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BIOSSEGURANA LABORATORIAL
RECOMENDAES GERAIS
NORMAS DE SEGURANA NO LABORATRIO DE MICROBIOLOGIA
PREPARO DE MATERIAL PARA LABORATRIO PESQUISA-MICROBIOLOGIA
2014
estudante
dever
entrar
no
laboratrio
de
aulas
prticas
de
Microbiologia
e) Ao final de todo trabalho prtico, no se esquea de higienizar as mos com gua e sabo
lquido e posteriormente, e se necessrio lcool 70%. Alm de ser um critrio bsico de higiene,
voc poder notar o quanto isto importante.
f) Todas as vezes que voc utilizar o microscpio, no final no se esquea de limpar as objetivas
e mant-lo livre do alcance de p. Foi atravs da manuteno adequada de instrumentos, por
colegas que lhe antecederam, que permitiu que voc hoje os utilizasse. No quebre essa cadeia.
PROCEDIMENTOS TCNICOS GERAIS
a) Como Flambar ala ou fio de platina: Procure executar esse procedimento colocando o
instrumento sobre a chama, numa inclinao aproximada de 45 e nunca em posio horizontal,
pois desta ltima forma voc estar esterilizando apenas a poro final, e geralmente voc
contamina muito mais do que isso ao introduzir a ala num tubo contaminado.
b) Como abrir o tubo de cultura: Para os destros: segure o tubo com a mo esquerda e retire o
tampo de algodo com os dedos mnimos e anelares da mo direita, deixando livre o dedo mdio,
indicador e polegar para manuseio da ala bacteriolgica ou pipeta, evitando assim deixar o
tampo sobre a bancada o que levaria sua contaminao.
c) Como abrir placas de Petri: Coloque a placa fechada sobre a bancada, com a tampa para
baixo. Retire o fundo da placa com a mo esquerda e assim voc ter a mo direita livre para
semear microrganismos na superfcie do meio de cultura.
d) Quanto as Semeaduras: Semeie o material contido numa ala ou num fio ou num "swab",
numa placa, ou em um tudo ou etc.. Voc aprender todas as tcnicas em aula prtica de tcnicas
de semeadura, aguarde.
e) Como confeccionar um bom esfregao: Desengordure a lmina, passando-a levemente pela
chama e limpando-a com papel absorvente. Coloque no centro da lmina o material a ser corado,
evitando a concentrao excessiva num nico local, mas proporcionando a obteno de um
esfregao denso (algumas vezes voc ter que usar mais que uma alada). A seguir passe pela
chama a parte oposta da lmina, para fixar o esfregao que estar pronto quando todo o material
estiver seco. No se esquea de identificar o lado da lmina onde voc fez o esfregao. A seguir,
realize a colorao desejada. Aguarde as coloraes.
Limpar e desinfetar a superfcie das bancadas antes e depois de cada aula prtica.
Higienizao das mos ao iniciar a anlise, ao sair do laboratrio e sempre que for
necessrio. Caso tenha ferimentos nas mos, procurar no tocar no material.
Identificar as amostras, bem como o material a ser utilizado antes de iniciar a anlise.
Figura 1
C. PREPARO DO MATERIAL PARA LABORATRIO PESQUISA-MICROBIOLOGIA-E
OUTROS
O imprevisvel e diversificado comportamento das doenas infecciosas emergentes e reemergentes
tem acarretado a discusso das condies de Biossegurana nas instituies de ensino, pesquisa,
desenvolvimento tecnolgico e de prestao de servios. A despeito do avano tecnolgico, o
profissional de sade est frequentemente exposto a riscos biolgicos e de produtos qumicos, cujo
enfrentamento est consubstanciado na adequao das instalaes do ambiente de trabalho e na
capacitao tcnica desses profissionais. O conceito de Biossegurana e sua respectiva aplicao
tm como objetivo principal dotar os profissionais e as instituies de ferramentas para o
desenvolvimento de atividades com um grau de segurana adequado seja para o profissional de
sade, o meio ambiente ou a qualidade dos trabalhos desenvolvidos. Nesse sentido, podemos definir
Biossegurana como sendo a condio de segurana alcanada por meio de um conjunto de
aes destinadas a prevenir, controlar, reduzir ou eliminar riscos inerentes s atividades que possam
comprometer a sade humana, animal, vegetal e o ambiente.
Quando se trabalha com pesquisa e microrganismo patognico e oportunista necessrio conhecer
todas as normas de segurana neste laboratrio, no podendo se esquecer do principal: ROTINAS
DE DESCONTAMINAO, LIMPEZA, ESTERILIZAO E DESINFECO.
Observar os mtodos mais usados na rea de sade para limpeza, esterilizao e desinfeco.
removendo todo tipo de resduo presente. Enxaguar vrias vezes em gua e a seguir em gua
destilada.
Secagem do material:
Acondicionamento do material:
acondicionar todo material, embrulhando em papel grau cirrgico, papel alumnio, caixas
metlicas, etc
Esterilizao:
Armazenamento do material.
lugares apropriados.
Esterilizao terminal:
Quando novas so bem lavadas com gua e sabo, secas e preparadas para esterilizao.
Quando em uso, autoclavar e escorrer todo contedo na peneira; deixar de molho por
algumas horas; lavar com gua, sabo e Bombril; deixar secar.
A tampa das placas limpas deve ser revestida com um disco de papel de filtro (para reter
gua evaporada do meio de cultura e evitar que ela se condense sobre ele).
As placas podem ser embrulhadas com papel jornal ou colocar na lata de alumnio (porta
placa).
3.3-Tubos de ensaio
Deixar secar bem e prepar-los para esterilizao, tamponando com algodo (hidrfilo).
3.4-Lminas e lamnulas
Retirar o leo de imerso, quando em uso, com auxlio de algodo embebido em xilol.
Colocar em cuba contendo soluo de sabo (nunca deix-las sobre a mesa), pois assim
evita que as preparaes ressequem, dificultando a limpeza posterior.
Secar bem.
Para esterilizao:
3.5-Pipetas
3.5.1-Pipetas Graduadas
Secar bem.
3.5.2-Pipetas Pasteur
(4) Diversos
4.1-Ala e fio de platina
4.2-Ala de Drigalski
4.3-Pina
4.4-Cotonetes (Swabs)
Colocar no forno Pasteur a 160C por 2 horas ou autoclavar a 120C, 1 atm por 30 minutos.
4.5-Palitos de Madeira
Colocar no forno Pasteur a 160C por 2 horas ou na autoclave a 120C, 1 atm. por 20
minutos.
Observaes importantes: Ala e fio de platina devem ser flambados antes e depois de qualquer
operao de semeadura. importante que se faa o esfriamento da ala antes de ser colhido o
material.
Em relao s semeaduras feitas em tubos de ensaio, deve ser flambada a boca dos mesmos, aps
a retirada e antes da colocao do tampo de algodo. Este deve ser mantido pelo dedo mnimo da
mo direita e nunca deixado sobre a mesa do laboratrio.
manuseadas com cuidado e no podero ficar abertas no ambiente, alm do cuidado de manuse-las
sempre prximo a uma chama. Uma vez semeadas, devem ser incubadas em estufa, com a tampa
voltada para baixo.
Atividades de aprendizagem
1. A que visam as normas em laboratrio de Microbiologia?
2. Como se deve proceder em um laboratrio de Microbiologia, para assegurar a sade do
manipulador?
3. Qual a importncia da desinfeco da bancada de trabalho?
4. Qual a sequncia de tratamento necessrio aos materiais de laboratrio de Microbiologia?
5. Qual a necessidade da esterilizao do cultivo microbiolgico aps a leitura?
6. Quais os detergentes mais utilizados na lavagem de vidrarias e utenslios de laboratrio?
7. Quando usar a soluo sulfocrmica?
8. Qual o perigo do resduo de detergentes nas vidrarias?
9. Qual a relao tempo/ temperatura utilizadas para esterilizao em estufa e em autoclave?
10. Diferencie esterilizao de desinfeco?
11. Quais os agentes fsicos e qumicos utilizados na esterilizao e desinfeco?
12. Quanto de lcool e de agua devemos utilizar para obteno de 1000 ml de lcool a 70%?
13. Porque de se utilizar o lcool a 70% para desinfeco?