cultivo DE HONGOS

Introduccin

La rama de la microbiologa que estudia los hongos (reino Fungi) se conoce como la micologa. Los hongos se
clasifican en 4 grupos principales a base de su modo de reproduccin sexual:
1.

Phycomycetes: mohos (molds) del agua, del pan y trerrestres. Las

esporas reproductivas son externas y descubiertas.

2.

Ascomycetes: levaduras (yeast) y mohos. Poseen esporas sexuales

llamadas ascoesporas. Estas se producen en sacos llamados ascos.

3.

Basidiomycetes: setas. Forman esporas reproductivas conocidas como

basidioesporas en estructuras llamadas basidios.

4.

Deuteromycetes: Tambin llamados hongos imperfectos porque no tienen

fase reproductive sexual.

Los hongos son organismos heterotrficos, eucariotas capaces de metabolizar gran variedad de sustratos
orgnicos. Los hongos pueden ser de gran beneficio as como tambin perjudiciales al ser humano. Aquellos que habitan en
el suelo ayudan a descomponer plantas y animales muertos, manteniendo frtil el terreno. Los hongos que llevan a cabo
fermentacin son de gran importancia industrial. La industria de la cerveza, el vino, los quesos, los antibiticos, las enzimas,
la repostera, dependen de los hongos. Algunas actividades detrimentales de los hongos son por ejemplo: el moho que le d a
las frutas , vegetales y granos, el dao a los alimentos en general. Algunas especies son capaces de producir drogas como
toxinas y halucingenos. Algunas especies pueden causar enfermedades al hombre, ejemplo de stos son las micosis
superficiales (en piel, pelo y uas) y las micosis sistmicas (en pulmones, sistema nervioso, genitales).
La asociacin entre la densidad de hongos y las descargas orgnicas a cuerpos de agua o en el suelo, sugieren que
los hongos pueden ser indicadores de contaminacin. Desafortunadamente no se han identificado especies o grupos de
hongos importantes en este rol. Algunas especies de levaduras y hongos filamentosos son caractersticos de aguas calientes y
pueden ser indicadores tiles de contaminacin termal.
La identificacin de hongos es dependiente de la morfologa (forma) de las colonias cuando se crecen en medio
slido, as como su crecimiento y morfologa de estructuras reproductivas. Para la identificacin de las levaduras es
importante la actividad fisiolgica en cultivos en el laboratorio.
Mtodo:
Muestras:
1.
2.

Envases: las muestras de agua o suelo se debe coleccionar en envases

estrilizados con tapas. El transporte de los envases debe ser de forma
derecha y deben descartarse luego de su uso.
Almacenamiento: las muestras deben ser procesadas no ms tarde de 24
horas de se recoleccin el campo. Si el anlisis no se comienza
prontamente, se debern refrigerar.

Medios de Cultivo:
Es donde se ponen a crecer los hongos. Se pueden usa los siguientes medios:
Agar Sabouraud
Agar Neopeptone-glucose-rose Bengal-aureomycin
Agar Czapek (para Aspergillus, penicillium y hongos relacionedos
Agar Yeast extract-malt extract-glucose
Agar Diamalt (para levaduras)
Preparacin y diluciones:
Una vez recolectada las muestras en el campo se deben hacer diluciones de las mismas antes de sembrar en
placas. Cuando se procesan muestras de agua de quebradas se deber hacer diluciones de 1/10 de la muestra original. Para

muestras de agua con gran material orgnico se debern hacer diluciones de 1/100 o 1/1,000. Para muestras de suelo, utilizar
diluciones de 1/1,000 o 1/10,000.
Para realizar diluciones de las muestras se deber usar agua esteril y toda la cristalera tambin esteriles.
Cultivo en placas:
Preparar placas para cada dilucin a ser examinada. Transferir 10 ml de medio a 45 0C a placas petri de 9
cm. Aadir 1 ml de la muestra diluda y mezclar mediante rotacin de la placa.
Solidificar el agar lo ms rpido possible. Tapar de inmediato las placas para evitar contaminacin.
Incubacin:
Incubar las placas sin invertirlas a temperatura de saln (20-24 0C) en luz, pero evitar que sea directa. Examinar y
contar las colonias en las placas luego de 3, 5 y 7 das.
Conteo e inventario:
El conteo de hongos en una placa proveer la base para comparaciones cuantitativas entre muestras tomadas en
distintas localidades. El inventario nos hablar de la abundancia de especies de hongos en la zona. Descartar placas con ms
de 300 colonias.
Se puede calcular el nmero de hongos por volmen de agua en las muestras y as comparar varios sitios
muestreados.
# de hongos/ ml de muestra = suma del nmero de colonias en las 5 placas X dilucin de una misma dilucin
Para realizar un inventario se deber utilizar el microscopio para ver morfologa y estructuras reproductivas que
ayuden en la clasificacin de las especies.
Referencias:
Laboratory Exercices in Microbiology, R. A. Pollack. 2002 John Wiley & sons,
Inc
J.G. y N. Sherman.1992. Microbiology a Laboratory Manual 3ra edicin
Cappuccino Benjamin/Cummings Inc.
A.E. Greenberg, L.S. Clesceri y A. D. Eaton 1992.
Standard Methods for Examination of Water and Wastewater 18th edicin