grupo: 3IM1

Lenard

Vaca Vargas Oscar

seccin I

SEPARACIN DE FOSFOLPIDOS POR

CROMATOGRAFA EN CAPA FINA
Introduccin: Los lpidos son biomolculas orgnicas
insolubles en el agua, que pueden extraerse de las
clulas y de los tejidos mediante disolventes no
polares, por ejemplo, el cloroformo, el ter o el
benceno. Los lpidos desempean diversas funciones
biolgicas importantes, actuando 1) como
componentes estructurales de las membranas, 2) como
formas de transporte y almacenamiento del
combustible catablico, 3) como cubierta protectora
sobre la superficie de muchos organismos, y 4) como
componentes de la superficie celular relacionados con
el reconocimiento de las clulas, la especificidad de
especie y la inmunidad de los tejidos. Casi todos los
cidos grasos, que proporcionan el componente
hidrocarbonado de los lpidos tienen un nmero par de
tomos de carbono, pudiendo ser saturado o
insaturados; los dobles enlaces tienen casi siempre la
configuracin cis. Los fosfolpidos y esteroles
constituyen alrededor de la mitad de la masa de las
membranas biolgicas. Los lpidos pueden ser
separados fcilmente de otras biomolculas por
extraccin con solventes orgnicos y pueden ser
separados por tcnicas experimentales como la
cromatografa de adsorcin, la cromatografa de placa
fina y cromatografa de fase reversa.

Fosfatidil Serina
Fosfatidil Colina

0.36

0.55

0.50

0.51

Esfingomielina
Lisofosfatidil
Colina
(isolecitina)

0.31
0.2

0.46
0.22

0.33
0.21

Discusin: realizamos 4 cromatografias con

aplicaciones de extracto de lpidos de gallina y de
codorniz.

Molibdato: En esta placa, todos los fosfolpidos se

Objetivos

tieron debido a que todos presentan en su estructura

un grupo fosfato, el cual da un color azul

Separar fosfolpidos de la yema de huevo por medio

de cromatografa en capa fina.

Yodo: Los cristales de yodo reaccionan con las dobles

Comparar el perfil de fosfolpidos de la yema de

huevo con otras especies.
Resultados: Rf en cm

Ninhidrina: En esta placa se tieron la Lecitina y la

Gallina
Lpidos neutros
Fosfatidil-etanol
-amina
Fosfatidil Serina
Fosfatidil Colina

Molibdato
0.8
0.66

Yodo
0.79
0.55

Ninhidrina
0.64

Bismuto
-

0.43

0.39

0.32

0.65

Esfingomielina
Lisofosfatidil
Colina
(isolecitina)

0.33
1.18

0.32
0.18

0.45
0.21

Codorniz
Lpidos neutros
Fosfatidil-etanol
-amina

ligaduras de todos los fosfolpidos del cromatograma

tiendo de color caf como prueba positiva. Esta
prueba al igual que la de molibdato, dio positiva para
todos los fosfolpidos.

Fosfatidil-etanol-amina ya que contienen grupos amino,

las cuales reaccionan con la ninhidrina formando un
compuesto de color violeta

Bismuto: El reactivo de Bismuto reacciona con la

Colina de la Lecitina, Esfingomielina e Isolecitina,
tiendo manchas de color amarillo-naranja.

Conclusiones

Molibdato
0.83
0.51

Yodo
0.94
0.67

Ninhidrina
0.71

Bismuto
-

Los Lpidos neutros, Fosfatidil-etanol-amina, Lecitina,

Esfingomielina e Isolecitina contienen un grupo fosfato
en su estructura (en cabeza polar).
La, Fosfatidil-etanol-amina y la Lecitina, contienen un
grupo amino.

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La Lecitina, Esfingomielina e Isolecitina contienen en

su estructura Colina.
Los Lpidos neutros, Fosfatidil-etanol-amina, Lecitina,
Esfingomielina e Isolecitina contienen dobles enlaces.

Bibliografa
Lehninger, A., Bioqumica, Principios de Bioqumica, 4
edicin, Ediciones Omega, Barcelona, Espaa, 1984,
pp. 343-348.
Rouser, G.; Fleischer, S. & Yamamoto, A. (1970) Lipids
5, 494-496.

DETERMINACIN DE COLESTEROL EN
YEMA DE HUEVO

Determinar la concentracin de colesterol en la

yema de huevo por el mtodo de LiebermanBurchard.

Clculo para
agregados

los

miligramos

de

------0.25ml

x= 20 g

------0.50ml

x= 40 g

Tubo 3

0
10

20

30

40

50

60

70

80

90

g /ml

6
4
0
n
m

colesterol

Al interpolar la el valor de absorbencia en la

curva tipo, la concentracin de glutmico es
de : 44 g

------15ml

x= 132000 g

X= 132 mg de colesterol (5yemas)

------0.75ml

x= 60 g

Tubo 4
80 g -------1ml
-------1ml

x= 80 g

80 g -------1ml

Resultados

Hay muchas variables por las cuales no obtuvimos la

concentracin de colesterol correcta, como pudo ser la
preparacin de los tubos para la curva tipo, porque se trabaj
con cloroformo el cual volatiliza muy rpido, y con anhdrido
actico que se hidrata muy fcilmente.
Conclusin:

La concentracin de colesterol presente en la

yema de huevo de codorniz es de 26.4 mg/yema
(segn nuestros resultados).

Tubo 5

------1.25ml

En
la
bibliografa
se
encontr
que
la
concentracin de colesterol en un huevo de
codorniz es de 76mg, y es un valor bastante alejado de lo
que se obtuvo experimentalmente mediante el mtodo de
Lieberman-Burchad.

80 g -------1ml

0.1

Discusin:

80 g -------1ml

0.2

X= 132/5= 26.4

Tubo 2

0.3

80 g -------1ml

0.4

44g -------0.005ml

Tubo 1

o
r
b
e
n
c
i
a

Volumen del extracto de yema de huevo (de

codorniz): 15 mL

Objetivos

b
Concentracion
de colesterol
s

x= 100 g

El mtodo de Lieberman-Buchard no nos result

muy eficiente para determinar el colesterol en el
huevo.
Bibliografa:

100 11

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