EFECTO DEL pH SOBRE S.

aureus
Paola Campio; Karla Cruz; Andrea Leal
Universidad de Pamplona - Facultad de Ciencias Bsicas
Programa de Microbiologa
Microbiologa Predictiva
INTRODUCCION
El pH es uno de los factores determinantes para el crecimiento de la
supervivencia de los microorganismos. La tolerancia de las bacterias a los
cambios de pH es ilimitada, cambios bruscos producen la muerte.
Las variaciones del pH del medio causan alteraciones:
-

En la estabilidad de la membrana plasmtica y otras envueltas

En el intercambio de hidrogeniones
En la concentracin interna de los mismos ( las bacterias mueren si su
pH interno es menor 5.5)
Cambia la ionizacin de las molculas
Inhibe la actividad enzimtica y las protenas de transporte
(desnaturalizacin )

Mecanismo de adaptacin
-

Mediante sistemas anti porte Potasio/protones

Mediante respuesta de tolerancia a medio acido, sntesis de en ATPasas
translocadoras de protones que expulsan protones al medio.
Mediante sntesis de chaperonas para corregir las protenas
desnaturalizadas. (Sanchez, 2015)

La mayora de las bacterias pueden crecer dentro de un margen de pH de su

medio, manteniendo al mismo tiempo su pH interno ptimo prcticamente
constante.
Por ejemplo, Escherichia coli puede crecer bien entre pH 6 y pH 8, pero su pH
interno es siempre 7.6 o muy cercano a ese valor.
Respecto del margen normal de pH a los que crecen las bacterias, stas se
pueden clasificar en:
Neutrfilos: si crecen de modo ptimo en torno a la neutralidad (entre pH 5.5 y
8)
Acidfilas: si crecen normalmente entre pH 0 y pH 5.
Alcalfilas: si crecen entre pH 8.5 y pH 11.5.

La mayor parte de las bacterias son neutrfilos. Muchas bacterias neutrfilos

modifican el pH del medio, y resisten entornos relativamente cidos o alcalinos.
Por ejemplo, algunas bacterias fermentativas excretan cidos, mientras otras
alcalinizan el medio, p. ej., produciendo amonio a partir de desaminacin de
aminocidos. Por otro lado, la mayor parte de los hongos y levaduras requieren
pHs ligeramente cidos (en torno a 4-5).
Aunque los microorganismos pueden crecer en un margen ms o menos amplio
de pH (alrededor de un ptimo), los cambios bruscos pueden ser lesivos
(afectando a la membrana y al transporte de solutos, e inhibiendo enzimas). Si
el pH citoplsmico cae rpidamente hasta 5 o menos, la bacteria puede morir.
Uno de los mecanismos que, al menos en neutrfilos parece controlar el pH
interior es un sistema de antiporte H+/K+: a pH cidos, el interior celular
puede quedar en principio ms alcalino que el exterior. Este sistema introduce
protones en el interior y saca iones potasio. De esta manera neutralizan el pH
interior y siguen teniendo un potencial de membrana para establecer una
fuerza protn motriz que les suministre energa.
Si el pH interior cae en torno a 6 o 5.5, bacterias como E. coli o S. typhimurium
inducen una respuesta de tolerancia a cidos, consistente en ATPasas
translocadoras de protones (expulsan protones al exterior) y chaperonas
(protenas celadoras) para corregir las protenas desnaturalizadas.
Existen algunos notables procariotas cuyo pH ptimo es muy bajo (acidfilos
extremos u obligados): Algunas eubacterias del gnero Thiobacillus (T.
thiooxidans, T. ferrooxidans) y las arqueas de los gneros Sulfolobus,
Thermoplasma y Ferroplasma tienen su ptimo a pH 2, y generan ellas mismas
estos bajos pH al oxidar sulfuros hasta cido sulfrico. De hecho, estas
bacterias necesitan esas altas concentraciones de H+ para mantener la
integridad de sus membranas y envueltas: a pH neutro esas envueltas se
desintegran. Una arquea sorprendentemente acidfila es Picrophilus oshimae,
cuyo pH ptimo es nada menos que 0.7 (aparte de que es una termfila que
necesita temperaturas de ms de 60C). (Granada, 2015)
PALABRAS CLAVES: pH, efecto, S.aureus
METODOLOGA
Para la medicin del efecto del pH sobre el crecimiento de S.aureus se tom 5
mL de un cultivo del microorganismo en fase exponencial y se adiciono en 5
fiolas con 50 mL de caldo BHI modificado y se procedi a medir la absorbancia
a 600 nm para obtener un valor inicial de T0, posteriormente cada fiola se
incubo a 37C.Posteriormente se procedi a medir la absorbancia de las fiolas

con el microorganismo cada 30 min, a cada tiempo se le midi la absorbancia a

600 nanmetros con el fin de obtener un valor del crecimiento bacteriano y
realizar las respectivas grficas.

RESULTADOS Y DISCUSIN
Tabla. 1 Efecto de pH sobre S.aureus
Tiempo
T0
T1
T2
T3
T4
T5
T6
T7
T8
T9

Tiempo
minutos
0
60
90
120
150
180
210
240
270
300

pH 6,0
0,172
0,198
0,248
0,346
0,485
0,589
0,644
0,691
0,752
0,781

pH 6,5
0,185
0,228
0,286
0,38
0,54
0,671
0,731
0,788
0,845
0,894

pH 7
0,162
0,192
0,251
0,322
0,463
0,595
0,644
0,688
0,748
0,805

pH 7,5
0,242
0,284
0,335
0,43
0,549
0,695
0,765
0,802
0,849
0,919

Grafica 1. Efecto del pH sobre el crecimiento

Absorbancia a 600 nm Vs tiempo de exposicin.

de

pH 8
0,246
0,34
0,356
0,421
0,566
0,715
0,779
0,833
0,889
0,936

S.

aureus,

Tabla 2. Tiempo de Generacin S. aureus con efecto de pH

Tiempo
T0
T1
T2
T3
T4
T5
T6
T7
T8
T9

Tiempo (min)
0
60
90
120
150
180
210
240
270
300

pH 6,0
15,5
16,6
18,6
22,5
28,1
32,3
34,5
36,4
38,8
40,0

pH 6,5
16,0
17,8
20,1
23,9
30,3
35,6
38,0
40,3
42,6
44,5

pH 7
15,1
16,3
18,7
21,6
27,2
32,5
34,5
36,3
38,7
41,0

pH 7,5
18,3
20,0
22,1
25,9
30,7
36,5
39,4
40,8
42,7
45,5

pH 8
18,5
22,3
22,9
25,5
31,4
37,4
39,9
42,1
44,3
46,2

Tabla.3 Velocidad de crecimiento para S. aureus

pH

Tg

Velocidad de
crecimiento

6,0

24,0

0,00613983

6,5

22,9

0,00634206

7,0

23,9

0,00615064

7,5

23,5

0,00560095

8,0

23,5

0,00560095

Grafica 2. Crecimiento bacterias/ml Vs Tiempo de generacin para

cada pH

ANLISIS DE RESULTADOS
El pH es un parmetro crtico en el cultivo de microorganismos ya que estos
slo pueden crecer en un rango estrecho de pH fuera del cual mueren
rpidamente. El pH intracelular es ligeramente superior al del medio que rodea
las clulas ya que, en muchos casos, la obtencin de energa metablica
depende de la existencia de una diferencia en la concentracin de protones a
ambos lados de la membrana citoplsmica. Hay que considerar que, como
consecuencia del metabolismo, el pH del medio de cultivo suele tender a bajar
durante el cultivo. Por consiguiente, es necesario controlar el pH de los cultivos
industriales para evitar que un descenso excesivo pueda producir la auto
esterilizacin del cultivo.

Por otra parte, la bajada del pH del medio que producen ciertos
microorganismos les confiere una ventaja selectiva frente a otros
microorganismos competidores. As, por ejemplo, las bacterias lcticas que
producen grandes cantidades de cido lctico como consecuencia de su
metabolismo primario reducen el pH del medio de cultivo a valores inferiores a
los soportables por otras bacterias competidoras (llegan a bajar el pH del
medio hasta 4.5). De esta forma, las bacterias competidoras mueren y las
lcticas se convierten en la poblacin dominante
Respecto a la influencia del pH sobre S.aureus encontramos que en la grfica 1
se observan los distintos pH evaluados, en esta se puede observar que el
mayor valor para la absorbancia (variable de respuesta), se obtuvo a un pH de
6,5, este valor fue de 0.936 nanmetros lo que indica que Staphylococcus
aureus, observando la grfica tuvo su mejor comportamiento a este valor.
Tambin podemos observar en la grfica una fase de latencia, exponencial y el
inicio de la estacionaria.
En la grfica 2 se observa que a pH 6,5 Staphylococcus aureus obtuvo mayor
crecimiento y su desarrollo fue optimo ya que la concentracin fue superior a
45 bact/ml, el tiempo de generacin fue de 22,9 min con una velocidad de
crecimiento 0,00634206 superior a la obtenida con los dems pH, lo que indica
que a pH 6,5 S .aureus crece a una velocidad mayor empleando menor tiempo.
El desarrollo y crecimiento en todos los pH fue bueno ya que S. aureus tolera
un rango de pH entre 5 y 10.El pH ptimo para S. aureus fue de 6,5.
Conclusin
De la prctica realizada se llega concluir que el pH si es un factor que afecta el
crecimiento de S.aureus estableciendo que el pH ptimo para su crecimiento es
de 6.5, considerando que est en el rango en el cual el microorganismo crece.

BIBLIOGRAFIA
elika. (28 de Febrero de 2013). Obtenido de Staphylococcus aureus:
www.elika.net/datos/pdfs_agrupados/documento95/7.staphylococcus.pdf
Granada,
U.
d.
(2015).
Universidad
de
Granada.
Obtenido
de
http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/13agfisicos.htm#_Toc59451642
Sanchez,
I.
M.
(2015).
diversidad
microbiana.
Obtenido
http://www.diversidadmicrobiana.com/index.php?
option=com_content&view=article&id=459&Itemid=531

de