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Universidad Austral de Chile

Instituto de Bioqumica y Microbiologa, Facultad de Ciencias

INSTRUMENTACION BIOQUIMICA
BIOQ. 251
1. INFORMACION GENERAL
1.1. Nombre del Modulo: Instrumentacin Bioqumica
1.2. Cdigo: BIOQ. 251
1.3. Horas tericas semanales: 4
Horas prcticas semanales: 4
1.4. Prerequisitos:
1.5. Descripcin de la asignatura: Este modulo (asignatura) esta destinado a que el estudiante adquiera
las competencias tanto tericas como prcticas en las tcnicas e instrumentacin bsica de uso frecuente
de la disciplina, utilizadas para caracterizar molculas y macromolculas, aislar y separar molculas y
macromolculas, marcar y detectar selectivamente macromolculas. Estas tcnicas incluyen
espectrometra, tcnicas de deteccin y cuantificacin de fluorescencia, tcnicas del manejo y
cuantificacin de la radiactividad, electroforesis, cromatografa, centrifugacin, captura y cuantificacin de
imgenes.
1.6. Perodo acadmico y ao en que se dicta: I Semestre: 2015
1.7. Horario de clases tericas:
Horario de clases prcticas:

Martes 09:50-11:20 hrs. Sala: 102 PA


Jueves 09:50-11:20 hrs. Sala: 113 Pab.C
Lunes 08:10-11:20 hrs. Lab. Trabajos Prcticos

1.8. Profesor Responsable:

Dr. Rodolfo Amthauer M.

ramthaue@uach.cl

1.9. Acadmicos colaboradores:

Dra. Heide Ludwig


Dr. Alejandro Yez
Dra. Claudia Quezada
Dr. Cesar Lpez
Dr. Carlos Bustos
Dr. Gabriel Vallejos
Dra. Margarita Concha
Dr. Joel Asenjo
MgCs. Mauricio Hernandez
Dra. Wallis Garrido

hludwig1@uach.cl
ayanez@uach.cl
claudiaquezada@uach.cl
clopez@uach.cl
cbustos@uach.cl
gabrielvallejos@uach.c
margaritaconcha@uach.cl
joel.asenjo@gmail.com
mauricio.hernandez@uach.cl
ximegi83@gmail.com

1.10. Alumno ayudante:

Natalia Hernndez

2. OBJETIVOS DE LA ASIGNATURA
2.1. Objetivos generales:
Entregar al estudiante los conocimientos tericos y prcticos fundamentales en el manejo de
instrumentos y tcnicas de mayor importancia bioqumica.
2.2. Objetivos especficos:
Al finalizar el curso el estudiante deber:
a) Describir los principios tericos en que se basan las tcnicas e instrumentos utilizados
preferentemente en bioqumica. (contadores de Centelleo lquido y slido; espectrofotmetros,
espectrofluormetros, multilectores, sistemas cromatogrficos como FPLC y HPLC, Centrfugas
y ultracentrfugas, sistemas de captura de imagen y programas de manejo de imagen, etc.).
b) Resolver problemas numricos originados de las distintas tcnicas instrumentales.
c) Ser capaz de utilizar las tcnicas e instrumentos en la resolucin de problemas bioqumicos.
3. METODOLOGIA
La asignatura se desarrollar con clases expositivas complementada con medios audiovisuales y
actividades prcticas de laboratorio y algunas actividades demostrativas.
4. CALENDARIO DE ACTIVIDADES TEORICAS
Clase N
1-2
3-4
5-6
7-8
9-10
11-12
13-14
15-16
17-18
19-20

Tema
Tcnicas espectroscpicas UV visible

Tcnicas cromatogrficas

Docente
H Ludwig

Fecha
12/03
17/03
19/03
14/03
26/03

R Amthauer

31/03
02/04
07/04
09/04
14/04

1. PRUEBA PARCIAL 23 Abril


21-22
23-24

Captura y cuantificacin de imgenes

25-26
27-28
29-30

Tcnicas electroforticas

31-32
33-34
35-36

Tcnicas de centrifugacin

R Amthauer

16/04
21/04

J Asenjo

23/04
28/04
30/04

R Amthauer

05/05
07/05
12/05

2. PRUEBA PARCIAL 28 Mayo


37-38
39-40

Tcnicas
de
deteccin
cuantificacin de fluorescencia.

H Ludwig

14/05
19/05

41-42
43-44
45-46
47-48
49-50
51-52

Espectrofluorometria
Instrumentacin para la deteccin y
cuantificacin de fluorescencia y
luminiscencia
Tcnicas
de
deteccin
y
cuantificacin de radiactividad

R Amthauer

26/05

A Yaez

28/05
02/06
04/06
09/06
11/06

3. PRUEBA PARCIAL 18 Junio


53-54
55-56

Espectroscopia FT-IR
Tema 1: Instrumentacin.
Tema 2: Captura de imgenes
(Transformada de Fourier)
Tema 3: Informacin obtenida de
un espectro IR. Ejercicios
Tema 4: Tratamiento y
manipulacin de datos. (Profesor
Carlos Bustos apoyar con
SPECTRA MANAGER).

C Lpez

16/06
18/06

57-58
59-60

Espectroscopias de Masa, MS
Tema 1: Instrumentacin. MS,
CG/masa, HPLC/masa
Tema 2: Captura de Imgenes
Tema 3: Informacin obtenida de
un espectro de masas. Ejercicios

C Bustos

23/06

59-60
61-62

Resonancia Magntica Nuclear


(NMR)
Tema 4: Integracin de los Tpicos
IR, NMR. MS. Ejercicios

C Bustos

25/06
30/06

63-64

Aplicaciones de RMN a Pptidos.

G Vallejos

03/07

4. PRUEBA PARCIAL 9 Julio

4.1. CALENDARIO ACTIVIDADES PRACTICAS


Prctico N

Tema
.
Espectrofotometra.
Determinaciones cuantitativas

Docente

Fecha

H Ludwig
J Asenjo

23/03

Espectro de absorcin de derivados


de hemoglobina

H Ludwig
J Asenjo

30/03

Cromatografa
de
intercambio
inico. (DEAE-celulosa).

M Concha
J Asenjo

06/04

Cromatografa filtracin en geles.


(Sephadex).

M Concha
J Asenjo

13/04

Cromatografa Fase Reversa

R Amthauer
J Asenjo

20/04

Anlisis y procesamiento de imagen


Utilizando software ImageJ

R Amthauer

27/04

Electroforesis I (Agarosa)

M Concha
NN

04/05

Electroforesis II (PAGE-SDS)

J Asenjo
NN

11/05

HPLC y FPLC instrumentacin


(Demostrativo)

M Hernndez
R Amthauer
C Oyarzun*
J Asenjo

18/05

10

Ultracentrifugacin. Simulacin de
separaciones en gradientes de
sacarosa.

R Amthauer

25/05

11

Fluorescencia Luminiscencia
Instrumentacin (demostrativo)

H Ludwig
R Amthauer

01/06

12

Taller Aplicaciones prcticas de


radiactividad en Bioqumica

A Yaez
C Quezada

08/06

13

Contador Geiger-Muller. Manejo del


contador de Centelleo lquido
Determinacin de vida media

A Yaez
C Quezada

15/06

NOTA IMPORTANTE: Esta asignatura se regir por el nuevo Reglamento Estudiantil de Pregrado de
la Universidad Austral de Chile.
5. REQUISITOS DE ASISTENCIA
La asistencia a clases tericas es controlada exigindose un 70% de asistencia para aprobar la
asignatura (Articulo 24 del reglamento estudiantil).
La asistencia a las sesiones prcticas es obligatoria (Articulo 25 del reglamento estudiantil).
La inasistencia deber justificarse en base a razones fundadas ante la Direccin de la Escuela a ms tardar
dentro de los tres das hbiles siguientes de ocurrida la ausencia (Articulo 25 del nuevo reglamento
Acadmico Estudiantil de Pregrado). No obstante debe tenerse presente que para aprobar la asignatura se
requiere haber realizado al menos el 80% de las actividades prcticas programadas y realizadas
6. NORMAS DE EVALUACION
6.1. Parte terica: Se realizarn cuatro pruebas parciales las que tienen carcter obligatorio. Estas
evaluarn tanto las materias tratadas en las clases tericas como problemas derivados del contenido terico.
Para algunos tpicos se entregaranay guas de ejercicios para la resolucin de problemas tpicos.
La inasistencia a una prueba parcial se regir de acuerdo al artculo 29 del nuevo reglamento, debiendo
rendir una prueba recuperativa.

6.2. Parte prctica: Es indispensable presentarse al trabajo de laboratorio con el dominio de las
materias correspondientes tratadas en clase y en la gua de prctico correspondiente. Por esta razn, al
inicio de cada sesin de laboratorio se har una prueba corta de 15 minutos evalundose tanto los
conceptos tericos que se manejarn en el prctico as como el conocimiento del trabajo experimental a
realizar. Adems, cada alumno o grupo deber elaborar un informe del trabajo prctico el cual se
confeccionar de acuerdo a una pauta e instrucciones particulares a cada prctico. En general los
informes se entregarn finalizado el trabajo practico, por lo que deben confeccionarse durante la
misma sesin. Los informes sern aprobados (A o A), o rechazados (R). En la eventualidad que el
estudiante no entregue el informe correspondiente, se evaluar como rechazado. Los estudiantes que
tengan todos sus informes aprobados (con una A), se les calificar con nota 7.0,. para aquellos que tengan
informes con -A y/o R, a la nota 7 de informes se le restar 0,5 por cada A y 1,0 por cada R. La
nota resultante equivaldr a 2 notas, para calcular el promedio de notas de practico.
6.3. Nota Final de aprobacin.
La nota final se obtendr de la siguiente ponderacin:
Prueba 1
Prueba 2
Prueba 3
Prueba 4
Promedio notas de Prctico
Nota de Final

19.0%
18.0%
17.0%
16.0%
30.0%
100%

La nota mnima para aprobar la asignatura es de 4.0 (Articulo 35 nuevo reglamento)


Debe tenerse presente que NO HABRA EXAMEN
Nota: En las pruebas parciales y examen escrito slo se podr usar calculadoras simples no programables.
Adems, durante las pruebas y sesiones de prcticos NO SE ACEPTARA el uso de ningn dispositivo
electrnico como telfonos celulares, MP3, MP4, tablet o similares. Los telfonos celulares debern
permanecer apagados durante todas actividades acadmicas.
7. BIBLIOGRAFIA
1. Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology
Edited by T.S. Work and E.Work.
North Holland Publishing Company
Vol. 1, al 9.
2. D.Freifelder (1982). Physical Biochemistry. Freeman and Co.,
San Francisco (2da. Edicin).
3. I.H.Seguel (1976) Biochemical Calculations. John Wiley and Sons, New York.
4. P.Scheeler "Centrifugation in Biology and Medical Science"
John Wiley & Sons, New York. 1981.
5. B.D.Hames y D.Rickwood "Gel eletrophoresis of Proteins".
IRL Press, Oxford. 1981.
6. An Introduction to Spectroscopy for biochemists Ed. by J.B.Brown
7. Instrumental Methods of Analysis
(Mtodos Instrumentales de Anlisis)
Hobart H.Willard, Lynne Merrit, John Dean
8. Radioisotopes in Biology
Edited by R.J. Slater
IRL Press, Oxford 1990
9. Instrumentacin Qumica
H.A.Strobel
10. HPLC of macromolecules: a practical approach. Oliver, R.W.A.
IRL/Oxford University, 1998. 2. Edicin.

DR. RODOLFO AMTHAUER M.


PROF. RESPONSABLE
BIOQ. 251

VALDIVIA, Marzo 2015

DR. ALEJANDRO REYES P.


DIRECTOR
INSTITUTO DE BIOQUIMICA Y
MICROBIOLOGIA

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