDICE
NDICE DE FIGURAS...................................................................................................... 6
NDICE DE TABLAS........................................................................................................ 6
RESUMEN.................................................................................................................... 8
1.
INTRODUCCIN...................................................................................................... 9
2.
3.
OBJETIVOS.......................................................................................................... 11
OBJETIVO GENERAL............................................................................................. 11
3.1.
4.
MARCO TEORICO..................................................................................................12
4.1.
4.2.
4.3.
4.4
4.4.
4.5
4.6
4.6.1
4.7
4.7.1
4.7.2
4.8
Probiticos.................................................................................................... 12
Principales microorganismos probiticos utilizados actualmente...........................................13
Efectos benficos en el consumo de microorganismos probiticos..........................................14
Factores que condicionan la viabilidad del probitico.......................................................19
Prebitico y Simbitico.......................................................................................21
Encapsulacin................................................................................................ 23
Microencapsulacin..........................................................................................24
Uso de la microencapsulacin como mecanismo de proteccin de probiticos.............................25
Uso de soluciones, dispersiones y emulsiones, como mecanismo de proteccin............................26
Tipos de emulsin: simple, doble o mltiple..................................................................27
Mtodos para producir microcpsulas.......................................................................29
Agentes encapsulantes utilizados para la proteccin de sustancias bioactivas..............................35
1.8.1
1.8.2
1.8.3
1.8.4
1.8.5
1.8.6
1.8.7
1.8.8
1.8.9
1.8.10
1.9
1.9.1
1.9.1.1
1.9.1.2
1.9.1.3
1.9.1.4
1.9.1.5
1.9.1.6
1.9.1.7
1.9.1.8
1.9.2
Alginato..................................................................................................................36
-carragenina...........................................................................................................37
Almidn..................................................................................................................37
Maltodextrinas..........................................................................................................37
Goma arbiga...........................................................................................................37
Gelana...................................................................................................................38
Xantana..................................................................................................................38
Quitosano................................................................................................................39
Protenas aisladas de suero lcteo (PS)................................................................................39
Gelatina..............................................................................................................39
1.9.2.1
1.9.2.2
1.9.2.3
1.9.2.4
1.9.3
1.9.3.1
1.9.3.2
Bifidobacterium adolescentis................................................................................................ 46
Bifidobacterium animalis..................................................................................................... 46
Bifidobacterium infantis y Bifidobacterium longum...................................................................47
Bifidobacterium lactis......................................................................................................... 47
Otras especies de probiticos................................................................................................. 48
Saccharomyces boulardii..................................................................................................... 48
Streptococcus salivarius sp. thermophilus................................................................................48
2.
CONCLUSIONES.................................................................................................... 50
3.
REFERENCIAS...................................................................................................... 51
NDICE DE FIGURAS
Figura 1. Diferentes mecanismos de accin ejercidos por las bacterias probiticas ..14
Figura 2. Emulsiones mltiples del tipo W/O/W y O/W/O....26
Figura 3. Principio del mtodo de coacervacin compleja.....30
Figura 7. Secador por aspersin... ..33
NDICE DE TABLAS
RESUMEN
El uso de microorganismos en los alimentos se ha utilizado a lo largo de la historia, en reas
como la medicina y la industria alimentaria, descubriendo que no solo pueden tener un efecto
patgeno, como ciertas cepas, sino que administrados en las cantidades y condiciones adecuadas
pueden ejercer un efecto teraputico sobre su husped. Para lograr esto los microorganismos
tienen que atravesar diversas barreras y seguir manteniendo su viabilidad para ejercer su efecto
en el sitio de accin.
Se ha propuesto la microencapsulacin como medida para mantener la viabilidad de los
microorganismos durante el almacenamiento y su paso travs del tracto gastrointestinal, la
microencapsulacin proporciona tambin un sistema con el cual se puede controlar la liberacin
del probitico dependiendo del tipo de matriz utilizada, en la actualidad la industria alimentaria
busca la obtencin de un alimento no solo comestible, sino que aporte un beneficio a la salud del
consumidor.
La industria de los alimentos en la ltima dcada ha indagado en la utilizacin de probiticos que
cumplan con esta caracterstica, llegando al mercado diversos productos en su mayora de origen
lcteo, debido a las cepas utilizadas, estos microorganismos han demostrado que pueden ser
combinados con diversas sustancias, por ejemplo los prebiticos aumentando su efectividad.
Diversos estudios han demostrado su eficacia en el tratamiento de ciertas enfermedades como el
cncer de colon, alergias, y un crecimiento en la funcin del sistema inmune, entre otros. El
presente trabajo hace una revisin de los diferentes beneficios que aportan las cepas probiticas
durante su consumo, las variables a considerar para su encapsulacin y la cantidad mnima
requerida para que se logre un efecto teraputico en el husped y se pueda considerar como
microorganismo probitico.
Se realiza una descripcin breve de las tcnicas comnmente utilizadas para la
microencapsulacin de probiticos, as como de diversos estudios en los que se ha evaluado la
efectividad de la microencapsulacin en la proteccin de las cepas probiticas.
1. INTRODUCCIN
La organizacin mundial de la salud define a los probiticos como microorganismos vivos que
administrados en las cantidades adecuadas producen un efecto teraputico. Para que esto sea
posible es necesario que los microorganismos lleguen en condiciones de viabilidad al sitio de
accin, en la mayora de los casos el intestino delgado, no sin antes cruzar por diferentes barreras
tanto ambientales como fisiolgicas (Arribas et al., 2008).
La microencapsulacin es la alternativa para lograr que las cepas probiticas puedan llegar al
intestino, con suficiente viabilidad para lograr el efecto teraputico. Existe una amplia gama de
agentes encapsulantes, para lograr la microencapsulacin es necesaria la seleccin de un material
de pared adecuado que tenga las propiedades necesarias para soportar el procesamiento del
mtodo elegido y lograr la obtencin de la cantidad necesaria de unidades formadoras de colonias
(UFC) viables para colonizar el intestino delgado y producir un efecto teraputico. Cada tcnica
tiene una funcin especfica, dependiendo de la finalidad del producto que se quiera encapsular.
Al combinar el material de pared correctamente con otros agentes como los prebiticos, se
incrementa el efecto teraputico, y la viabilidad del microorganismo durante el procesamiento y
el tiempo de almacenamiento (Buriti et al., 2007).
Los beneficios en el consumo de bacterias probiticas son altamente extensos, y van desde el
tratamiento de diarreas hasta enfermedades graves como el cncer de colon entre otras. La
microencapsulacin provee el medio necesario para que los microorganismos probiticos arriben
a su sitio de accin en las concentraciones adecuadas y normativas para ser considerados
probiticos.
3. OBJETIVOS
10
4. MARCO TEORICO
4.1. Probiticos.
Los probiticos han sido consumidos por humanos desde tiempos inmemoriales, en forma de
leche fermentada, yogurt y otros alimentos fermentados, dependiendo de la cultura en particular,
es el tipo de alimento fermentado a ocupar.
La Organizacin Mundial de la Salud define a los probiticos como microorganismos vivos que
administrados en cantidades adecuadas producen un efecto beneficioso sobre la salud del
hospedador. Para que los microorganismos puedan ser considerados probiticos deben cumplir
las siguientes condiciones (Arribas et al., 2008):
Ser de origen humano ya que las cepas aisladas de los seres humanos sanos, posiblemente
no sean patgenas y tengan ms facilidad para colonizar el intestino, habindose utilizado
para definir esta caracterstica el acrnimo ingls GRAS (generally recognized as
safe)
Deben poseer tolerancia a las condiciones ambientales del tracto gastrointestinal (GI) ya
que deben llegar en condiciones viables al lugar de accin. Por lo tanto es necesario que
resistan factores como el pH gstrico, enzimas digestivas y la accin de las sales biliares.
Han de ser capaces de colonizar el intestino con un tiempo corto de replicacin y
adherirse a la mucosa intestinal para que tenga lugar la modulacin de la respuesta
inmune, as como la exclusin de microorganismos patgenos.
Los probiticos utilizados en el mercado deben ser evaluados detalladamente con el fin de estar
conscientes de su inocuidad, y que estos no produzcan sustancias txicas ni afines a estas, que
puedan daar al husped (Hernndez, 2009).
Para lograr la identificacin de una cepa probitica se tiene que aislar en un medio de cultivo
(MRS) y realizar pruebas bioqumicas para determinar la produccin de cido lctico, as como
de identificacin de morfologa por tinciones de Gram y esporas, adems de las pruebas de
produccin de enzimas citocromo-c-oxidasa y catalasa. Se realizan estudios de tolerancia al
cido, crecimiento a distintas temperaturas, tolerancia a las sales biliares y capacidad
fermentativa (vila et al., 2010).
11
Especies de Lactobacillus
L. acidophilus
L. amylovorus
L. brevis
L. casei
L. casei sp. Rhamnosus
L. crispatus
L. delbrueckii sp. Bulgaricus
L. fermentun
L. gasseri
L. helviticus
L. jhonsonii
L. lactis
Microorganismos probiticos
Especies de Bifidobacterium
B. adolescentes
B. animalis
B. breve
B. bifidum
B. infantis
B. lactis
B. longum
Otras
Bacillus cerus
Clostridium botyricum
Enterococcus faecalis
Enterococcus faecium
Escherichia coli
Lactococcus lactis sp.
cremoris
Lactococcus lactis sp. Lactis
Leuconostoc mesenteroides sp.
Dextranicum
Pediococcus acidilactici
Propionibacterium
freudenreichii
Saccharomyces boulardii
Streptococcus salivarius
Streptococcus thermophilus
L. paracasei
L. plantarum
L. reuteri
12
con
patgenos
potenciales
a travs
(Organizacin
de un
Mundial
de
Gastroenterologa, 2008).
Parracho y Anne (2007) mencionan diversas funciones a nivel gastrointestinal de los probiticos
promoviendo los siguientes efectos:
1. Competicin con bacterias nocivas por:
Desplazamiento de su sitio de unin al epitelio.
Inhibicin de su crecimiento y/o muerte mediante la produccin de compuestos
antibacterianos o reduccin del pH.
2. Mejora de la funcin de barrera intestinal.
La presencia de algunas bacterias en el tracto intestinal, depende de su capacidad de
adherirse al epitelio intestinal, de tal manera que quedan inmovilizados en la pared del
intestino y se resisten a ser expulsadas por el peristaltismo, previniendo la entrada de
compuestos o agentes potencialmente lesivos para el organismo.
3. Produccin de nutrientes importantes para la funcin intestinal.
Los cidos grasos de cadena corta (AGCC), principalmente acetato, propionato y butirato,
generados principalmente en el intestino grueso, son los productos finales en la
fermentacin llevada a cabo por la flora bacteriana comensal de los carbohidratos
procedentes de la dieta que no han sido digeridos en el intestino delgado.
4. Inmunomodulacin.
13
Diversos estudios han puesto de manifiesto que numerosos lactobacilos pueden alertar al
sistema inmune intestinal, y secundariamente favorecer el rechazo de microorganismos
infecciosos potencialmente lesivos, esto lo pueden realizar mediante la produccin de
inmunoglobulinas especficas de tipo A, o la activacin de clulas K (natural killer).
5. Degradacin de los receptores de toxinas.
Adems Lourens y Viljoen (2001) demostraron funciones teraputicas como:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Figura 1. Diferentes mecanismos de accin ejercidos por las bacterias probiticas, adaptado de
Arribas et al., (2008).
Los probiticos se han usado de gran manera para combatir padecimientos como diarreas y
enfermedades inflamatorias del intestino (Kieran et al., 2003). El ms prometedor de los
resultados es en su uso contra la gastroenteritis aguda en nios, en particular, diarrea por rotavirus
y el uso de S. boulardii en prevencin contra la diarrea causada por antibiticos (Sullivan y Nord,
14
2002). Estudios recientes han demostrado su actividad para prevenir o eliminar las infecciones
causadas por Helicobacter pylori (Halmiton, 2003). Se ha comprobado que cierto tipo de
bifidobacterias intestinales producen el cido linoleico conjugado (ALC), un cido graso que
promueve la salud sistmica (Shea et al., 2011).
Actualmente el uso de probiticos, es una propuesta novedosa en el tratamiento de las alergias,
principalmente para el tratamiento del eczema, asociado especialmente a la IgE. La comprensin
de los mecanismos de proteccin en la enfermedad alrgica ser de gran ayuda para prevenir y
tratar este padecimiento (Zheng et al., 2012).
En Japn se consume el natto que es un alimento fermentado, y cocido hecho de Bacillus subtilis
el cul es utilizado para estimular el sistema inmune, producir vitamina K y con propiedades
anticancergenas, el alto consumo de este producto y los beneficios que produce apoyan al uso de
los probiticos (Hong et al., 2005). Adems de utilizar la administracin oral, los probiticos
tambin pueden administrarse directamente en el sitio de accin si la cepa probitica cumple con
los requisitos, se maneja la administracin rectal y vaginal (Mombelli et al., 2000). Los
beneficios de los probiticos no se han aplicado solamente a hombres sino tambin en animales
como los peces (tilapia, Oreochromis niloticus) en la prevencin de infecciones, las bacterias
probiticas demostraron un alce en la actividad del sistema inmune promoviendo la actividad del
complemento aumentando la fagocitosis en el pez (Pirarat et al., 2006).
En el rea alimentaria se han realizado algunos estudios que comprueban, que la adicin de
probiticos ya sean libres o encapsulados, previene el decrecimiento del pH en un alimento de
origen lcteo, aumentado su vida de anaquel (Kailasapathy, 2006).
En la actualidad existe una dosificacin de probiticos para diferentes padecimientos como se
muestra en la siguiente tabla:
Probitico
Lactobacillus rhamnosus
Rgimen de dosificacin
recomendada
Al menos 1010 UFC en 250 mL
15
de solucin de rehidratacin
GG (LGG)
lactantes y nios
Lactobacillus reuteri
Saccharomyces boulardii
11
das.
4 x109- 2x1010 UFC diarias de 14 semanas.
6 x10 - 4x1010 UFC diarias de 19
LGG
Diarrea asociada con
antibiticos
Lactobacillus acidophilus
y Lactobacillus
bulgaricus
L. acidophilus y
Bifidobacterium longum
L. acidophilus y
Bifidobacterium lactis
2 semanas.
2x109 UFC diarias de 5-10 das.
S. boulardii
LGG
VSL #3
Sndrome de intestino
Bifidobacterium infantis
semanas.
10 -10 UFC diario por 4
irritable
35624
LGG y otros
semanas.
8-9 x109 UFC diario por 6
microorganismos
Escherichia coli Nisle
meses.
UC activa: 5x1010 bacterias, 2
siglas en ingls)
1917
10
16
S. boulardii
VSL #3
Enfermedad de Crohn
Pouchitis
S. boulardii
VSL#3
Prevencin de enfermedad
atpica
embarazadas seguido de la
administracin al infante durante
6 meses.
LGG
L. rhamnosus GR-1 y
Lactobacillus fermentun
Candidiasis vulvovaginal
RC-14
7 das.
8 oz de yogurt que contenga
L. acidophilus
17
sales biliares.
4. Intolerancia al oxgeno de cepas probiticas.
El contenido de oxgeno y el potencial redox del medio ambiente son muy importantes
18
causando extensin de la fase lag y limitacin del crecimiento morfologa celular alterada
y cambios en los perfiles de cidos grasos celulares.
La principal problemtica que presenta el uso de probiticos son factores que influyen en la
viabilidad y supervivencia de los microorganismos, entre ellos podemos resaltar la acidez
gstrica, el pH, sales biliares, entre otros. As como las condiciones de almacenamiento. Esto con
lleva a un decrecimiento en su supervivencia, provocando una baja en sus valores de
concentracin necesarios para llevar a cabo su efecto en el sitio de accin (Buriti et al., 2010).
Para que un probitico sea viable debe exceder 10 7 UFC/g a la fecha lmite de consumo que
representan un efecto teraputico en el husped, y manteniendo un nivel mnimo de 10 6 UFC/g
para ser reconocido como probitico y confiera un beneficio a la salud del hospedador (Heenan
et al., 2004; Sue-Siang et al., 2009; Nualkaekul et al., 2011).
19
Oligofructosa.
Oligosacaridos de la leche de pecho.
Inulina.
Lactulosa.
Galacto-oligosacaridos.
Algunos de los efectos benficos de los probiticos son los siguientes (Vrese y Schrezenmeir,
2008):
Actuacin como fibras dietticas: Al no ser digeribles por las enzimas del intestino, pero
fermentables por la microbiota intestinal, se incrementa la biomasa, el peso de las heces y
la frecuencia de evacuacin, teniendo un efecto positivo en la constipacin y salud de la
mucosa intestinal.
Estimulacin de la flora intestinal: Estimulan el crecimiento de bacterias con efecto
protector, e inhiben el desarrollo de bacterias patgenas.
Estimulacin de la absorcin de minerales: La disminucin del pH en el intestino mejora
la absorcin de calcio, hierro y magnesio en el intestino grueso, probablemente debido a
un aumento de la solubilidad de minerales.
Modulacin del metabolismo heptico de lpidos: Se ha estudiado este efecto en ratas y
hamsters, bajo una dieta alta en grasas y baja en fibra, los prebiticos redujeron altamente
los niveles de triglicridos y colesterol.
Propiedades inmunoduladoras: Aunque la inulina y la oligofructosa no tienen ningn
efecto inmunognico directo, se puede dar por influir en la flora intestinal, y modular
indirectamente diversos parmetros del sistema inmune, como la actividad de clulas NK,
la secrecin de IL-10 y el interfern, y la proliferacin de linfocitos.
Estabilidad de los huesos: Por su efecto en la absorcin de minerales como calcio.
Prevencin de cncer: Disminucin de las sustancias y bacterias toxicas, muta gnicas o
genotxicas, as como de los cidos biliares secundarios y enzimas que promueven el
cncer.
Se han reportado estudios en los que se utiliza conjuntamente fibra, prebiticos y probiticos,
esto aumenta su potencia como laxante y ayuda en la fermentacin de las bacterias probiticas
gracias a las altas cantidades de almidn que contiene (Lansal y Faubion, 2009).
La utilizacin de prebiticos en combinacin con probiticos aumenta la capacidad de mercado
de estos, ya que, no solo dependera de un producto lcteo la administracin de probiticos sino
20
tambin se pueden manejar otros productos como el salvado de fibra, que proporciona la
proteccin necesaria a la cepa probitica, para llegar al sitio de accin (Biguetti et al., 2010). La
capacidad de una bacteria probitica de metabolizar un prebitico no es indispensable ms sin
embargo ayuda a mejorar la accin de este y producir un efecto mayor (Bauelos et al., 2008).
Los simbiticos son la mezcla de un probitico y un prebitico que afecta beneficiosamente al
husped, mediante la combinacin de un estimulante y microorganismos vivos en el tracto
gastrointestinal, mejorando as la salud del husped (Buriti et al., 2007).
4.5 Encapsulacin.
La encapsulacin es una tcnica en la que el material o mezcla de materiales es atrapada en otro
material. El componente que se recubre se denomina material activo, y la cubierta externa se
conoce como agente encapsulante o cubierta. La encapsulacin es un proceso por el cual ciertas
sustancias bioactivas, son introducidas en una pared o matriz con el fin de impedir su prdida,
para protegerlos de la reaccin con otros compuestos, o para impedir que sufran reacciones de
oxidacin debido a la luz o al oxgeno (Yaez et al., 2005; Hernndez, 2011).
Las cpsulas son formas farmacuticas solidas en las que el principio activo se encuentra dentro
de un recipiente soluble o una cubierta dura o blanda (Gennaro, 2003). Pueden ser de diferentes
tipos entre ellos se encuentran:
Cpsulas duras.
Cpsulas blandas.
Cpsulas gastrorresistentes.
Cpsulas de liberacin modificada.
Sellos
Las ventajas y desventajas al utilizar este mtodo varan de acuerdo a la tcnica empleada pero
podemos mencionar algunas que generalmente afectan a este proceso.
Ventajas:
21
manejo
Proteccin ante las barreras fisiolgicas y condiciones ambientales
Previene la oxidacin
Fcil identificacin por su cdigo de colores
Tolerancia para el organismo
Rpida solubilidad de la cpsula
Desventajas obtenidas de Guevara (2008):
4.6 Microencapsulacin.
El termino microencapsulacin se utiliza en la industria alimentaria y farmacutica cundo se
encapsulan sustancias de bajo peso molecular o en pequeas cantidades, en este caso bacterias
probiticas. La microencapsulacin puede ser considerada una forma especial de empacar, en la
que un material en particular puede ser cubierto de manera individual para protegerlo del
ambiente y de influencias deletreas.
En un sentido amplio, este mtodo provee un medio de envasar, separar y almacenar materiales
en escala microscpica, formando una barrera entre el principio activo y el medio externo, hasta
su liberacin posterior bajo condiciones controladas (Del Piano et al., 2006). Dentro del trmino
microencapsulacin se incluyen las microcpsulas, micropartculas, nanocpsulas y sustancias
activas atrapadas o embebidas, aunque existe una terminologa especifica dependiendo de la
industria de aplicacin.
Adems, ofrecen la ventaja de enmascarar olores y sabores desagradables, proteger frente a la
oxidacin, volatilidad o fotosensibilidad, y reducir la accin irritante gastrointestinal de algunos
frmacos (Rodrguez et al., 2003). La microencapsulacin puede mejorar la viabilidad de las
22
4.6.1
Antes de que un probitico pueda realizar un beneficio a la salud humana debe cumplir ciertos
criterios, debe tener buenas propiedades tecnolgicas de modo que pueda ser fabricado e
incorporado en productos alimenticios sin sufrir una prdida de viabilidad y funcionalidad sin la
creacin de sabores o texturas desagradables (Semyonov et al., 2010).
Diversos factores provocan mortalidad en los probiticos antes de que lleguen a su sitio de
accin, ejemplo de estos son pH estomacal, temperatura, as como el oxgeno, para evitar que los
microorganismos sufran daos al entrar en contacto con estos, se ha propuesto la
microencapsulacin como medida de proteccin, la cual consiste en el recubrimiento de pequeas
cantidades de un determinado compuesto, mediante un material protector que es generalmente de
naturaleza polimrica (Krasaekoopt et al., 2006).
Se han utilizado perlas de alginato como material de encapsulacin de probiticos en el yogurt,
aumentando su viabilidad, ya que se ha comprado su eficacia contra la accin del jugo gstrico en
las cepas probiticas (Mokarram et al., 2009).
Algunas cepas probiticas pueden crecer potencialmente en el producto, pero la mayora no lo
hace y es necesario recurrir a tcnicas como la microencapsulacin (Mattila et al., 2002). La
microencapsulacin protege a los materiales encapsulados de variables como calor, humedad,
aumentando su viabilidad y estabilidad. Adems la microencapsulacin protege a los probiticos
de los bacterifagos y de los ambientes adversos. La congelacin y las soluciones gstricas,
facilitan la manufacturacin de productos fermentados, ya que, proporcionan condiciones
constantes (Prez et al., 2013).
23
24
En el sector farmacutico, las emulsiones sirven para encapsular los frmacos activos y despus
liberarlos cundo se encuentra en la corriente sangunea. Es decir, actan como barrera fsica para
lograr que el principio activo, llegue al punto de absorcin, en ptimas condiciones y as ejercer
su efecto teraputico (Aranberri et al., 2006).
En el encapsulamiento de Enterococcus lactis, se uso aceite de frijol de soya como medio
dispersante, y protena concentrada de soya como material inmovilizador, el procedimiento de
secado por aspersin mostr una alta viabilidad de las cepas probiticas al finalizar el proceso, al
mantener una viabilidad alrededor de 108 UFC/mL, y despus de 25 semanas de almacenamiento
se mantuvo una concentracin efectiva de 107 UFC/mL (Eun, 2012).
4.7.1
Los tipos de emulsin mencionados anteriormente O/W y W/O pertenecen a las emulsiones
simples, las emulsiones dobles o mltiples se caracterizan por el hecho de que la fase dispersa
contiene a su vez lquido inmiscible con el de las gotas que lo contiene y por lo general igual o
miscible con la fase continua.
El lquido que divide ambas fases acta como membrana, es aceite si las fases separadas son W1
y W2, es agua (solucin acuosa), si las fases separadas son O 1 y O2 (Figura 2). Por ello este tipo de
emulsiones se conocen como membranas lquidas emulsionadas o membranas surfactantes
lquidas. Esto es lo que le da el gran potencial de aplicacin a las emulsiones mltiples. Esta
membrana puede actuar liberando un componente desde la fase interna hacia la fase externa o
atrapar un compuesto (o varios), desde la fase externa hacia la fase interna, tambin el hecho de
que se pueda romper la membrana bajo ciertas circunstancias resulta til (Cardenas y Salager,
2011).
25
26
adicin de un agente tensioactivo ayuda a mejor la estabilidad de las emulsiones dependiendo del
tipo que se maneje.
Diferentes investigadores han usado la emulsin como mecanismo de proteccin de las cepas
probiticas por ejemplo, Zamora (2011) realizo la encapsulacin de la levadura Saccharomyces
boulardii, la levadura probitica se prolifero en caldo nutritivo (BIXON) a 30C durante 48 h y
posteriormente se centrifugo a 10,000 rpm por 10 min. La tcnica est basada en la formacin de
una emulsin simple (W/O), que consisti en preparar 100 mL de una dispersin de
hidrocoloides, adicionando el botn celular obtenido por centrifugacin y que contena una
concentracin equivalente a 1010 UFC/mL, posteriormente a la mezcla se le agrego CaCO 3
(0.04M). Por separado se mezclaron 200 mL de aceite canola con 2.5 g de Span 85 (fase oleosa)
permitiendo la formacin de la emulsin. La resistencia al pH estomacal (2.0) se llevo a cabo con
agua peptonada ajustada con HCL 6M, el pH simulado para el colon fue de 6.5. En estado libre la
perdida de viabilidad respecto al tiempo a pH 2 fue de 97.05, 99.7, y 99.94% a tiempos de
exposicin de 60, 120 y 180 min respectivamente. Para las clulas encapsuladas los resultados
obtenidos fueron 92.76, 97.60 y 99.31%. Los resultados de trabajar con una emulsin se vieron
reflejados en el aumento de la viabilidad de S. boulardii encapsulada que en estado libre.
En otro estudio se realiz el recubrimiento de Lactobacillus rhamnosus con una emulsin doble,
demostrando que aumenta su viabilidad a travs de las condiciones gastrointestinales como pH
bajo y sales biliares obteniendo una supervivencia de 128% (Pimentel et al., 2009).
4.7.2
Existen numerosas tcnicas para la produccin de microcpsulas y se han sugerido que podran
identificarse ms de 200 mtodos en la literatura de patentes. No obstante algunos autores
clasifican a los mtodos de encapsulacin en. Fsicos o mecnicos y qumicos (Guevara y
Jimnez, 2008; Hernndez, 2011; K. Gbassi y Vandamme, 2012).
Tipo de
Mtodo de
Tabla 3. Clasificacin
tcnica
encapsulacin
Coacervacin
de algunos mtodos de
Qumicas
encapsulacin.
Gelificacin inica
Secado por aspersin
Atomizacin por
Fsicas
enfriamiento/congelacin
Liofilizacin
Extrusin
Secado por vaco
Aspersin con pistola
27
Coacervacin
La tcnica de coacervacin es un mtodo qumico de separacin de fases lquido-lquido de
forma espontnea,
aucoso.la coacervacin puede ser de dos maneras simple o compleja; para la primera se utiliza un
tipo de polmero y se aaden agentes fuertemente hidroflicos a la solucin coloidal, mientras que
en la segunda se usan dos o ms tipos de polmeros. El coacervado se considerada como el soluto
polimrico separado, en forma de gotas lquidas de pequeo tamao (Pedroza, 2002).
El coacervado forma capsulas envolviendo a las pequeas gotas liquidas insolubles, para lograr
una gelificacin apropiada, normalmente se utilizan gelatina y gomas debido a que tienen carga
opuesta, haciendo posible la coacervacin (Guevara y Jimnez, 2008). El inicio de la
coacervacin puede ocurrir de distintas maneras como por ejemplo: cambios de pH, temperatura,
adicin de una sal inica etc. (Madene et al, 2006).
El proceso de coacervacin consiste en las siguientes etapas mencionan Guevara y Jimnez
(2008) (Figura 3):
1. Dispersin del compuesto a encapsular mediante agitacin (lquido o partculas solidas)
en una solucin del polmero formador de la cubierta.
2. Induccin de la coacervacin por alguno de los procedimientos sealados. En esta fase se
observa que el sistema sufre una opalescencia y, al microscopio ptico, las gotas de
coacervado presentan una apariencia semejante a la de una emulsin.
28
Figura 3. Principio del mtodo de coacervacin compleja. (Adaptado de Madene, et al. 2006).
Gelacin inica
Este mtodo se desarrollo para lograr la inmovilizacin celular, utilizando esencialmente alginato
como materia prima de la membrana en combinacin con iones divalentes como calcio, para
generar la gelificacin. La correlacin inica entre los iones calcio y los similares del cido
gulurnico del alginato, dan origen al gel que se conoce como modelo de caja de huevo
(Cuatzo, 2010).
29
En el momento de interactuar los iones calcio con el alginato el gel es formado de manera
instantnea, es posible la manipulacin de la dureza del gel cambiando las condiciones de
fabricacin como por ejemplo, pH, concentracin de iones etc. (Flores, 2011).
Esta tcnica se ha utilizado en la encapsulacin de Bifidobacterium adolescentis 15703T con el
fin de mejor la supervivencia a condiciones gastrointestinales. Las Microesferas de gelatina
fueron reticulados con genipina no citotxica y recubiertas con alginato reticulado por Ca. La
capa de alginato impidi la degradacin inducida por pepsina de las microesferas de gelatina en
el jugo gstrico simulado a pH 2,0 durante 2 h, dando un resultado significativo (P < 0,05) de
mayor nmero de supervivientes debido al efecto de amortiguacin de las microesferas (Annan,
Borza y Truelstrup, 2007).
Despus de la incubacin secuencial en jugo gstrico simulado (1 h) y jugos intestinales a pH
7,4 durante 4 h, el nmero de clulas supervivientes fue de 7.6 y 7.4 log UFC mL -1 para
microesferas recubiertas de alginato respectivamente, mientras que para las clulas en
microesferas de gelatina sin revestir y las clulas libres, se obtuvieron 6.7 y 6.4 UFC ml -1
(Annan, Borza y Truelstrup, 2007).
Los geles de alginato/calcio son permeables a molculas solubles en agua cuyos pesos
moleculares se encuentren entre 5,000-10,000 Daltons. La utilizacin de microcpsulas de
alginato se ha llevado a cabo en la larvicultura y para producir microalgas como Dunaliella
bardawil, obteniendo cultivos con una alta densidad hasta cinco veces mayor. (Pedroza, 2002).
Atomizacin por enfriamiento/congelacin
En este mtodo el material encapsulante pasa por un tratamiento de fusin. La combinacin de la
cubierta con el material a encapsular, que se encuentra distribuido en la misma, es fundido en una
cmara por la que atraviesa una corriente de aire fro o un gas enfriado con anterioridad. El
siguiente paso es pulverizar la muestra. Los materiales que se utilizan como cubierta tienen una
punto bajo de fusin, como por ejemplo las ceras, grasas y cidos grasos, esta tcnica es adecuada
para compuestos termolbiles (Hernndez, 2011).
Liofilizacin
30
31
32
Polisacridos
Alginato, carragenina
Almidn y sus derivados,
maltodextrinas, goma arbiga
Gelan, xantana
Quitosano
Protenas del suero lacteo,
gelatina
Alginato
Es un polisacrido aninico que se obtiene de algas marinas pardas. Su composicin qumica est
formada por un polmero lineal de los residuos de los cidos (14)--D-manurnico y -Lgulurnico, los cuales forman bloques de cada uno de los cidos con una distribucin aleatoria de
los mismos (Jimnez, 2010).
De este modo se pueden obtener alginatos con diferente proporcin de ambos cidos, lo que
permite obtener distintos grados de estabilidad mecnica. Es el biopolmero ms comnmente
utilizado para la microencapsulacin. Algunas de las ventajas de utilizarlo es su nula toxicidad,
adems de presentar la capacidad para formar matrices de gel alrededor de las clulas del
probitico, son seguras y biocompatibles con el organismo, econmicas y las condiciones del
proceso son simples y de fcil manejo (Chvarri, 2010).
34
1.8.2
-carragenina
Almidn
es un integrante lineal del almidn, y est constituida por molculas de D-
glucopiranosa unidas por enlaces (14), los cuales son resistentes a la -amilasa pancretica,
ms sin embargo son degradados por las enzimas producidas por la microbiota colnica,
proporcionndole adems una actividad prebitica. Existen mtodos por lo que se puede hacer
ms resistente como la eterificacin, esterificacin o acidificacin (Jimnez, 2010).
El almidn resistente es aquel que no puede ser digerido por las enzimas pancreticas (amilasas),
por lo que puede llegar al colon donde es fermentado, adems al tratarse de un prebitico puede
ser utilizado por los microorganismos probiticos en el intestino grueso. Los grnulos de almidn
se consideran una superficie ideal para la adhesin de los microorganismos, lo cual mejora la
viabilidad de las cepas probiticas (Anal y Singh, 2007).
1.8.4
Maltodextrinas
Se obtienen por mtodos de hidrlisis de tipo cida o enzimtica de los almidones. Son una buena
eleccin debido a su costo y efectividad, son inodoras, incoloras, presentan baja viscosidad a altas
35
Goma arbiga
La goma arbiga es la goma ms utilizada como material encapsulante, debido a sus propiedades
emulsificantes, elevada solubilidad, baja viscosidad y su buena retencin de compuestos
voltiles, hacen de ella un producto muy verstil, que se puede ocupar en la mayora de los
mtodos de encapsulacin. Este material se adapta de buena manera a la encapsulacin de gotas
de lpidos ya que presenta propiedades como agente superficial activo, y evita la prdida de
voltiles en contacto con la atmsfera. Sin embargo su aplicacin en la industria alimentaria es
limitada debido a su alto coste (Hernndez, 2011).
1.8.6
Gelana
Xantana
36
Quitosano
1.8.9
Las PS tienen todas las propiedades funcionales necesarias para una agente encapsulante. En el
mercado la protena se puede encontrar como protena aislada de suero (PS) (95-96% protena) o
concentrado de suero (CPS). El CPS ofrece las propiedades requeridas para estabilizar
emulsiones. Las PS se han utilizado en combinacin con hidratos de carbono y actan como
agentes encapsulantes de compuestos voltiles. La protena de suero ms usada en la industria
alimentaria es la beta-lactoglobulina debido a sus propiedades emulsificantes (Hernndez, 2011).
Las protenas de la leche son vehculos naturales para las clulas probiticas debido a sus
propiedades estructurales y fisicoqumicas, son un adecuado sistema de proteccin y liberacin
(Livney, 2010).
37
1.8.10 Gelatina
Es un producto de hidrlisis del colgeno que se usa en el proceso de coacervacin. Es un
material hidrosoluble que tiene la habilidad de actuar como agente encapsulante de numerosos
componentes voltiles mediante secado por aspersin. Estas cpsulas de gelatina pueden ser
usadas en un gran nmero de productos como especias y muchos otros aromas usados en la
industria alimentaria (Jimnez, 2010).
La utilizacin de una combinacin de agentes encapsulantes mejora significativamente la
resistencia de las capsulas al pH estomacal, aumentando la viabilidad de los microorganismos
probiticos, por ejemplo la encapsulacin con alginato, aadiendo un recubrimiento de quitosano
(Sohail, et al., 2011).
1.9 Estudios sobre el efecto de la microencapsulacin en los probiticos y su funcin.
1.9.1
Gnero Lactobacillus
Las bacterias cido-lcticas (BAL o LAB por sus siglas en ingls) se han empleado durante siglos
en fermentaciones industriales, siendo utilizadas en la industria alimentaria y farmacutica para la
obtencin de cido lctico, componentes saborizantes, espesantes y bacteriosinas, adems de
aportar valor nutritivo a los productos alimenticios. Son bacterias gran-positivas, no esporuladas,
en forma de cocos o bastones y catalasa negativa, su metabolismo es estrictamente fermentativo
produciendo cido lctico como producto de mayor cantidad final por la va Emden-Meyer
(Cabeza, 2006).
Los microorganismos del gnero Lactobacillus se encuentran por lo general en el intestino
delgado y vagina de los seres humanos. Son bacterias consideradas probiticas por su produccin
de vitamina K, lactasa y sustancias antimicrobianas como acidolina, acidolfina, lactocidina, y
bacteriocina, las cuales ayudan a prevenir y combatir infecciones en su husped (Cabezas, 2009).
1.9.1.1 Lactobacillus acidophilus
En un estudio se evalu la supervivencia de Lactobacillus acidophilus 547 en sistemas
gastrointestinales simulados,
encapsulado
simulacin gastrointestinal fueron, una solucin de sales biliares al 0.6% y jugo gstrico simulado
(pH: 1.55) seguido de una incubacin intestinal con y sin 0.6% de sales biliares. El recuento de
clulas inicial estaba en el rango de 5.9 0.2 x 10 8 a 2.5 0.5 x109, el recubrimiento de las perlas
con quitosano aumento la supervivencia de las clulas ms que otros materiales obteniendo al
final una viabilidad celular de 1.5 0.9 x106 (Krasaekoopt et al., 2004).
As mismo se han realizado estudios en los que se ha evaluado la supervivencia de L. acidophilus
4356 y 33200 en yogurt y yogurt liofilizado despus del procesamiento y almacenamiento. Ya
que los probiticos tienen una vida til limitada en el yogurt convencional, la liofilizacin es un
proceso que no solo conserva el yogurt sino que ayuda a mantener la suficiente cantidad de
microorganismos viables. Adems se analizaron factores como la adicin de prebiticos y
crioprotectores para mejorar la viabilidad de la cepa probitica siendo Unipectine TM RS 150 el
que obtuvo un mayor recuento celular. El efecto de la liofilizacin sobre las colonias se ve
reflejado con porcentaje de supervivencia del 72.85 % para L. acidophilus 4356 y 73.88% para L.
acidophilus 33200 (Capela et al., 2006).
Otros estudios han investigado el efecto de la microencapsulacin con alginato de sodio en L.
acidophilus ATCC 43121, a travs de la liofilizacin, realizando pruebas en microorganismos
encapsulados y no encapsulados, en condiciones gastrointestinales simuladas a un pH de 1.2 y 1.5
obteniendo una muerte celular elevada para los microorganismos no encapsulados y en los
encapsulados una alta tasa de supervivencia, adems de comprobar que la encapsulacin no
afecta significativamente la adhesin de L. acidophilus ATCC 43121 al intestino delgado del ser
humano, sin afectar su funcin bacteriana que es asimilar el colesterol en la sangre. Las pruebas
se iniciaron con una concentracin de 1.4 x10 7 UFC/ml finalizando en 104 UFC/ml al cabo de
tres horas a un pH de 1.5 (Kim et al., 2008).
Investigaciones sobre el material de pared a utilizar en la encapsulacin de Lactobacillus
acidophilus AL1 usando alginato de sodio como material encapsulante ha demostrado proveer
una barrera efectiva contra condiciones simuladas de jugos gstricos pH (1.0, 1.5 y 2) y altas
concentraciones de sales biliares (1.0%, 1.5% y 2%) (Sabikhi L. et al., 2010).
1.9.1.2 Lactobacillus amylovorus y L. fermentun
39
En un estudio a doble ciego se prob la efectividad de estas cepas probiticas para alterar la
adiposidad corporal a travs la modificacin de la microflora intestinal. Se llevo a cabo en 28
participantes sanos pero con sobre peso, los cuales consumieron yogurt con 1.39 x10 9 UFC de L.
amylovorus y 1.08 x109 para L. fermentun. Para la microencapsulacin se ocupo alginato-poli-Llisina-alginato (APA) utilizando la tcnica de extrusin. Al finalizar el tratamiento la microflora
de Lactobacillus en el intestino haba incrementado considerablemente, este incremento del
gnero Lactobacillus valida la habilidad de las bacterias probiticas de colonizar el tracto
intestinal (Omar et al., 2013).
La principal conclusin de este estudio es que la alimentacin controlada de probiticos altera la
microflora intestinal de manera que se asocia con una reduccin de la adiposidad corporal total,
un indicador antropomtrico importante de la obesidad. Los participantes perdieron una masa
total de grasa de 4%, 3% y 1% con el tratamiento de L. amylovorus, L. fermentun y yogurt
control respectivamente. Tales resultados apoyan el trabajo, en que la prdida de peso modula la
composicin microbiana intestinal, donde la abundancia de cepas bacterianas especficas en el
intestino aumenta o disminuye con la prdida de peso (Omar et al., 2013).
1.9.1.3 Lactobacillus brevis
Este estudio reporta la encapsulacin de Lactobacillus brevis por secado por aspersin en el cul
se utilizo como material de pared 2% de solucin de sodio de alginato estril, en una suspensin
de bacterias probiticas en leche sin grasa (clulas iniciales: 10.440.11 x10 9 UFC g-1) 3% de
cloruro de calcio y 2% de quitosano. La encapsulacin favoreci la proteccin de la bacteria
probitica a un pH estomacal simulado de 1.2 y un pH intestinal de 7.2, obteniendo un recuento
final de 108 UFC g-1 (Qi et al., 2011).
La evaluacin del efecto teraputico de las microcpsulas contra la diarrea, se realizo usando la
amplificacin de secuencias intergnicas de consenso repetitivas de enterobacterias (ERIC-PCR
por sus siglas en ingls), fue en tres terneros los cuales sufran de diarrea, se les administro
diariamente capsulas preparadas en este estudio (10g/, se recolectaron sus heces durante 3 das,
se guardaron en glicerol al 80% y se almacenaron a -70C antes de la extraccin de ADN. El
anlisis de las huellas dactilares ERIC-PCR mostr que la administracin de microencapsulacin
de Lactobacillus brevis tuvo fuerte efecto un benfico sobre la sustitucin de la microflora
40
intestinal de los terneros con diarrea, la cual es la principal muerte de los mismos, en la industria
del ganado (Qi et al., 2011).
En otro estudio un pre-cultivo de Lactobacillus brevis aislado de un queso tradicional en 250 ml
de caldo MRS (De Man, Rogosa y Sharpe, por sus inventores) se incubo a 37C por 48 h, se
centrifugo a 5000 rpm y el sedimento fue re-suspendido en 10 mL de una solucin de 8g/L de
cloruro de sodio. Se utilizo como material encapsulante alginato (4.8g) y maltodextrina (0.8g).
La tcnica que se ocupo fue secado por aspersin a una temperatura de 130C, 8 m 3/h, con un
caudal contante de 2.5 ml /min (Both et al., 2012).
Este estudio demuestra la posibilidad de producir encapsulados de bacterias cidas lcticas,
usando una boquilla de pulverizacin ultrasnica a 130 C con alta tasa de supervivencia.
Lactobacillus brevis aislado de los quesos de fabricacin tradicional microencapsulado en
alginato de sodio y maltodextrina muestra mayor viabilidad en condiciones digestivas con un
conteo inicial de 6 log UFC/g finalizando con 4.353 log UFC/g en comparacin con las clulas
bacterianas no encapsuladas con un conteo final de 2.954 log UFC/g (Both et al., 2012).
1.9.1.4 Lactobacillus casei
Durante un estudio esta cepa probitica Lactobacillus casei NCDC-298 fue encapsulada en tres
diferentes soluciones de alginato de sodio 2%, 3% y 4%, fue sometido a pruebas como pH bajo
(1.5), alta concentracin de sal de bilis (1% o 2%) y tratamiento trmico (55, 60 o 65C durante
20 min). Tambin se evalu la liberacin de clulas encapsuladas en una solucin simulada del
pH del colon. La supervivencia de las microcpsulas de L. casei era mejor a pH bajo, alta
concentracin de sal de bilis y durante el tratamiento trmico, en comparacin con las clulas
libres. Se necesitan ms estudios sobre la supervivencia de los lactobacilos encapsulados en
elaboracin de productos lcteos y la eficacia en la prestacin de las clulas viables en vivo para
la mejor aplicacin de los probiticos en el desarrollo de alimentos funcionales (Mandal et al.,
2006).
De igual manera Krasaekoopt et al., (2004) realizo estudios donde encapsulo L. casei por el
mtodo de extrusin, en tres diferentes recubrimientos quitosano, alginato y poli-L-lisina, los
cuales fueron sometidos a sales biliares simuladas (0.6%) a diferentes tiempos, siendo quitosano
el que mostr ser un mejor recubrimiento ya que el recuento celular inicial fue de 5.8 0.4 x10 9
41
finalizando en 1.7 0.3 x108 a diferencia de los dems en los que hubo prdidas de ms de dos
logaritmos.
1.9.1.5 Lactobacillus delbrueckii sp bulgaricus
Lactobacillus delbruekii sp bulgaricus es importante en un nmero de aplicaciones industriales y
se emplea con frecuencia como un cultivo iniciador para las fermentaciones de productos lcteos;
combinado con otras especies, es especialmente utilizado en la fabricacin industrial de yogurt y
diferentes tipos de queso (Lebos et al., 2011).
1.9.1.6 Lactobacillus crispatus
Esta cepa probitica ha sido estudiada en su capacidad de producir un efecto benfico contra la
colitis. Se realizo un estudio en el cul fue inducida la colitis en ratas, a las cules se les
administro diferentes dosis de L. crispatus M247 y MU5, en una solucin de sacarosa al 30%, las
dosis fueron de 104, 106, 108 y 1010; se comprob que reduce la colitis inducida siendo el efecto
dosis-dependiente, ya que a una mayor concentracin se incrementa el efecto teraputico. Con el
fin de investigar su adherencia al coln se incubaron tejidos de colon con 10 8 UFC/mL de L.
crispatus M247 se obtuvo una alta adherencia al tejido lo que reduce severamente la inflamacin
(Castagliuolo et al., 2005).
1.9.1.7 Lactobacillus helviticus
Se evalu la accin de Lactobacillus helviticus M92 con adicin de transglutaminasa en yogurt,
la microencapsulacin se llevo a cabo por gelificacin enzimtica, en matrices de protenas de
leche, utilizando caseinato de sodio. La microencapsulacin de las bacterias probiticas mejora
su supervivencia, en yogures durante el almacenamiento, as como durante la exposicin a
condiciones gastrointestinales simuladas. La adicin de bacterias probiticas, ya sea libres o
microencapsuladas en caseinato de sodio, disminuye el tiempo de fermentacin y mejora
significativamente la apariencia y consistencia del yogur probitico (Lebos et al., 2011).
Se hace hincapi en la eficiencia de la microencapsulacin sobre la proteccin celular. El
pretratamiento de la leche con transglutaminasa incrementa la resistencia del gel y la disminucin
de la sinresis, lo que result en una mejor apariencia y consistencia de los yogures (Lebos et al.,
2011).
42
Gnero Bifidobacterium
43
44
45
Esta bacteria probitica ha sido encapsulada utilizando una mezcla hidratada de gomas de gelana
y xantana. Estudios reolgicos mostraron que la mezcla de gomas era adecuada para la
encapsulacin de B. lactis, y para su incorporacin en alimentos o bebidas suaves. El tamao del
50 % de las capsulas era 637m. Las capsulas contenan de 10 11-1012 U.F.C. g-1, obteniendo al
finalizar una concentracin de 1011 U.F.C. g-1. Con excepcin del cultivo anaerbico de B. lactis
el resto del trabajo se hizo en presencia de oxgeno al que la cepa mostro una alta tolerancia. Esta
tcnica representa un medio adecuado de suministro de probiticos viables para la comida o en la
aplicacin de la industria farmacutica (Mc Master et al., 2005).
1.9.3 Otras especies de probiticos
1.9.3.1 Saccharomyces boulardii
Duongthingoc et al., (2013) investigo el efecto de la aglomeracin de protenas en la supervivencia
46
47
2. CONCLUSIONES
Los beneficios de los microorganismos probiticos son extensos y su uso se ha convertido en una
alternativa segura en el tratamiento de distintas enfermedades. La microencapsulacin juega un
papel de suma importancia para que estos microorganismos sean viables ya que los protege
contra distintos factores como la temperatura, pH gstrico, pH intestinal, oxigeno, humedad, entre
otros. Los cuales pueden ser controlados con una adecuada metodologa para cada tipo de
microorganismo. Las cepas probiticas ms utilizadas en la microencapsulacin son las especies
de Lactobacillus y Bifidobacterium, debido a su baja patogenicidad, propiedades de colonizacin,
metablicas, trficas, obtencin y manejo relativamente sencillo.
La eleccin correcta del tipo de matriz encapsulante beneficia potencialmente el efecto del
microorganismo probitico, una mezcla de diversos materiales hace que la respuesta teraputica
crezca debido a las capacidades prebiticas de cada uno, logrando crear una microcpsula con
altos niveles teraputicos.
La microencapsulacin de probiticos es un mtodo con el cual se prolonga la vida til de estos
microorganismos, y se protegen contra las condiciones adversas del medio. Adems de obtener
una liberacin controlada en el sitio de accin. La microencapsulacin es una tcnica necesaria
para la industria moderna, que le permite extender su mercado ya no solo enfocado en la venta de
productos lcteos, sino en una extensa variedad de productos comestibles.
El conocimiento de distintas tcnicas y materiales encapsulantes aporta una amplia variedad de
opciones para el proceso de la microencapsulacin. La eleccin correcta de cada uno depender
siempre del tipo de producto final que se requiera segn la funcin a realizar. Si se tiene un
control adecuado en la preparacin de la solucin, dispersin emulsin a utilizar, se obtienen
resultados satisfactorios.
48
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