INFORME DE PRCTICA

Alumna: Roman Reyes Cinthia Natali

Recuento globular, hematocrito, dosaje

de hemoglobina, constantes corpusculares
y
velocidad
de
sedimentacin
en
vertebrados
UNIVERSIDAD NACIONAL

DE TRUJILLO

Trujillo Per

INTRODUCCIN
El volumen de sangre de los adultos se correlaciona con la masa corporal (libre
de grasa) y representa en las mujeres 3.5 L y en los hombres 4.5 L. La sangre
est formada por una parte corpuscular (clulas sanguneas) y una parte
lquida

(plasma). De

la

parte

corpuscular

aproximadamente

el

90%

corresponde a glbulos rojos (Rodak, 2004).

Entre las funciones de la sangre destacan entre otras el transporte de
numerosas sustancias (O2, CO2, nutrientes, productos del metabolismo,
vitaminas,

electrlitos,

etc.),

el

transporte

de

calor

(calentamiento,

enfriamiento), la transmisin de seales (hormonas), el amortiguamiento y

defensa frente a las sustancias extraas y microrganismos (Silbernagl y
Despopoulus, 2000).
Estas funciones son realizadas por las clulas sanguneas, de las que las ms
numerosas son los eritrocitos encargados del transporte de O 2 y de parte del
taponamiento del pH. Entre los leucocitos, los granulocitos neutrfilos se
encargan de la defensa inmunitaria inespecfica y los monocitos y linfocitos de
las reacciones inmunitarias especficas. Las plaquetas (o trombocitos)
intervienen de forma decisiva en la coagulacin de la sangre (Silbernagl y
Despopoulus, 2000).
Debido a la importancia de estas funciones y a la cantidad de clulas
sanguneas que participan en estos procesos, se toman medidas que nos
indican valores normales de parmetros como: Tiempo de coagulacin,
velocidad de sedimentacin, hematocrito, hemoglobina, recuento de glbulos
rojos, recuento de glbulos blancos, volumen corpuscular medio, etc.

Por eso decidimos realizar esta prctica de laboratorio, donde determinaremos

el valor de las siguientes constantes corpusculares: Tiempo de coagulacin,
velocidad de sedimentacin, hematocrito, hemoglobina, recuento de glbulos
rojos, recuento de glbulos blancos, volumen corpuscular medio, hemoglobina
corpuscular media, concentracin media de hemoglobina corpuscular. Y como
objetivo comparar los resultados obtenidos con los parmetros normales.

II.

MATERIAL Y MTODOS
Obtencin de la muestra
La sangre se extrajo tpicamente de una vena, de la parte interior
del codo. El sitio se limpia con un desinfectante (alcohol). Se
envolvi una banda elstica alrededor de la parte superior del
brazo con el fin de aplicar presin en el rea y hacer que la vena
se llene de sangre. Luego, se introdujo suavemente una aguja en
la vena y se recogi la sangre en un frasco conteniendo
anticoagulante. La banda elstica se retir del brazo. Una vez
recogida la muestra de sangre, se retir la aguja y se cubri el
sitio de puncin para detener cualquier sangrado.
Tiempo de coagulacin:
Se coloca una gota de sangre en una lmina porta objeto, con un
alfiler se mueve lentamente la gota de sangre hasta observar la
formacin de un delgado hilo en la punta del alfiler que vendra a
ser la fibrina formada producto de la transformacin del fibrogeno.
Calculando el tiempo desde que se coloco la gota de sangre hasta
la aparicin de dicho hilo. El cual seria el tiempo de coagulacin.

Velocidad de sedimentacin:
Colocamos el tubo de Wintrobe en la gradilla de sedimentacin
cuidando que est perfectamente bien nivelada. Con la ayuda de
la pipeta Pasteur llenamos el tubo de Wintrobe hasta la marca de
10 1 con sangre previamente homogenizada. Dejamos reposar
durante una hora evitando cualquier movimiento. Hicimos la
lectura de los milmetros (mm) sedimentados en una hora.
Hematocrito:
Segn el Mtodo de Wintrobe, la sangre con anticoagulante debe
ser llevada mediante una pipeta Pasteur, hacia el tubo de
Wintrobe, co0menzando desde el fondo hasta la marca de
100mm. , teniendo cuidado de no formar espuma.
Tapar el tubo con un tapn de goma para evitar evaporacin.
Centrifugar a 3000rpm. por 30 minutos.
Transcurrido el tiempo observar y medir directamente el nivel de
la columna de glbulos rojos.
Microhematocrito:
Tomar la muestra

en

capilares

con

anticoagulante.

Debe llenarse aproximadamente 70 80% del capilar.

Ocluir un extremo del capilar con plastilina.
Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de una
centrifuga de microhematocrito, con el extremo ocluido, adherido
al reborde extremo de la plataforma.
Centrifugar por 5 minutos entre 10000 12000 rpm.
Hemoglobina:
La sangre tomada se diluye en 5ml de hidrxido de amonio el cual
causa hemolisis de los hemates.
Por medio de la pipeta de Sahli se toma exactamente 0.02 ml de
sangre total, limpiar luego la punta con papel absorbente, y verter
en un tubo de ensayo el cual contiene el hidrxido de amonio.

Dejar en reposo por espacio de 5 a 15 minutos. Luego llevar a un

espectrofotmetro

con filtro verde a 540 nm. y leer la

absorbancia.
Realizar los clculos, multiplicando la absorbancia por el factor
que es 0.1063, y as obtener la concentracin de hemoglobina por
unidad de volumen (gr/dL).
Cantidad de Glbulos rojos:
Llenar la pipeta de Thoma para eritrocitos (roja) con sangre hasta
la marca de 0.5 con ayuda una boquilla. Secar el exceso de
sangre con una gasa limpia.
Sin dejar caer alguna gota de sangre, llenar con el lquido
diluyente de Hayem hasta la marca de 101 sin pasar de la marca.
Mezclar el contenido en el agitador para pipetas de Thoma
durante 1 min. Desechar las primeras 3 gotas. Dejar caer una
gota en la cmara de NEUBAUER, cubrir con una laminilla.
Contar las clulas con el objetivo 40X en las cinco cuadrculas
secundarias con la ayuda de un contador mecnico. Calcular el
nmero de eritrocitos/mm3 multiplicando el valor obtenido por
10000
Cantidad de Glbulos blancos:
Llenar la pipeta de Thoma para leucocitos (blanca) con sangre
hasta la marca de 0.5 con ayuda una boquilla. Secar el exceso de
sangre con una gasa limpia.
Sin dejar caer alguna gota de sangre, llenar con el lquido
diluyente de Turck hasta la marca de 101 sin pasar de la marca.
Mezclar el contenido en el agitador para pipetas de Thoma
durante 1 min. Desechar las primeras 3 gotas. Dejar caer una
gota en la cmara de NEUBAUER, cubrir con una laminilla.

Contar las clulas con el objetivo 40X en las cinco cuadrculas

secundarias con la ayuda de un contador mecnico. Calcular el
nmero de eritrocitos/mm3 multiplicando el valor obtenido por
10000
Volumen corpuscular medio (VCM):
Resulta de multiplicar el valor del hematocrito en porcentaje por
10, divido todo esto entre el nmero de Glbulos Rojos contados
en millones por mm3. Arroja el volumen promedio de cada GR, en
micras cubicas o femtolitros (fL).
Hemoglobina Corpuscular Media (HCM):
Se determina mediante el cociente entre el valor de la
concentracin de hemoglobina de sangre total (gr/dL) multiplicado
por 10 y el nmero de hemates en un mm3. Se expresa en g.
Concentracin Corpuscular Media de hemoglobina (CMHC):
Se obtiene de la multiplicacin de la concentracin de la
hemoglobina de la sangre total por 100, todo esto divido entre el
valor del hematocrito en porcentaje.

III.

RESULTADOS
Tabla N 1:
ANLISIS
Tiempo de coagulacin
Velocidad de sedimentacin
Hematocrito
Microhematocrito
Hemoglobina
Recuento de Glbulos rojos
Recuento de Glbulos blancos
Volumen corpuscular medio(VCM)
Hemoglobina corpuscular media(HCM)
Concentracin media de Hb. Corpuscular(CMHC)

IV.

DISCUSIN

LECTURA
42
10mm/h
48%
48%
15.48g/dL
2410000 /mm3
5560 mm3

El nmero de leucocitos depende de muchos factores como, edad, peso, etc.

Para adultos los valores de referencia oscilan entre 4 500 / mm 3 y 11 500 /
mm3 (Ruiz, 2003). Los valores obtenidos para recuento de glbulos blancos en
la tabla 1 dan un nmero de 5560 mm3 de sangre, encontrndose dentro de
los parmetros ideales.
La referencia para hemoglobina es variable y depende del sexo, altura del sitio
de residencia, etc. Las cifras inferiores normales de hemoglobina en adultos
sanos son de 12 g/dL

para mujeres y de 14

g/dL

para varones.

Las

cuantificaciones de Hb inferiores a las mencionadas permiten establecer el

diagnstico de anemia. Las cifras de hemoglobina superiores a 15 g/dL para
mujeres y 18 g/dL

para varones permiten establecer el diagnstico de

eritrocitosis o polisemia (Ruiz, 2003). Por lo tanto concentracin de

hemoglobina en mujer, hallada en el laboratorio (15.48 g/dL), se encuentra por
encima del limite superior, lo que no indicara el diagnstico de eritrocitosis o
polisemia; sino debido a al error propio de la inexperiencia de los estudiantes
en estas pruebas.
El valor encontrado del Hto se encuentra en el rango dispuesto por Rodak,
2004, el cual oscila entre 35 y 49 % para mujeres.
El Tiempo de coagulacin indica el estado de los factores plasmticos que
intervienen en el mecanismo de la coagulacin (globulina antihemoflica,
protrombina, fibringeno, etc.) o que la dificultan (antitrombina, etc), aunque
hay que resaltar su escaso valor, pues es normal en muchos casos en los que
estos factores estn alterados (M. Donado, 2005). En la prctica este tiempo
fue de 4 2, valor ligeramente bajo; ya que el tiempo de coagulacin normal es

de 5 a 10 minutos. Slo si es superior a 12 puede considerarse patolgico

(Rodak, 2004).
La velocidad de sedimentacin globular (VSG) es til para monitorizar la
evolucin de una enfermedad inflamatoria o diferenciar enfermedades
similares. La VSG es afectada por los eritrocitos, el plasma y factores
mecnicos y tcnicos. Los eritrocitos normalmente son pequeos, sedimentan
despacio y tienen una carga superficial neta negativa, por consiguiente tienden
a repelerse entre s (Rodak, 2004). Caso que ocurre en la VSG hallada en el
laboratorio de prctica, el cual est dentro del rango establecido por Ruiz,
2003, el cual va desde los 15 mm/h a 20 mm/h.

V.

CONCLUSIN
Los resultados obtenidos para las diferentes pruebas, dan resultados dentro de
los parmetros establecidos, por lo que se los puede considerar como
normales, con excepcin de algunos valores que varan.

VI.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFCAS
GANONG W. 1996. Fisiologa mdica. El Manual Moderno.
RODAK, F. 2004. HEMATOLOGA: Fundamentos y Aplicaciones Clnicas.
Editorial Mdica Panamericana. Espaa. pg. 155-168.
RUIZ ARGUELLES, G. J. 2003, FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGA,
Editorial Mdica Panamericana S.A. Espaa., pg. 45-60.
SILBERNAGL, S. DESPOPOULUS, A. 2000. Atlas de bolsillo de fisiologa.
Ediciones Harcourt. Espaa. pg. 88.