Cromatografa de Gases.

Caractersticas principales de la
cromatografa gas-lquido.

Principio.
La muestra requiere ser volatilizada.
La cromatografa de gases est indicada para compuestos
que se puedan vaporizar.
De ah que la cromatografa de gases necesite usar un
horno programable para efectuar las separaciones.
Los componentes de la muestra se van a distribuir entre la
fase mvil y la fase estacionaria lquida de acuerdo a su
solubilidad, la que depende de:
La presin de vapor que a su vez es funcin de la temperatura
de la columna.
La afinidad por la fase estacionaria.

Diferencias en la presin de vapor de los componentes

provocan un reparto diferente de los mismos, y en
consecuencia, se produce la separacin cromatogrfica.

Reparto en cromatografa de gases.

Columna empacada:

Necesidades.
Los gases que se usan como portadores deben
presentar extremada pureza.
Se deben usar filtros para el gas portador que eliminen
eficazmente las trazas de oxgeno, humedad o
hidrocarburos.
De todos los gases que pueden aparecer como
contaminantes de los portadores el ms peligroso es el
oxgeno dado que puede daar las fases estacionarias
de las columnas y puede provocar problemas tambin
en determinados detectores (ECD).
Las purezas habituales de los gases portadores suelen
ser mayores o como mnimo iguales a 99.995%.

Tipos de muestra.
Anlisis de voltiles:

Sistemas Head-Space.
Purga y trampa.
Desorcin trmica.

Sobre tubos adsorbentes.

SPME.

Muchas molculas grandes no se pueden usar

directamente dada su baja volatilidad (polmeros). Lo que
se hace es provocar sobre estos componentes una
descomposicin trmica en fragmentos ms simples y
analizar los fragmentos.
Para estos componentes no voltiles tambin es posible
usar una tcnica denominada derivatizacin. La
derivatizacin consiste en transformar el componente en
otro que sea ms voltil y analizar este ltimo. Esta tcnica
se usa en la determinacin de cidos grasos en alimentos:
transformacin a FAME.

Las columnas en la cromatografa de

gases por reparto.
Son el corazn de la cromatografa:

Empacadas: Partculas inertes sobre las que se deposita

adecuadamente un lquido (ceras polmeros).
Tubulares (ms usadas): La fase estacionaria es un lquido que
se deposita en el interior de las paredes del tubo.
WCOT (siglas Wall Coated Open Tubular). Estas columnas presentan
una fina capa de fase estacionaria activa sobre las paredes internas
del tubo. Las ms modernas se fabrican de slice fundida (FSOT).
SCOT (siglas Support Coated Open Tubular). Estas columnas tienen
depositado en el interior de las paredes un soporte inerte primero y
sobre ste se deposita la fase estacionaria.
PLOT (siglas Porous Layer Oper Tubular). Estas columnas tienen
depositado en el interior de las paredes una capa porosa que puede
depositarse por medios qumicos o por deposicin de partculas
porosas a partir de una suspensin. Puede usarse como como soporte
de fase estacionaria lquida o como fase estacionaria propiamente
dicha.

Propiedades de las columnas.

Tipo de Columna

FSOT

10-100
Longitud,m
0.1-0.53
ID, mm
2000-4000
Eficacia/m
(20-400)103
N
10-75
Tamao muest. ng
Baja
Presin Retroc.
Rpida
Veloc. Relativa
Mejor
Inercia Qumica
Si
Estab. Qumica

WCOT

SCOT

Rellena

10-100
0.25-0.75
1000-4000
(10-400)103
10-1000
Baja
Rpida
Buena
No

10-100
0.5
600-1200
(6-120)103
10-1000
Baja
Rpida
Normal
No

1-6
2-4
500-1000
(1-10)103
10-106
Alta
Lenta
Pobre
No

Fases estacionarias.
La solubilidad de los componentes en la fase
estacionaria va a depender de las fuerzas
intermoleculares involucradas (retencin).
La regla general es lo similar disuelve a lo similar. Por
lo tanto, una fase estacionaria til para la separacin
de un componente semipolar ser semipolar.
TIPOS:
Slidos adsorbentes: Alminas, Slice, Zeolitas, Tamices
moleculares.
Compuestos Polimricos: Que pueden estar en fase lquida
a altas temperaturas en la columna (nombres comerciales:
Tenax, Chromosorbs y Porapaks).
Fases lquidas: Hidrocarburos de cadena larga (apiezn),
poliglicoles, politeres, polisteres y polisiloxanos. Los ms
usados los polisiloxanos.

Fases estacionarias y aplicacin.

Separar gases inertes, freones, compuestos
muy voltiles (VOCs) hidrocarburos de C1 a
C10: Usaramos Slidos adsorbentes.
Si queremos separar desde hidrocarburos
hasta cidos orgnicos de bajo peso
molecular: Usaramos polmeros porosos en
columna empaquetada. En la actualidad hay
buenas columnas capilares que dan buenos
resultados para estas mezclas.

Fases estacionarias y aplicacin.

Para la mayora de las aplicaciones que queramos desarrollar con
una amplia variedad de analitos en diferentes matrices, usaramos
las fases estacionarias lquidas. Ahora bien, estas fases tendrn que
elegirse en funcin de la polaridad de lo que se pretenda separar.

POLARIDAD

-Ciano-propil-siloxano
-Polietilnglicol.
-Ciano-fenil-siloxano.
-Fenil-siloxano.
-Metil/Fenil-Siloxanos.
-Dimetil siloxano o Escualeno

En funcin de la casa
comercial que venda
estas columnas reciben
diferentes nombres.
OJO con la confusin.
Consultar
bien
el
catlogo y el nombre
qumico.

Resumen.
Componentes

Fase Estacionaria

Tipo (columna)

Gases

Tamices moleculares

Gas-slido (empacada)

Gases permanentes

Polmeros porosos

Gas-slido (capilar PLOT)

Lquidos no polares

Metilsiloxanos

Gas-lquido (capilar)

PCBs, muestras
petroqumicas,
Herbicidas/plaguicidas

Polisiloxanos-carboranos

Gas-lquido (capilar)

Farmacuticos

Fenil polifenilsiloxanos

Gas-lquido (capilar)

Azcares (derivatizacin
previa)

Cianopropilfenil
metilsiloxanos

Gas-lquido (capilar)

cidos Grasos, Alcoholes

(Derivatizacin previa)

Polietilnglicoles

Gas-lquido (empacada o
Capilar)

Alcoholes, aminas.

Fenil metil siloxanos (ms

50% en fenil)

Gas-lquido (empacada o
capilar)

Fases estacionarias gas-lquido.

Fases lquidas

Lmite
trmico

No polares
Escualeno
100% Polimetilsiloxano
5% Fenil 95% polimetilsiloxano.

150
300
300

Moderadamente polares
14% cianopropilfenil/86% polimetilsiloxano
50%fenil/50% polimetilsiloxano fenilsiloxano carborano

300
225

Polares
50% Cianopropilfenil/50% polimetilsiloxano
50% trifluoropropil/50% polimetilsiloxano
polietilnglicol

275
250
200

Muy polares
70%cianopropil/30%polifenilsiloxano
Poli(dietilenglicol succinato)

250
200

Seleccin de la Columna.
La seleccin de la mejor columna depende de muchos
factores:
Qu tipo de componentes tiene la muestra y cmo es la
matriz?
Cuntos componentes se esperan en la muestra?
Cules son los puntos de ebullicin de los componentes?
Rango de ebullicin de la muestra.
Qu grupos funcionales estn presentes en la muestra?
Qu concentracin es la esperada para los componentes?
Los componentes son estables o inestables trmicamente?

Otras cuestiones adicionales seran:

El anlisis es cuali o cuantitativo o ambos?

Los componentes necesitan ser unvocamente identificados?
Se requieren inyecciones especiales?

Algunas consideraciones sobre las

columnas que pueden ayudar.
Cuando se usa una columna no polar, el orden de salida en el
cromatograma es el mismo que el orden creciente de los puntos de
ebullicin de los componentes.
Lo similar se separa en lo similar. Esta regla se aplica bien para
componentes polares de similares caractersticas en cuanto a
volatilidad y polaridad.
Una columna capilar estndar no polar (30 m, 0.25 mm, 0.25 m)
sera capaz de separar componentes de una mezcla que tienen una
diferencia de 2C en sus puntos de ebullicin.
El poder de separacin de una columna aumenta con la longitud de
la columna, y con el espesor de la fase estacionaria.
Un mayor dimetro de columna tolera una mayor carga de muestra
y normalmente mejora los lmites de deteccin de los componentes
de la muestra.
Para trabajos de alta temperatura o que requieran el empleo de
detectores de masas se necesitan columnas con mayor estabilidad y
bajo sangrado.

Es mejor para la separacin