Licenciatura en LaboratorioClnico

Prof. Adj. Lic. Natasha Soca

Qu es ?
Fisiologa
Es el estudio de las funciones de los
organismos teniendo en cuenta que:
los procesos de la vida estn mediados
por sus estructuras, relacin estructurafuncin.

Fisiologa
La funcin fundamental de todo ser vivo es el
crecimiento.
Crecimiento consiste en aumentar en forma
ordenada el nmero y la masa de todos sus
componentes celulares.

Fisiologa
Componentes celulares:
pared celular
membrana citoplasmtica
cidos nucleicos (ADN y ARN)
flagelos
fimbrias

Fisiologa
La composicin de las estructuras
celulares comprende macromolculas
de:
protenas
polisacridos
lpidos
cidos nucleicos

Fisiologa
Es el estudio de las funciones de las
bacterias.
Es el proceso por el que los seres vivos toman
del medio donde habitan las sustancias
qumicas que necesitan para crecer
(nutrientes).
Nutrientes que se requieren para:
Fines energticos
Fines biosintticos

Las bacterias son muy eficientes

fisiolgicamente.
Sintetizan en forma muy rpida sus
componentes celulares, siendo la mayora
autosuficientes a pesar de su simpleza
estructural .

Para que esto ocurra se desencadenan

una serie de procesos qumicos que
constituyen el metabolismo bacteriano

De acuerdo a sus requerimientos y el tipo

de nutricin los podemos clasificar
Existen condiciones apropiadas para el
crecimiento bacteriano :
Humedad
Oxgeno
PH
Temperatura

NUTRIENTES
Los nutrientes son la fuente de energa
necesaria para la vida de los
microorganismos.
Temperatura
Influye en la velocidad de crecimiento.

NUTRICIN
Agua
Ms del 80% de la composicin celular
bacteriana es agua.
Es el solvente universal
Cumple una funcin tampn
Acta como coenzima de enzimas
hidrolazas.

NUTRICIN
Fuente de Carbono:
Todos los compuestos orgnicos poseen carbono.
Fuentes ms simples de carbono:
CO2
CH4
Fuentes ms complejas:
aminocido
hidratos de carbono
lpidos

NUTRICIN
De acuerdo a la fuente de carbono
utilizada las bacterias se
clasificadas como :
Auttrofas
Hetertrofas

NUTRICIN
Bacterias auttrofas son aquellas
bacterias que utilizan como fuente de
carbono sustancias simples como CO2 y
CH4.
Bacterias hetertrofas son aquellas que
requieren macromolculas orgnicas
como fuente de carbono tales como los
hidratos de carbono

NUTRIENTES
Clasificacin :
1-Macronutrientes: carbono, hidrgeno,
oxgeno y nitrgeno.
2.-Micronutrientes: fsforo, potasio, azufre,
magnesio.
3.-Vitaminas y hormonas
4.-Elementos traza: zinc, cobre, manganeso,
molibdeno, cobalto.

NUTRICIN
Nitrgeno.
Todos los organismos requieren N2.
Es metabolizado y entra a formar parte de
las protenas, cidos nucleicos y polmeros
de la pared celular.

Fuentes de nitrgeno
N2atmosfrico
Compuestos inorgnicos como nitratos,
nitritos o sales de amonio
Compuestos nitrogenados orgnicos como
son los aminocidos o pptidos.

NUTRCIN
NITRGENO
Elemento fundamental.
Componente principal de protenas y cidos
nucleicos.
Constituye el 10% del peso seco de la bacteria.
El N2 en el interior de la clula se encuentra
como grupo amino (R-NH2)
Las bacterias lo pueden adquirir en forma de
NO3, NO2, N2, NH4, RNH2.

NUTRCIN
NITRGENO
La urea es el principal producto de excrecin
del metabolismo proteico en mamferos.
Es inestable.
Se descompone rpidamente a amoniaco (NH3),
compuesto voltil .

NUTRCIN
NITRGENO
Las bacterias nitrificantes del suelo son las
que por oxidacin lo llevan a NO3 no voltil.
Este NO3 puede ser captado por las plantas y
transformado a compuestos orgnicos.
Las bacterias desnitrificantes reducen el NH3
a N2, en regiones anaerbicas del suelo
liberndolo a la biosfera

NUTRCIN
AZUFRE - S
Es utilizado por la bacteria para sintetizar
aminocidos
cistena, cistina y
metionina.
Tambin, forma parte de vitaminas
como biotina y tiamina.
La mayora de las bacterias son capaces de
obtener S a partir de SO4 y lo reducen a
H2S.
Generalmente es transportado por una
molcula de O acetil serina.

Iones inorgnicos (P, K, Mg)

Fsforo es esencial en estructuras como
cidos nucleicos, ATP, fosfolpidos de
membrana y algunas coenzimas, como NAD y
FAD.
Se utiliza como cofactor de reacciones
enzimticas donde acta el ATP.
P puede ser captado como fosfato o P libre
(Pi).
Se puede utilizar fosfato orgnico como son
los glicerofosfatos y fosfolpidos.

Iones inorgnicos (P, K, Mg)

Potasio. K
El in K acta como coenzima y
probablemente como catin en la
estructura de RNA y otras estructuras
aninicas celulares.
Magnesio. Mg
Se utiliza como cofactor de reacciones
Enzimticas donde acta el ATP.

Elementos traza u oligoelementos Fe,

Cu, Mo, Zn
Son elementos que las bacterias requieren en
cantidades muy pequeas
Generalmente, basta con la cantidad que contiene
el H2O u otros elementos del medio.
Fe - existen en las bacterias molculas
transportadoras de Fe denominadas siderforos,
que compiten con la lactoferrina y transferrina del
hospedero.
Ejemplo- E. coli tiene un opern que codifica para
el siderforo entero-quelina y para una protena de
membrana actuando como un receptor que capta
las deficiencias de Fe del ambiente.

Factores de crecimiento
Son molculas orgnicas especficas
indispensables para la vida de la bacteria pero
que esta es incapaz de sintetizarlas orgnicas.
Ej : coenzimas o sus precursores, bases
nitrogenadas, aminocidos.
Ej: precursores, aminocidos, vitaminas,
colesterol.
Estos compuestos hay que aportarlos
al medio, puesto que su carencia no es
compatible con la vida bacteriana

ENZIMAS
Como los catalizadores sintticos, las
enzimas, aceleran las reacciones
qumicas sin alterarse.
Las enzimas normales dejan de trabajar
cuando se exponen al calor o a otras
circunstancias extremas.
Permaneciendo activas cuando otras
fallan.

Como es un catalizador la enzima no se

consume, acelerando la velocidad de reaccin
sin modificar la posicin de equilibrio.
Propiedades
1-Capaces de acelerar las reacciones en las
condiciones suaves de la clula.
2-Alto poder cataltico por su gran actividad
molecular, aceleran las reacciones ms de
1000 veces.

ENZIMAS -extremoenzimas
Son catalizadores biolgicos que ayudan a los
extremfilos a funcionar en las circunstancias
de su entorno (se las llama "extremozimas").
Las enzimas de los extremfilos aumentan la
eficacia y reducen el costo.
Pueden ser la base de procesos nuevos
basados en enzimas.

VITAMINAS
Clasificacin
Hidrosolubles
Excepto el cido ascrbico son
necesarias para el crecimiento de las
bacterias.
La mayor parte son componentes de
coenzimas.
Liposolubles
Son necesarias excepto A , D y E

CLASIFICACIN DE LAS ENZIMAS

De acuerdo al lugar de accin:
. Endoenzimas-son aquellas enzimas que actan en
el interior de la clula
Ej. oxidasas, reductasas.
. Exoenzimas-son enzimas que siendo sintetizadas
en el interior de la clula para ejercer su funcin
deben ser exportadas al medio exterior.

Las exoenzimas, son exportadas:

Al medio extracelular (Gram+)
Al espacio periplsmico (Gram(-).
La funcin principal es degradar
macromolculas, las que por su tamao no
atraviesan las capas superficiales de la
clula procaritica.

Caractersticas de las enzimas

No catalizan en reacciones de naturaleza
distinta.
No puede unirse con cualquier sustrato.
Hay ms especficas que otros.
La especificidad puede ser tan alta que se
distinga entre estereoismeros.
Debido a la especificidad se pueden
catalizar muchas reacciones a la vez .

CLASIFICACION DE LAS ENZIMAS

Pueden ser clasificadas considerando s su sntesis
es o no modificada por el medio ambiente en :
CONSTITUTIVAS
INDUCIDAS

Constitutivas -son aquellas cuya sntesis es

independiente del medio externo.
Se sintetizan siempre.
Ej. enzimas que degradan la glucosa.

Enzimas Inducidas
Son aquellas cuya sntesis depende de la
presencia o ausencia del sustrato en el medio

Ej. -galactosidasa, la cual acta sobre la

lactosa. Slo es sintetizada cuando existe
lactosa en el medio .
Las bacterias son metablicamente
eficientes ya que la mayora de sus
enzimas son inducidas

NUTRICIN
Fuente de :
energa: luz vs qumica
carbono: orgnica vs inorgnica

Dadores de H2 y receptores de H2
Las bacterias realizan su metabolismo en
base a reacciones qumicas, obteniendo
energa fundamentalmente por xidoreduccin.
Necesitan sustratos oxidables y aceptores
finales de electrones.
Ej.: glucosa, como dador de electrones y O2,
como receptor de stos.

Temperatura
Las bacterias se pueden clasificar en
3 grandes grupos, segn su temperatura
ptima de crecimiento:
Psicrfilas 10 20 C (15 C)
Mesfilas 20 40 C (35 C)
Termfilas 50 60 C (55 C)

TEMPERATURA DE
CRECIMIENTO
Presentan un estrecho rango de crecimiento
optimo.
Una temperatura mnima de crecimiento y
una mxima.

Requerimientos de Oxgeno
Se clasifican en:
Aerbicas: Requieren de O2para su
desarrollo.
Anaerbicas: crecen en ausencia de O2
Microaeroflicas : crecen mejor con tensiones
bajas de O2

Fisiologa Requerimientos de O2
Aerobios Estrictos
Son aquellas bacterias en que el aceptor
final de electrones es el O2

Anaerobios Estrictos
Aquellos microorganismos en que el aceptor
final es una molcula inorgnica, como SO4 o
NO3.
No utilizan O2 (ste es txico) ya que carecen
de la capacidad de sintetizar catalasas ,
superxido dismutasa

Fisiologa Requerimientos de O2
Anaerobios Facultativos
.Pueden vivir con O2 y sin O2
Si estn en un medio con O2(aerobio), lo utilizan
como aceptor final de electrones, forman ATP
por fosforilacin oxidativa y si las condiciones del
medio cambian y se termina el O2, son capaces de
cambiar todo su patrn enzimtico relacionado con
la respiracin.

E. coli es capaz de sintetizar 50 enzimas nuevas

en pocos minutos para seguir la va anaerbica.

Bacterias microaerfilas
Si bien pueden utilizar el O2, slo lo
toleran cuando su concentracin es
ms baja que la del aire (<21%).
Por su limitada capacidad de respirar o
porque contienen alguna molcula o
enzima sensible al O2.

Bacterias capnfilas
Para crecer en forma ptima necesitan
de elevadas concentraciones de CO2
Ejemplo:

Haemophilus spp
Neisseria spp.

PH
En el interior de la bacteria el pH es
normalmente neutro debido al eficiente
sistema de membrana de las bacterias.
La mayor mayora de las bacterias pueden
soportar cambios de PH de entre 3 y 4
unidades de PH.
Segn su PH se clasifican en :
Alcalfilas
Neutrfilas
Acidfilas

La mayora de las bacterias de interes

medico son neutrfilas.
Excepciones:

Lactobacillus spp, acidfilo que crece a

pH = 4.5
Vibrio cholerae, alcalfilo que puede vivir
a pH 9.

OSMOLARIDAD
Tienen una tolerancia osmtica importante, lo que
les permite soportar grandes cambios de
osmolaridad, gracias a la PARED CELULAR que
constituye una importante barrera.

Bacterias halfilas extremas- soportan hasta

un 30% de sales.
Bacterias halfilas corrientes que soportan
entre 2 a un 10% de concentracin de sal, Ej.:

Staphyloccus aureus.

Requisitos para el crecimiento

bacteriano
Agua- ambiente acuoso
Fuente de energa

Fuente de carbono

luz Fottrofo
qumica Quimitrofo

Compuestos orgnicos
Organotrofo
Compuestos inorgnicos
Litotrofo

Clasificacin
Auttrofo

Fuente de Carbono

Hetertrofo Fuente de Carbono

orgnica
Fottrofos
Quimitrofos
orgnico

Fuente de energa

CO2
materia

la luz

Fuente de energa compuesto

La mayora de las bacterias patgenas para

el hombre son heterotrfas.

Clasificacin

Precursores
Protenas
aminocidos
flagelos, pili,
citoplasma, membrana, enzimas
citoplasmticas y pared celular.
Polisacridos
azcares
cpsula , pared celular
Lpidos

carbohidratos

cidos grasos membranas

cidos nucleicos
nucletidos
RNA, plsmidos y citoplasma

DNA,

CARBONO
Es el esqueleto de los
carbohidratos ,lpidos y protenas.

NITRGENO
entra a formar parte de
protenas, cidos nucleicos y polmeros de la
pared celular, al ser metabolizado.
La fuente puede ser el N2 atmosfrico, nitritos,
nitratos, sales de amonio, aminocidos y
pptidos.

CRECIMIENTO
BACTERIANO

Crecimiento bacteriano
El crecimiento bacteriano es autolimitante
Multiplicacin de 3 a 5 no /hrs , llegando a
un numero y tamao mximo.
Fases:
Fase de latencia o retraso

Fase logartmica o exponencial.

Fase estacionaria.
Fase de regresin o muerte

Fase de retraso:
Aprox. 4 horas.
Las bacterias tienen una gran
actividad
metablica.
No hay divisin, por lo tanto
su n no aumenta

Fase logartmica:
Despus de 6 h aprox.
Hay crecimiento exponencial, en
donde las bacterias se dividen en
forma constante y mxima.
Las diferente poblaciones
bacterianas poseen una tasa de
crecimiento caracterstica que
depende de la t y los nutrientes que
el medio le esta entregando.
Liberacin de exotoxinas.

Fase estacionaria
Acumulacin de deshechos
metablicos y disminucin de los
nutrientes.
Iguala la tasa de crecimiento con
la de muerte.

Fase de muerte:
Las bacterias dejan de
multiplicarse y mueren
con el tiempo.
Hay terminacin de nutrientes,
acumulacin de material de
desecho y disminucin del espacio
fsico.
Esta curva solo se produce en
condiciones de cultivos cerrados.

Bibliografa
Murray P, Kobayasshi G, Pfaller M. and Rosenthal K. 1997
Brooks GF, Butel JN, Ornston NL, Jawetz E. Melnick J. Adelberg E. 1992.
Microbiologa Mdica.
Temas de Bacteriologa y Virologa Mdica -Departamento de Bacteriologa y Virologa
.Instituto de Higiene . Facultad de Medicina. UDELAR-Oficina del Libro