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MICROBILOGA SANITARIA I

UNI FIA 2015-1

CALIBRACIN DEL MICRMETRO OCULAR MEDICIN DE


MICROORGANISMOS
I.

OBJETIVOS

Reconocimiento del equipo: micrmetro de ocular, micrmetro de platina y,


microscopio.
Calibrar el micrmetro de ocular y el de platina de forma eficiente, en el
menor tiempo posible y con el menor error.
Hallar los valores de calibracin con los diferentes aumentos 10X, 43X.
Medir microorganismos con la ayuda del micrmetro de ocular.
Calcular el error en las mediciones y en las calibraciones.

II. FUNDAMENTO TERICO


MICROMETRO DE OCULAR
Consiste en un disco de vidrio transparente en el cual se encuentra graduada
una reglilla de 10 [mm] de longitud, dividida en 100 partes. Este disco
graduado va inserto en el ocular del microscopio. Se utiliza para medir el
tamao de los microorganismos susceptibles de ser vistos por el microscopio
ptico.

MICROMETRO DE
PLATINA)

OBJETIVO (O

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Consiste en una lmina de vidrio que contiene en su centro un segmento de


recta de 1 [mm] de longitud, dividido en 100 partes iguales de 10 micrones ()
cada una. Se coloca en la platina del microscopio, y se utiliza para calibrar la
reglilla ocular y el ocular de Whipple respecto al ocular y al objetivo que se
utilice en el microscopio.

CALIBRACION MICROMETRO
La calibracin de un micrmetro es una operacin propia de un sistema de
calidad. El micrmetro es un instrumento de medida para el control
dimensional de elementos. Se trata de un instrumento de medida con unas
buenas prestaciones metrolgicas respecto a su coste. Conseguir resoluciones
de centsimas en cualquier otra magnitud fsica (temperatura, presin, fuerza,
) requieren de inversiones mucho ms elevadas. Esto es debido,
fundamentalmente, a que la tecnologa en la magnitud dimensional est ms
desarrollada que en las dems.
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La calibracin de un micrmetro debe ser una operacin planificada y sus


resultados deben ser verificados conformes a un criterio de aceptacin/rechazo
preestablecido
Calibrar micrmetros es comparar la medida de un patrn de referencia
trazable con la medida del mensurando. Al calibrar los micrmetros estamos
aportando niveles de fiabilidad y seguridad en los procesos donde la medicin
resultante del uso del instrumento tenga lugar. Igualmente, al calibrar
los micrmetros podremos generar los registros pertinentes para poder
documentar un Sistema de Gestin de la Calidad y tomar las medidas
oportunas para poder asegurar la calidad de los productos y servicios.
Calibracin micrmetro de ocular
Consiste en determinar la distancia real en mm, a que equivale cada una de las
divisiones del micrmetro ocular.

Reglilla ocular

III. MATERIALES UTILIZADOS

Regilla micrometrica

MICROSCOPIO N7

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LMPARA

MUESTRA DE ALGAS

MICRMETRO DE PLATINA

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MICRMETRO DE OCULAR

IV. PROCEDIMIENTO
a. Colocar el micrmetro de platina, en la platina.
b. Colocar el micrmetro del ocular en el ocular
c. Superponer el micrmetro de ocular sobre el micrmetro de platina para
determinar el N de divisiones equivalentes de ambos micrmetros.

d. - Calibracin del micrmetro del ocular


Determinar cuntas divisiones del micrmetro del ocular y coinciden con
las divisiones del micrmetro de platina x .Con los objetivos de 10X y 43X
Nombramos:
X = divisin de platina
;
Y = divisin del ocular
Se calcula: y
e. - Medicin de los microorganismos
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Con el micrmetro del ocular, se realiza la medida de microorganismos;


objetivo de 10X y 43X.
V.

RESULTADOS

SEMANA 1 CALIBRACIN

Para 10x
Dato x= 0.1mm
1 divisin de platina <> 7 divisiones de ocular
1X <> 7Y
Y <>

Y <>
Y <>

0.1
mm
7

0.01428 mm
14.28 m

Para 43x
Dato x= 0.1mm
1 divisin de platina <> 25 divisiones de ocular
1X <> 25Y
Y <>

Y <>

0.1
mm
25

0.004 mm

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Y <>

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4 m

SEMANA 2 MEDICIN DE MICROORGANISMOS

Para 10x
Y <>

14 m

Largo = 3.5 divisiones de ocular = 3.5y = 49.98 m


Ancho = 1.5 divisiones de ocular = 1.5y = 21.42 m

Para 43x
Y <>

4 m

Largo = 12.5 divisiones de ocular = 12.5y = 50 m


Ancho = 5.5 divisiones de ocular = 5.5y = 22 m

Errores de medicin
error .medicin

e(10 x) e(43x) x100%

error de medicin LARGO =

e(43x)

|49.9848|
48

100 =4.125

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error de medicin ANCHO =

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|21.4222|

100 =2.63

22

Grfica divisin del ocular vs medida (en micras)

MEDICIN DE MICROORGANISMOS
25
20
15
10x
divisiones del ocular

43x
10
5
0
0

50

100

150

200

250

300

dimension real (m)

CUADRO DE DATOS

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VI.

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CONCLUSIONES

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VII.

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Para medir el tamao de microorganismos lo hicimos por comparacin


de dimensiones (a cuantas divisiones del micrmetro de ocular equivale)
posteriormente se determinan las dimensiones reales (en micras o
milimetros) con la calibracin echa anteriormente.
Se encontr errores de 4.125% Y 2.63% en el largo y ancho

respectivamente, valores ligeramente mayores del recomendado


debido a un error en la calibracin.
Las algas filamentosas presentan hilillos que al ser observadas con
el microscopio se ven segmentados lo que facilita su medicin.

RECOMENDACIONES

Tener cuidado en el manejo del microscopio, asegurarse de que el ocular


y micrmetros estn limpios, de no ser as proceder con la limpieza.

Realizar varias veces la calibracin con el microscopio elegido, en caso


de obtenerse un error muy grande (>2%) en la medicin del
microorganismos se deber iniciar de nuevo desde la calibracin.

Se debe realizar la calibracin de manera rpida debido a la escasez de


micrmetros de platina del laboratorio.

VIII. CUESTIONARIO
1. Sealar el tamao relativo de los m.o.: bacterias, hongos,
protozoarios, algas y virus.
BACTERIAS: Miden de 1 a 6 micras (aunque existen de mayor tamao
40-50 micras)
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HONGOS: Los hongos macroscpicos se miden en cm, en tanto que los


microscpicos se miden en micras, sus tamaos van entre 2 y 200
micras.
PROTOZOARIOS: La mayora de las especies tienen menos de 250 de
longitud; pero Spirostomun (ciliado) crece hasta 3mm, y Porospora
gigantea (esporozoo) hasta 16mm. Algunos solo tienen 2 3 de
longitud.
ALGAS: Su tamao va desde unas micras hasta unos 100 mt de largo.
VIRUS: Su tamao oscila entre los 24 nanmetros del virus de la fiebre
aftosa a los 300 nanmetros de los poxvirus.
2. describa las principales caractersticas de bacterias, hongos,
protozoarios, algas, virus, rotiferos y microorganismos.

Bacterias

*El primer nombre de una bacteria corresponde al gnero y el segundo l


a especie.
* son organismos procariotas.
*Se caracterizan porque carecen de un ncleo con una membrana.
*Se clasifican por su forma en cocos, bacilos y espiroquetas, segn la
estructura de la pared celular.
*Son microorganismo unicelular, de forma diferente y hbitat variable.
*Las bacterias aerbicas son las que necesitan oxigeno las anaerbicas
les resulta nocivo.
*Las bacterias son capaces de generar mutantes.

Hongos

*Son organismos uni o pluricelulares inmviles con paredes celularsemejantes en cuanto a la composicin qumica, espesor y estructura.
*Pueden crecer como clulas nicas.
*No poseen clorofila
*Estn ampliamente difundidas en la naturaleza, especialmente sobre el
suelo.
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*Interviene en el despoblamiento de la materia orgnica.


*Son tiles para la reproduccin de antibiticos, de enzima.

Virus

*Entidad infecciosa microscpica que solo puede multiplicarse dentro de


las clulas vivas de otros organismos.
*Infecta todos los tipos de organismos.
*Son considerados submicroscopicos.
*Los virus contiene ADN o ARN lo que les permite la reproduccin.
* No tienen nutricin, ni reproduccin y no lo hacen porque no tienen
metabolismo.

Protozoarios

*Unicelulares, algunos
multicelulares.

coloniales

algunos

con

etapas

de

vida

*mayormente microscpicos
*todo tipo de simetra
*sin capas germinativas
*Eucariontes con orgnulos especializados
*De vida libe y todo tipo de simbiosis (mutualismo, comensalismo,
parasitismo)
*digestin intracelular
*reproduccin asexual (por fision, gemacin, quistes). Sexual ( singamia,
autogamia, etc)

Rotiferos

*El nombre rotferos, que significa portadores de ruedas, proviene


precisamente de ese aparato rotador.
*Son de las primeras formas de vida microscpicas que se estudiaron, y
se les conoca como animlculos rueda. Oscilan entre 40 m y 3mm y
comprenden unas 1.500 especies.

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*Los rotferos son muy numerosos en todo el mundo y se encuentran


principalmente en ecosistemas dulceacucolas, como charcas o lagos de
agua dulce, aunque tambin hay algunas especies marinas o terrestres.
*Se alimentan de otros microorganismos y unas pocas especies son
parsitas. *Los rotferos presentan sexos separados, aunque los machos
son escasos y salvo en condiciones adversas se desarrollan por
partenognesis.
*Clasificacin cientfica: los rotferos constituyen el filo Rotferos
(Rotifera), formado por 3 clases: Seisonceos, Bdeloideos y
Monogonontos.
3. porque es importante conocer el tamao de los m.o.?
Explique
Para poder estudiarlo, bsicamente como vas a estudiar y analizar algo
que no puedes ver, ni conoces alguna caracterstica. Ya de ah, para
conocer su morfologa, como se mueve, que reacciones presenta ante
estmulos fsicos y qumicos, tambin para conocer datos de su ecologa,
como la abundancia, como interacta con otros organismos, etc.
A su vez, el tamao de los microorganismos es importante para los
filtros que los logran retener por medio del tamao separndolos unos
de otros, por medio de poros que permiten el paso.

4. Describa las aplicaciones prcticas referente a la informacion


sobre la medicion de los microorganismos
a. proceso de filtracin de tratamiento de agua
En general, se considera la filtracin como el paso de un fluido a travs
de un medio poroso que retiene la materia que se encuentra en
suspensin. En las principales instalaciones de filtracin, los filtros
sueles ser abiertos, mientras los filtros cerrados suelen utilizarse para
instalaciones pequeas (menor de 40m3/h).
En las instalaciones de filtracin de las estaciones de tratamiento de
agua, el medio poroso suele ser generalmente arena, arena + antracita
o bien carbn activo en grano, y la materia en suspensin est
constituida por flculos o microflculos procedentes de la etapa anterior
de decantacin o bien formados expresamente cuando se sigue el
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proceso conocido como "microfloculacin sobre filtro" o filtracin


directa". Los filtros de estas instalaciones, generalmente son abiertos,
con velocidades de filtracin entre 6 y 15 m/h, emplendose los filtros
cerrados a presin en instalaciones pequeas (menores de 50 m3 /h).
El espesor de la capa de arena suele oscilar entre 0,7 y 1 m. y la talla
efectiva entre 0.8 y 1mm con un coeficiente de uniformidad entre 1,5 y
1,7. En el caso de lechos bicapa, el espesor de arena es 1/3 del total y
sobre ella una capa de antracita de 2/3 del espesor total y talla efectiva
entre 1,2 y 2,5mm.

Realmente, el espesor y granulometra depende de la velocidad de


filtracin, del tamao y naturaleza de las partculas que van a ser
retenidas y de la prdida de carga disponible.
b. proceso de filtracion mediante membrana (tratamiento de agua)
La filtracin con membranas es una tcnica empleada para separar
partculas de un lquido para purificarlo.
En la filtracin con membranas, un disolvente atraviesa una membrana
semipermeable. La permeabilidad de la membrana est determinada por
el tamao de los poros de la membrana y acta como barrera para las
partculas que son ms grandes que los poros, mientras que el resto del
disolvente puede pasar libremente a travs de la membrana. El
resultado es un fluido limpio y filtrado a un lado de la membrana, con la
solucin eliminada al otro.
Existen tres procesos de filtracin con membranas:
Microfiltracin [MF] - La MF es un proceso a baja presin [hasta 100 psi
(7 bares)] para separar los solutos de mayor tamao de las soluciones
acuosas por medio de una membrana semipermeable. Este proceso se
realiza a travs de un caudal de solucin del proceso que fluye a travs
de la superficie de una membrana a presin. Los solutos retenidos (como
las partculas slidas) saldrn del caudal del proceso y no se acumularn
en la superficie de la membrana. Los poros oscilan entre 0,1 - 3 m
(micras).
Aplicaciones:
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La aclaracin de zumos oscuros, por ejemplo la clarificacin de los


zumos de vino y zumos oscuros, la MF sirve para separar los slidos en
suspensin del zumo para producir un zumo de turbidez baja al tiempo
que permite el paso del color y el sabor.
Tratamiento de aguas residuales.
Ultrafiltracin [UF] - La UF es un proceso a baja presin [hasta 150 psi
(10 bares)] para separar los solutos de las soluciones acuosas por medio
de una membrana semipermeable. La UF proporciona sobre todo una
completa barrera contra las partculas ms grandes que el tamao del
poro, bacterias y los abundantes y pequeos virus que normalmente se
encuentran en el suministro de agua.
La UF funciona con un mecanismo de eliminacin en superficie parecido
a un colador fino con un tamao de los poros muy uniforme. Se rechaza
cualquier partcula que sea ms grande que el tamao del poro. Esta
caracterstica hace que las membranas de UF sean ideales para cumplir
los requisitos de calidad de una filtracin absoluta.
Adems, para una eliminacin eficaz y un ndice de eliminacin absoluto,
las membranas de UF tienden a ser ms compactas, lo que permite una
automatizacin ms alta con funcionamiento sin atencin y usar en
menor medida productos qumicos.
El tamao del poro es aproximadamente de 0,02 m (micras).
Aplicaciones:
Eliminacin
de
Cryptosporidium]

contaminantes

macrobiticos

[rechazo

de

Pre-tratamiento de osmosis inversa [reduccin de SDI y TOC (carbono


orgnico total)]
Reduccin
grandes]

de

turbidez

[coloides,

protenas,

molculas

orgnicas

Tratamiento de aguas residuales.


Nanofiltracin [NF] la NF es un proceso de una alta presin de baja a
moderada [hasta 450 psi (31 bares)]. El tamao de los poros oscila entre
la UF y la RO. Los poros de las membranas de NF no se han observado
nunca al microscopio, pero el agua puede pasar a travs de la
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membrana y las sales multivalentes y los orgnicos con bajo peso


molecular son retenidos. Es difcil predecir el rendimiento de las
membranas de NF ya que el rechazo de la membrana se ve influido por
el tamao, la estructura y la carga de los componentes de la solucin.
Como resultado, el pilotaje es altamente recomendado en aplicaciones
con NF, incluso si est disponible un anlisis detallado del agua del
suministro.
Aplicaciones:
Ablandamiento del agua.
Reduccin general de TDS (slidos totales disueltos).
Color y TOC (carbono orgnico total).
Separacin de materia orgnica de materia inorgnica (en especial, en
aplicaciones alimentarias y de aguas residuales).
c. proceso biologico de tratamiento
PERCOLADOR, WETLAND

de

aguas

residuales

FILTRO

Plantas de filtros percoladores


El concepto del filtro percolador naci del uso de los filtros de contacto,
que eran estanques impermeables rellenos con piedra machacada. En su
funcionamiento, el lecho de contacto se llenaba con el agua residual
desde la parte superior y se dejaba que se pusiese en contacto con el
medio durante un corto perodo de tiempo. El lecho se vaciaba a
continuacin y se le permita que reposase antes de que se repitiese el
ciclo. Un ciclo tpico exiga 12 horas de las cuales haba 6 horas de
reposo. Las limitaciones del filtro de contacto incluyen una posibilidad
relativamente alta de obturaciones, el prolongado perodo de tiempo de
reposos necesario, y la carga relativamente baja que poda utilizarse.
En el filtro percolador el agua residual es roseada sobre la piedra y se
deja que se filtre a travs del lecho, este filtro consiste en un lecho
formado por un medio sumamente permeable al que los
microorganismos se adhieren y a travs del cual se filtra el agua
residual. El tamao de las piedras de que consta el medio filtrante est
entre 2.5 10cm de dimetro, la profundidad de estas vara de acuerdo
al diseo particular, generalmente de 0.9 2.4m con un promedio de
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profundidad de 1.8m. Ciertos filtros percoladores usan medios filtrantes


plsticos con profundidades de 9 12m.
- Wetland
La importancia de los wetland ha variado con el tiempo. Los wetland son
zonas de transicin entre el medio ambiente terrestre y acutico y sirven
como enlace dinmico entre los dos. El agua que se mueve arriba y
abajo del gradiente de humedad, asimila una variedad de constituyentes
qumicos y fsicos en solucin, ya sea como detritus o sedimentos, estos
a su vez se transforman y transportan a los alrededores del paisaje.
Los wetland proveen sumideros efectivos de nutrientes y sitios
amortiguadores para contaminantes orgnicos e inorgnicos. Esta
capacidad es el mecanismo detrs de los wetland artificiales, tambin
denominados wetland, para simular un humedal natural con el propsito
de tratar las aguas residuales de empresas y municipios.
La solucin biotecnolgica consiste en la instalacin de wetland
artificiales que actan como filtros naturales. Ubicados entre la planta y
los recursos acuticos (ros, lagos, lagunas), estos sistemas, adems de
no necesitar mantenimiento ni consumir energa elctrica, cuestan
menos que la cuarta parte de un sistema de tratamiento tradicional.
*Las plantas pueden ser utilizadas como bombas extractoras de bajo
costo para depurar aguas contaminadas.
*Algunos procesos degradativos ocurren en forma ms rpida con
plantas que con microorganismos.
*Es un mtodo apropiado para descontaminar superficies grandes o para
finalizar la descontaminacin de reas restringidas en plazos largos.

d. metodo de filtrado de membrana (determinacion de coliformes)


Consiste en determinar el nmero de coliformes totales, fecales y
streptos fecales mediante la filtracin de volmenes determinados del
agua a analizar, enfiltros de membrana, e incubacin sobre medios de
cultivo a temperaturas adecuadas.
El nmero de coliformes totales presentes en el agua se determina
mediante la filtracin de volmenes especficos de la muestra a travs
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de filtros de membrana. Por lo general, estn compuestos de steres de


celulosa, tpicamente con poros de 0,45 mm de dimetro que retienen
los coliformes totales y otras clases de bacterias presentes en la
muestra. Despus se incuban las membranas vueltas hacia arriba en un
medio selectivo. En la prctica, la tcnica de filtracin de membrana
ofrece resultados comparables a los que se obtienen con el mtodo de
tubos
mltiples.
Una de las ventajas del mtodo de filtracin a travs de membrana es la
prontitud con que pueden obtenerse los resultados y, en consecuencia,
se pueden llevar a cabo rpidamente acciones correctivas y operar en la
planta de agua de nuevo en forma normal. Esta tcnica puede aplicarse
en el anlisis de casi todos los tipos de agua, tambien se utiliza en el
anlisis de leche y otros alimentos lquidos.

IX.

BIBLIOGRAFA

1. http://www.buenastareas.com/ensayos/Medici%C3%B3n-DeMicroorganismos-Calibraci%C3%B3n-Del/4041625.html
2. http://www.leica-microsystems.com/fileadmin/downloads/Leica
%20S6/User%20Manuals/Leica_Measuring_Manual_ES.pdf
3. http://es.algenfrei.com/es/algas-cloroficeas-algas-filamentosas-enel-agua.html
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4. http://www.mailxmail.com/curso-microscopio/partes-microscopio-

optico

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