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UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA DE OBSTETRICIA

PRACTICA N 8
PERFIL LIPIDICO
Determinacion de colesterol

CURSO BIOQUIMICA
CICLO 2013 - I
I

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PRACTICA N 8
PERFIL LIPIDICO DETERMINACION DE COLESTEROL
INTRODUCCION

Un perfil lipdico tambin llamado lipidograma y perfil de riesgo


coronario, es un grupo de pruebas de laboratorio solicitadas generalmente
de forma conjunta para determinar el estado del metabolismo de los lpidos
corporales, generalmente en suero sanguneo.
El medico utiliza la informacin para evaluar, junto con otros signos y
sntomas, el riesgo de una dislipidemia y sus complicaciones como un
infarto cardaco o una apopleja provocados por obstruccin de los vasos
sanguneos debido a ateromas o placas de colesterol, es decir para valorar
el riesgo cardiovascular de la persona e instituir as un rgimen adecuado
de prevencin y tratamiento.

LABORATORIO N 08
PERFIL LIPIDICO (triglicridos, Colesterol, HDL y LDL)

I.

MARCO TEORICO
Qu es un perfil lipdico?
Un perfil lipdico es un grupo de pruebas solicitadas generalmente de forma
conjunta para determinar el riesgo de enfermedad cardaca coronaria. Las
pruebas que conforman un perfil lipdico han mostrado ser buenos
indicadores de la posibilidad de presentar un infarto de miocardio o un
accidente vascular cerebral provocados por obstruccin de los vasos
sanguneos o por endurecimiento de las arterias (aterosclerosis). El perfil
lipdico tpico incluye:
*colesterol total
* colesterol HDL, a menudo conocido como colesterol bueno
*colesterol LDL, a menudo conocido como colesterol malo
* triglicridos
Un perfil lipdico ms extenso puede tambin incluir:
*colesterol VLDL
* colesterol no-HDL
A veces, el informe incluye algunos clculos adicionales como el cociente
entre colesterol total y colesterol HDL, o un ndice de riesgo establecido a
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partir de los resultados del perfil lipdico, la edad, el sexo y otros factors de
riesgo. El mdico le informar acerca de lo que pueden significar estos
resultados.
Cmo se obtiene la muestra para el anlisis?
Extraccin de la muestra por puncin de una vena del antebrazo o a veces
por puncin directa en un dedo. Esta alternativa es la que se utiliza cuando
se pretende analizar la muestra en un dispositivo porttil. Es necesario
haber estado en ayunas durante 9-12 horas; es posible que se le permita
beber agua.
Cmo se utiliza el perfil lipdico?
El perfil lipdico se utiliza para determinar el riesgo de enfermedad cardaca
y como gua para decidir como debe ser tratada una persona en situacin
de riesgo. Los resultados del perfil lipdico se consideran conjuntamente con
otros factores de riesgo conocidos de enfermedad cardaca para
proporcionar un plan de tratamiento y seguimiento. En funcin del perfil
lipdico y de otros factores de riesgo se plantean distintas alternativas
teraputicas que incluyen cambios en el estilo de vida como dieta y ejercicio
fsico, o tratamiento con frmacos como estatinas.
Cundo se solicita?
Se recomienda el estudio a adultos sanos sin factores de riesgo conocidos
de enfermedad cardaca, cada cinco aos. Es posible que tan slo se le
solicite el colesterol en lugar de un perfil lipdico completo, aunque si el
colesterol resulta elevado, es muy probable que se le realice el estudio
completo.
Si existen otros factores de riesgo o se tiene (o se haba tenido
anteriormente) el colesterol elevado, se recomienda la realizacin del perfil
lipdico completo de manera ms frecuente.
El perfil lipdico no suele solicitarse en nios ni en adolescentes sin riesgo.
No obstante, s que se recomienda su realizacin en nios y jvenes con
riesgo aumentado de desarrollar enfermedad cardaca. Algunos factores de
riesgo son parecidos a los de los adultos e incluyen una historia familiar de
enfermedad cardaca, diabetes, hipertensin arterial o sobrepeso. A los
nios con riesgo elevado se les debera de solicitar el perfil lipdico entre los
2 y los 10 aos de edad (segn recomienda la American Academy of
Pediatrics).
Tambin puede solicitarse regularmente el perfil lipdico como
monitorizacin del tratamiento (dieta, ejercicio o estatinas) para evaluar si
ha resultado efectivo.
II.

DETERMINACIN DE COLESTEROL TOTAL


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FUNDAMENTO DEL METODO:


La secuencia reaccional es la siguiente:
Esteres del colesterol
Colesterol O2

colesterol cidos grasos

CHE

Colesten-3-ona H2O2

CHOD

H2O2 4-AF aceptor

POD

uinonimina roja.

MATERIAL:
Material para toma de muestra:
automticas

Tubos de ensayo - Gradillas - Pipetas

- Pipetas de 5 ml
EQUIPOS:
- Bao Mara - Espectrofotmetro Centrfuga
REACTIVOS:
STANDARD : Solucin Colesterol 200 mg%
ENZIMAS
: Colesterol Esterasa ( CHE )
Colesterol Oxidasa (CHOD)
Peroxidasa (POD)
4 aminofenazona (4-AF)
BUFFER
: Solucin Buffer Ph 6,8 conteniendo Fenol y Colato de
Sodio.
REACTIVO DE TRABAJO:
Reconstituir el contenido de un vial de enzimas con una parte de
enzimas con una parte de Buffer. Transferir al frasco de Buffer
enjuagando varias veces el Val con el mismo. Mezclar hasta disolucin
completa. Homogeneizar y usar.
PROCEDIMIENTO:
En tres tubos de ensayo, colocar:
B
STANDARD
MUESTRA
RVO DE TRABAJO

STD
200mg %
30 ul
--3 ml

----3 ml
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D
--30 ul
3ml

Incubar 5 minutos en Bao Mara a 37C.


Leer en Espectrofotmetro a 505 nm , llevando el aparato a cero con el
blanco.

CALCULO DE LOS RESULTADOS:


Colesterol
Factor :

mg%: Abs.D

Factor

Conc.Std (200 mg%)


Abs.Conc

VALORES NORMALES: 170 240 mg%


Factor=200/0.29=689.65
Colesterol total=689.65*0.33=277
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10C) hasta la
fecha de vencimiento indicada en la caja. No mantener a
temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
Reactivo de Trabajo: es estable 30 das en refrigerados (2-10C)
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS
El Reactivo de Trabajo puede presentar una coloracin rosada que no
afecta su funcionamiento.
Lecturas del Blanco superiores a 0.160 D.O. o lecturas del Standard
anormalmente bajas, son indicios de deterioro del Reactivo. En tal
caso, desechar.

MUESTRA
Suero o plasma.
a) Recoleccin: previo ayuno de 21 a 14 horas, obtener suero o
plasma. Separar de los glbulos rojos dentro de las 2 horas de
extraccin.
b) Aditivos: en caso de emplear plasma, se recomienda el uso de
Anticoagulante W o heparina para su obtencin.
c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros con hemlisis
intensa o marcadamente ictricos producen resultados errneos,
por lo que no deben ser usados.
d) Estabilidad e instrucciones: los triglicridos en suero son
estables 3 das en refrigerador (2-10C). No congelar.
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MATERIAL REQUERIDO

III.

Espectofotmetro o fotocolormetro.
Micropipetas y pipetas para medir los volmenes indicados.
Tubos de fotocolormetro o cubetas espectrofotomtricas.
Bao de agua a 37 C
Reloj o timer.

Cuestionario

1. Haga un balance energtico del cido palmtico.


2. Qu caractersticas tiene los quilomicrones y los VLDL,
qu transportan y cmo se regulan comente sobre sus
apolipoproteinas B100, B48, Apo C, Apo e?
3. Con qu enzimas y por qu hormonas es regulado en el tejido
adiposo el movimiento lipdico?
4.
Cmo y cuando produce liplisis activa el stress
metablico
incluya
los
cuerpos
cetnicos
riesgos
importancia?
5. como puede sintetizarse triglicridos en dietas ricas en
carbohidratos o Protenas que vias utilizara cada una.
BIBLIOGRAFIA:
http://www.scribd.com/doc/18398172/OXIDACION-DE-ACIDOSGRASOS-Power-point
Harper- 15 Edicion
http://www.labtestsonline.es/tests/LipidProfile.html

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