LABORATORIO DE AISLAMIENTO DE HONGOS

AMBIENTALES

PRESENTADO POR:
KAREN MOLINA VALEST
SAIRA PIMIENTA
STEFANY SUAREZ

PRESENTADO A
ADRIANA SANDON

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MICROBIOLOGIA
MICOLOGIA
VALLEDUPAR
2014

INTRODUCCION
El reino fungi, cumple un papel importante en ecologa microbiana, debido a
que sus miembros, los hongos, se encargan de cumplir variados ciclos
biolgicos y de nutrientes, ya que son los degradadores principales de la
materia orgnica muerta, por esto se les conoce como saprofitos, este es un
factor altamente influyente para que su dispersin en la naturaleza sea casi
total, puesto que podemos encontrarlos en variados hbitats, principalmente a
la intemperie, en la atmosfera.
Los hongos ambientales se encuentran creciendo habitualmente en el suelo,
aire y a expensas de la vegetacin, algunos factores ambientales como la
humedad, la temperatura, la precipitacin, contaminacin, influyen de manera
determinante en la proliferacin y propagacin de las partculas fngicas hacia
los espacios interiores (Calizaya et al, 2010).
Como ya sabemos los propgulos fngicos, pueden permanecer en estado
vegetativo y de latencia por tiempo prolongado y resistir condiciones adversas
como temperaturas elevadas, desecacin, e incluso algunos altas
concentraciones de salinidad, esperando nuevamente encontrar las
condiciones apropiadas para volver a germinar y poblar el espacio donde se
encuentren.
Se han conseguido identificar
ms de 100.000 especies de hongos
ambientales, sin embargo se cree que existen gneros y especies aun no
identificadas, entre los gneros ya conocidos cerca de 200 especies producen
patologas de variada ndole en humanos (Bueno et al, 2003).
El mtodo ms comn para el aislamiento de hongos ambientales es la
obtencin de esporas, mediante un medio de cultivo especial para hongos, esto
se hace pasando la caja de Petri previamente abierta por las zonas donde
deseamos aislar hongos, en la prctica a realizar tomaremos una placa con
medio de cultivo sabouraud, y aislaremos hongos ambientales de nuestro sitio
de trabajo el laboratorio de microbiologa de la universidad popular del Cesar.

OBJETIVOS
Objetivo general:
Aislar hongos ambientales en diferentes sitios del rea de los
laboratorios de microbiologa de la universidad popular del cesar.

Objetivos especficos:

Observar las caractersticas macroscpicas y microscpicas de cada

morfotipo.
Identificar las implicaciones y roles que tienen los hongos ambientales
en las reas de laboratorio
Diferenciar las caractersticas macroscpicas y microscpicas de los
hongos encontrados.

MARCO TEORICO
Los hongos, principalmente los filamentosos se caracterizan por ser
organismos cosmopolitas, que pueden desarrollarse en variados sustratos,
climas, e incluso en condiciones extremas (Calizaya et al, 2010).
La mayora de los hongos son organismos de vida libre, es decir, los podemos
encontrar en un sin nmero de ambientes ya sean terrestres o acuticos, su
mbito es tan amplio, que sus esporas incluso sobrepasan la atmsfera (Aira et
al, 2003), las esporas encontradas en la atmosfera corresponden a hongos del
suelo, de la vegetacin y del mar. Algunos de los gneros comnmente
aislados del aire son Penicillium, Aspergillus,
Rhizopus, Mucor y
Cladosporium, entre otros (Lpez et al, 2006)
Por lo tanto, las esporas y otras estructuras fngicas son componentes
normales de ambientes externos y pueden ser la fuente contaminante de los
ambientes internos y muchos de estos, pueden servir como sitios de
amplificacin para el crecimiento de los hongos (Bueno et al, 2003).
Los hongos ambientales han sido aislados en todos los lugares en que se han
colocado medios de cultivo, identificndose ms de 100000 especies, inclusive
se han aislado esporas en alturas superiores a 3000 metros sobre el nivel del
mar, encontrndose altas concentraciones en las nubes, el aire y bajo la
mayora de las condiciones climatolgicas, predominando hongos
pertenecientes al phyllum Basidiomycota y Ascomycota. Pueden encontrarse
tanto dentro como fuera de los domicilios, dependiendo de las condiciones
higinicas del hogar y climatolgicas del exterior. Las esporas de estos son
muy resistentes y suelen ser de tamao pequeo, entre 3 y 10 micras (Calizaya
et al, 2010).
Cuando estos hongos se proliferan en ambientes internos como nuestros
hogares, algunos tienden a convertirse en alrgenos, causantes de cuadros
alrgicos respiratorios, dichos hongos se han denominado como hongos
anemfilos.
Los hongos anemfilos generalmente se desarrollan sobre materia orgnica en
descomposicin, sin embargo al crecer en el interior de casas, lo pueden hacer
sobre cualquier sustrato y contaminar alimentos, textiles, pisos, etc. Durante su
ciclo biolgico, estos hongos producen conidios, que son inhaladas por los
humanos, por lo tanto la importancia de estos alrgenos radica no solo en su
capacidad de estar en diferentes ambientes, sino de invadir las mucosas
respiratorias de huspedes susceptibles, donde la poblacin que tiende a
presentar mayor susceptibilidad son los nios y adolescentes (Guerrero et al,
2003).

Los componentes alergnicos de hongos contienen molculas, como

glucoprotenas, protenas y polisacridos, que pueden desencadenar
reacciones de hipersensibilidad tipo I (Ruiz et al., 2006),
Hay un cierto nivel de los hongos ambientales que puede ser considerado
como seguro. Esto depende de la concentracin fngica en los ambientes
externos y de los tipos de esporas presentes en el ambiente interno (Bueno et
al, 2003).

MATERIALES
4 Cajas de Petri con medio de cultivo PDA:
Caja1: Laboratorio de microbiologa
Caja2: Coordinacin de laboratorios
Caja3: Cepario
Caja4: Laboratorio clnico
Azul de lactofenol
Asas micolgicas
Laminas y laminillas

PROCEDIMIENTO
Se tomaron cuatro cajas de Petri que contenan medio de cultivo PDA
Una vez abiertas, estas se expusieron al ambiente de los laboratorios de
microbiologa de la Universidad Popular del Cesar de la siguiente
manera:
Caja 1 -------------------------------------Caja 2 -------------------------------------Caja 3 -------------------------------------Caja 4 --------------------------------------

Lab de microbiologa
Coordinacin de laboratorios
Cepario
Lab Clnico

Las cajas se incubaron a temperatura ambiente aproximadamente por

dos semanas
Se realiz el respectivo recuento de colonias
Se escogieron colonias que pudieran presentar un morfotipo y se
hicieron montajes con azul de lactofenol para observar morfologa
microscpica
Se hicieron las respectivas identificaciones y descripciones de los
morfotipos observados

RESULTADOS
Caja 1: Laboratorio de microbiologa
Colonia 1
Medio de Cultivo: PDA
Textura algodonosa
Levantamiento de tapa, es decir,
presenta micelio areo
Anverso blanco
Reverso blanco
Margen irregular
No presenta surcos
Colonia que al inicio tiende a ser
plana de textura algodonosa, luego se
torna algodonosa puntiforme con
levantamiento
Colonia2
Textura pulverulenta
Dematicea
Anverso gris
Reverso negro
Margen irregular
No presenta surcos
Colonia
inicialmente
negra
pulverulenta, se torna gris con textura
pulverulenta y puntiforme

Colonia
1:
Fragmoconidias
o
macroconidias
fragmentadas
de
Fusarium sp, con una hifa septada
atravesada en medio
de las
fragmoconidias y pertenece al phyllum
Ascomycot

Colonia 2
Curvularia sp con hifas dematiceas
gruesas, septadas con presentacin
de macroconidias ovaladas con uno
de los lados abultados y dos o tres
septos. Todo de color caf

Caja 2: Coordinacin de laboratorios

Medio de Cultivo: PDA

Textura: Pulverulenta
Dematicea
Anverso: gris
Reverso: negro
Margen: irregular
No presenta surcos
Colonias al inicio de color negro
algodonoso
Posteriormente se torna pulverulenta
de color gris claro

Cladosporium sp
Hifas dematiceas
Hifas septadas
Hifas sinuosas, es decir, presentan
curvas y ondulaciones
Conidios con cicatrices en extremos
de diferentes formas.

Caja 3: Cepario

Medio de Cultivo: PDA

Textura: Pulverulenta
Anverso: Rosa o naranja claro
Reverso: Blanco amarillento
Margen: Indefinido
No presenta surcos
Al inicio se torna plana, luego se
torna con un levantamiento leve, ms
o menos pulvinada.

Fragmoconidias o macroconidias
fragmentadas de Fusarium sp, no
hubo observacin de hifas.

Caja 4: Laboratorio Clnico

Colonia 1
Textura algodonosa
Al inicio caf y blanca algodonosa
posteriormente
se
torna
caf
pulverulenta de color caf claro
Anverso caf y blanco
Reverso
blanco
aparentemente
concntrico
Margen definido

Colonia 2
Medio de cultivo PDA
Textura algodonosa
Al
inicio
blanca,
amarilla
posteriormente se torna amarillo
oscuro con apariencia pulverulenta
Anverso: amarillo
Reverso blanco en los mrgenes.
Hialino en el centro
Margen definido
No presenta surcos.

Ambas colonias presentaron la

misma Morfologa que corresponde a
hongos del phyllum zygomycota
Esporangios
vacos,
ya
hubo
germinacin de esporas
En 10X no se observaron hifas
septadas.
No se pudo hacer observacin en
40X
Se logra observar hifas dematiceas
caf verdosas y otras hifas de color
azul propias de zygomycotas
ANLISIS DE RESULTADOS

Los hongos son organismos cosmopolitas que pueden desarrollarse en los

sustratos ms variados, en todos los climas de la tierra e incluso en
condiciones extremas. Su mbito es tan amplio, que sus esporas incluso
sobrepasan la atmsfera (Aira et al., 2003).
Las esporas fngicas son componentes normales de ambientes externos y
pueden ser la fuente contaminante de los ambientes internos y muchos de
estos pueden servir como sitios de amplificacin para el crecimiento de los
hongos (Bueno et al., 2003). La inhalacin sistmica de esporas y fragmentos
de micelio de hongos puede inducir una afeccin alrgica respiratoria, tanto en
las vas areas superiores como en las inferiores. Los componentes
alergnicos de hongos contienen molculas, como glucoprotenas, protenas y
polisacridos, que pueden desencadenar reacciones de hipersensibilidad tipo I
(Ruiz et al., 2006).
Las muestras que se procesaron en el laboratorio de microbiologa fueron
obtenidas de manera natural a travs de la exposicin de las cajas de Petri en
las instalaciones (cuatro laboratorios: lab. Clnico, lab. de Microbiologa,
Cepario y lab. de Coordinacin) de la Universidad Popular del Cesar bloque F.
En esta prctica se observaron hongos filamentosos de diferentes
caractersticas tanto macroscpicas como microscpicas, se caracterizaron dos
gneros de los cuales el que ms prevaleci fue Fusarium sp y Curvularia sp.
El gnero Fusarium sp., fue encontrado en las cuatro cajas expuestas. Este
estudio puede ser til para comprobar la incidencia de los hongos ambientales
y se podra inferir que la presencia de estos organismos es de gran
importancia, ya que servira para futuros controles para contrarrestar las
posibles contaminaciones as como problemas de salud.
En comparacin con el artculo hongos ambientales en una biblioteca: un
ao de estudio se pudo apreciar hongos ambientales en una biblioteca de
investigacin donde se trabaja con microorganismos en Argentina. En el cual
se identificaron hongos y entre los ms frecuentes fueron Cladosporium sp,
Fusarium sp, Alternara sp, Acremonium sp y Aspergillus sp. Se pueden
mencionar algunas diferencias en estos estudios en la tabla. Aunque hay
similaridad entre algunos gneros encontrados, puede ser debido a muchos
factores como el clima, temperaturas ptimas de dichos hongos, entre otros.
Como ya se haba mencionado estos estudios son de importancia ya que as
se podran examinar q posibles riesgos y consecuencias se pueden tener
conviviendo con estos organismos a diario.

Factores

Hongos ambientales Hongos ambientales

universidad
popular en una biblioteca

T de crecimiento
Medio de cultivo
Hongos aislados

del cesar
Temperatura ambiente
Agar PDA
Fusarium sp, Curvularia
sp

BIBLIOGRAFIA

25 - 28C
Agar papa glucosada
con cloranfenicol
Cladosporium
sp,
Fusarium sp, Alternara
sp, Acremonium sp y
Aspergillus sp.

 Manual de Micologa Aplicada. Laboratorio No. 10 Aislamiento e

identificacin de algunos hongos del ambiente. Pg. 54.
Evaluacin de hongos ambientales en mercados de abastos de la ciudad
de Tacna Per
Carla Calizaya Limaco
Gian Salazar Torres
Jos Silva Aburto
Revista mexicana de Micologa 2010
http://revistamexicanademicologia.org/wp-content/uploads/2010/07/8.TR-188-65-67.pdf
Aislamiento e identificacin de moho en el aire
Leonor Lpez Tevez
Carola Torres
http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp12.pdf
Hongos ambientales en una biblioteca: un ao de estudio
Dante J. Bueno
Julio Silva
Ctedra de Micologa, Facultad de Bioqumica, Qumica y Farmacia.
http://eprints.rclis.org/12003/1/ad0602.pdf
Los mohos en el medio ambiente
http://www.cdc.gov/mold/es/pdfs/faqs.pdf
Aislamiento de hongos en las instalaciones deportivas de la UNAM
http://www.medigraphic.com/pdfs/facmed/un-2003/un033d.pdf