UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERA EN ALIMENTOS

INGENIERA BIOQUMICA
LABORATORIO DE INGENIERA DE ENZIMAS
Docente
Ayudante
Nombre
Semestre
Prctica

: Ing. Cecilia Carpio

: Egdo. Juan Pablo Peafiel
: Cristian Carvajal
: 8vo U Bioqumica
:1

TEMA:
USO DE LA PIPETA. DETERMINACIN DE LA EXACTITUD Y
PRECISIN
I.- INTRODUCCIN
La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para succionar y transferir
pequeos volmenes de lquidos y permitir su manejo en las distintas tcnicas
analticas.
Los volmenes captables por estos instrumentos varan segn el modelo: los ms
habituales, denominados p20, p200 y p1000, admiten un mximo de 20, 200 y 1000 l,
respectivamente.
Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear distintos lquidos sin tener
que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plstico, que
habitualmente son estriles. Existen varios tipos de puntas: por ejemplo, las amarillas
para pipetear volmenes pequeos (por ejemplo, 10 l), y las azules para pipetear
volmenes grandes (por ejemplo, 800 l). (Equipos y laboratorios de Colombia, 2014)
Precisin se refiere a la dispersin del conjunto de valores obtenidos de mediciones
repetidas de una magnitud. Cuanto menor es la dispersin mayor la precisin. Una
medida comn de la variabilidad es la desviacin estndar de las mediciones y la
precisin se puede estimar como una funcin de ella. Es importante resaltar que la
automatizacin de diferentes pruebas o tcnicas puede producir un aumento de la
precisin. Esto se debe a que con dicha automatizacin, lo que logramos es una
disminucin de los errores manuales o su correccin inmediata. No hay que confundir
resolucin con precisin. (SKOOG, 2009)
Exactitud se refiere a cun cerca del valor real se encuentra el valor medido. En
trminos estadsticos, la exactitud est relacionada con el sesgo de una estimacin.
Cuanto menor es el sesgo ms exacto es una estimacin. Cuando se expresa la exactitud
de un resultado, se expresa mediante el error absoluto que es la diferencia entre el valor
experimental y el valor verdadero. (PALLAS R, 2004)

III.- OBJETIVOS
General
Determinar la precisin y la exactitud de cuatro micropipetas automtica.
Especficos
Establecer la importancia del uso correcto de la micropipeta.
Verificar el funcionamiento correcto de la micropipeta.
IV.- MATERIALES

Pipeta automtica
Puntas para pipeta
Agua
Balanza analtica con 0.0001 g de precisin
Tubos de tapa rosca (bacteriolgicos) secos
Vasos de precipitacin

V.- PROCEDIMIENTO

Se fij el volumen a usar girando la perilla

para control de volumen en sentido horario
y antihorario para disminuir o aumentar el
volumen, seguidamente se ajust de
manera adecuada la punta al extremo de la
pipeta.

Se presion el mbolo hasta el primer tope, se

introdujo la punta desechable (tip) en la solucin y de
forma lenta y controlada se dej que el mbolo se
mueva hacia arriba.
Se descarg el contenido de la pipeta en el tubo
correspondiente
presionando
con
un
movimiento
suave el mbolo hasta el primer tope y a continuacin
hasta el segundo tope y se repiti el proceso por
segunda vez hasta que se vace todo el contenido de
la pipeta.

Entonces se tom un tubo con tapa rosca y se pes.

Se
tom
3
muestras
de
agua
destilada
de
los
siguientes volmenes 0,125; 0,250; 0,500 1.000 mL,
se descarg el volumen en el tubo tarado y se
registr el peso de cada descarga.

VI.- RESULTADOS
Tabla #1 Resultados Obtenidos
Volumen
Volumen
(ml)
G1 (g)
G2 (g)
(ml)
G3 (g)
0,284
0,152
0,097
0,15
0,1
0,29
0,151
0,098
0,274
0,149
0,097
0,422
0,251
0,234
0,25
0,25
0,423
0,25
0,234
0,422
0,253
0,245
0,666
0,5
0,488
0,5
0,5
0,665
0,497
0,492
0,668
0,497
0,49
0,919
0,984
0,742
1
0,75
0,918
0,99
0,747
0,918
0,996
0,729
Elaborado por: Cristian Carvajal.
Fuente: Laboratorio de Ing. de las Enzimas

G4 (g)
0,274
0,274
0,273
0,4273
0,4201
0,4215
0,6678
0,6692
0,6632
0,9351
0,9203
0,9147

1. Elaborar un grfico de barras para demostrar la variacin de los resultados que

incluya barras de error
GRAFICO #1 Barras con error al 5% G1 y G2
1
0.98 0.99
0.92 0.92 0.92

1
0.9
0.8
0.67 0.67 0.67

0.7
0.6

0.5

0.5

peso (g)

0.4
0.3
0.2

0.5

0.42 0.42 0.42

0.28 0.29 0.27

0.25 0.25 0.25

0.15 0.15 0.15

0.1
0

Volumen descargado

Elaborado por: Cristian Carvajal.

Fuente: Laboratorio de Ing. de las Enzimas

0.5

GRAFICO #2 Barras con error al 5% G3 y G4

1

0.94 0.92 0.91

0.9
0.74 0.75 0.73
0.67 0.67 0.66

0.8
0.7
0.6

0.49 0.49 0.49

0.43 0.42 0.42

0.5

peso (g)

0.4
0.3
0.2
0.1

0.27 0.27 0.27

0.23 0.23 0.25
0.1

0.1

0.1

Volumen descargado

Elaborado por: Cristian Carvajal.

Fuente: Laboratorio de Ing. de las Enzimas
2. Determinar la exactitud y precisin del instrumento a lo largo de todo el rango de
medidas
Clculo demostrativo para la exactitud
d=

m
V

V obtenido =

m
0,284 g
=
=0,284 m L
d 0.99829 g/ mL

V real =0,1 mL
V exceso =V obtenidoV real
V exceso =0,284 mL0,15 mL
V exceso =0,134 mL
0,15 mL 100
0,134 mL x=88,99

Exactitud=100 898,99

Exactitud=11,01

TABLA #2 Exactitud de las pipetas

Volumen
G1%
G2%
Volumen
G3%
0,150 mL
11,01
99,16
0,100 mL
102,83
0,250 mL
30,91
99,43
0,250 mL
104,64
0,500 mL
66,57
100,23
0,500 mL
101,83
1,000 mL
108,04
100,83
1,000 mL
125,97
Elaborado por: Cristian Carvajal.
Fuente: Laboratorio de Ingeniera de las Fermentaciones

G4%
0
30,51
66,57
107,54

Calculo demostrativo para la precisin

P=100

P=8,08 103100
P=0,80 8 %
TABLA #3 Precisin de las pipetas
Volumen
G1%
G2%
Volumen
0,150 mL
0,808
0,153
0,100 mL
0,250 mL
0,058
0,153
0,250 mL
0,500 mL
0,153
0,173
0,500 mL
1 mL
0,058
0,600
1 mL
Elaborado por: Cristian Carvajal.
Fuente: Laboratorio de Ingeniera de las Fermentaciones

G3%
0,058
0,635
0,200
0,929

G4%
0,058
0,379
0,306
1,082

3.- Elaborar los clculos estadsticos correspondiente para obtener la media, desviacin
estndar, desviacin estndar relativa en relacin al promedio y expresarla en porcentaje
Media
xi
X =
n
0,284 +0,29+0,274
X =
=0,283 g
3
TABLA #4 Media de los pesos

Volumen
G1(g)
G2(g)
Volumen
0,150 mL
0,283
0,151
0,100 mL
0,250 mL
0,422
0,251
0,250 mL
0,500 mL
0,666
0,498
0,500 mL
1,000 mL
0,918
0,990
1,000 mL
Elaborado por: Cristian Carvajal.
Fuente: Laboratorio de Ingeniera de las Fermentaciones

G3(g)
0,097
0,238
0,490
0,739

G4(g)
0,274
0,423
0,666
0,923

Desviacin estndar
=

1
)2
( xi X
N1

1
2
2
2
( ( 0,2840,283 ) + ( 0,290,283 ) + ( 0,2740,283 ) )
31

=8,08 10

TABLA #5 Desviacin estndar de los pesos

Volumen
G1
G2
Volumen
0,150 mL 8,083E-03
1,528E-03
0,100 mL
0,250 mL 5,774E-04
1,528E-03
0,250 mL
0,500 mL 1,528E-03
1,732E-03
0,500 mL
1,000 mL 5,774E-04
6,000E-03
1,000 mL
Elaborado por: Cristian Carvajal.
Fuente: Laboratorio de Ingeniera de las Fermentaciones
Desviacin estndar relativa en relacin al promedio (%)

r = 10 0
x
r=

8,083E-03
0,283

r =

2,856%

G3
5,774E-04
6,351E-03
2,000E-03
9,292E-03

G4
5,774E-04
3,786E-03
3,055E-03
1,082E-02

TABLA #6 Desviacin estndar relativa

Volumen
G1
G2
Volumen
0,150 mL
2,856
1,012
0,100 mL
0,250 mL
0,137
0,609
0,250 mL
0,500 mL
0,229
0,348
0,500 mL
1 mL
0,063
0,606
1 mL
Elaborado por: Cristian Carvajal.
Fuente: Laboratorio de Ingeniera de las Fermentaciones

G3
0,595
2,668
0,408
1,257

G4
0,211
0,895
0,459
1,172

4.- Realizar un anlisis R&R

Con la ayuda del programa minitab, se tiene la siguiente informacin para un anlisis
R&R
Fuente
R&R del sistema de medicin total
Repetibilidad
Reproducibilidad
grupo
grupo*volumen ml
Parte a parte
Variacin total

%Var. de estudio (%SV)

33,93
17,36
29,15
23,00
17,91
94,07

VII.- DISCUSIN
En la presente prctica de laboratorio se pudo analizar y determinar la precisin y
exactitud de diferentes micropipetas a volmenes determinados, puesto a la necesidad
de que los mismos se encuentren totalmente calibrados y los datos que proporcionen
sean con exactitud y precisin, en la Tabla #1 se encuentran detallados los pesos de cada
una de las mediciones que posteriormente se utilizaron para determinar la exactitud y
precisin del intrumento, en la Tabla #2 se observa la exactitud de cada instrumento
expresado en porcentaje en donde el Grupo 2 y Grupo 3 se hallan en un rango aceptable,
al contrario del Grupo 1 y Grupo 4, en la Tabla #3 se encuentra igualmente expresado en
porcentaje la precisin en donde los datos se encuentran en un rango de 0 a 1 que
indicara una precisin aceptable para todos los datos, en la Tabla #4 se encuentra
expresada la media aritmtica para cada grupo de volmenes y en la Tabla #5 la
desviacin estndar del mismo grupo de datos lo que indic que para la mayora de
datos no existe una variacin significativa entre ellos, en la Tabla #6 se analiz la
desviacin relativa y los mejores resultados se encontr en la micropipeta del Grupo 2.
VIII.- CONCLUSIONES

Se determin la precisin y la exactitud de las 4 micropipetas de cada grupo en

donde despus de un anlisis exhaustivo en donde por medio de la desviacin

estndar y la desviacin estndar relativa se concluy que la micropipeta del
grupo nmero 2 es la que presentaba menor error al momento de utilizar.
Se estableci la importancia del uso correcto de la micropipeta debido a que los
volmenes pueden variar en cada medicin y esto en un futuro podra afectar al
experimento que se est realizando debido que se utilizan medidas muy
pequeas en donde los errores por experimentacin afectaran completamente la
investigacin.
Se verific el funcionamiento correcto de la micropipeta mediante el anlisis de
la variacin que presentan los volmenes en cada medicin, para esto se utiliz
la media, desviacin estndar y desviacin estndar relativa como medidas de
tendencia central que permiten analizar la dispersin de los datos
IX.- CUESTIONARIO
a) cul es la diferencia entre exactitud y precisin?
Exactitud se refiere a que nuestros datos se encuentren ms cerca del valor que se
requiere y la precisin es la que tan cerca se encuentran nuestros datos entre si
independientemente que estos estn cerca o no del valor requerido.
b) Enumerar las principales fuentes de error en esta prueba

Calibracin de la micropipeta.

Factores ambientales.

Manipulacin incorrecta del instrumento.

Danos interno o externos de la micropipetas.

Que fuera de la micropipeta se encuentren gotas del lquido.

c) Qu significan las siglas R&R, Explicar de forma concisa en que consiste

un anlisis R&R, y la razn o razones para realizarlo
El Anlisis del sistema de medicin (MSA) es un componente clave para
establecer, mejorar y mantener sistemas de calidad.
El tipo ms comn de MSA es el estudio de repetibilidad y reproducibilidad
(R&R) del sistema de medicin. La mayora de los estudios R&R del sistema de
medicin evala los efectos de dos factores en la variacin de su sistema de
medicin: por lo general, Operador y Parte.
Sin embargo, los efectos de
Operador y Parte suelen no ser suficientes para comprender plenamente el
sistema de medicin. A menudo es necesario agregar una tercera variable
(generalmente, Sistema de medicin) al estudio estndar (Minitab Inc, 2014).

X. - BIBLIOGRAFA

Equipos y laboratorios de Colombia, 2014 vease tambin en:

http://www.equiposylaboratorio.com/sitio/
Skoog, Douglas A. (2009). Principios de Anlisis Instrumental (6 edicin).
PARANINFO, S.A. p. 965
Ramon Palls Areny, (2004). Sensores y acondicionadores de seal 4Ed. Marcombo
ISBN (978-84-267-1344-5)
Minitab Inc. 2014. Estudio R&R ampliado del sistema de medicin. Vase tambin en:
http://www.minitab.com/es-mx/Published-Articles/C%C3%B3mo-dise%C3%B1ar,analizar-e-interpretar-los-resultados-de-un-estudio-R-R-ampliado-del-sistema-de-medici
%C3%B3n/. Fecha de consulta 13/10/2014