INTRODUCCIN

El contenido total de protenas en los alimentos est conformado por una mezcla compleja
de protenas. Estas existen en una combinacin con carbohidratos o lpidos, que puede ser
fsica o qumica. Actualmente todos los mtodos para determinar el contenido protico total
de los alimentos son de naturaleza emprica. Un mtodo absoluto es el aislamiento y pesado
directo de la protena pero dicho mtodo se utiliza slo a veces en investigaciones
bioqumicas debido a que es dificultoso y poco prctico
En 1883 el investigador dans Johann Kjeldahl desarroll el mtodo ms usado en la
actualidad para el anlisis de protenas (mtodo Kjeldahl) mediante la determinacin del
nitrgeno orgnico. En esta tcnica se digieren las protenas y otros componentes orgnicos
de los alimentos en una mezcla con cido sulfrico en presencia de catalizadores. El
nitrgeno orgnico total se convierte mediante esta digestin en sulfato de amonio. La
mezcla digerida se neutraliza con una base y se destila posteriormente. El destilado se
recoge en una solucin de cido brico. Los aniones del borato as formado se titulan
con HCl (o H2SO4) estandarizado para determinar el nitrgeno contenido en la muestra.
El resultado del anlisis es una buena aproximacin del contenido de protena cruda del
alimento ya que el nitrgeno tambin proviene de componentes no proteicos.
El mtodo Kjeldahl ha sufrido varias modificaciones. Originalmente se utiliz
permanganato de potasio para llevar a cabo el proceso de oxidacin (digestin), sin
embargo, los resultados no fueron satisfactorios, de manera que este reactivo se descart.
En 1885 Wilforth encontr que se poda acelerar la digestin utilizando cido sulfrico y
aadiendo un catalizador. Gunning en 1889 propuso aadir sulfato de potasio que eleva el
punto de ebullicin del cido sulfrico utilizado en la digestin para disminuir el tiempo de
la reaccin.
En la actualidad se utiliza principalmente Sulfato de Cobre penta hidratrado
CuSO4.5H2Ocomo catalizador.

OBJETIVOS
Con la redaccin de este informe se persigue que los alumnos adquieran la capacidad de:
Comprender los fundamentos del mtodo Kjeldahl para la determinacin del
contenido en protena de un alimento.
Conocer el procedimiento experimental del anlisis de protenas por el mtodo de
Kjeldahl, recogiendo el nitrgeno sobre cido brico y valorndolo con una
disolucin de cido clorhdrico o sulfrico.
Calcular el porcentaje de protena de un alimento a partir del contenido de nitrgeno
obtenido por el mtodo Kjeldahl.

DESARROLLO
A continuacin pasamos a describir el fundamento del mtodo Kjeldahl y las etapas que los
constituyen. Despus, se describir el procedimiento experimental y los clculos
implicados. Para finalizar se expondr un ejemplo prctico real.

4.1 Fundamentos del mtodo y etapas

El mtodo Kjeldahl mide el contenido en nitrgeno de una muestra. El contenido en
protena se puede calcular seguidamente, presuponiendo una proporcin entre la protena y
el nitrgeno para el alimento especfico que est siendo analizando, tal y como
explicaremos ms adelante.
Este mtodo puede ser dividido, bsicamente en 3 etapas: digestin o mineralizacin,
destilacin y valoracin. El procedimiento a seguir es diferente en funcin de si en la etapa
de destilacin el nitrgeno liberado es recogido sobre una disolucin de cido brico o
sobre un exceso conocido de cido clorhdrico o sulfrico patrn. Ello condicionar la
forma de realizar la siguiente etapa de valoracin, as como los reactivos empleados.
En este informe se explica el primer procedimiento, cuando el nitrgeno se atrapa sobre
cido brico.
(a) Etapa de digestin: un tratamiento con cido sulfrico concentrado, en presencia de
un catalizador y ebullicin convierte el nitrgeno orgnico en in amonio, segn la
ecuacin 1. catalizadores/ calor n - C -NH2 + H2SO4 CO2 + (NH4)2 SO4 + SO2 (ec. 1)
Procedimiento: Se introducen de 1 a 5 g de muestra un tubo de mineralizacin y se ponen 3
g de catalizador que suele estar constituido por una mezcla de sales de cobre, xido de
titanio o/y xido de selenio. De forma habitual se utiliza como catalizador una mezcla de
K2SO4 : CuSO4 : Se (10:1:0,1 en peso). Despus se adicionan 10 mL de H2SO4
concentrado y 5 mL de H2O2. Posteriormente se digiere a 420 C durante un tiempo que
depende de la cantidad y tipo de muestra. Se sabe que la digestin ha terminado porque la
disolucin adquiere un color verde esmeralda caracterstico. En esta etapa, el nitrgeno
proteico es transformado en sulfato de amonio por accin del cido sulfrico en caliente.
En la actualidad, para llevar a cabo este proceso se utilizan digestores automticos que son

capaces de digerir un nmero determinado de muestras al mismo tiempo (imagen 1).

Imagen 1. Unidad de digestin
(b) Etapa de destilacin (imagen 2): se alcaliniza la muestra digerida y el nitrgeno se
desprende en forma de amoniaco (ecuacin 2). El amoniaco destilado se recoge sobre un
exceso desconocido de cido brico (ecuacin 3).
(NH2)SO4 + 2 NaOH 2NH3 + Na2SO4+ 2H2O (ec. 2) NH3 + H3BO3 NH4 +
H2BO3 - (ec. 3)
Procedimiento: Despus de enfriar se adicionan al tubo de digestin 50 mL de agua
destilada, se pone en el soporte del destilador y se adiciona una cantidad suficiente de
hidrxido sdico 10 N, en cantidad suficiente (50 mL aprox.) para alcalinizar fuertemente
el medio y as desplazar el amoniaco de las sales amnicas. El amoniaco liberado es
arrastrado por el vapor de agua inyectado en el contenido del tubo durante la destilacin, y
se recoge sobre una disolucin de cido brico (al 4 % p/v). Imagen 2. Unidad de
destilacin
(c) Etapa de valoracin: La cuantificacin del nitrgeno amoniacal se realiza por
medio de una volumetra cido-base del in borato formato, empleando cido clorhdrico o
sulfrico y como indicador una disolucin alcohlica de una mezcla de rojo de metilo y
azul de metileno (ecuacin 4). Los equivalentes de cido consumidos corresponden a los
equivalentes de amoniaco destilados.
H2BO3 - + H+ H3BO3 (ec. 4)

4.2 CLCULOS
De la valoracin se puede calcular el nmero de equivalentes de nitrgeno recogidos, y con
ste dato se obtiene el porcentaje de nitrgeno en la muestra. Para calcular el porcentaje de
protena basta con multiplicar por un factor de conversin el % de nitrgeno calculado. Este
factor de conversin est tabulado para cada grupo de alimentos. En la tabla 1 se recogen
los factores para algunos alimentos.

Es un mtodo oficial
Se comienza pesando 10g de sulfato potsico que sirve para elevar el punto de ebullicin
del acido sulfrico y asi favorecer la mineraizacion de la leche se adiciona 1 ml de
disolucin de sulfato de cobre al 5 % que va a ctuar como catalizador aumentando la
velocidad de la reaccin de mineralizacin para que la toma de muestra sea lo mas correcta
posible es necesario que la grasa de la leche este perfectamente repartida por ello se agita la
leche con cuidado de no hacer espumas
En un tubo de ensayo con tapon se vierte aproximadamente 5 ml de leche en el platillo de
la balanzase pone un vasode precipitado que sostiene el tubo cerrado con la leche y se tara,
es decir, la balanza se lleva a 0
La leche del tubo de ensayo se escha en el tubo de digestin y se pesa de nuevo , ahora con
el tubo de ensayo sin leche la diferencia en la pesada es la cantidad de leche tomada para el
anlisis ( se anotan todos los datos obtenidos)
Por ultimo se aaden 20 ml de acido sulfrico concentrado con un dosificador de 10 ml por
lo que esta accin se repite dos veces

Se agita para disolver todo lo que hay en el tubo de digestin, en el momento que el acido
sulfrico reacciona con la leche se produce una carbonizacin parcial de la muestra y por
esta razn la disolucin toma un color marron negrusco
Elobjeto de vidrio que se coloca encima de los tubos de digestin sirve para conectarlos a
una bomba vacio que es ta encargada de arrastrar los vapores del agua y acido sulfrico y
hacerlos burbujear en una disolucin de hidrxido sdico para neutralizarlos , los tubos de
digestin que aparecen transparentes no tienen muestra solo acido sulfrico y se ponen
porque el aparato calienta los 6 tubos a la vez la etapa de digestio o mineralizacin es la
mas pesada ya que dura unas 4 horas
Con objeto de evitar en lo posible una gran formacin de espuma se comienza calenrando
suavemente y se eleva la temperatura conforme va avanzando la mineralizacin durante la
mineralizacin de la muestra se observa al principio la fornacion de vapores de agua y de
acido sulfrico, posteriormente la formacin de espuma y as tarde comienza a hervir si la
espuma sube por encima del tubo de digestin se perdera parte de la muestra y se tendra
que empezar de nuevo con el anlisis. Tras la ebullicin quedan restos en las paredes de los
tubos que poco a poco van desapareciendo, el color de las disoluciones de la muestra es
todava negro se continua la calefaccin al mximo y se ve como las disoluciones van
perdiendo color poco a poco cuando obtienen un ligero color amarillo se mantiene durante
una hora y media y despus se quita la calefaccin. En estos momentos las muestras estn
totalmente transparentes con un ligero color celeste debido al sulfato de cobre aadido, se
dejan enfriar los tubos a temperatura ambiente y cuando estn frios se adicionan
aproximadamente 100 ml de agua destilada poco a poco iran resbalando por las paredes del
tubo a la vez que se agitan de este modo se evitan salpicaduras por la reaccin energica
por la reaccin entre el acido sulfrico y el agua
El aparato que se ve se encarga de la adicion de hidrxido sdico para la formacin del
amoniaco y del mismo, el funcionamiento del aparato es el siguiente:
Dos recipientes estn conectados al aparato uno de hidrxido de sodio al 50% y otro de
agua el primero de ellos va a una bomba azul que se encuentra en la parte izquierda del
aparto y de arriba para introducir agua en el calderin productor de vapor, el de hidrxido
sdico a otra bomba situada debajo del anterior que sirve para verter la cantidad adecuada
del hidrxido sdico en la muestra, el vapor entra en la muestra por el conducto izquierdo
que esta unido a un tubo de plstico para que el vapor entre en la parte mas baja de la
muestra y caliente mejor a la misma el hidrxido sdico entra por el conducto de la derecha
y cae sobre la muestra.
Para recoger todo el amoniaco destilado se pone 50 ml de acido borico al 4% con un
dosificador de 25 ml por lo que la accin se realiza dos veces se pone un exceso no medido
de acido borico para que reaccione con todo el amoniaco desprendido, este acido es muy
dbil reacciona con el amoniaco para dar borato amnico y lo que se valora son los iones
borato con acido clorhdrico por esta razn no importa cuanto haya sido el exceso de acido
borico , lo que si es importante es que todo el amoniaco que hay en la muestra reaccione
con ell acido borico se ponen unas gotas de indicador shiro-tashiro que es una mezcla de los
indicadores rojo de metilo y azul de metileno, este indicador tiene un color rojo violceo
(el verde es pH mayor a 7 o neutro y violeta menor a 5) hay que revisar que el tubo de
plstico del aparato que recoge los condensados este sumerjido dentro de la disolucin de
acido borico para que no se escape nada de amoniaco, se introduce el tubo con la muestra
en el aparato se pulsa el botn de adicion del hidrxido sdico y posteriormente se pulsa el
botn comenzar y comienza la introduccin de vapor cuando el amoniaco destilado

comieza a reaccionar con el acido borico la disolucin se va volviendo verde debido a queel
indicador cambia de color en medio bsico producido por el ion borato.
Durante el tiempo que demora el proceso se recoje en el Erlenmeyer sobre unos 150 ml de
condensado. Este dispositivo automatico realizade una forma rpida y sin intervencin de
una analista prcticamente en una 5 minutos
En un laboratorio de alumnos no se cuenta con un aparato como este asi es que se utiliza un
montaje por arrastre de vapor y la muestra se pone directamente al mechero se tiene que
medir el hidrxido borico. En la valoracin se utiliza una bureta en la cual ira el acido
clorhdrico y este se echa a la muestra hasta que cambie de coloracin, anotar el gasto.con
estos datos se podrn calcular el porcentaje de protenas en la muestra de leche.

REACCIONES LLEVADAS A CABO EN EL MTODO DE KJELDAHL

DIGESTIN
catalizadores

(1) n

protena

-NH2 +

mH2SO4 CO2 +

(NH4)2 SO4 +

SO2

2NH3 +
Na2SO4+
NH4 + H2BO3 (in borato)

2H2O

calor

NEUTRALIZACIN Y DESTILACIN
(2) (NH2)SO4 +
2
NaOH
(3) NH3 + H3BO3 (cido brico)

TITULACIN
El anin borato (proporcional a la cantidad de nitrgeno) es titulado con HCl (o
H2SO4)estandarizado:

(4) H2BO3- + H+
H3BO3
MATERIAL
J.P SELECTA suministra los equipos necesarios para la realizacin del procedimiento por
el mtodoKjeldahl.
-1
bureta
electrnica
Digitrate-Pro
50
resolucin
0.01
ml.
Cdigo 0182026

-1
balanza
Cdigo 5830039

analtica

de

precisin FA-2204B resolucin

0,1mg.

-1 Unidad de digestin (Bloc Digest) para

Cdigos 4000629, 4000630, 4000631
-1
Unidad
Cdigo 4001611
-1
Bomba
de
circulacin
Cdigo 4001612

6,

12

20

plazas.
Scrubber.

de

agua.

-1
Aparato
destilador
Kjeldahl
Cdigos 4002627, 4002851, 4002430

(Pro

Nitro

M,

A).

- Material diverso de laboratorio

REACTIVOS
Reactivos preparados:
Es aconsejable la utilizacin de reactivos ya preparados, especialmente el HCl (o H2SO4)
de valoracin. Cualquier error en su preparacin puede afectar directamente al resultado de
la determinacin.
Utilizar los siguientes, o sus equivalentes en otras marcas:


cido
Brico
(en
polvo)
99.5%

Indicador mixto 4.8 ( 5) RV PANREAC 283303

(Rojo metilo + Verde de Bromocresol)

PANREAC

141015

Indicador mixto 4.4 RV PANREAC 282430

(Rojo metilo + Azul de Metileno)

HCl
0.1N
SV PANREAC

HCl
0.25N
SV PANREAC

H2SO4 0.1N
SV PANREAC

H2SO4 0.2N
SV PANREAC

Sodio Hidrxido 40% RE PANREAC 171220

(Para determinacin de N)

171023
182318
181061
182011

Acetanilida
99%
(Patrn
para
validacin) PANREAC

Amonio
sulfato
(Patrn
para
validacin) PANREAC

Catalizador Kjeldahl 6.25% Cu tabl. 8g PANREAC 174428

Preparacin de la solucin fijadora de amonaco

151005
131140

1.- Con indicador Mixto 4.8 ( 5)

Preparar la solucin de la siguiente frmula para 1 litro de solucin fijadora:

Pesar
10g
de
Acido
Brico
(en
polvo) PANREAC
141015

Disolverlo
en
1
litro
de
agua
destilada.
Aadir 15ml de Indicador mixto 5. PANREAC 283303
2.- Con indicador mixto 4.4
Preparar la solucin de la siguiente frmula para 1 litro de solucin fijadora:

Pesar
10g
de
cido
Brico
(en
polvo) PANREAC
141015
Disolverlo
en
1
litro
de
agua
destilada.
Aadir 10ml de Indicador mixto 4.4. PANREAC 282430

PROCEDIMIENTO
REPARACIN DE LA MUESTRA
1.
Triturar, homogeneizar y mezclar la muestra.
2.
Pesar entre 1 y 2 gramos de muestra.
3.
En muestras con contenidos de nitrgeno muy pequeo, tomar la muestra
suficiente para que contenga como mnimo 5 mg de nitrgeno.
DIGESTIN
Aadir entre 10 y 15 ml (tubo macro) de H2SO4 96-98% y 1 tableta (8 gm) de
catalizador.
(Para
el
tubo
micro,
el
mximo
de
H2SO4 es
5ml)
Montar un sistema para la extraccin de humos o scrubber con Na2CO3.
Realizar la digestin en tres pasos:
1. En funcin del contenido de agua de la muestra, empezar la digestin
evaporando
agua
a
150C
entre
15
y
30
minutos.

2. Realizar un segundo paso entre 270 y 300C entre 15 o 30 minutos para

reducir
la
produccin
de
humos
blancos.
3. Continuar la digestin a 400C entre 60 y 90 minutos.
Algunos ejemplos:
Queso
o
carne:
Paso1: 150C / 30
Paso 2 : 270C / 30
Paso 3: 400C / 90
Cereales:
Paso1: 150C / 15
Paso 2 : 300C / 15
Paso 3: 400C / 60
Control Visual: El resultado es un lquido transparente ntido con coloracin azul claro,
verde o amarillo dependiendo del catalizador utilizado. No deben quedar restos negros
adheridos a la pared de tubo.
Nota: Durante la digestin debe controlarse la produccin de espuma en las muestras. Si
esta es excesiva, debe alargarse el paso n 1.
DILUCIN
Sacar los tubos muestra del bloque digestor y dejar enfriar a T ambiente. (Puede
forzarse
sumergiendo los tubos, cautelosamente, en un poco de agua).

Aadir
unos
25ml
de
agua
destilada
en
cada
tubo.
Aadir el agua despacio y moviendo el tubo sin dejar solidificar la muestra. Si es
necesario calentar ligeramente el tubo (por ej. introducindolo en el bloque digestor
todava
caliente)

Dejar
enfriar
de
nuevo
hasta
T
ambiente.
Para evitar prdidas de nitrgeno y reacciones violentas no introducir el tubo todava
caliente al destilador.
DESTILACIN
Situar un Erlenmeyer de 250ml a la salida del refrigerante con 50ml de cido Brico y
unas
gotas
de
indicador.

Programar
una
dosificacin
de
50
a
75
ml
de
NaOH.

Introducir
el
tubo
con
la
muestra
en
el
destilador.
Destilar hasta recoger 250ml en el Erlenmeyer (50ml Brico + 200ml de destilado).
Control Visual: Una vez se ha aadido el NaOH, la muestra debe tomar una coloracin
azulada, de no ser as, aadir ms NaOH.
VALORACIN Y CLCULO
Valorar el destilado con HCl H2SO4 hasta el cambio de color. (punto final: pH 4.65)
Moles de HCl = Moles de NH3 = Moles de N en la muestra
Moles de H2SO4= 2Moles de NH 3 = 2Moles de N en la muestra
Realizar el clculo:
mg N = N x V x 14
Donde:

N
= Normalidad
del
cido
de
valoracin
V
= Volumen
de
cido
consumido
14 = Peso atmico del nitrgeno.
Para pasar a contenido de protenas corregir por el factor adecuado segn la naturaleza
de
la
muestra.
(6.25
por
defecto)
Peridicamente realizar un ensayo en blanco y restarlo del resultado.
% Protenas = P2/P0 x 100 x F
Donde:
P2: Nitrgeno
P0: Peso
de
la
F: Factor
(6.25 por defecto)
Factor protico de algunos alimentos:
Almendras
Nueces
Nueces
Gelatina
Soja
Cebada,
avena,
Trigo,
harina
Harinas
(no
Arroz
Maz
Todos
los
otros
Salvado
Leche y lcteos 6,38

muestra

cacahuetes
centeno
entera
entera)
alimentos

(mg).
(mg).
protenico.
5,18
5,30
5,41
5,55
5,71
5.83
5,83
5,70
5,95
6,25
6,25
6,31

VERIFICACIN DE LA RECUPERACIN CON AMONIO SULFATO

Esta verificacin es ampliamente utilizada para certificar el funcionamiento del destilador.
Se trata de preparar una muestra cuyo contenido de nitrgeno es conocido. Esta se destila,
se valora con HCl 0.25N y se calcula el Nitrgeno detectado.
El porcentaje de nitrgeno detectado sobre el de la muestra se denomina recuperacin de
Nitrgeno.
Preparar la muestra:
Contenido de nitrgeno de una muestra de Amonio sulfato :
Formula: (NH4)2
SO4
Peso
molecular: 132.14
Factor: 14
*
2
/
132.14
=
0.212
mg de Nitrgeno = 0.212 * mg de Amonio sulfato


Pesar unos 100mg
de amonio
La cantidad exacta de Nitrgeno es:

sulfato.

El

peso

exacto

P1 (mg) = P0 x 0,212

Destilar
aadiendo
25ml
de
Una vez destilado y valorado obtenemos el nitrgeno (mg) detectado: P2

ser

P0

NaOH

P2 = N x V x 14
Donde:
N
= Normalidad
del
V
= Volumen
14 = Peso atmico del nitrgeno.
Calculamos la recuperacin:

cido
de

de

valoracin
cido

(HCl

0.25)
consumido

R(%) = P2 / P1 *100
La recuperacin aceptable es entre 99.5 y 100.5 %.
Si se utiliza HCl de normalidad diferente preparar muestras:
NormalidadMuestra de Amonio sulfato.
0,05
20 ... 40 mg
0,1

40 ... 90 mg

0,25

100 200 mg

0,5

200 400 mg

VERIFICACIN DE LA RECUPERACION CON ACETANILIDA

Esta verificacin es ampliamente utilizada para certificar el funcionamiento del proceso
completo del anlisis del nitrgeno Kjeldahl que incluye las etapas de digestin, destilacin
y valoracin.
Se trata de preparar una muestra cuyo contenido de nitrgeno es conocido. Esta se digiere,
se destila, se valora y se calcula el Nitrgeno detectado.
El porcentaje de nitrgeno detectado sobre el de la muestra se denomina recuperacin de
Nitrgeno.
Para realizar sta verificacin se utiliza la Acetanilida.
Preparar la muestra:
Contenido de nitrgeno de una muestra de Acetanilida :
Frmula: C8H9NO
Peso
Factor: 14
/
135.17
mg de Nitrgeno = 0.1035 * mg de Acetanilida

Pesar alrededor de 250mg de acetanilida.

La cantidad exacta de Nitrgeno es:

=
El

peso

molecular: 135.17
0.1035
exacto

ser

P0

P1 (mg) = P0 x 0,1035
Digestin de la muestra:
Colocar la acetanilida en un tubo, aadir 10ml de cido sulfrico 98% y una tableta de
catalizador
Kjeldahl.
Digerir a 400C durante 1h. (El resultado debe ser un lquido transparente con coloracin
azul.)
Dejar enfriar y aadir 25ml de agua destilada en cada tubo. Tomar precauciones para
evitar salpicaduras. La reaccin del agua sobre el cido sulfrico es violenta.
Destilar:
Destilar aadiendo 75ml de NaOH. Utilizar HCI 0.25N para la valoracin.
Una vez destilado y valorado, obtenemos el nitrgeno (mg) detectado: P2
Donde:
N
= Normalidad
del
V
= Volumen
14
= Peso
P2 = N x V x 14
Calculamos la recuperacin:

cido
de
de
atmico

valoracin
cido
del

(HCl

0.25).
consumido.
nitrgeno.

R(%) = P2 / P1 *100
La recuperacin aceptable es entre 99.5 y 100.5 %.
FUENTES DE ERROR
Las principales fuentes de error son:
En el proceso de digestin:
1.- La inclusin de nitrgeno no protico (aunque la cantidad de este nitrgeno suele ser
despreciable
comparada
con
la
del
nitrgeno
protico);
2.- La prdida de nitrgeno durante la digestin. El exceso de sulfato de sodio o potasio
que se aade al cido para elevar el punto de ebullicin, puede producir una
descomposicin por calor y por lo tanto prdida de nitrgeno. Por otro lado, el exceso de
catalizador (de cobre generalmente) tambin puede producir prdidas de nitrgeno
3.- La digestin incompleta de la muestra. Generalmente debida a falta de tiempo de
reaccin o falta de cido sulfrico.
Durante la destilacin:
1.- Neutralizacin incompleta de la mezcla digerida. Es necesario aadir suficiente NaOH
para neutralizar el exceso de cido sulfrico resultante de la digestin as como transformar
todo
el
amonio
formado
en
la
digestin
en
amonaco.
2.- Perdida
de
amonaco
por
fugas
en
el
circuito
de
destilacin.
3.- Perdida de amoniaco por refrigeracin insuficiente en el condensador.

Cierre A lo largo de este objeto de aprendizaje se ha descrito el mtodo Kjeldahl para la

determinacin de protenas de un alimento a partir de la cuantificacin del nitrgeno,
empleando cido brico como medio para atraparlo y cido clorhdrico o sulfrico para su
valoracin. Adems se han expuesto los clculos necesarios para obtener el porcentaje de
protena a partir del contenido en nitrgeno de la muestra y se ha ejemplificado el
procedimiento con un caso real.