UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

56

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

ANALISIS DEL ACIDO SALICILICO por espectrofotometra

U.V-VISIBLE

I.

Determinar el % de aspirina y cido saliclico en una pastilla comercial.

Aprender a utilizar correctamente el espectrofotmetro UV-Visible.

Obtener la longitud de onda mx. del cido saliclico.
Obtener la curva de calibracin con la solucin patrn.
Obtener la concentracin de cido saliclico en la aspirina a partir de su absorbancia medida.

II.
ESPECTROSCOPA ULTRAVIOLETA-VISIBLE
La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometra
ultravioleta-visible (UV/VIS) es una espectroscopia de fotones y
una espectrofotometra. Utiliza radiacin electromagntica (luz)
de las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja
cercana (NIR) del espectro electromagntico. La radiacin
absorbida por las molculas desde esta regin del espectro
provoca transiciones electrnicas que pueden ser cuantificadas.
La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos
grupos funcionales de molculas, y adems, para determinar el
contenido
y
fuerza
de
una
sustancia.
Se utiliza de manera general en la determinacin cuantitativa de
los componentes de soluciones de iones de metales de transicin y
compuestos orgnicos altamente conjugados.
Se utiliza extensivamente en laboratorios de qumica y bioqumica para determinar pequeas
cantidades de cierta sustancia, como las trazas de metales en aleaciones o la concentracin de
cierto medicamento que puede llegar a ciertas partes del cuerpo.

57

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

Radiacin ultravioleta
Se denomina radiacin ultravioleta o radiacin UV a la radiacin electromagntica cuya longitud
de onda est comprendida aproximadamente entre los 400 nm (4x10 -7 m) y los 15 nm (1,5x10-8
m). Su nombre proviene que su rango empieza desde longitudes de onda ms cortas de lo que los
humanos identificamos como el color violeta. Esta radiacin puede ser producida por los rayos
solares y produce varios efectos en la salud.
Segn su longitud de onda, se distinguen varios subtipos de rayos ultravioleta:
Nombre

Abreviacin

Ultravioleta cercano
Onda larga
Onda media
Onda corta
Ultravioleta lejano
Ultravioleta extremo

NUV
UVA
UVB
UVC
FUV, VUV
EUV, XUV

Longitud de onda
(nm)
400 200
400 320
320 280
283 - 200
200 10
91,2 1

Energa por fotn

(eV)
3,10 6,30
3,10 3,87
3,87 4,43
4,43 6,20
6,20 - 124
13,6 1240

Luz ultravioleta
La luz ultravioleta tambin es conocida coloquialmente como luz negra. Para generar este tipo de
luz se usan unas lmparas fluorescentes especiales. En estas lmparas se usa slo un tipo de
fsforo en lugar de los varios usados en las lmparas fluorescentes normales. Tambin se
reemplaza el vidrio claro por uno de color azul-violeta, llamado cristal de Wood.
El vidrio de Wood contiene xido de nquel, y bloquea casi toda la luz visible que supere los 400
nanmetros. El fsforo normalmente usado para un espectro de emisin de 368nm a 371nm
puede ser tanto una mezcla de europio y fluoroborato de estroncio (SrB4O7F:Eu2+), o una mezcla
de europio y borato de estroncio (SrB4O7:Eu2+), mientras que el fsforo usado para el rango de
350nm a 353nm es plomo asociado con silicato de bario (BaSi2O5:Pb+).
La radiacin ultravioleta, al iluminar ciertos materiales, se hace visible debido al fenmeno
denominado fluorescencia. Este mtodo es usado comnmente para autenticar antigedades y
billetes, pues es un mtodo de examen no invasivo y no destructivo. En estructuras metlicas, se
suele aplicar lquidos fluorescentes para despus iluminarla con una luz negra, y as detectar
grietas y otros defectos.
En ciencia forense, la luz negra se usa para detectar rastros de sangre, orina, semen y saliva (entre
otros), causando que estos lquidos adquieran fluorescencia. Usando esta misma tcnica, algunos
reporteros han revelado la falta de higiene en las habitaciones de los hoteles, o manchas en ropa
que de otra manera seran ms difciles de detectar.

58

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

El espectrofotmetro
Un espectrofotmetro es un instrumento usado en la
fsica ptica que sirve para medir, en funcin de la
longitud de onda, la relacin entre valores de una
misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de
radiaciones. Tambin es utilizado en los laboratorios
de qumica para la cuantificacin de sustancias y
microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotmetros, puede ser de
absorcin atmica o espectrofotmetro de masa.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica a travs de una
muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al
operador realizar dos funciones:
1. Dar informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra
2. Indicar indirectamente qu cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la
muestra
Sus componentes son:
Fuente de luz:
La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes condiciones:
estabilidad, direccionabilidad, distribucin de energa espectral continua y larga vida. Las
fuentes empleadas son: lmpara de wolframio (tambin llamado tungsteno), lmpara de
arco de xenn y lmpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atmicos
Monocromador:
El monocromador asla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se
reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromtica.
Est constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de
dispersin. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente que lleva
el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual
separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige hacia otra
lente que direcciona ese haz hacia la rendija de salida.
Compartimiento de Muestra:
Es donde tiene lugar la interaccin, R.E.M con la materia (debe producirse donde no haya
absorcin ni dispersin de las longitudes de onda). Es importante destacar, que durante
este proceso, se aplica la ley de Lambert-Beer en su mxima expresin, en base a sus leyes
de absorcin, en lo que concierne al paso de la molcula de fundamental-excitado.
59

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

Detector:
El detector, es quien detecta una radiacin y a su vez lo deja en evidencia, para posterior
estudio. Hay de dos tipos:
a) Los que responden a fotones.
b) Los que responden al calor.
Registrador:
Convierte el fenmeno fsico, en nmeros proporcionales al analito en cuestin.
Fotodetectores:
En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para percibir
la seal en forma simultnea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto
reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes mviles del equipo.

Cubeta
Una cubeta o cubeta de espectrofotmetro es un pequeo tubo de seccin circular o cuadrada,
sellado en un extremo, fabricado en plstico, vidrio o cuarzo (transparente a la luz ultravioleta) y
diseado para mantener las muestras durante los experimentos de espectroscopia.1 Las cubetas
deben ser tan claras o transparentes como sea posible, sin impurezas que puedan afectar a una
lectura espectroscpica. Al igual que un tubo de ensayo, una cubeta puede estar abierta a la
atmsfera por la parte superior o tener una tapa para sellarla. Tambin se puede utilizar Parafilm
para sellarla.
Caractersticas y tipos
Las cubetas de bajo costo son redondas y tienen un aspecto similar a los tubos de ensayo. Las
cubetas desechables de plstico se utilizan a menudo para anlisis espectroscpicos rpidos,
donde la velocidad es ms importante que una exactitud elevada.
Algunas cubetas slo son transparentes en dos caras opuestas, de manera que slo pueda pasar el
rayo de luz a travs de ese par de caras. En ese caso, las otras dos caras opacas poseen cierta
rugosidad para permitir un fcil manejo. Las cubetas utilizadas en espectroscopia de fluorescencia
60

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

deben ser transparentes en sus cuatro caras pues la fluorescencia se mide en ngulo recto con
respecto a la trayectoria del haz para limitar las contribuciones del propio haz incidente. Algunas
cubetas, conocidas como cubetas tndem, tienen una barrera de cristal que se extiende hasta 2/3
de su altura interior, por lo que las medidas se pueden tomar, en primer lugar, con las dos
disoluciones separadas, y posteriormente cuando se mezclan. Normalmente, las cubetas miden 1
cm (0,39 pulgadas) de ancho, para permitir clculos fciles de los coeficientes de absorcin.
Tambin existen cubetas cuyo camino ptico es menor (de 5 mm o de 1 mm) o mayor (2 cm) que
las de longitud estndar. Otras cubetas estn preparadas para permitir el flujo de reactivos a su
travs para medidas rpidas, e incluso existen cubetas termostatizadas.
Las cubetas utilizadas en experimentos de dicrosmo circular no deben someterse a tensin
mecnica, pues ello produce birrefringencia en el cuarzo, afectando a las mediciones efectuadas.
Tipos de cubetas
Uso de una cubeta de longitud de camino ptico , en un diagrama para explicar la ley de BeerLambert.
Existen tres diferentes tipos de cubetas para uso general, segn las diferentes longitudes de onda
utilizables:

Cristal o vidrio, para longitudes de onda entre 380 y 780 nm (espectro visible)
Plstico, para longitudes de onda entre 380 y 780 nm (espectro visible)
Cuarzo fundido, para longitudes de onda inferiores a 380 nm (espectro ultravioleta)
El cuarzo UV puede usarse con longitudes de onda entre 220 y 2500 nm, y tiene una
tolerancia del 1% correspondiente a 220 nm.
El cuarzo ES puede usarse con longitudes de onda entre 190 y 2000 nm, y tiene una
tolerancia del 1% correspondiente a 200 nm.
El cuarzo IR puede usarse con longitudes de onda entre 220 y 3500 nm, y tiene una
tolerancia del 1% correspondiente a 2730 nm

Acido acetilsalicilico(ASPIRINA)
El cido acetilsaliclico o AAS (C9H8O4), tambin
conocido con el nombre de Aspirina, es un frmaco
de la familia de los salicilatos, usado frecuentemente
como antiinflamatorio, analgsico, para el alivio del
dolor leve y moderado, antipirtico para reducir la
fiebre y antiagregante plaquetario indicado para
personas con alto riesgo de coagulacin sangunea,1
principalmente individuos que ya han tenido un
infarto agudo de miocardio.
Los efectos adversos de la aspirina son
principalmente gastrointestinales, es decir, lcera
ppticas gstricas y sangrado estomacal. En
pacientes menores de 14 aos se ha dejado de usar

61

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

la aspirina para el control de los sntomas de la gripe o de la varicela debido al elevado riesgo de
contraer el sndrome de Reye.4
El cido saliclico o salicilato, producto metablico de la aspirina, es un cido orgnico simple con
un pKa de 3,0. La aspirina, por su parte, tiene un pKa de 3,5 a 25 C.[19] Tanto la aspirina como el
salicilato sdico son igualmente efectivos como antiinflamatorios, aunque la aspirina tiende a ser
ms eficaz como analgsico.[15]
La makesia es la produccin del un cido acetilsaliclico, se protona el oxgeno para obtener un
electrfilo ms fuerte.

La reaccin qumica de la sntesis de la aspirina se considera una esterificacin. El cido saliclico es

tratado con anhdrido actico, un compuesto derivado de un cido, lo que hace que el grupo
alcohol del salicilato se convierta en un grupo acetilo (salicilato-OH salicilato-OCOCH3). Este
proceso produce aspirina y cido actico, el cual se considera un subproducto de la reaccin.[20]
La produccin de cido actico es la razn por la que la aspirina con frecuencia huele como a
vinagre.[21]
Como catalizador casi siempre se usan pequeas cantidades de cido sulfrico y ocasionalmente
cido fosfrico. El mtodo es una de las reacciones ms usadas en los laboratorios de qumica en
universidades de pregrado.[22]

62

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

Acido salicilico
El cido saliclico (o cido 2-hidroxibenzoico) recibe su nombre de Salix, la denominacin latina del
sauce de cuya corteza fue aislado por primera vez. Se trata de un slido incoloro que suele
cristalizar en forma de agujas. Tiene una buena solubilidad en etanol y ter.
Usos mdicos y cosmticos
El cido saliclico es el aditivo clave en muchos productos para el cuidado de la piel diseados para
tratar acn, psoriasis, callosidades (el endurecimiento de la piel por presin persistente), la piel de
gallina y las verrugas. Trata el acn causando que las clulas de la piel se caigan ms fcilmente,
evitando que los poros se tapen. Este efecto en las clulas de la piel tambin hace que el cido
saliclico sea un ingrediente activo en varios champs diseados para tratar la caspa. El uso directo
de una solucin saliclica puede causar hiperpigmentacin en piel sin tratamiento previo para
aquellos con tipos de piel ms oscuros(prototipos Fitzpatrick IV, V, VI), as como con la falta de uso
de un bloqueador solar de amplio espectro.
Las propiedades medicinales del cido saliclico (principalmente para alivio a la fiebre) se han
conocido desde 1763. La sustancia ocurre en la corteza de los sauces; el nombre cido saliclico se
deriva de salix, el nombre en latn para los sauces.
La aspirina (cido acetilsaliclico) se puede preparar a travs de la esterificacin del grupo hidroxilfenlico del cido saliclico.
El subsaliclico en combinacin con el bismuto forman un aliviante popular estomacal conocido
como el subsaliclico de bismuto. (Bismutol, Pepto-Bismol, etc.) Al combinarse los dos ingredientes
claves ayudan a controlar la diarrea, la nusea, y hasta las flatulencias. Tambin es ligeramente
antibitico.
Como antisptico bucal, el cido saliclico restituye el cido protector de las mucosas, ejerciendo
un efecto antisptico actuando en las mucosas afectadas de la boca y labios y es absorbido
parcialmente por los mismos, ejerciendo as su accin antisptica y desinfectante.

63

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

III.

Celdas espectrofotomtricas.
Equipo Espectrofotmetro Visible
Marca Varian, modelo Cary 50
Piceta
Tubos de ensayo

Bagueta
Papel tiss
Matraz aforado

IV.

Solucin etanol/H2O al 50%

Agua destilada
Pastilla de aspirina
Aspirina pura
cido saliclico QP

64

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

V.

A. Preparacin de la solucin patrn y calibracin de la curva (absorbancia vs

concentracin)

1) Primero se prepara la disolucin stock (50mg de cido saliclico + 50 ml de alcohol

metlico y haga de proporcin 50/50.

2) Luego se diluir dicha disolucin en 0.4, 0.6 ,0.8, 1.0 ml respectivamente en

diferentes tubos de ensayos, enrasndolos todos a 10 ml.

3) Despus ser llevado al espectrofotmetro de absorcin en espectro UV- VISIBLE,

para poder determinar su lambda optimo

4) Una vez obtenido el lambda optimo se, calcular sus absorbancia de las

disoluciones diluidas anteriormente y se graficara (absorbancia vs concentracin)

haciendo un ajuste lineal.

65

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

B. Preparacin de las muestras y clculo del porcentaje de cido saliclico

1) Se pesa una pastilla de aspirina.

2) Se muele hasta obtener un polvo fino

3) Se le adicionara 5ml de solucin de alcohol metilico con agua en proporcin de

50/50y se filtra para separar el principio activo de los excipientes.

4) Se hidrolizara el principio activo agregando 5ml de HCl (5%) y se lleva a bao mara

por 5min aprox. A 50C o 60C.

5) Luego se saca una alcuota y se agrega FeCl3 para identificar el cido saliclico.
6) Finalmente se calcular su absorbancia respectiva en el espectrofotmetro a la

lambda ptima obtenido anteriormente.

7) Se calculara el cido saliclico en porcentaje que contiene la pastilla
8) Luego para las aspirina pura repetir los pasos a partir del tercer guin en adelante.
9) Para finalizar se analiza las absorbancias encontradas en la grfica anterior para

obtener sus concentraciones respectivas.

66

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

VI.
Reaccin producida:

ptimo = 286nm
DISOLUCION (ml)

CONCENTRACION (M)

ABSORBANCIA

0.4 ml

-4

2.22x10

0.6820

0.6 ml

3.33x10-4

0.7859

0.8 ml

4.44x10-4

1.0701

1.0ml

5.55x10-4

1.5438

Para la pastilla de aspirina:

Grfica Absorbancia VS Concentracin

1.8
1.6

Absorvancia

1.4
1.2
1

y = 3414x - 0.3825

0.8
0.6
0.4
0.2
0
0

0.0001

0.0002

0.0003

0.0004

Concentracin (M)

67

0.0005

0.0006

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

Se cumple por estequiometria

68

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

VII.
Se logr determinar el valor del max, observando que efectivamente se encuentra
en el rango de longitud de onda visible (380-780nm).
Adems se aprendi a usar correctamente el espectrofotmetro UV-Visible, como
tambin el uso y manipulacin correcta de la sustancia muestral.
Se interpret correctamente los resultados concluyendo que la longitud de onda
mxima depende tanto de la sustancia como de la concentracin ya que los
resultados variaban notablemente en cada grupo.

VIII.
Tener cuidado con el manejo de las celdas de vidrio con las cuales se trabajara para evitar
cualquier impureza que pueda afectar el anlisis.
Cuidar y repartir la muestra adecuadamente para realizar todos los ensayos
correspondientes.
Finalmente dejar el rea de trabajo limpia y entregar los materiales utilizados al encargado
del laboratorio.

IX.
Anlisis Instrumental, de Douglas A. Skoog y James J. Leary. Editorial McGraw-Hill,
Madrid, Espaa, 1997.
Introduccin al Anlisis Instrumental, de Lucas Hernndez Hernndez, Claudio Gonzlez
Prez. Editorial Ariel Ciencia, Buenos Aires, Argentina, 2002.

69

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

APLICACIN DEL CIDO SALICLICO

Usos mdicos y cosmticos

El cido saliclico es el aditivo clave en muchos productos para el cuidado de la piel diseados para
tratar acn,psoriasis, callosidades (el endurecimiento de la piel por presin persistente), la piel de
gallina y las verrugas. Trata el acn causando que las clulas de la piel se caigan ms fcilmente,
evitando que los poros se tapen. Este efecto en las clulas de la piel tambin hace que el cido
saliclico sea un ingrediente activo en varios champs diseados para tratar la caspa. El uso directo
de una solucin saliclica puede causar hiperpigmentacin en piel sin tratamiento previo para
aquellos con tipos de piel ms oscuros (prototipos Fitzpatrick IV, V, VI), as como con la falta de uso
de un bloqueador solar de amplio espectro.

Las propiedades medicinales del cido saliclico (principalmente para alivio a la fiebre) se han
conocido desde 1763. La sustancia ocurre en la corteza de los sauces; el nombre cido saliclico se
deriva de salix, el nombre en latn para los sauces.
El cido acetilsaliclico se puede preparar a travs de la esterificacin del grupo hidroxil-fenlico
del cido saliclico.

El subsaliclico en combinacin con el bismuto forman un aliviante popular estomacal conocido

como el subsalicilato de bismuto (Bismutol, Pepto-Bismol, etc.). Al combinarse los dos ingredientes
claves ayudan a controlar la diarrea, la nusea, y hasta las flatulencias. Tambin es ligeramente
antibitico.5

Como antisptico bucal, el cido saliclico restituye el cido protector de las mucosas, ejerciendo
un efecto antisptico actuando en las mucosas afectadas de la boca y labios y es absorbido
parcialmente por los mismos, ejerciendo as su accin antisptica y desinfectante.

70

UNAC-Facultad de Ingeniera Qumica

Laboratorio de Anlisis de Instrumentacin

APLICACIN DELCIDO ACETILSALICLICO

Dolor leve y moderado de origen variados, como el dolor de cabeza, perodos

menstruales, resfros, dolor en los dientes y dolores musculares.33 Sin embargo, no es efectiva
para el dolor visceral severo. La aspirina y otros antiinflamatorios no esteroideos (AINES) se
han combinado con analgsicos opioides para el tratamiento del dolor causado por el cncer,
donde los efectos antiinflamatorios actan sinergsticamente con los opioides para aumentar
la analgesia.

La

combinacin

de

aspirina

con oxicodona una

clase

de

analgsicos narcticos se usa para aliviar desde el dolor moderado al moderadamente

intenso.

Enfermedad de Kawasaki, especialmente a dosis elevadas durante la fase febril.51

Fiebre reumtica, sobre todo la artritis reumatoide.

Enfermedades autoinmunes tipo lupus eritematoso.

Otros trastornos inflamatorios de las articulaciones.

Proteccin cardiovascular
La aspirina disminuye la incidencia de ataques isqumicos, la angina inestable, trombosis de una
arteria coronariacon infarto agudo de miocardio y la trombosis secundaria a un baips coronario.

71