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Hormonas y metabolismo
Metabolismo es un trmino amplio utilizado para designar todas las reacciones bioqumicas
que tienen lugar en el organismo. Incluye el catabolismo, un proceso por el cual los materiales
complejos se descomponen en sustancias ms simples, generalmente con la ayuda de enzimas
presentes en las clulas. El metabolismo tambin incluye el anabolismo, en el cual los materiales
ms pequeos, por la accin de enzimas, crean molculas ms grandes y complejas. Cuando se
rompen los enlaces durante el catabolismo, la energa que estaba almacenada en ellos se libera
para ser utilizada por las clulas. Cuando se forman molculas ms grandes, la energa es
almacenada en los diferentes enlaces que se forman. Una parte de la energa liberada puede
dirigirse hacia la formacin de ATP, el material rico en energa utilizado por el organismo para su
funcionamiento. Sin embargo, no toda la energa liberada sigue este camino. Una parte de ella se
emite en forma de calor corporal. Los humanos somos animales homeotermos, lo que significa
que tenemos una temperatura corporal fija. El mantenimiento de esta temperatura es muy
importante para sostener las vas metablicas que existen en el organismo.
La hormona ms importante en el mantenimiento del metabolismo y la temperatura corporal
es la tiroxina. Tambin conocida como tetrayodotironina, o T4, la tiroxina es secretada por la
glndula tiroides, localizada en el cuello. Sin embargo, la produccin de tiroxina realmente est
controlada por la hipfisis, que segrega la hormona estimulante de la tiroides (TSH). TSH es
transportada hasta la glndula tiroides (su tejido diana) por la sangre, ocasionando una mayor
produccin de tiroxina.
Tambin es importante comprender el papel del hipotlamo
en la produccin de tiroxina y de TSH. El hipotlamo,
localizado en el cerebro, es una glndula endocrina primaria
que segrega varias hormonas que afectan a la hipfisis (tambin localizada en el cerebro). Entre stas se encuentra la
hormona liberadora de tirotropina (TRH), que estimula la
produccin de TSH en la hipfisis. Si el hipotlamo determina
que no hay suficiente tiroxina circulando para mantener el
metabolismo corporal, secretar TRH para estimular la produccin de TSH por la hipfisis, la cual, a su vez, estimular la
produccin de tiroxina por la glndula tiroidea (un ejemplo
clsico de un bucle de retroalimentacin negativa). La TRH es
transportada desde el hipotlamo hasta la hipfisis va el
sistema porta hipotlamo-hipofisario, una organizacin de
vasos sanguneos especializados que consiste en una simple vena porta que conecta dos lechos
capilares. El sistema porta hipotlamo-hipofisario transporta otras muchas hormonas desde el
hipotlamo hasta la hipfisis. Ante todo, las hormonas secretadas por el hipotlamo son trpicas
(o trficas), es decir, hormonas que estimulan o inhiben la secrecin de otras hormonas. La TRH
es un ejemplo de una hormona trpica, ya que estimula la liberacin de TSH (que, a su vez, es
una hormona trpica, pues estimula la liberacin de tiroxina).
En los siguientes experimentos investigars los efectos de la tiroxina y de la TSH sobre el
metabolismo de un animal. Del men principal selecciona Fisiologa del Sistema Endocrino
(Endocrine System Physiology). La pantalla de inicio aparecer en pocos segundos (Figura 1).
colocndola sobre la balanza. Cuando el animal est en la cmara, suelta el botn del ratn.
2. Asegrate de que la llave del tubo de la izquierda (en la parte superior de la cmara) est
abierta, permitiendo la entrada de aire a la cmara. Si est cerrada, pulsa sobre ella para
abrirla.
3. Asegrate que en el indicador que est junto al conector en forma de T se lee Cmara y
nico oxgeno que est respirando la rata es el contenido dentro del sistema.
7. Pulsa Iniciar (Start) del mdulo del temporizador. Vers que el Tiempo Transcurrido
(Elapsed Time) aparece en el indicador. Observa qu ocurre con el nivel del agua del tubo en
forma de U.
8. Al finalizar el periodo de 1 minuto el temporizador se detendr automticamente. Pulsa
entonces sobre el tirador del conector en forma de T hasta que indique Manmetro y
jeringuilla conectados (Manometer and syringe connected)
9. Pulsa sobre la llave para abrirla, de forma que la rata pueda respirar de nuevo el aire exterior.
10. Pulsa sobre el botn (+) bajo ml O2 , debajo de la jeringuilla, hasta que se lea 1.0 ml. Pulsa
entonces Inyectar (Inject) y observa qu ocurre con el nivel del fluido. Contina pulsando
sobre el botn (+) e inyectando aire hasta que el nivel del fluido se iguale en los dos brazos
del tubo en U.
Cuntos ml de aire has necesitado aadir para equilibrar el fluido en ambos brazos?
_______________________ ml
Este volumen es equivalente a la cantidad de oxgeno que ha utilizado la rata durante el
minuto que ha permanecido en la cmara cerrada.
11. Anota esta medida en el cuadro de resultados.
12. Determina el consumo de oxgeno por hora para la rata. Utiliza la siguiente frmula:
mL O2 consumido
1 minuto
60 min
hr
= ________________ ml O2 /hr
13. Anota este dato en el epgrafe ml O 2 utilizados por hora en la seccin Metabolismo Basal
de la cuadro 1.
14. Ahora que ya tienes la cantidad de oxgeno utilizado por hora, determina el metabolismo
basal por kilo de peso corporal, utilizando la siguiente frmula (observa que necesitars
convertir el dato del peso, de gramos a kg, antes de utilizar la frmula):
Metabolismo basal =
mL O2 /hr
Peso (kg)
mL O2 /Kg/hr
Qu diferencias existieron en los valores de metabolismo basal entre las tres ratas?
importa el orden en que las utilices. En Conjunto de Datos (Data Sets) resalta Normal, Tx
o Hypox dependiendo de la rata que escojas.
2. Pulsa el botn Reiniciar (Reset) en el mdulo denominado Aparato (Apparatus).
3. Pulsa sobre la jeringuilla marcada con tiroxina (Thyroxine) y arrstrala hasta encima de la
excepto que esta vez debes anotar los datos en la seccin Con Tiroxina en el cuadro de
Resultados.
5. Pulsa sobre Guardar Datos (Record Data).
6. Pulsa y arrastra a la rata desde la cmara devolvindola a su jaula, y pulsa Limpiar (Clean)
Cul fue el efecto de la tiroxina sobre el metabolismo basal de una rata normal? Cmo es
este metabolismo basal en comparacin con el de una rata normal (sin tiroxina)?
Cul fue el efecto de la tiroxina sobre el metabolismo basal de una rata tiroidectomizada?
Cmo es este metabolismo basal en comparacin con el de una rata tiroidectomizada?
Cul fue el efecto de la tiroxina sobre el metabolismo basal de una rata hipofisectomizada?
Cmo es este metabolismo basal en comparacin con el de una rata hipofisectomizada?
A continuacin investigars los efectos de las inyecciones de TSH sobre el metabolismo basal de
las tres ratas. Selecciona primero una rata para experimentar y despus comienza.
1. En Conjunto de Datos (Data Sets) resalta Normal, Tx o Hypox dependiendo de la rata que
ests utilizando.
2. Pulsa el botn Reiniciar (Reset) en el mdulo denominado Aparato (Apparatus).
1. Pulsa y arrastra sobre la rata la jeringuilla marcada con TSH y suelta el botn del ratn,
inyectando a la rata.
2. Pulsa y arrastra la rata hasta la cmara. Sigue de nuevo los pasos 1 a 12 de la Actividad 1.
RATA TIROIDECTOMIZADA
RATA HIPOFISECTOMIZADA
ests utilizando.
2. Pulsa el botn Reiniciar (Reset) en el mdulo denominado Aparato (Apparatus).
3. Pulsa y arrastra sobre la rata la jeringuilla marcada con Propiltiouracilo (Propylthiouracil) y
excepto que esta vez guarda tus datos en la seccin Con Propiltiouracilo del cuadro de
resultados
5. Pulsa Guardar Datos (Record Data).
6. Pulsa y arrastra a la rata desde la cmara devolvindola a su jaula, y pulsa Limpiar (Clean)
RATA TIROIDECTOMIZADA
RATA HIPOFISECTOMIZADA
Insulina y Diabetes
La insulina es producida por las clulas de la porcin endocrina del pncreas. Es vital para la
regulacin de los niveles sanguneos de glucosa porque capacita a las clulas corporales para
absorber glucosa desde el torrente circulatorio. La glucosa absorbida puede entrar en las clulas
(generalmente en las hepticas o musculares) donde se utiliza su exceso para formar glucgeno
(almidn animal). Se estima que el 75% de la glucosa que se ingiere en una comida es
almacenada de esta forma. Como se considera a los humanos comedores discontinuos, esta
produccin de almidn animal tras una comida asegura que existir glucosa disponible varias
horas despus de la ingesta. El organismo tiene que mantener un cierto nivel de glucosa en
sangre para ser til a las clulas del sistema nervioso, las cuales solo pueden absorber glucosa.
Cuando los niveles de glucosa en sangre disminuyen por debajo de un cierto valor, las clulas a
del pncreas producen entonces glucagn. La
funcin de esta hormona es escindir el
glucgeno almacenado en glucosa, para ser
liberada a la sangre.
Cuando el pncreas no produce insulina
conduce a la diabetes mellitus Tipo I.
Cuando el pncreas s produce insulina, pero
el organismo no responde a ella, el resultado
es la diabetes mellitus Tipo II. En ambos
casos, la glucosa permanece en la sangre,
incapaz de ser incorporada por las clulas del
organismo para ser utilizada como principal
combustible para el metabolismo. El exceso
de glucosa sangunea es entonces filtrado por
el rin. Como la recaptacin de la glucosa
filtrada implica un nmero finito de receptores
en las clulas renales, parte del exceso de
glucosa no ser reabsorbido hacia el
organismo y, en su lugar, se perder con la
orina. La ausencia de insulina para el transporte de glucosa tambin afecta al msculo y tiene
como resultado el catabolismo proteico de las clulas musculares, de forma que los aminocidos
liberados pueden formar glucosa en el hgado. Esta accin expone al organismo a un equilibrio
negativo respecto del nitrgeno, debido al agotamiento proteico y al consumo tisular resultante.
Este trastorno tambin est asociado a una deficiente resistencia a las infecciones.
En el siguiente experimento estudiars los efectos del tratamiento con insulina sobre la
diabetes Tipo I. El experimento est dividido en dos partes. En la Parte 1 obtendrs una curva
estndar de glucosa, que se explicar brevemente. En la Parte II comparars los niveles de
glucosa de una rata normal con los de una rata diabtica, y los comparars, de nuevo, tras haber
inyectado insulina a cada rata.
Parte 1
Washer), un aparato distribuidor de tubos de ensayo (sobre el lavador) y una unidad incubadora
de tubos de ensayo, que necesitars para preparar las muestras para el anlisis.
1. Pulsa y arrastra el tubo de ensayo (de encima del lavador de tubos de ensayo) (Test Tube
Washer) a la ranura 1 de la unidad de incubacin. Vers ascender otro tubo de ensayo del
aparato distribuidor. Pulsa y arrastra este segundo tubo de ensayo hasta la ranura 2 de la
unidad de incubacin. Repite esta operacin hasta que hayas arrastrado un total de cinco tubos
de ensayo a las 5 ranuras de la unidad de incubacin.
2. Pulsa y mantn el botn del ratn sobre el tapn cuentagotas de la botella de Glucosa
Estndar (Glucosa Standard). Arrastra el tapn sobre el tubo no 1. Suelta el botn del ratn
para verter la glucosa. Vers que cae una gota de la solucin de glucosa en el tubo.
El gotero automticamente se mover hacia los siguientes tubos. Observa que cada tubo
recibir automticamente una gota adicional de glucosa estndar (es decir, el tubo n o 2 recibir
dos gotas, el tubo no 3 recibir tres gotas, el tubo no 4 recibir cuatro gotas y el tubo no 5
recibir cinco gotas).
3. Pulsa y mantn el botn del ratn sobre el tapn cuentagotas de la botella de Agua
Desionizada (Deionized Water). Arrastra el tapn sobre el tubo no 1. Suelta el botn del ratn
para verter el agua. Observa que se aaden automticamente cuatro gotas de agua al primer
tubo. Nota que cada tubo subsiguiente recibir una gota menos de agua que el anterior (esto
es, el tubo no 2 recibir tres gotas, el tubo no 3 recibir dos gotas y el tubo no 4 recibir una
gota). El tubo no 5 no recibir ninguna gota de agua.
4. Pulsa sobre el botn Mezclar (Mix) de la unidad de incubacin para agitar el contenido de los
tubos.
5. Pulsa sobre el botn Centrifugar (Centrifuga). Los tubos descendern a la unidad de
incubacin y sern centrifugados. Cuando los tubos son centrifugados, giran alrededor de un
punto central a una velocidad elevada, de forma que cualquier partcula de materia del tubo se
posar en su parte inferior, formando lo que se denomina un sedimento.
6. Cuando los tubos vuelvan a la superficie, pulsa sobre el botn Eliminar Sedimento (Remove
Pellet). Cualquier sedimento del proceso de centrifugacin ser eliminado de los tubos de
ensayo.
7. Pulsa y mantn el botn del ratn sobre el tapn cuentagotas de la botella de Reactivo
Enzimtico para Colorear (Enzyme Color Reagent). Manteniendo todava apretado el botn
del ratn, arrstralo sobre el tubo n o 1. Cuando sueltes el ratn, observars que se aaden
cinco gotas del reactivo y que el tapn es devuelto a su botella. Automticamente el gotero se
deslizara hacia los subsiguientes tubos.
8. Pulsa ahora Incubar (Incubate). Los tubos descendern a la unidad de incubacin donde
Esto calentar el instrumento y lo dejar listo para tus lecturas. En este caso, ajustar tambin
incluye fijar el punto cero, de forma que el espectrofotmetro leer exactamente la cantidad
de material contenido en cada tubo.
10. Pulsa y arrastra el tubo n o 1 al espectrofotmetro (Spectrophotometer) (justo encima del botn
de Ajustar (Set Up)) y suelta el botn del ratn. El tubo se colocar en su lugar.
11. Pulsa Analizar (Analyze). En la pantalla aparecer un punto, y los valores aparecern en los
sangre de las dos ratas. Inyectars, entonces, a ambas con insulina y obtendrs de nuevo muestras
de sangre. Finalmente, analizars todas las muestras en el espectrofotmetro (descrito en la Parte
1) para comparar las cantidades de glucosa presente en ellas.
1. Pulsa y arrastra la jeringuilla de Solucin Salina (Salive) hasta la rata Control (Control) y
el rabo de la rata Control (Control) y suelta el botn del ratn. Observars que caen tres gotas
de sangre desde el rabo al tubo. A continuacin, pulsa y arrastra el tubo hasta el soporte n. 1
de la unidad de incubacin de tubos de ensayo. (Nota: la cola es un lugar comn para obtener
sangre de una rata. Su extremo puede cortarse fcilmente y recoger la sangre sin perturbar
realmente a la rata. La cola se cura rpidamente, sin dao para el animal.)
4. Pulsa y arrastra otro tubo de ensayo nuevo (del aparato distribuidor de tubos de ensayo) sobre
muestra las jeringuillas. Las jeringuillas y las ratas desaparecern y, en su lugar, vers cuatro
botellas cuentagotas.
9. Pulsa el botn del ratn y mantenlo sobre la botella de Agua Desionizada (Deionized Water).
Arrastra el tapn sobre el tubo n. 1. Suelta el botn del ratn para verter el agua. Vers que se
aaden al tubo cinco gotas de agua. El agua se aade para que todos los tubos contengan el
mismo volumen.
10. Repite el paso 9 con los restantes tubos de ensayo.
11. Pulsa y mantn el botn del ratn sobre el cuentagotas de Hidrxido de Bario (Barium
Hydroxide). Arrastra el tapn hasta el tubo n 1. Suelta el botn del ratn para verter su
contenido. Observars que se aaden al tubo cinco gotas de la solucin. (El hidrxido de bario
se utiliza para aclarar protenas y clulas de forma que se puedan obtener lecturas limpias de
glucosa.)
12. Repite el paso 11 con los restantes tubos de ensayo.
13. Pulsa y mantn el botn del ratn sobre el cuentagotas de la botella de Heparina (Heparin).
Todava con el botn del ratn pulsado, arrastra el tapn hasta el tubo n 1. Suelta el botn del
ratn para verter la heparina. La heparina es un anticoagulante que evita que se coagule la
sangre mientras se trabaja con ella.
14. Repite el paso 13 con los restantes tubos de ensayo.
15. Pulsa sobre el botn Mezclar (Mix) de la unidad de incubacin para mezclar el contenido de
los tubos.
16. Pulsa sobre el botn Centrifugar (Centrifuga). Los tubos descendern al interior de la unidad
(Enzyme Color Reagent). Arrastra el tapn hasta el tubo n 1. Suelta el ratn para verter la
enzima.
19. Repite el paso 18 con los restantes tubos de ensayo. En un laboratorio real adems deberas
agitar los tubos de ensayo tras aadir el reactivo enzimtico para colorear.
20. Pulsa Incubar (Incubate) una vez ms. Los tubos descendern a la unidad de incubacin, se
espectrofotmetro) hasta el lugar donde se cruza la lnea horizontal (del paso 24) con la lnea
estndar de glucosa. Observa lo que ocurre en el indicador de Glucosa (Glucose) a medida
que mueves la regla mvil hacia la izquierda.
Cul es la lectura de glucosa en el lugar en donde la lnea horizontal cruza a la lnea de
glucosa estndar?
Tubo de ensayo n 1: ______________ mg/dL de glucosa.
Este es el valor de glucosa de la muestra que ests ensayando.
26. Pulsa Guardar Datos (Record Data) de la unidad de recogida de datos.
27. Pulsa y arrastra el tubo de ensayo desde el espectrofotmetro (Spectrophotometer) hasta el
lavador de tubos (Test Tube Washer), pulsa entonces Limpiar (Clear) debajo de la pantalla del
osciloscopio.
28. Repite los pasos 22 a 27 para los restantes tubos de ensayo. Anota aqu las lecturas de glucosa
Cul es el nivel de glucosa en el tubo de ensayo n 1 comparado con el del tubo de ensayo
n 2. Da una explicacin a este resultado.
Cul es el nivel de glucosa en el tubo de ensayo n 3 comparado con el del tubo de ensayo
n 1? Da una explicacin a este resultado.
Cul es el nivel de glucosa en el tubo de ensayo n 4 comparado con el del tubo de ensayo
n 2? . Da una explicacin a este resultado.
Tambin se observa en la pantalla una jeringa que ser utilizada para inyectar las muestras en el
inyector del HPLC (HPLC injector) para anlisis. Los botones de Cortisol y ACTH son usados
para preparar la columna con los solventes necesarios para separar las dos hormonas. El detector
medir la cantidad de hormona presente y la convierte en valores de concentracin
1. Inicie el experimento pulsando el botn de Cortisol. Con esto, se preparar la columna para la
Libere el mouse para que la muestra entre al tubo y fluya hacia la columna. El detector
mostrar la concentracin de cortisol de la primera muestra.
4. Registre sus datos (Record data)
5. Pulse el botn para Limpiar (Clean) cerca de la jeringa para tomar la prxima muestra y
Limpiar la columna (Clean Column) cerca del margen superior de la pantalla para remover
residuos de cortisol en la columna.
6. Repita los pasos 2-6 utilizando las otras muestras
7. Prepare la columna para la separacin y cuantificacin de ACTH
8. Pulse y arrastre la jeringa sobre la primera muestra. Libere el Mouse para llenar la jeringa
con la muestra
9. Pulse nuevamente sobre la jeringa y arrstrela sobre el inyector de HPLC. Libere el mouse. El
Limpiar la columna (Clean Column) cerca del margen superior de la pantalla para remover
residuos de ACTH en la columna.
12. Repita los pasos 8-12 utilizando las siguientes
muestras de sangre
13. Seleccione una fila de l conjunto de datos (Data
adjunto.
14. Registre sus valores en el cuadro de resultados
Explique brevemente las diferencias en los niveles de cortisol y ACTH en cada una de las
muestras
Que paciente podra ser diagnosticado con la enfermedad de Cushing? Por qu?