Mudanas de biomassa e comunidades bacterianas em carvo ativado

biolgico
filtros para o tratamento de gua potvel
Resumo
(BAC) filtragem de carbono ativado Biolgica geralmente pode executar
bem na remoo de biodegradvel compostos orgnicos em gua potvel.
Neste estudo, um baixo-fluxo do sistema de filtrao BAC em escala piloto
foi construdo para o tratamento de guas ozonizado. As mudanas de
concentrao de biomassa e comunidade bacteriana nos filtros de TAS com
o tempo de contato e tempo de servio foram caracterizados por meio de
anlise de fosfolipdios de cidos graxos (PLFA) e anlise 16rRNA biblioteca
clone gene, respectivamente. Os resultados operacionais indicou o sistema
de filtragem BAC poderia efetivamente remover o carbono orgnico
dissolvido (DOC) e carbono orgnico assimilvel (AOC). Concentrao de
biomassa diminuiu com o tempo de contato, mas mostrou apenas uma
ligeira alterao com o tempo de servio. Tempo de contato e tempo de
servio
pode
afetar
a
estrutura
da
comunidade
microbiana.
Alphaproteobacteria foi o maior grupo de bactrias e pode ter ligaes
importantes com o DOC e remoo AOC. Este trabalho pode fornecer alguns
novos insights sobre comunidade microbiana e processo biolgico nos
Biofiltros de gua potvel.

1. Introduo

Devido deteriorao da qualidade da gua de superfcie, a modernizao

do processo de tratamento convencional (coagulao-floculao, decantao, filtrao
rpida de areia, e desinfeco) tem despertado cada vez mais ateno por parte dos
produtores de gua potvel no mundo. A remoo de compostos orgnicos em guas
geralmente pode ser melhorada por oxidao qumica, filtrao por membrana e
filtrao biolgica. Aps filtrao de areia, carvo ativado biolgico (BAC) filtrao
tem sido amplamente aplicada para remover compostos orgnicos biodegradveis,
controlando, assim, a formao microbiana rebrota e desinfeco subprodutos (DBPs)
em sistemas de distribuio de gua potvel (DWDS).

A populao microbiana

indgena ligado superfcie porosa do carvo activado granulado (GAC) responsvel

por este processo biolgico. Um biofilme estvel, fina e ativa ideal para filtrao BAC
[1]. Ele tem sido comumente aceito que o conhecimento das comunidades microbianas
em filtros BAC pode aumentar a nossa compreenso dos processos biolgicos [2,3].
Muitas tcnicas tm sido utilizados para avaliar quer densidade de biomassa microbiana

ou a sua actividade em filtros de TAS, tais como o consumo de oxignio, as contagens

de placas heterotrficas, a contagem total de clulas diretos, microscopia eletrnica de
varredura, fosfolipdios, absoro de substratos marcados e reduo de sais de tetrazlio
[5]. No entanto, estes mtodos microbiolgicos convencionais no podem fornecer
informaes precisas sobre as populaes bacterianas nos filtros BAC. Alm disso, pode
desempenho de filtrao BAC no estar relacionado com quantidades de biomassa [6,7].
Mtodos dependentes de Cultura tm fornecido algumas informaes teis sobre a
populao bacteriana em filtros BAC [8-10]. No entanto, a maioria dos
microorganismos no ambiente so refratrios ao cultivo e ao desvio dos parmetros
ambientais originais podem inaccurately reflectthe estrutura original da comunidade
microbiana [11]. Anlise Phospholipid cido graxo (PLFA) tem sido amplamente
utilizado para descrever a dinmica da comunidade microbiana em beber gua biofiltros
[4,12-14]. Alm disso, com base em 16S RNA ribossomal (rRNA) sequncias,
eletroforese desnaturante em gel com gradiente (DGGE) e polimorfismo de fragmentos
de restrio terminal (TRFLP) fingerprinting tm sido comumente utilizados para a
anlise rpida da diversidade microbiana e dinmica em filtros BAC [6,15- 18]. No
entanto, nenhum dos PLFA, TRFLP e anlise DGGE poderia fornecer informao
filogentica direta nas comunidades microbianas. At data, apenas alguns estudos
utilizando 16rRNA anlise biblioteca clone gene tm sido realizados para caracterizar as
populaes bacterianas ou bactrias oxidantes de amnia (AOB) comunidades em filtros
BAC [19-21]. Portanto, as ligaes dos processos biolgicos que ocorrem nos filtros
BAC com as comunidades microbianas permanecem pouco entendido.
As diferenas verticais de concentrao de biomassa nos Biofiltros de gua
potvel foram bem documentados. Densidade de biomassa geralmente diminui com o
aumento epth filtro (e tempo de contato correspondente), o resultado do consumo
gradual de substratos [3,8,12,20,22]. Devido variao de substratos em afluentes, a
densidade de biomassa em biofiltros gua de beber tambm pode alterar com o tempo
de servio. Infelizmente, muito poucos estudos relataram a mudana de densidade de
biomassa em biofiltros de gua potvel, com o tempo de servio [3,8]. Theproperties e
concentraes Ofthe carbonsource disponvel pode afetar a estrutura da comunidade
microbiana em gua e biofilme [23-26]. No entanto, h pouca informao disponvel
sobre a heterogeneidade vertical de estruturas de comunidades microbianas em beber
biofiltros de gua. Alm disso, a mudana de comunidade microbiana em biofiltros com
o tempo de servio permanece em grande parte desconhecido. No estudo actual, filtros

BAC em escala piloto utilizados para o tratamento de gua potvel foram construdos de
modo a avaliar o desempenho na reduo de matria orgnica. As mudanas de
biomassa e as populaes bacterianas com tempo de contato e tempo de servio foram
caracterizados usando PLFA e 16rRNA biblioteca clone gene analisa, respectivamente.
Este trabalho poder fornecer novos insights sobre a evoluo das comunidades
bacterianas e sua funo ecolgica no biofiltro gua potvel. As mudanas de biomassa
e as populaes bacterianas com tempo de contato e tempo de servio foram
caracterizados usando PLFA e 16rRNA biblioteca clone gene analisa, respectivamente.
Este trabalho poder fornecer novos insights sobre a evoluo das comunidades
bacterianas e sua funo ecolgica na gua potvel biofiltro.
2. MATERIAIS E MTODOS
2.1. INSTALAO EXPERIMENTAL
Fig. 1 mostra o diagrama esquemtico do sistema de filtrao de fluxo para
baixo BAC escala piloto. Ambas as colunas eram cilindros Plexigas e com altura e
dimetro interno de 1,9 m e 40 cm, respectivamente. As colunas de filtragem BAC
foram fornecidas com portas de amostragem de gua e GAC. O sistema de filtragem
BAC recebeu o influente atthe carga hidrulica de 8 m / h. O afluente ofthe sistema era
gua do lago pr-tratados com pr-ozonizao, mistura rpida, floculao, decantao,
filtrao de areia e ps-ozonizao. Antes do incio das experincias, os filtros estavam
sob operao contnua durante seis meses, a fim de permitir a formao de biofilme.
Durante este estudo, os valores de pH e concentraes de oxignio de que o influente
variou entre 7,5 e 8,3, e 6,5 e 7,5 mg de O2 / L, respectivamente.
2.2. mtodos analticos
As amostras de gua e amostras GAC foram recolhidos no dia 0 e no dia
160. Para a anlise fsico-qumica, o oxignio dissolvido (OD) e foram determinados o
pH, como descrito anteriormente [2]. O carbono orgnico dissolvido (DOC) foi medido
utilizando um analisador Shimadzu 5000ATOC. Assimilvel de carbono orgnico
(AOC) bioensaio foi realizado de acordo com o mtodo padro [27]. A biomassa aderida
ao GAC foi quantificada por um ensaio de fosfolpidos [8]. Neste estudo, as amostras
dos pontos de amostragem A-D no dia 0 foram referidas amostras A0, B0, C0, e D0,
respectivamente. Da mesma forma, as amostras dos pontos de amostragem A-D no dia
160 foram encaminhados para Amostras A160, B160, C160 e D160, respectivamente.
DNA de cada amostra GAC foi submetido a anlise de biblioteca de clonar como

previamente descrito [2,28,29]. Resumidamente, os genes 16S rRNA foram

amplificados utilizando iniciadores 27F e 1492R. Os produtos de PCR foram clonados
no vector de pMD19-T (Takara Corp., Japo). Os clones contendo tamanho correto
foram sequenciados. O Projeto de Banco de Dados Ribosomal (MSU Centro de
Ecologia Microbiana) ferramenta de anlise "classificador" foram utilizadas para
classificar a identidade taxonmica de cada sequncia bacteriana em nvel de confiana
de 80% [30]. As sequncias obtidas neste estudo foram submetidos a GenBank sob os
nmeros

de

adeso

JQ398498-JQ398598,

JQ937027-JQ937081,

JQ926629-

JQ926675,JX181665-JX181753, e JX402513-JX402602.

3. RESULTADOS E DISCUSSO
3.1. REMOO DE DOC E AOC
Eliminao gradual de DOC com tempo de contato foi observada no piloto
escala sistema de filtragem BAC (Fig. 2A). O sistema de filtragem BAC poderia
efetivamente reduzir DOC, com as taxas de remoo calculados de 34,3% e 31,2% nos
dias 0 e 160, respectivamente. AOC tambm foi gradualmente reduzido com o tempo de
contacto (fig. 2B). As taxas mdias de remoo AOC por o sistema de filtrao de BAC
foram 60,6% e 51,2% nos dias 0 e 160, respectivamente. A remoo eficaz de DOC e
AOC por sistemas de biofiltrao tem sido bem documentado [17,31-33]. Ozonizao
seguida de filtrao BAC foi efetiva na melhoria bioestabilidade em gua potvel
[21,32,34]. Laurent et ai. encontrado que a reduo do carbono orgnico dissolvido
biodegradvel (CODB) era uma funo do tempo de contacto no filtro BAC [34]. A
reduo gradual da concentrao de demanda qumica de oxignio tambm foi
encontrada em um sistema de filtragem BAC [2]. No entanto, as informaes sobre o
perfil do DOC e reduo AOC dentro sistemas biofiltration ainda escassa. Neste
estudo, DOC e AOC foram removidos principalmente no filtro BAC primeira fase,
especialmente no topo de 200 mm de camada GAC. Portanto, DOC e remoo AOC
diferenciado no sistema de filtragem biolgica. Wang et al. Tambm descobriram que a
grande maioria de remoo de matria orgnica ocorreu no topo dos biofiltros [22].
3.2. concentraes de biomassa
Figo. 2C mostra a diminuio da concentrao de biomassa (determinado
como fosfolipdeos) com o tempo de contato no sistema de filtrao BAC em escala
piloto. Concentrao da biomassa na superfcie GAC (34,4 ou 31,7 nmol meios-P / g de
peso seco) a partir da parte superior do filtro firststage foi quase trs vezes to grande

como a partir da parte inferior do filtro de segunda fase. No entanto, para cada amostra,
houve apenas uma ligeira alterao da concentrao de biomassa aps o servio de 160
dias. Diferenas significativas nas concentraes de biomassa em diferentes filtros e a
vrias profundidades dentro filtros foram detectadas utilizando o ensaio de fosfolpidos
[22]. A quantidade de biomassa aderida geralmente diminuiu medida que a
profundidade de filtro (ou tempo de contacto) aumentou [8,15,22]. No entanto, Emelko
et al. informou que a concentrao de fosfolipdios de biomassa no pode estar
diretamente relacionado remoo de matria orgnica biodegradvel em biofiltros [7].
Boon et ai. constatou que as maiores densidades de biomassa ocorreu na parte do meio
do filtro BAC e eles sugeriram ainda que o desempenho de filtrao BAC no pode ser
relacionada com a concentrao de biomassa [6].
H uma escassez de informaes sobre servios dependentes do tempo
mudanas na concentrao de biomassa em biofiltros. Com este propsito, Ko et al.
constatou que a biomassa em anexo sobre as partculas do GAC como aumento do
tempo de funcionamento foi estendido 3-7 meses [8]. Por outro lado, Velten et al.
descobriu que a biomassa aderida acumulou-se rapidamente nas partculas GAC durante
os primeiros 90 dias de operao e manteve um estado estacionrio depois [3]. De igual
modo, no presente estudo, durante o perodo de funcionamento de 160 dias, a
concentrao de biomassa variou ligeiramente, o que sugere que a biomassa aderida
sobre GAC superfcie alcanou a estabilidade durante o perodo de seis meses antes da
formao de biofilme neste estudo.
3.3. Composies filo bacteriana e sub-filo
Oito amostras GAC foram objecto de clonar anlise biblioteca. As
bibliotecas de clones derivados de amostras A0, B0, C0, D0, A160, B160, C160, D160 e
tinha 48, 53, 54 e 48, 47, 42, 44 e 46 sequncias, respectivamente. Neste estudo, os
grupos principais de bactrias foram encaminhados para aqueles com abundncia elative
no menos do que 10%. Tabela 1 apresentou os filo e sub-filo composies das oito
amostras. A mudana de composio do major filos e subfilos e suas abundncias
relativas ocorreu com tanto contato e tempo de servio. No entanto, Alphaproteobacteria
permaneceu o grupo bacteriano mais abundante, e Acidobacteria foi dominante em
todas as amostras. Estes resultados, em grande parte so diferentes dos de outros
estudos relatando a dominncia Betaproteobacteria nos filtros BAC [9,10,17,19]. A
diferena na disponibilidade AOC no afluente do filtro BAC pode ser responsvel por
essa discrepncia. Neste estudo, a concentrao AOC no afluente foi alta, 235 e 162 g /
L no dia 0 e no dia 160, respectivamente, enquanto que a concentrao COA

documentado em outra literatura anterior era muito inferior [17]. As composies da

comunidade de bactrias nos filtros de BAC foram dependentes da disponibilidade de
nutrientes e substratos de carbono [4,6,19], bem como as condies operacionais
[12,13,16,17,35]. Nosso estudo anterior tambm indicou que Alphaproteobacteria,
Gammaproteobacteria e Acidobacteria predominou nos filtros de alcoolemia acima de
fluxo, enquanto Betaproteobacteria era um grupo menor [2]. Tem sido amplamente
aceito que o tempo de reteno hidrulica (TRH) podem afetar significativamente a
estrutura da comunidade microbiana nos biofiltros de gua potvel [13,17,35]. No
entanto, apenas alguns estudos anteriores tambm mostraram a heterogeneidade espacial
da estrutura da comunidade microbiana com contacttime dentro filtros BAC para
tratamento de gua potvel [2,6,12,21]. Alm disso, o perodo de tempo necessrio para
a estabilidade da estrutura da comunidade bacteriana durao pode ser maior do que a
de biomassa. A diferena em materiais e mtodos tambm podem afetar a avaliao da
estabilidade da estrutura da comunidade bacteriana [6,18]. Neste estudo, o
deslocamento de populaes bacterianas no interior dos filtros BAC indicou que as
comunidades bacterianas no tinham atingido a estabilidade aps o perodo de formao
de biofilme de seis meses.
3.4. Alphaproteobacteria
Houve inmeros relatos sobre a presena de Alphaproteobacteria em beber
gua biofiltros [2,8-10]. Neste estudo, a Tabela 2 mostram as composies de
microrganismos pertencentes classe Alphaproteobacteria em cada amostra GAC. Nos
quatro amostras recolhidas no dia 0, a maioria dos microorganismos dentro classe
Alphaproteobacteria no poderia ser atribuda a qualquer gnero conhecido. Em
contraste, em cada uma das amostras colhidas no dia 160, a maioria dos
microorganismos foram identificados ao nvel gnero. O gnero Sphingomonas
predominaram nas amostras colhidas no dia 160, em oposio aos relacionados com o
tempo de ponto zero. Assim, estes resultados mostraram que uma alterao significativa
na composio da comunidade bacteriana ocorreu como uma funo do tempo de
servio.
Ao lado nos biofiltros de gua potvel, Sphingomonas tem tambm
costumam foi encontrado na gua de beber e beber biofilmes de gua [36-38]. Os
microrganismos do gnero Sphingomonas poderia degradar uma variedade de
substncias qumicas ambientais, tais como hidrocarbonetos policclicos aromticos
(HPAs) [39-41], isoproturon [42], o lindano [43], e terpeno 2 metilisoborneol (MIB)
[44]. Isto pode explicar a onipresena de espcies Sphingomonas em ambientes de gua

oligotrficas. Gnero Bradyrhizobium tambm tem sido associada a biodegradao de

uma variedade de poluentes ambientais [45,46]. A presena de Bradyrhizobium foi
encontrado em filtros BAC e bebendo biofilmes de gua [10,36]. Alm disso,
Hyphomicrobium, Mesorhizobium e Rhodobacter tambm foram capazes de degradar
muitos tipos de poluentes ambientais [29,47-49]. Portanto, no presente estudo, o
domnio de Alphaproteobacteria em filtros BAC pode contribuir para o DOC e remoo
COA em todo o sistema de biofiltrao.
4. Concluses
O sistema de filtragem BAC em escala piloto, poderia efetivamente reduzir
DOC e AOC. Concentrao de biomassa diminuiu com o tempo de contato, mas apenas
variou ligeiramente com o tempo de servio. Anlise biblioteca Clone ilustrado as
mudanas de estruturas de comunidades microbianas no interior do BAC filtra ambos
com tempo de contato e com o tempo de servio. Alphaproteobacteria foi o grupo
bacteriano mais abundante nos filtros BAC, o que pode contribuir para o DOC e
remoo AOC em todo o sistema de filtragem biolgica. Sero necessrios mais
esforos para elucidar a evoluo das comunidades nos biofiltros de gua potvel.
Reconhecimento
Este trabalho foi financiado pelo Programa de Cincia, Tecnologia Maior e
para Poluio da gua Tratamento de Controle e na China (No. 2009ZX07423-003).