Metformina /

Glibenclamida
500 mg/5 mg

Estudio de Bioequivalencia realizado por el CIDEIM*

Certifica que Metformina/Glibenclamida MK 500 mg/5 mg
es Bioequivalente con el producto Referente.

Promedio de los Parmetros Farmacocinticos

Metformina
Producto

Cmx

Tmx

Promedio de los Parmetros Farmacocinticos

Glibenclamida

AUC (0-t)

Cmx

Tmx

AUC (0-t)

MK

1613,99

3,00

10619,07

MK

568,10

4,00

5393,50

Glucovance

1615,81

1,50

10516,68

Glucovance

614,46

4,00

4833,28

Curvas de Biodisponibilidad Metformina

Curvas de Biodisponibilidad Glibenclamida

8,00

7,00

MK

Cmax

7,50

6,50

Glucovance
Ln concentracin (ng/mL)

7,00
6,50
6,00
5,50
5,00
4,50
4,00
3,50
3,00

MK

Cmax

Glucovance

6,00
5,50
5,00
4,50
4,00
3,50

2,0

Tmax

3,00
0,0

4,0

6,0

8,0

10,0

12,0

14,0

16,0

Tiempo (horas)

Concentracin plasmtica (ng/mL) vs. Tiempo despus de la administracin oral.

0,0

2,0

Tmax

Ln concentracin (ng/mL)

Producto

6,0

8,0

10,0

12,0

14,0

16,0

Tiempo (horas)

Concentracin plasmtica (ng/mL) vs. Tiempo despus de la administracin oral.

* CIDEIM (Centro Internacional de Entrenamiento e Investigaciones Mdicas): Institucin autorizada por el Instituto Nacional de Vigilancia de
Medicamentos y Alimentos (INVIMA) en Colombia para el desarrollo y ejecucin de estudios clnicos y Biofarmacuticos en humanos.

Estudio de Bioequivalencia entre Metformina 500 mg +

Glibenclamida 5 mg MK tabletas de Tecnoqumicas S.A. vs
Glucovance Metformina 500 mg + Glibenclamida 5 mg
tabletas del laboratorio Merck S.A.
RESUMEN
Antecedentes
Se realiz un ensayo in vivo para demostrar diferencias estadsticamente
significativas entre las concentraciones plasmticas de Metformina y
Glibenclamida en el tiempo, obtenidas con la formulacin en tabletas del
producto Metformina 500 mg + Glibenclamida 5 mg MK tabletas de
Tecnoqumicas S.A., medicamento genrico o producto de Prueba (T), en
comparacin con Glucovance Metformina 500 mg + Glibenclamida 5 mg
tabletas de Merck S.A., producto de Referencia (R). El estudio evalu el
comportamiento de los dos productos con las variables de Concentracin
mxima alcanzada (Cmx), tiempo para lograrla (Tmx) y rea bajo la curva de
concentracin en el tiempo (AUC), para los principios activos que los
componen. Se administraron por va oral dosis nicas de 1000 mg de
Metformina + 10 mg de Glibenclamida (Glyburide) en cada producto a 19
voluntarios sanos, en dos periodos de tratamiento.

Piedad Restrepo Valencia 1

Milena Prez Guzmn 2
Eduar D. Echeverri Garca 3
Gloria Ramrez Correa 4
Mauricio Prez Flrez 5
1 Q.F., MSc. Directora del Estudio
Investigadora Asociada CIDEIM piedadrestrepo11@une.net.co
2

Q.F. Asistente de Investigacin CIDEIM

milena_perez@cideim.org.co
3

MD. Coordinador Clnico Unidad de

Estudios Biofarmacuticos CIDEIM

Mtodos
eecheverri@cideim.org.co
Los productos en estudio fueron comprobados para el cumplimiento de los
4 Q.F. Asistente de Investigacin CIDEIM
parmetros fisicoqumicos de control de calidad para determinar su
gloriashirley_ramirez@cideim.org.co
Equivalencia Farmacutica. En el ensayo de Bioequivalencia se aplic el
diseo experimental para un estudio cruzado, en 19 voluntarios sanos con
5 Estadstico Unidad de Epidemiologa
edades entre 18 y 33 aos, que cumplieron los requisitos de inclusin y
y Bioestadstica CIDEIM mauricioperez@consintieron su participacin voluntaria y por escrito. Los sujetos recibieron
cideim.org.co
aleatoriamente cada producto en dosis nicas de 2 tabletas (Metformina 1000
mg + Glibenclamida 10 mg), asignados al azar como A o B para secuencia,
tratamiento y periodo, con un lapso de 7 das entre los tratamientos. Los productos les fueron administrados en ayunas con
240 mL de solucin de dextrosa al 20%. Durante las primeras dos horas, cada 15 minutos se les suministraron 60 mL de
esta misma solucin. En cada periodo se extrajeron 14 muestras de sangre de 10 mL, que se sometieron a procedimientos
de separacin del plasma y cuantificacin de la concentracin de Metformina/Glibenclamida, por el mtodo analtico de
cromatografa lquida HPLC-UV con adicin estndar, validado en el Laboratorio de Estudios Biofarmacuticos de
CIDEIM. Con los resultados se calcularon y compararon los parmetros farmacocinticos de cada componente activo
para: rea Bajo la Curva (AUC), Concentracin mxima (Cmx) y Tiempo para alcanzar la concentracin mxima (Tmx).

Resultados
Los ensayos fisicoqumicos demostraron que no hubo diferencias entre las muestras de los productos, por lo que se
estableci su Equivalencia Farmacutica. Los datos de las muestras biolgicas fueron analizados estadsticamente para
pruebas de significancia de las diferencias en la concentracin de Metformina/Glibenclamida en plasma y en los
parmetros de AUC, Cmx y Tmx. Los resultados permitieron cuantificar y verificar los criterios de Bioequivalencia dada
la inclusin en el rango entre 80% y 125% de la razn entre los promedios geomtricos T/R [%Ref], con 90% de nivel de
confianza: Metformina: ln AUC (102,23%Ref) [85,63% - 122,04%) y ln Cmx (101,64%Ref) [87,54% - 118,0%].
Glibenclamida: ln AUC (111,0%Ref) [92,95% - 132,55%) y ln Cmx (92,98%Ref) [81,61% - 105,93%]. Y para la
diferencia de los promedios logartmicos: Metformina: [ln (AUC-A) - ln (AUC-B)]: (0,83 1,17) y [ln (Cmx-A) - ln
(Cmx-B)]: (0,85 1.14), tal como se presentan en el aparte de resultados de este estudio. Glibenclamida: [ln (AUC-A) ln (AUC-B)]: (0,76 1,07) y [ln (Cmx-A) - Ln (Cmx-B)]: (0,95 1,23). Tmx para Metformina en el producto A fue 1,5
horas y en B de 3,0 horas. Para Glibenclamida en ambos productos fue de 4 horas.
Conclusiones:
Los anlisis realizados son concordantes con los requerimientos que demuestran la Equivalencia Farmacutica entre los
productos y la Biodisponibilidad y Bioequivalencia Promedio (Average Bioequivalence) para los componentes activos en
los productos comparados por la ausencia de diferencias significativas entre los valores promedio de las variables
farmacocinticas AUC y Cmx, en el intervalo de confianza de 90%.
PALABRAS CLAVE: Metformina/Glibenclamida, Biodisponibilidad, Bioequivalencia.
Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

SUMMARY
Background
This in vivo study was designed to statistically demonstrate differences between the serum concentrations of Metformin and
Glibenclamide (Glyburide) in time, comparing 500 mg / 5 mg Tablet formulation of Metformin / Glibenclamide MK generic drug
test product (T) and Glucovance, reference product (R). The comparison was based on pharmacokinetic variables: Cmax, Tmax, and
AUC, for each drug, after single dose administration under fasting conditions in healthy subjects. Therefore, the design of a
randomized, two sequence and cross-over study with a wash-out period of seven days was used. Single doses of 1000 mg of Metformin
and 10 mg of Glibenclamide were orally administered to 19 healthy volunteers between 18 and 33 years old, in two treatment periods.
Methods
The products under study were checked for quality control compliance with physicochemical parameters to determine their
Pharmaceutical Equivalence. The experimental design was a randomized, two sequence and cross-over study with a wash-out period
of seven days. 19 healthy volunteers, between 18 and 33 years old, who met the inclusion criteria and signed a written consent,
participated. The subjects received each product in doses of 1000 mg Metformin and 10 mg Glyburide, with 240 mL of 20% of glucose
in water, randomly assigned as A or B, for sequence, treatment and period. Each period, 14 blood samples of 10 mL were extracted and
subject to plasma separation and Metformin/Glibenclamide concentration was quantified by liquid chromatography HPLC-UV, with
standard addition, validated in the Biopharmaceutical Studies Laboratory from CIDEIM. With the results, pharmacokinetic parameters
such as area under the curve (AUC), maximum plasma concentration (Cmax) and time to maximum plasma concentration (Tmax) were
calculated and compared for each active pharmaceutical ingredient.
Results
Physicochemicals tests proved no difference between the product samples so Pharmaceutical Equivalence can be established.
Biological samples results were statistically analyzed for significance tests between the difference in plasma Metformin /
Glibenclamide concentrations and in AUC, Cmax, Tmax parameters. Results allowed to quantify and check Bioequivalence criteria
because the geometric means T/R ratio [%Ref] were in the 80% - 125% range, with a 90% confidence level and the average logarithmic
difference between 0,8 and 1,25 with 90 % confidence level, and 5% significance Bioequivalence was established in: Metformin: ln
AUC (102,23%Ref) [85,63% - 122,04%) y ln Cmx (101,64%Ref) [87,54% - 118,0%]. Glibenclamide: ln AUC (111,0 %Ref) [92,95%
- 132,55%) y ln Cmx (92,98%Ref) [81,61% - 105,93%]. The Bioequivalence was demonstrated for the difference between logarithmic
mean of Test and Reference product (log T - log R) between 0.80 and 1.25 in intervals limited by Metformin: [ln (AUC-A) - ln
(AUC-B)]: (0,83 1,17) y [ln (Cmx-A) - ln (Cmx-B)]: (0,85 1,14). Glibenclamide: [ln (AUC-A) - ln (AUC-B)]: (0,76 1,07) y [ln
(Cmx-A) - ln (Cmx-B)]: (0,95 1,23). Metformin Tmx for A drug was 1,5 h and B drug was 3,0 h. Tmx in Glibenclamide Tmax in both
samples was the same: 4,0 h.
Conclusions
The results of the study allowed to establish Pharmaceutical Equivalence and Bioequivalence of the products compared and their
therapeutic equivalence and interchangeability, by the properties within the limits of acceptance for the physicochemical parameters
and dissolution rate and the absence of significant differences between the mean values from pharmacokinetic variables AUC and Cmax,
in the confidence interval of 90%.
Key words: Metformin, Glibenclamide, bioavailability, bioequivalence.

INTRODUCCIN
El propsito fue realizar un estudio de
Bioequivalencia entre los productos con Metformina
500 mg + Glibenclamida 5 mg, ejecutado segn el
contrato interinstitucional entre CIDEIM - Tecnoqumicas
S.A y la Universidad ICESI (2009-03-13) y lo
planeado de acuerdo con el protocolo aprobado por el
Comit Institucional de tica para Investigacin en
Humanos (CIEIH) [2009-08-03, Acta 0906,
actualizada a 2010-03-16]a. La comparacin entre los
productos hace referencia a los parmetros
farmacocinticos de concentracin de cada principio
activo y la cantidad absorbida durante el periodo de
observacin. La aplicabilidad de los resultados en las
propiedades farmacodinmicas y clnicas requieren
consolidar los objetivos de prescripcin y la
ampliacin de los criterios de interaccin entre la
enfermedad y el tratamiento con este tipo de
medicamentos, incluyendo los relacionados con
farmacogentica y farmacogenmica como otros
condicionantes de eficacia, actualmente en amplia
discusin. Los principios activos que componen los
productos en ensayo se diferencian, desde el punto de
vista biofarmacutico, en el mecanismo de accin y
en la potencia farmacolgica para disminuir los
niveles sanguneos de glicemia. La Metformina es
altamente soluble en agua pero de baja permeabilidad

y tiene un amplio margen teraputico, mientras que la

Glibenclamida es ms potente y de baja solubilidad y
baja permeabilidad. La asociacin de Metformina y
Glibenclamida (Cdigo ATC: A10BD02 Metformina y
Sulfonamida - Combinaciones de Frmacos que bajan la
Glucosa sangunea)1 est aprobada en Colombia segn
las normas farmacolgicas y el cdigo correspondiente a:
8.2.3.0.N202. Ambas sustancias han sido ampliamente
registradas y utilizadas como antihiperglicemiantes
orales en Amrica y Europa desde la dcada de los 50 (en
Estados Unidos en 1995 se aprob la Metformina sola o
en combinacin con sulfonilureas)3. Amplia bibliografa
describe las propiedades farmacolgicas, dosis, va de
administracin y margen teraputico para ambas
sustancias. Los productos combinados de Metformina +
Glibenclamida presentan accin sinrgica en el control
de la glicemia y por ello estn indicados en asociacin
para el manejo teraputico de pacientes con diabetes tipo
2, para quienes los cambios en la dieta y calidad de vida
no logran disminuir los niveles plasmaticos de glucosa a
los rangos deseados.
a El presente estudio se acoge a las normas tcnicas, administrativas y
de tica para realizar investigacin biomdica en Colombia, Resolucin
8430 de 1993 y Resolucin 2378 de 2008. As tambin, a los principios
ticos estipulados en la Declaracin de Helsinki, ltima revisin de
octubre de 2008

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

La Metformina tiene una denominacin qumica:

N,N-dimetil-imido-dicarbonimidico-diamida, es un
polvo cristalino blanco, de frmula y peso molecular:
C4H11N5, 129,16 g/mol, fcilmente soluble en agua y
prcticamente insoluble en ter y cloroformo. El pKa
de la Metformina es 12,4. El pH de la solucin acuosa
al 1% es 6,684,5. La solubilidad en agua es alta en el
rango de pH 1,0 a 6,8 a 37C. La permeabilidad en el
tracto gastrointestinal es baja, por lo cual la
clasificacin biofarmacutica (BCS) es Tipo 3.
Coeficiente de particin Octanol/Agua como log
Po/w: -2,6406. La Metformina disminuye la
produccin de glucosa en el hgado y aumenta la
accin de la insulina en el msculo y tejido adiposo.
Estas acciones son mediadas por la proteincinasa
activada por AMP (AMP cinasa). En consecuencia se
disminuye la produccin de glucosa heptica, la
absorcin intestinal de glucosa y mejora la
sensibilidad perifrica a la captacin y utilizacin de
glucosa.
Est contraindicada en pacientes con enfermedad
renal, shock o colapso cardiovascular, infarto agudo
de miocardio, insuficiencia cardiaca, septicemia,
hipersensibilidad a Metformina, acidosis metablica
crnica o aguda (incluye cetoacidosis diabtica que
debe ser tratada con insulina). Debe descontinuarse
en pacientes que van a someterse a estudios
radiolgicos con medios de contraste yodados puesto
que puede precipitar una disfuncin renal y no pueden
realizarse procedimientos quirrgicos durante su uso.
Est contraindicada en mayores de 80 aos, a menos
que la funcin renal muestre indicadores de funcin
renal ptima. Debe evitarse el consumo simultneo de
alcohol. No puede administrarse ningn medio de
contraste diagnstico simultneamente.
La Glibenclamida7,8,9 es un hipoglicemiante del grupo
qumico de las sulfonilureas. Su nombre qumico es:
5-cloro-N-[2-[4-ciclohexilcarbamoilsulfamoil)
fenil]etil]-2-metoxibenzamida. Es un polvo blanco
cristalino, con la frmula molecular: C23H28CIN3O5S.
Peso molecular: 494,01g/mol. La solubilidad de la
Glibenclamida es baja (4mg/L) y la permeabilidad es
baja con una clasificacin biofarmacutica (BCS) tipo
2. Coeficiente de particin Octanol/Agua como log
Po/w: 4,79010. El cdigo identificador ATC
corresponde a A10BB01. Las sulfonilreas han sido
aprobadas como hipoglicemiantes desde los aos 40 y
utilizadas en la clnica desde una dcada ms tarde.
La Glibenclamida estimula el pncreas para la
liberacin de insulina, por lo que depende del
funcionamiento de las clulas en los islotes
pancreticos. Tambin disminuye la depuracin de la
insulina en el hgado, estimula la liberacin de
somatostatina y disminuye levemente la secrecin de
glucagn. Para su accin se une a los receptores
SUR1 bloqueando los conductos de potasio sensibles
a ATP, disminuye la conductancia a este catin y
facilita la entrada de calcio a la clula, durante la
despolarizacin responsable de la secrecin de
insulina y otros. Est contraindicada en diabetes Tipo I,

embarazo,
lactancia,
hipersensibilidad
al
medicamento y en cetoacidosis dibetica con o sin
coma. Debe administrarse cuidadosamente en
personas con insuficiencia heptica o renal. No debe
administrarse a pacientes con historia de alergia a
sulfonamidas u otro medicamento colorante o
preservante.
Algunas normas que regulan la valoracin de la
disponibilidad fisiolgica o perfil de concentracin
sangunea en productos combinados o asociaciones,
aceptan como indicador para Biodisponibilidad y
Bioequivalencia la valoracin de uno de los 2 frmacos11.
Otras prescriben que las condiciones de Bioequivalencia
deben ser analizadas con cada principio activo por
separado en cuanto a las concentraciones en sangre y el
tiempo para alcanzarlas12. Este estudio de
Bioequivalencia se bas en el marco legal en Colombia
para la aprobacin de Bioequivalencia de productos
genricos frente a la referencia en el mercado, que
incluyen la produccin con Buenas Prcticas de
Manufactura. Entre las Normas se citan las siguientes:
Poltica Farmacutica Nacional, 2003; Decreto 709 de
1992, Ley 100 de 1993 y Decreto 677 de 199513.
De la revisin de las propiedades farmacolgicas que
aparecen descritas en el protocolo del estudio se extraen
las siguientes: Metformina se absorbe principalmente en
el intestino delgado. La Biodisponibilidad oral es de 52
1% (40% 55%). No se une significativamente a
protenas del plasma. La excrecin urinaria sin
modificaciones es de 99,9 0,5% (79% - 100%). La
depuracin es de 7,62 0,30 mL/min. kg (6,3 - 10,1
mL/min. Kg). El volumen de distribucin es cercano a
1,12 0,08 l/kg (0,9 - 3,94 l/kg). La semivida (t) se
encuentra en 1,74 0,20 horas (1,5 - 4,5 horas). El
tiempo promedio para alcanzar la concentracin mxima
despus de una dosis oral de 500 mg es de 1,9 0,04
horas (1,5 - 3,5 horas). La concentracin mxima es de
1,6 0,2 g/mL (1,0 a 3,1 g/mL, para dosis nicas de
0,5 a 1500 mg).
Glibenclamida: Los alimentos disminuyen su absorcin;
algunos estudios recomiendan ingerirla media hora antes
de las comidas, otros con el primer alimento. Se espera
que la Biodisponibilidad sea superior al 50% (64% 90%). En el plasma puede unirse al 99,8% (90% a 99%)
a la albmina. El volumen de distribucin es cercano a
0,20 0,11 l/Kg. La semivida (t) se encuentra en
4,01,0 horas (6,0 10,0 horas) pero se presenta una fase
terminal de 15 horas que refleja redistribucin a los
tejidos. La depuracin es de 1,3 0,5 mL/min. Kg.
Despus de 5,0 mg por va oral se espera Cmx de 104
ng/mL en 2 a 4 horas. Se metaboliza en el hgado a
4-transhidroxiderivados y 3-cishidroxiderivados con
actividad insignificante; ambos metabolitos se eliminan
en bilis y orina.
El fundamento del presente estudio comparativo fue la
valoracin de Metformina y Glibenclamida en las
muestras de plasma de los voluntarios. En el proceso
analtico les fue adicionada a las muestras de plasma
una cantidad exacta de 0,05 g de sustancia estndar de

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

Metformina y de Glibenclamida, valoradas en su

potencia, con el fin de garantizar la capacidad de
respuesta, el grado de linealidad, la exactitud, la
precisin y la sensibilidad del sistema y del mtodo
analtico, en el rango de concentracin en las
condiciones establecidas durante la validacin del
mismob. De esta manera, todas las muestras quedaron
afectadas en la misma cantidad de estndar adicionado.
El anterior procedimiento fue indispensable para
analizar las muestras de los voluntarios por el mtodo
bioanaltico validado en presencia de bajas
concentraciones, que hacan necesario enriquecer la
muestra para certificar la sensibilidad de la prueba en
cuanto a lmites de deteccin y cuantificacin de cada
analito dentro del rango y de los parmetros
estadsticos validados para selectividad, linealidad,
precisin y exactitud. Ello tambin explica la
presentacin de resultados positivos para Metformina
y Glibenclamida en las muestras obtenidas antes de la
ingestin de cada producto (muestra -1)14,15.
El ensayo in vivo se realiz en 19 voluntarios adultos
sanos, incluidos tras firmar el Consentimiento
Informado y segn los criterios previstos en el
protocolo, con exmenes mdicos y pruebas de
laboratorio para descartar antecedentes en el
voluntario, y/o en familiares de primer grado de
consanguinidad de: disfuncin tiroidea, renal,
heptica, de glicemia y hematolgicas. Se comprob el
peso en el rango recomendado para el gnero, edad y
talla (peso 15% del peso ideal, en el rango
recomendado - ndice de Masa Corporal entre 20 y 29
kg/m2). Se indag por alergia conocida a la
Metformina y/o Glibenclamida, a componentes del
medicamento o a otro tipo medicamentos, trastornos
metablicos, infarto cardaco o enfermedad
cardiovascular, aneurisma o anemia.
A cada voluntario se le administr una dosis nica por
va oral de 1000 mg de Metformina y 10 mg de
Glibenclamida de cada producto asignado al azar, en
dos periodos separados entre s por un intervalo de
siete das, y se le extrajeron 14 muestras de plasma en
un lapso de 14 horas.
Se realiz revisin mdica a 79 sujetos voluntarios
sanos, con capacidad para consentir voluntariamente
su participacin, de los cuales 3 fueron incluidos en el
estudio piloto para definir criterios de validacin del
mtodo bioanaltico y 24 se seleccionaron para el
estudio completo. El diseo experimental aplicado
redujo la variabilidad dentro y entre los sujetos, porque
se administraron ambas formulaciones a cada uno de
los voluntarios en diferentes periodos.
b Expert Working Group (Quality) of the International Conference on
Harmonisation of Technical Requirements for Registration of
Pharmaceuticals for Human Use (ICH) and Food and Drug Administration:
Guidance for Industry Q2B Validation of Analytical Procedures:
Methodology. This guidance represents the Agencys current thinking on the
validation of analytical procedures (1996)

El Protocolo y los Procedimientos Operativos

Estandarizados se acogieron en todo momento a la versin
vigente de la Declaracin de Helsinki, ltima revisin de
octubre de 200816; las Guas actualizadas de la Organizacin
Mundial de la Salud que se compendian en International
Ethical Guidelines for Biomedical Research Involving
Human Subjects issued by the Council for International
Organizations of Medical Sciences (CIOMS) y, en
Colombia, a la Resolucin del Ministerio de Salud 008430
de 1993 en los Artculos 11, 53, 54, 55, 57 y 61 y a la
Resolucin 2378 de 200817,18,19.
El estudio se llev a cabo en las instalaciones del Centro
Internacional de Entrenamiento e Investigaciones Mdicas,
CIDEIM, con la cooperacin de la Clnica Sebastin de
Belalczar y la Fundacin Valle del Lili para la fase de
muestreo clnico. Estas entidades estn ubicadas en la ciudad
de Cali, Colombia.

MTODOS Y MATERIALES
Voluntarios
Los voluntarios fueron convocados a travs de
comunicacin telefnica y escrita, dando prioridad a los
voluntarios de estudios de investigacin similares con el
fin de asegurar la comprensin de los procedimientos a
realizar y de las restricciones para su participacin, adems
de no mostrar antecedentes de abuso de drogas ni alcohol,
que no hubiesen ingerido medicamentos de prescripcin
en los ltimos cuatro meses ni de venta libre en los 10 das
previos a la fase clnica del estudio y que aceptaran tener
restriccin de ejercicio de alto rendimiento y de consumo
de alcohol en los ltimos 10 das previos a la prueba. En la
seleccin de sujetos se aplic el procedimiento
estandarizado sobre seleccin de voluntarios para Estudios
de Biodisponibilidad y Bioequivalencia de CIDEIM
(SOP10016).
El mdico coordinador de la fase clnica del estudio
entrevist individualmente a cada sujeto y lo instruy
sobre el propsito del estudio y el contenido del
Consentimiento Informado (CI) para asegurar la
participacin voluntaria en el mismo. A todos los sujetos
les fue entregada una copia del consentimiento fechado y
firmado por ellos y los investigadores.
En la convocatoria inicial se tamizaron 107 jvenes y se
verificaron en ellos los requisitos mnimos para ser
incluidos en el estudio. De ellos, 79 fueron revisados por el
mdico. Tres voluntarios con edades de 19, 21 y 23 aos
fueron elegidos para el estudio piloto, veinticuatro (24)
voluntarios con edades entre 18 y 33 aos fueron
asignados aleatoriamente a los periodos de muestreo para
el estudio completo. De ellos 5 desistieron
voluntariamente de participar. 19 voluntarios participaron
finalmente en el estudio completo.
Fueron excluidos del estudio, de manera especfica,
quienes tuvieran menos de 18 o ms de 35 aos de edad,
sufrieran reacciones alrgicas a medicamentos u otro;
padecieran de alteraciones de la glndula tiroides o del

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

sistema cardiovascular y sanguneo y/o de enfermedades

como diabetes, estados convulsivos, hipertensin,
epilepsia, enfermedad renal, enfermedad heptica,
enfermedad respiratoria. Los que hubieran consumido
algn medicamento de venta libre en los ltimos 10 das
(como aspirina, ibuprofeno, vitaminas, productos
naturales y productos homeopticos, entre otros), a
quienes les hubieran prescrito tratamiento mdico con
medicamentos en los ltimos cuatro meses, los que
fueran incapaces de dejar de ingerir bebidas alcohlicas
durante 10 das, de fumar durante 2 das o de realizar
ejercicio de alto rendimiento durante 10 das. Los
resultados de la aplicacin del formato de inclusin se
anexaron al informe final del estudio.
Los datos demogrficos muestran los promedios (SD)
de: edad de 24,9 aos +/- 5,0 [22,5, 27,3 28,3], peso 73,8
kg +/- 9.3 [67,7, 76,7], talla 1,7m+/- 0,05 unidades [1,68
- 1,74] e ndice de Masa Corporal de 24,6 kg/m2+/- 3.1
[26.1 - 23.1].
En la Tabla 1 se describen los datos demogrficos de los
voluntarios participantes en el estudio de productos con
Metformina/Glibenclamida y la secuencia de tratamiento
asignada al azar.
TABLA 1. Descripcin Demogrfica de los Voluntarios

Voluntario
Nmero

Cdigo

Edad
(aos)

Peso*
(kg)

Talla
(m)

IMCa
(kg/m2)

HAGP-1

32

82,0

1,70

28,4

JEPR-2

29

76,0

1,70

26,3

AJRL-3

19

60,0

1,68

21,3

RRG-4

32

84,0

1,73

28,1

SJRQ-5

ROG-6

25

63,0

1,70

21,8

JJA-7

23

70,0

1,75

22,9

GDVL-8

23

77,0

1,66

27,9

JLB-9

30

81,0

1,78

25,6

10

AMC-10

22

75,0

22,4

11

OEBB-11

29

1,83

65,0

22

1,68

23,0

12

JDOR-12

57,0

1,68

20,2

13

LFGA-13

14

WH-14

15

SCR-15

16

LHJ-16

33

80,0

1,74

26,4

17

EAPT-17

20

70,0

1,73

23,4

18

APA-18

25

1,70

VASC-19

24

20,4

19

59,0

1,77

20

GCR-20

26,8

84,0

21

MAMS-21

29

81,0

1,66

29,4

22

JESL-22

19

80,0

1,68

28,3

23

RIV-23

18

60,0

1,59

23,7

24

SAVP-24

19

68,0

1,82

20,5

Pb

JSVP -1

23

72,0

1,66

26,1

AFVC-2

21

68,0

1,78

21,5

JDCC-3

19

66,0

1,77

21,1

b. Participante en el estudio piloto

a. IMC: ndice de Masa Corporal
Resaltados, los cdigos de los voluntarios que desistieron.
* Observacin; para la consideracin de peso normalse
complement la informacin del IMC con el criterio sobre
lmites de normalidad para el rango comprendido entre +/15% del lmite superior e inferior del peso ideal, para la talla
y gnero.

Reactivos y equipos
Los equipos crticos y materiales aplicados al desarrollo y
validacin del mtodo fueron: Balanza Analtica marca
Ohaus serie Adventurer; Balanza Electrnica Adventurer
SL AS3101. Agitador Vortex marca Fisher Scientific;
Agitador Magntico Multistation marca IKA; Purificador
de Agua marca Simplicity Millipore; pH metro WTW
Inolab 740; Cabina Extractora de Gases y Humos C4
Control de Contaminacin Ltda.; Congelador -80C marca
Revco: Microcentrfuga Eppendorf 5415D; Estndares
Secundarios
de
Glibenclamida,
Lote
MPN05905200623-S, potencia 99,7%; Estndar Secundario de
Metformina, Lote 1022639R1-S, potencia 99,4%;
Acetonitrilo, Metanol grado HPLC, Dodecil sulfato de
sodio, Fosfato de sodio dibsico; Agua grado HPLC;
Plasma Humano libre de Glibenclamida y/o Metformina.
Las muestras de plasma se conservaron a -80C en viales
de polipropileno de 2 mL y descongelaron a temperatura
ambiente para su valoracin. Antes de aplicar las muestras
a los ensayos fueron verificadas las especificaciones de los
sistemas y equipos de acuerdo con registros que
demostraran el comportamiento satisfactorio de cada uno.
Los datos individuales de reas y concentracin de
Metformina y Glibenclamida fueron corregidos por el
valor del rea inicial o seal cromatogrfica basal (muestra
1) obtenida en el voluntario correspondiente y por la
potencia del estndar adicionado. En ningn caso se
sustrajo el valor del estndar adicionado porque se
arriesgaba afectar el rango de concentracin en el cual el
mtodo demostr ser lineal, exacto y reproducible.

PROTOCOLO DEL ESTUDIO

Productos y Equivalencia Farmacutica
El laboratorio especializado de anlisis de la
Universidad de Antioquia en Medelln verific el
cumplimiento de los parmetros farmacopeicos
vigentes (USP) y las especificaciones declaradas por el

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

fabricante de Metformina y Glibenclamida MK, en

una muestra de los productos a comparar.
Mtodo bioanaltico
En el laboratorio de estudios biofarmacuticos, ubicado
en las instalaciones de CIDEIM (Carrera 125 No 19 225 Va a Pance, Cali, Colombia), se desarroll y valid
el mtodo analtico para valorar las muestras en plasma
sanguneo.
El mtodo const de: adicin estndar, tcnica de
cromatografa lquida de alta eficiencia con detector UV
y arreglo de diodos, precipitacin de protenas con
acetonitrilo, columnas para fase reversa; la fase mvil
consisti de una mezcla de Buffer fosfato de potasio PH
7,5 y acetonitrilo en proporcin 80:20 %v/v.
Estas condiciones demostraron validez estadstica para
exactitud, precisin, reproducibilidad y lmite de
cuantificacin. En ello se aplicaron criterios fsicos y
qumicos identificados en la bibliografa consultada
para determinar y cuantificar estas molculas en plasma
sanguneo20,21,22,23. Las condiciones cromatogrficas se
definieron para: flujo de 1,0 mL/min, temperatura de
columna de 40C, con lecturas en Longitud de onda de
226 nm y volumen de inyeccin de 10 L. El sistema
analtico fue un HPLC Lachrom Ultra LCU HITACHI
con Columna: Chromolith Performance RP-18e 100-4,6
mm, 2 m, con detector UV y arreglo de diodos.
Se prepararon muestras en plasma sanguneo a partir de
estndares analticos valorados de Metformina y
Glibenclamida. Este plasma humano es obtenido de un
banco de reserva adquirido de donantes adultos sanos,
convocados e incluidos en un proceso diferente a los
realizados para este estudio. De esta manera se
prepararon muestras de ocho concentraciones de
Metformina en concentraciones diferentes de: 0,25,
0,50; 0,75; 1,0; 1,25; 1,50; 2,0; 2,5; 3,0; 4,0; 6,0; 8,0;
10,0; 20,0 y 30,0 g/mL. Para Glibenclamida, en
concentraciones de 0,25; 0,50; 0,75; 1,0, 1,25; 1,50;
2,0; 2,5; 3,0; 4,0; 8,0; 10,0; 20,0 y 30,0 g/mL.
De cada concentracin se prepararon 5 muestras
independientes y se hicieron determinaciones por
triplicado de cada una.
Las muestras preparadas con estndar analtico
valorado en su potencia para Metformina y
Glibenclamida se sometieron a ensayos de
representacin estadstica para la valoracin de los
parmetros clsicos de sensibilidad, exactitud,
precisin, robustez y linealidad, as como a la
valoracin de estabilidad de las muestras en el tiempo
bajo condiciones de almacenamiento definidas, segn
las guas que se prescriben al respecto24. Los criterios
estadsticos se aplicaron para desviacin estndar,
lneas de tendencia, factor de correlacin y coeficientes
de variacin; estos fueron calculados con la aplicacin
del Programa Estadstico: Statgraphics Plus for
Windows 4.1 Professional Version. Copyright 1994
-1999 by Statistical Graphics Corp.

En resumen, los parmetros instrumentales estandarizados

fueron:
PARMETROS

CONDICIN

Modo de elucin

Isocrtico

Flujo de fase mvil

1,0 mL/min

Volumen de Inyeccin

10 L

Longitud de onda de deteccin

226 nm

Columna

Columna Chromolith
Performance RP-18e,
100 - 4,6 mm

Temperatura de la columna

40 C

Temperatura del automuestreador 10 C

Modo de cuantificacin

Estndar Interno

Modo de cualificacin

Tiempo de retencin

Modo de calibracin

Curva de calibracin

Unidades de concentracin

g/mL

Tiempo de Retencin del

estndar Interno (Metilparabeno)

2,0 minutos

Tiempo de Retencin del analito

(Metformina/Glibenclamida)

7,5 minutos

Tiempo de anlisis

12 minutos

Diseo experimental y conduccin del estudio

El diseo experimental se bas en la administracin
cruzada de los dos medicamentos a cada voluntario en
dos periodos diferentes, en el orden de la asignacin
aleatoria a sujetos voluntarios sanos, de los productos
codificados como A o B, teniendo en cuenta para su
administracin: dos tratamientos, dos periodos, dos
secuencias, dosis nica y cruzado. Se administraron
dos tabletas de 500/5 mg de Metformina /
Glibenclamida de ambas formulaciones, con un
intervalo entre los periodos de siete das. Este diseo
disminuye la variabilidad en factores que no se deben
a las diferencias entre las formulaciones comparadas.
Los datos para el anlisis en la determinacin de
Bioequivalencia fueron los resultados de las
valoraciones de Metformina y Glibenclamida en el
plasma de 14 muestras extradas durante 14 horas
continuas, en cada periodo de muestreo. El tiempo de
muestreo previ la desintegracin, disolucin y
absorcin del principio activo desde cada producto y
posibilit la mxima absorcin.
De acuerdo con el diseo experimental descrito, todos
los datos de los 19 sujetos se incluyeron en el anlisis
estadstico, con un nivel de significancia de 5% y un
intervalo de confianza de 90% alrededor de la razn
entre los promedios geomtricos T/R, dentro de los
lmites de Bioequivalencia de 80-125% para los datos
con transformacin logartmica. Los anlisis

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

estadsticos se basaron en las diferencias de los

promedios logartmicos (log T log R), calculados de
datos directos y transformados logartmicamente en el
rango de 0,80 a 1,25, aplicados a los parmetros de
rea bajo la curva (AUC) y Concentracin Mxima
alcanzada o concentracin pico de Metformina y
Glibenclamida (Cmx), para cada producto.

Tabla 2. Resultados de la Evaluacin Fisicoqumica de las

muestras de los productos.
ATRIBUTO

09-09-23

09-09-27

Valoracin de
Metformina
Mtodo HPLC
Lmites: no menos de
90% ni ms de 110%

Metformina
clorhidrato
501,0 mg 100,2%
de la cantidad
declarada

Metformina
clorhidrato
512,0 mg 102,4%
de la cantidad
declarada

Peso promedio (g)

Valoracion de
Glibencamida MK
Metodo HPLC
Lmites: no menos de
90% ni ms de 110%

Los valores antilogartmicos de los lmites de

confianza constituyeron el intervalo de 90% para la
razn de las medias geomtricas entre los productos A
y B, con aceptacin de un intervalo de confianza de
mnimo 80% y no ms de 125%, mediante la
aplicacin de dos Test de Hiptesis Unilaterales,
definidas como:

Prueba de Disolucin
(HPLC)
S1: % principio activo
disuelto Lmite: En seis
unidades (6) ninguna unidad
debe ser menor del 85% de
la cantidad declarada del
principio activo

2. Ho: Diferencia entre los promedios logartmicos de

Test y Referencia (log T - log R) mayor a log 1,25
versus Ha: Diferencia entre los promedios
logartmicos de Test y Referencia (log T - log R)
menor o igual a log 1,25.
Las pruebas se aplicaron para rechazar las hiptesis
nulas con el fin de establecer la Bioequivalencia entre
los productos A y B.

RESULTADOS
Ensayo de Disolucin y
Equivalencia Farmacutica
En la Tabla 2 se resumen los criterios o atributos
valorados en cada muestra de producto, tal como
constan en los informes del Laboratorio
Especializado de Anlisis de la Universidad de
Antioquia, Medelln.

Glucovance
(Metformina/
Glibenclamida)
Tabletas 500mg/5

Fecha de anlisis

Anlisis estadstico
Los parmetros crticos para comparar los productos
en trminos de concentracin (ng/mL) en el tiempo
(h): AUC, Cmx y Tmx, fueron analizados por la
Unidad de Epidemiologa y Bioestadstica de
CIDEIM, donde se emplearon diferentes pruebas
estadsticas aplicando el programa SPSS Version 7.5
para Windows, Chicago Inc. 1996. En el anlisis de
los 8 datos tambin se aplicaron otros programas
como
PK
Solutions
Pharmacokinetics
Noncompartmental Data Analysis, Summit Research
Services y Winnonlin Noncompartmental Analysis
Program Version 5.3.

1. Ho: Diferencia entre los promedios logartmicos de

Test y Referencia (log T - log R) menor a log 0,8
versus Ha: Diferencia entre los promedios
logartmicos de Test y Referencia (log T - log R)
mayor o igual a Log 0,8.

Metformina/
Glibenclamida
MK Tabletas
500mg/5

Uniformidad de
dosis (%)
Lmite: Valor de
aceptacin de 15%

0,66358

0,62041

Glibenclamida
5,34 mg 106,7%
de la cantidad
declarada.

Glibenclamida
5,8 mg 101,5%
de la cantidad
declarada.

Metformina
clorhidrato
Promedio: 100,1%
S: 1,0
Valor: 2,5%
Glibenclamida
Promedio: 108,0%
S: 3,2 Valor: 14,2%

Metformina
clorhidrato
Promedio: 102,2%
S: 0,8
Valor: 2,6%
Glibenclamida
Promedio: 102,2%
S: 1,2 Valor: 3,6%

Metformina clorhidrato S1:

Medio: Buffer Fosfato de 100,102,101,94,100,
potasio 0,05 M
96
pH: 6,8; 1000 mL a 37oC
Aparato: 2,50 rpm
Tiempo: 30 min
Tolerancia: (Q) 85%
Glibenclamida
S1:
Medio: cido brico 0,05 103,104,104,101,
M y Cloruro de Potasio 103,98
0,05 M; 500 mL a 37C
Aparato: 2,75 rpm
Tiempo: 30 min
Tolerancia(Q): 85%

S1:
92,95,95,99,99,99

S1:
98,96,98,97,99,97

Las muestras de los productos cumplieron las

especificaciones definidas para los ensayos fsicos,
qumicos, pruebas de disolucin y dems anlisis
realizados. Por lo tanto, al comparar los resultados y
el cumplimiento de las especificaciones de calidad se
declara la Equivalencia Farmacutica entre ambos
productos.
Validacin del mtodo de anlisis
de las muestras de plasma
Los procedimientos para el desarrollo y la validacin
del mtodo con el cual se valoraron las muestras de
plasma de los voluntarios, permitieron la verificacin
y el anlisis de significancia para el cumplimento de
los parmetros indicados en la consideracin de
validacin satisfactoria.
Los resultados de la validacin estadstica del Mtodo
Bioanaltico se describen en la Tabla 3.

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

Tabla 3. Resultados de la Validacin del Mtodo

Bioanaltico.
Ensayo

Criterio de
Aceptacin
2

LinealidadSistema

R 0.80

PrecisinSistema

CV < 15%

PrecisinMtodo

CV < 15%

ExactitudMtodo

Desviacin
<30% respecto
de la media

LinealidadMtodo

R 0.80

Resultado
Metformina
R2 = 0,9989
Glibenclamida
R2 = 0,9975
p < 0,01
Metformina
CV = 0,68 %
Glibenclamida
CV = 0,78 %

Metformina:
CV = 1,81 %
Glibenclamida:
CV = 2,77 %
Promedio de la
desviacin
respecto de la
media
Metformina:
13,86%
Glibenclamida:
1,03% p<0,05
Metformina:
r2: 0,9989
Glibenclamida:
r2: 0,9968
p < 0,01

No presencia de
interferencia
significativa en
Especificidad las mismas
condiciones que
para Metformina
y Glibenclamida

No seales en
el tiempo de
retencin de
Metformina
Glibenclamida

Recuperacin

Metformina:
101,10%
Glibenclamida:
113,4%

Limite:
Deteccin
Lmite:
Cuantificacin

Decisin
Aceptado

Aceptado

Aceptado

Aceptado

Aceptado
Realizar correccin
al valor del rea de
cada muestra con
respecto a las
seales medidas
en la muestra, antes
de administrar el
medicamento a
cada voluntario.

Metformina:
0,06 g/mL
Glibenclamida:
0,24 g/mL
Metformina:

0,13 g/mL
Glibenclamida:
0,42 g/mL

Se realizaron los ensayos de estabilidad de los

analitos en las muestras de plasma para:
congelamiento, descongelamiento, tiempo en el
sistema analtico y en etapa preparativa para el
anlisis. A los resultados se aplicaron las pruebas
estadsticas para diferencias significativas (t, p<0,05)
con respecto a muestras frescas o recin preparadas.
Estas pruebas se identifican como: Short Term:
descongelamiento durante cuatro horas, con respecto
de las muestras frescas. Long Term: muestras
almacenadas a -80oC durante 48 horas, 96 horas, 11
das, 30 das, 60 das y 90 das. Post-Preparativa:
muestras mantenidas en el automuestreador durante
24 horas a 10C. Descongelamiento: muestras
sometidas a tres ciclos de congelamiento y
descongelamiento. Soluciones stock en muestras

despus de permanecer 24 horas a temperatura

ambiente y una semana a 4C en nevera.
De los resultados obtenidos se concluy que las
muestras en plasma de Metformina y Glibenclamida
deben ser descongeladas a temperatura ambiente y
analizadas antes de un mes de su conservacin a -80
o
C. Las muestras no deben ser sometidas a ciclos de
congelamiento y descongelamiento.
Por lo anterior, el mtodo analtico para la valoracin
de Metformina y Glibenclamida en plasma humano
cumpli con los parmetros que validan los resultados
analizados en este informe. Su validez fue demostrada
con base en los criterios de linealidad, especificidad,
precisin y exactitud, bajo las condiciones analticas
declaradas
en
el
Procedimiento
Operativo
Estandarizado, identificado como SOP10128-01,
CIDEIM.
Evaluacin de Biodisponibilidad (BD)
y Bioequivalencia (BE)c
Los voluntarios aceptaron por escrito participar en el
estudio, recibir las dosis de los medicamentos con
Metformina y Glibenclamida y donar sangre de la
siguiente manera: para el estudio piloto 130 mL de
sangre (10 mL para pruebas de laboratorio clnico
durante los exmenes mdicos de inclusin y 120 mL
de 12 muestras de 10 mL) y 290 mL para el estudio
completo de BE (10 mL para pruebas de laboratorio
clnico durante los exmenes mdicos de inclusin y
140 mL en 14 muestras de 10 mL, en dos
oportunidades diferentes). En el estudio piloto los
voluntarios estuvieron hospitalizados en la Clnica
Sebastin de Belalczar, y en el estudio completo
estuvieron hospitalizados en la Clnica de la Fundacin
Valle del Lili. Ambas entidades estn ubicadas en la
ciudad de Cali y fueron contratadas por CIDEIM para
este fin.
A tres voluntarios elegidos para el estudio piloto, luego
de un periodo de ayuno de aproximadamente 10 horas,
se les extrajo la primera muestra de sangre a travs de
un catter antecubital e inmediatamente despus se les
suministraron 4 tabletas de Glucovance, de 500 mg/5
mg de Metformina+Glibenclamida (Total 2000 mg de
Metformina + 20 mg de Glibenclamida), con un
volumen de 240 mL de solucin al 20% de glucosa en
agua (DAD 20%).
Durante las siguientes dos horas le fueron
suministrados 60 mL de la solucin azucarada cada 15
minutos. En un cronograma estandarizado se
extrajeron en forma consecutiva once muestras ms
de sangre de la siguiente manera: las primeras seis
muestras cada media hora y, a partir de la sexta, una
cada hora durante cuatro horas; la ltima muestra se
extrajo despus de 14 horas de la administracin del
producto.
c El presente estudio se acoge a las normas tcnicas,
administrativas y de tica para realizar investigacin biomdica en
Colombia, Resolucin 8430 de 1993 y Resolucin 2378 de 2008.
As tambin, a los principios ticos estipulados en la Declaracin
de Helsinki, ltima revisin de octubre de 2008

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

Durante el estudio piloto los voluntarios manifestaron

sntomas de nuseas, palpitaciones, mareos y ansiedad,
que motivaron la realizacin de glucometras, las cuales
evidenciaron bajos niveles de glucemia. Se procedi a
administrar dosis adicionales de DAD 20% va oral,
practicando glucometras a intervalos cortos de tiempo,
encontrndose que persistan valores bajos aunque sin
sntomas. El mdico responsable de la fase clnica del
estudio tom la determinacin de hospitalizar
preventivamente a los voluntarios para monitorizarlos.
Durante
la
hospitalizacin
permanecieron
asintomticos, pero con glicemias subnormales. Se dio
manejo mdico con suero dextrosado y dieta
hipercalrica. Luego de 18 horas de observacin se
encontraron glucemias consecutivas en valores
normales y se procedi a dar de alta a los voluntarios.
El Comit de tica de Investigacin en Humanos
consider la situacin de eventos adversos serios
presentados durante el estudio piloto, reanaliz los
riesgos posibles en los voluntarios a participar en el
Estudio Completo de Bioequivalencia y solicit
requerimientos modificatorios en el contenido del
Protocolo y el Consentimiento Informado. Estos
requerimientos se relacionaron con la inclusin de
prrafos con explicaciones precisas sobre los riesgos de
hipoglucemia y las posibles consecuencias para el
voluntario incluyendo el riesgo poco probable de morir
y la instruccin sobre la posibilidad de permanecer
hospitalizado hasta que se considerara seguro autorizar
el retiro de la clnica.
Los resultados analticos de las muestras de plasma del
estudio piloto permitieron verificar el mtodo analtico
en cuanto a sensibilidad y especificidad. As tambin, el
estudio farmacocintico de los mismos indicaron la
necesidad de ajustar el Protocolo en lo referente a los
tiempos de muestreo u horarios para la toma de
muestras en el ensayo clnico de Bioequivalencia, tal
que se obtuvieran datos para evaluar la absorcin en 15
y 45 minutos. Con base en los eventos adversos de
hipoglucemias severas presentados por los tres
voluntarios y por la sensibilidad del mtodo analtico,
se replante la dosis a ser suministrada a los
participantes del estudio completo de Bioequivalencia,
de modo que se disminuy a 1000 mg de Metformina y
10 mg de Glibenclamida (dos tabletas de cada
producto).
Para el estudio completo de BE, el mdico coordinador
de la fase clnica procedi a la revisin de cada
voluntario, confirm el ayuno por al menos 10 horas y
les record las recomendaciones de reposo durante dos
horas despus de la administracin del medicamento,
as como la metodologa para la toma de las muestras de
sangre. Todos los voluntarios fueron alojados en un
saln amplio, iluminado, dotado con sillas reclinables y
equipo de video, ubicado al lado del rea de descanso y
servicios para alimentacin, higiene y aseo. Cada da de
muestreo
se
cumplieron
adecuadamente
las
condiciones de administracin de medicamentos, la

toma de muestras de sangre y el programa de

alimentacin de tres comidas completas (desayuno,
almuerzo y cena), y dos refrigerios (en la maana y en
la tarde). Los voluntarios consumieron agua a voluntad
durante su hospitalizacin, a excepcin de una hora
antes y dos despus de la administracin del
medicamento.
Despus de la primera muestra de sangre y de la
administracin del medicamento asignado se ejecut
estrictamente el cronograma para la toma de 14
muestras de sangre de 10 mL en los intervalos de horas
as descritos: 0,0; 0,25; 0,50; 0,75; 1,0; 1,50; 2,00; 2,50;
3,00; 4,00; 6,00; 8,00; 11,00 y 14,00.
Las muestras de sangre fueron transferidas a tubos
heparinizados identificados con nmero de sujeto,
muestra, fecha, cdigo del producto administrado y
periodo. Posteriormente, se llev a cabo la separacin
del plasma por centrifugacin a 10000 r.p.m por 20 min.
El plasma obtenido se distribuy en viales de propileno
de 2 mL previamente rotulados de la misma manera que
los tubos heparinizados y se conservaron a -70 C, hasta
su traslado al Laboratorio de Estudios Biofarmacuticos
de CIDEIM, donde se almacenaron a temperaturas de
-80oC hasta la valoracin qumica correspondiente.
Las muestras de plasma fueron analizadas para su
contenido en Metformina y Glibenclamida. Para ello se
aplicaron los mtodos y procedimientos desarrollados y
validados adicionando a cada muestra 100 L de una
solucin de 0,5 g/mL del estndar de cada analito, de
acuerdo con el procedimiento identificado en el Sistema
de Calidad de CIDEIM como: Determinacin de
Metformina/Glibenclamida en Plasma Humano por
Cromatografa Lquida, empleando el Mtodo de
Adicin Estndar. Cdigo: E-002-04-2010 SOP10127.
Cada dato de rea cromatogrfica para valorar la
concentracin de Metformina y Glibenclamida fue
corregido al restarle el valor del rea basal o seal
cromatogrfica inicial (muestra 1) obtenido del
voluntario correspondiente y por la potencia del mismo.
En ningn caso se sustrajo el valor del estndar
adicionado para no afectar el rango de concentracin en
el cual el mtodo demostr ser lineal, exacto y
reproducible.
Los clculos aplicados para la cuantificacin se basaron
en la siguiente funcin:
Conc *.Metformina/Glibenclamida (ug /mL)=

rea Muestra
x Conc Estndar
rea Estndar

*Conc: Concentracin del estndar analtico.

En sntesis, el Mtodo Analtico se fundament en la

valoracin de Metformina y Glibenclamida en plasma
humano por Cromatografa Lquida de Alta Eficiencia
-HPLC- con detector ultravioleta y arreglo de diodos
y la precipitacin de protenas con acetonitrilo. Las
condiciones cromatogrficas para Metformina y

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

Glibenclamida fueron: Fase mvil: mezcla de Buffer

Fosfato de Potasio pH 7,5 y Acetonitrilo en
proporcin 80:20 v/v, flujo: 1,0 mL/min, longitud de
onda de deteccin () 226 nm, volumen de inyeccin:
10 L, temperatura de la columna 40C, temperatura
del automuestreador 10C, columna Chromolith
Performance RP-18e 100-4.6 mm, y en su
preparacin se adicion estndar analtico de
Metformina y Glibenclamida valorado en su potencia.
Modo de cuantificacin: Estndar externo. Modo de
cualificacin: tiempo de retencin. Modo de
calibracin: curva de calibracin. Tiempo de
retencin de Metformina: 7,5 minutos. Tiempo de
retencin de Glibenclamida: 2 minutos. Estas
condiciones demostraron validez estadstica para
exactitud, precisin, reproducibilidad y lmite de
cuantificacin.

Los anteriores resultados estn representados de manera

grfica y comparada en la Figura 1 y demuestran el
comportamiento similar de ambos productos en cuanto a
perfiles plasmticos.
TABLA 5. Concentracin y reas Bajo la Curva.
Glibenclamida. Productos A y B. 19 Voluntarios.
TIEMPO PRODUCTO A PRODUCTO B PRODUCTO A PRODUCTO B
Concentracin Concentracin
AUC
AUC
(h)
Promedio
(ng/mL)

Promedio
(ng/mL)

[(ng/mL)h]

[(ng/mL)h]

0,00

0,00

0,00

0,25

160,36

317,96

20,05

39,74

0,50

234,45

259,72

49,35

72,21

0,75

301,23

315,90

66,96

71,95

Los datos promedio de concentracin plasmtica de

Metformina y Glibenclamida en el tiempo se
muestran en las Tablas 4 y 5 respectivamente. En ellas
se describen Cmx, Tmx y AUC0-t. El rea Bajo la
Curva fue calculada por el mtodo de los trapecios y
con base en ello se valoraron reas parciales y bajo el
primer momento de la curva (AUMC).

1,00

359,67

310,41

82,61

78,29

0,50

487,87

369,34

211,88

169,94

2,00

408,57

454,57

224,11

205,98

2,50

515,15

436,30

230,93

222,72

3,00

590,50

516,86

276,41

238,29

TABLA 4. Concentracin y reas Bajo la Curva.

Metformina. Productos A y B. 19 Voluntarios.

4,00

614,46

568,10

602,48

542,48

6,00

378,75

517,93

993,20

1086,03

8,00

341,29

380,24

720,04

898,17

11,00

212,59

278,53

830,82

988,16

14,00

137,04

241,17

524,44

779,55

4833,28

5393,50

TIEMPO PRODUCTO A PRODUCTO B PRODUCTO A PRODUCTO B

Concentracin Concentracin
AUC
AUC
(h)
Promedio
(ng/mL)

[(ng/mL)h]

[(ng/mL)h]

0,00

0,00

0,00

0,25

356,08

370,30

44,51

46,29

0,50

945,67

910,83

162,72

160,14

0,75

1442,20

1373,56

298,48

285,55

1,00

1514,12

1382,23

369,54

344,47

0,50

1615,81

1430,98

782,48

703,30

2,00

1425,27

1582,86

760,27

753,46

2,50

1484,36

1477,66

727,41

765,13

3,00

1521,53

1613,99

751,47

772,91

4,00

1335,41

1278,31

1428,47

1446,15

6,00

782,18

854,16

2117,59

2132,46

8,00

511,89

473,24

1294,07

1327,40

11,00

250,06

299,15

1142,92

1158,58

14,00

174,43

183,00

636,74

723,22

10516,68

10619,07

AUCTOTAL

AUCTOTAL

Los anteriores resultados fueron transformados al

logaritmo y su representacin grfica, para
Metformina y Glibenclamida en los productos A y B,
se presenta en las Figuras 1 y 2, respectivamente. Esto
demuestra el comportamiento farmacocintico
similar de ambos productos para su contenido en el
frmaco respectivo.
8.00
7.50
Ln Concentracin (ng/ml)

Promedio
(ng/mL)

7.00
6.50
6.00
5.50
5.00
Ln Concentracin Producto A

4.50

Ln Concentracin Producto B

4.00
3.50
3.00
0.0

2.0

4.0

6.0

8.0

10.0

12.0

14.0

16.0

Tiempo (h)

FIGURA 1. Ln concentracin promedio (ng/mL) Metformina

Producto A y B, 19 voluntarios

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

10

La distribucin normal de los datos obtenidos para los

parmetros de inters fue analizada mediante las
pruebas
de
Shapiro-Wilk.
Las
variables
transformadas de ln de AUC y ln de Cmx demostraron
normalidad con un nivel de significancia de 0,05.
Para la diferencia de medias [D] se aplicaron ensayos
de muestras pareadas, puesto que fueron
observaciones sobre un mismo individuo. Con ello se
valoraron los intervalos de confianza (IC90%).

Glibenclamida en plasma [Tmx] (valor p: 0,2276).

DISCUSIN
Este estudio de Bioequivalencia se dise para
comprobar la calidad y verificar el comportamiento in
vivo de dos productos orales indicados para el manejo
de la diabetes. Esta es una condicin mdica de alto
riesgo tiene consecuencias cardiovasculares que
comprometen la esperanza y la calidad de vida de las
personas que la padecen. Entre las complicaciones
microvasculares de la enfermedad, asociadas
estrechamente con la hiperglucemia, estn la ceguera
y la falla renal. El United Kingdom Prospective
Diabetes Study (UKPDS) y otros demostraron la
disminucin del riesgo cardiovascular por el
tratamiento con Metformina en pacientes con diabetes
tipo 2. De manera especial qued establecido que el
control intensivo de glucosa disminuye las
complicaciones microvasculares. Sin embargo, el
Estudio ACCORD (Action to Control Cardiovascular
Risk in Diabetes), adems de demostrar la
disminucin benfica de daos microvasculares,
tambin pareci asociar el efecto hipoglucemiante en
exceso con el riesgo de muerte en terapias
combinadas
con
tiazolidinas,
sulfonilureas,
Metformina e insulina25.
Verificar y demostrar la calidad in vitro de productos
es un hecho rutinario en el sector de manufactura
farmacutica legalmente acreditado, especialmente
para aquellos con los que se intervienen entidades
patolgicas de graves consecuencias como la diabetes
y que conllevan riesgos asociados al uso de
medicamentos por los eventos adversos serios que
pueden ocasionar.
Entre los medicamentos de reconocida efectividad,
valorados y vigilados para el manejo de diabetes tipo
2, se cuenta con las tabletas orales de Metformina. Su
seguridad se representa en el uso de altas dosis
efectivas (usualmente 2 g, mximo 3 g al da), pero
con cualidades farmacuticas que le confieren
caractersticas especiales durante el proceso de
manufactura. En este sentido, la Metformina como
materia prima presenta propiedades fsicas que
delimitan el mtodo de fabricacin en cuanto a
tcnicas de compresin, tipo de cristal, grado de
cristalizacin o forma amorfa, y la consideracin
sobre el efecto en la fluidez del polvo o granulado,
adherencia, resistencia mecnica y estabilidad de las
tabletas26. Estas circunstancias son factores crticos
de control en los procesos de manufactura de los
productos ya que marcan sus propiedades de
estabilidad en el anaquel y de disolucin en el tracto
gastrointestinal, de las que dependen directamente las
posibilidades de absorcin o Biodisponibilidad en
cantidades efectivas para el uso antihiperglucemiante.

La prueba de Wilcoxon Signed Ranks aplicada a la

variable independiente tiempo no demostr
diferencias estadsticamente significativas entre los
dos productos en estudio para el Tiempo de mxima
concentracin de Metformina (valor p: 0,481),

Durante el proceso de formulacin y manufactura de

tabletas que contienen Metformina son estrictamente
controlados los tipos y proporciones de aglutinantes,
desintegrantes, lubricantes, porcentajes de humedad
en las mezclas, tamao de mallas de tamizado,

7.00

Ln Concentracin (ng/ml)

6.50
6.00
5.50
5.00
4.50
Ln Concentracin Producto A

4.00

Ln Concentracin Producto B

3.50
3.00
0.0

2.0

4.0

6.0

8.0

10.0

12.0

14.0

16.0

Tiempo (h)

FIGURA 2. Ln concentracin promedio (n/mL) Glibenclamida

Producto A y B, 19 voluntarios

El
cuadro
siguiente
describe
los
datos
farmacocinticos proyectados para los productos A y
B con respecto a Metformina y Glibenclamida en
plasma.
Tmx
(h)

AUMC(0 t)
[ng-h*h/mL]

10516,68 1615,81 1,50

48446,19

10619,07 1613,99 3,00

50146,93

GLIBENCLAMIDA

AUC(0 t)
Observada
(hr*ng/mL)

Cmx
(ng/mL)

Tmx
(h)

AUMC(0 t)
[ng-h*h/mL]

4833,28

614,46

4,00

27928,42

5393,50

568,10

4,00

34152,47

METFORMINA

AUC(0 t)
Observada
(hr*ng/mL)

Cmx
(ng/mL)

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

11

mtodo de secado y de compresin y las interacciones

entre el frmaco y los excipientes, entre otros. La
valoracin de la calidad in vitro del producto est
determinada por el cumplimiento de estndares
indicadores de calidad en los parmetros de peso,
dureza, desintegracin, friabilidad, uniformidad de
dosis y perfil de disolucin de las tabletas. Luego, en
la comparacin de productos con Metformina est el
reconocimiento explcito de las diferencias bsicas en
el origen de los materiales y los procesos de
manufactura aplicados, porque inciden forzosamente
en las cualidades de disolucin y Biodisponibilidad in
vivo, por lo que es evidente la necesidad de demostrar
Equivalencia Farmacutica entre los productos
genricos que contienen Metformina y los productos
aprobados como referencia27.
La comparacin entre los resultados obtenidos con los
indicadores diseados con productos de composicin
y presentacin similar, esto es Equivalentes
Farmacuticos,
permite
declarar
diferencias
estadsticamente significantivas o no en su
comportamiento biolgico desde la absorcin,
durante la distribucin y en la excrecin del
organismo [propiedades farmacocinticas]. En caso
de demostrar ausencia de diferencias significativas
entre productos comparados en ensayos con diseos
experimentales
adecuados
se
declarar
la
Bioequivalencia e Intercambiabilidad entre los
productos28.
En formulaciones combinadas con productos
constituidos por principios activos cada uno con
especificidades en sus propiedades fisicoqumicas y
farmacolgicas se potencializan condiciones y
variables para la comparacin y el anlisis de la
Biodisponibilidad y la Bioequivalencia, con base en
criterios farmacocinticos. Este es el caso de los
productos hipoglucemiantes combinados objeto del
presente estudio, donde la Metformina es una
especialidad para el diseo farmacutico, aunque su
potencia farmacolgica no contenga mayores riesgos,
pero la Glibenclamida se comporta como un frmaco
potente desde el punto de vista farmacodinmico29,
con expectativas de resultados hipoglucemiantes
graves en comparacin con Metformina.
En este caso tal vez las observaciones
farmacocinticas en pacientes no reflejarn
necesariamente los resultados farmacodinmicos, a
no ser que se logre discernir las causas y propiedades
que originan las diferencias especficas encontradas.
Por lo tanto, para ambos principios activos, las
condiciones fisiolgicas y/o patolgicas previas al
tratamiento contribuyen a las observaciones y
resultados del mismo, pero muchas veces son difciles
de prever por las caractersticas individuales
responsables de los efectos que se obtengan, como la
hipoglucemia por ejemplo, que dependen de la propia
homestasis, difcilmente generalizable por los

mltiples factores que en ella intervienen.

El postulado aqu enunciado fundamenta el propsito
del estudio de Bioequivalencia entre productos con
Metformina 500 mg + Glibenclamida 5 mg, ejecutado
segn
el
contrato
interinstitucional
entre
CIDEIM-Tecnoqumicas S.A. y la Universidad
ICESI.
En este estudio se verific el cumplimiento de las
especificaciones tcnicas de las muestras de los
productos en atributos de calidad de los productos
Metformina/Glibenclamida MK 500 mg/5 mg
tabletas y Glucovance 500 mg/5 mg tabletas. Las
muestras cumplieron las especificaciones definidas
para los ensayos fsicos, qumicos y pruebas de
disolucin realizadas; por lo tanto, al comprobar la
similitud de los resultados de valoracin de contenido
de principio activo, uniformidad de contenido y
porcentaje de disolucin, Tabla 2, es posible declarar
la Equivalencia Farmacutica entre ambos.
El monitoreo y seguimiento clnico de los voluntarios
participantes del estudio de Bioequivalencia
identific eventos adversos que se registraron en los
formatos de seguimiento de casos (CRF) para los dos
periodos. Los eventos presentados se resumen en:
tremor (6), mareo (8), diarrea (1), fro (2), parestesia
(1), cefalea (3), palpitaciones (4), diaforesis (2),
borborigmos (1). Todos los eventos se resolvieron sin
ninguna intervencin mdica.
De los resultados descritos, Tablas 4 y 5, y en los
anlisis referidos sobre Biodisponibilidad Comparada
para declarar Bioequivalencia, se deduce que no hubo
diferencias estadsticamente significativas entre A y
B (p<0,05). Por lo tanto, se verific la
Bioequivalencia dada la inclusin en el rango entre
80% y 125% de la razn entre los promedios
geomtricos T/R [%Ref], con 90% de nivel de
confianza.
Los
anlisis
estadsticos
referidos
sobre
Biodisponibilidad Comparada concluyen que no hay
diferencias estadsticamente significativas (p<0,05)
entre las muestras de los productos en ensayo. Por lo
tanto, se verific la Bioequivalencia dada la inclusin
en el rango entre 80% y 125% de la razn entre los
promedios geomtricos T/R [%Ref], con 90% de
nivel de confianza, as:
METFORMINA: ln AUC (102,23%Ref) [85,63% 122,04%) y ln Cmx (101,64%Ref) [87,54% - 118,0%].
La expresin aritmtica para los valores promedios
as calculados resultan en los siguientes datos para el
intervalo de confianza de 90%: AUCMETFORMINA
10.751,20 h*ng/mL (9.005,43 h*ng/mL 12.834,55
h*ng/mL).Cmx-METFORMINA 1.642,31 ng/mL (1.414,48
ng/mL 1.906,66 ng/mL).
GLIBENCLAMIDA: ln AUC (111,0%Ref) [92,95%

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

12

- 132,55%) y ln Cmx (92,98%Ref) [81,61% 105,93%]. La expresin aritmtica para los valores
promedios as calculados resultan en los siguientes
datos para el intervalo de confianza de 90%:
AUCGLIBENCLAMIDA 5.364,94 hr*ng/mL (4.492,53
hr*ng/mL 6.406,51 hr*ng/mL).Cmx-GLIBENCLAMIDA
571,32 ng/mL (501,46 ng/mL 650,89 ng/mL).
La prueba estadstica para la diferencia entre los
promedios logartmicos del producto Test y de
Referencia (log T - log R) demostr Bioequivalencia
en el rango comprendidos entre 0,80 y 1,25 para:
Metformina: [ln (AUC-A) - ln (AUC-B)]: (0,83
1,17) y [ln (Cmx-A) - ln (Cmx-B)]: (0,85 1,14).
Glibenclamida: [ln (AUC-A) - Ln (AUC-B)]: (0,76
1,07) y [ln (Cmx-A) - ln (Cmx-B)]: (0,95 1,23).

CONCLUSION
Se concluye la no diferencia estadsticamente
significativa entre el producto Metformina /
Glibenclamida MK tabletas de 500 mg/5 mg de
Tecnoqumicas S.A. y Glucovance tabletas de 500
mg/5 mg de Merck S.A, con base en las
caractersticas fisicoqumicas in vitro y los ensayos
de absorcin in vivo en voluntarios sanos. Por lo
tanto, este estudio demostr el cumplimiento de los
criterios
para
Equivalencia
Farmacutica,
Bioequivalencia e Intercambiabilidad entre los
productos comparados.

Los resultados de los anlisis in vitro realizados

demuestran la Equivalencia Farmacutica para los
productos Metformina/Glibenclamida MK 500/5 mg
tabletas del Laboratorio Tecnoqumicas S.A., y
Glucovance 500 mg/5 mg tabletas Merck S.A. De
igual manera, el estudio in vivo para evaluar la
Biodisponibilidad y la Bioequivalencia Promedio
(Average Bioequivalence) entre ellos, no encontr
diferencias estadsticamente significantivas. Por lo
anterior, existen condiciones para fundar la
intercambiabilidad entre los productos estudiados. Lo
anterior coincide con diversos criterios armonizados
por autoridades sanitarias, cientficos y tcnicos,
expuestos en las pginas y textos de dominio pblico
como Food and Drug Administration de los Estados
Unidos y Canad, y estn de acuerdo con lo expuesto
por la Conferencia Internacional de Armonizacin
(ICHR), la European Medicines Agency (EMA), de la
Union Europea y la Organizacin Mundial de la Salud
(OMS).
El cumplimiento de los anteriores requisitos, el
rechazo de las hiptesis nulas que planteaban
diferencia significativas entre los productos y la
aceptacin de las hiptesis alternativas para la razn
entre los promedios geomtricos T/R con respecto al
producto de referencia [%Ref], para las variables
crticas AUC y Cmx en el rango entre 80% y 125%,
admiten la consideracin de sustitucin e
intercambiabilidad
entre
ellos,
durante
la
dispensacin en el uso teraputico.
El ordenamiento de voluntarios y productos,
realizado por la Unidad de Epidemiologa y
Bioestadstica de CIDEIM, asign aleatoriamente
cdigos a los productos en estudio y en ello se
identifica como A al Producto Glucovance y como
producto B o Producto en Ensayo de Bioequivalencia
a Metformina/Glibenclamida MK.

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

13

REFERENCIAS
1. WHO Collaborating Centre for Drug Statistics Methodology, Norwegian Institute of Public Health. Oslo, 2009
February 26. Dsiponible en: http://www.whocc.no/atcddd/
2. Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos, Ministerio de Proteccin Social, Colombia.
Manual de Normas Farmacolgicas. Bogot, 2006. Disponible en:
http://www.invima.gov.co/Invima//consultas/docs_normas_farmacologicas/normasfarmacologicas%202006.pdf
3. Brunton, Laurence L., Lazo, John S., Parker, Keith L. Goodman & Gilman, Las Bases Farmacolgicas de la
Teraputica. Undcima Edicin. McGraw.Hill. Espaa, 2006. ISBN 0-07-142280-3. Pg. 1634 y ss
4. GLUCOPHAGE (metformin hydrochloride tablets). Revised 2000 October. Disponible en:
http://129.128.185.122/drugbank2/drugs/DB00331/fda_labels/989
5. U.S. National Librery of Medicine. metformin hydrochloride Disponible en:
http://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/drugInfo.cfm?id=3899
6. U.S. National Librery of Medicine ChemIDplus Lite Metformin [USAN:INN:BAN].
http://chem.sis.nlm.nih.gov/chemidplus/ProxyServlet?objectHandle=DBMaint&actionHandle=default&nextPag
7. Glyburide and Metformin (Glyburide / Metformin Hydrochloride) Description. Disponible en:
http://www.druglib.com/druginfo/glyburide-and-metformin/description/
8. U.S. National Librery of Medicine. 2006 June Glyburide Disponible en:
http://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/drugInfo.cfm?id=7826
9. Drug Bank. Showing drug card for Glibenclamide. Disponible en: http://www.drugbank.ca/drugs/DB01016
10. U.S. National Librery of Medicine. ChemIDplus Lite Glyburide [USAN]. Disponible en:
http://chem.sis.nlm.nih.gov/chemidplus/ProxyServlet?objectHandle=Search&actionHandle=getAll3DMViewFile
s&nextPage=jsp%2Fcommon%2FChemFull.jsp%3FcalledFrom%3Dlite&chemid=010238218&formatType=_3D
11. Health Canada. Conduct and Analysis of Bioavailability and Bioequivalence Studies: Part A: Oral dosage
formulations used for systemic effects (1992); Part B: Oral modified release formulations (1996); Report C:
Report on bioavailability of oral dosage formulations, not in modified release form, or drugs used for systemic
effects, having complicated or variable pharmacokinetics. 1992; 1992-1996.
12. U.S. Code of Federal Regulations. Title 21, Volume 5 Revised. Combination drug products. Access [CITE:
21CFR320.25]. 2008 April 1; 191-193, g). Disponible en:
http://edocket.access.gpo.gov/cfr_2008/aprqtr/21cfr320.25.htm
13. Latorre, M.C. Poltica Farmacutica Nacional. Medicamentos Genricos/Calidad. Organizacin Panamericana
de la Salud. Medicamentos Genricos. 2005 agosto. Disponible en: http://www.paho.org
14. U.S. Food and Drug Administration. Center for Drug Evaluation and Research. Guidance for the industry.
Bioanalytical Method Validation. 2001 May.
http://www.fda.gov/downloads/Drgs/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/UCM070107.pdf
15. Skoog DA. Principios de Anlisis Instrumental. 6 ed. Cengage Learning Editores, 2008: 376. [Fecha de acceso
07 de octubre de 2009].
http://books.google.com.co/books?id=7FOyZbb7q8UC&pg=PA376&dq=adicion+estandar
16. World Medical Association Declaration of Helsinki. Ethical Principles for Medical Research Involving Human
Subjects. Adopted by the 18th WMA General Assembly, Helsinki, Finland, June 1964, and amended by the: 29th
WMA General Assembly, Tokyo, Japan, October 1975. 35th WMA General Assembly, Venice, Italy, October 1983.
41st WMA General Assembly, Hong Kong, September 1989... 59th WMA General Assembly, Seoul, October
2008. [Disponible en FEMEBA: http://www.femeba.org.ar/index.php?op=4
Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

14

17. Shein-Chung Chow. Design and Analysis of Bioavailability and Bioequivalence Studies.
CRC Press 1999
18. World Health Organization. WHO Technical Report Series 937. Expert Committee on Specifications for
Pharmaceutical Preparations. Annex 9 Additional guidance for organizations performing in vivo bioequivalence
studies. 2006 http://apps.who.int/prequal/info_general/documents/TRS937/WHO_TRS_937__annex9_eng.pdf
19. Health Canada pursuant to Part C, Division 1 or 8 of the Food and Drg Regulations. Draft Comprehensive
Summary - Bioequivalence (CS-BE) (Module 1.4.2). (version: 2004-05-06). Documento Electrnico.
http://www.hc-sc.gc.ca/dhp-mps/alt_formats/hpfb-dgpsa/pdf/prodpharma/csbe_sgbe-eng.pdf
20. Mistri H.N., Jangid A.G. and Shrivastav P. S. Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry Method for
Simultaneous Determination of Antidiabetic Drugs Metformin and Glyburide in Human Plasma. Journal of
Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2007 (45)97106. Documento disponible en: www.sciencedirect.com
21. Ranetti M. C., Ionescu M, Hinescu L, et al. Validation of a HPLC Method for The Simultaneous Analysis of
Metformin and Gliclazide in Human Plasma. Farmacia 2009 (57) 6. Documento disponible en:
http://www.revistafarmacia.ro/20096/issue62009art07.pdf
22. Kumasaka K, Kojima T, Honda H and Doi K. Screening and Quantitative Analysis for Sulfonylurea-Type Oral
Antidiabetic Agents in Adulterated Health Food Using Thin-Layer Chromatography and High-Performance Liquid
Chromatography Journal of Health Science. 2005 (51) 4:453-460 Documento disponible en:
http://www.jstage.jst.go.jp/article/jhs/51/4/453/_pdf
23. B. L. Kolte. B. B. Raut. A. A. Deo. M. A. Bagool. D. B. Shinde, "Metformin and Glibenclamide: Simultaneous
determination by HPLC". En: Jack Cazes. Encyclopedia of Chromatography, Second edition, Volumen Two.
2005June. Disponible en:
http://books.google.com.co/books?id=9L2WRWXBauwC&dq=isbn:0824727878&ei=kKX0S8P0BIXcyQSn3oG
XCg
24. U.S. Food and Drug Administration. Center for Drug Evaluation and Research. Guidance for the industry.
Bioanalytical Method Validation. 2001 May.
http://www.fda.gov/downloads/Drgs/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/UCM070107.pdf
25. Dluhy R.G., and McMahon G.T. Intensive Glycemic Control in the ACCORD and ADVANCE TrialsN Engl J
Med 358; 24. 2008 June 12. Documento electrnico disponible en: www.nejm.org on January 30, 2009
26. Block L.C., Schemling L.O., Couto A.G, Mouro S.C., Bresolin, T.M.B. Pharmaceutical equivalence of
metformin tablets with various binders. Rev. Cinc. Farm. Bsica Apl., 2008; 29 (1): 29-35. ISSN 1808-4532.
Documento electrnico disponible en: http://200.145.71.150/seer/index.php/Cien_Farm/article/viewFile/431/414
27. Block, L.C., Schmeling, L.O., Couto, A.G., Silva, M.A.S., Tagliari, M.P., Bresolin, T.M.B., and Mouro, S.C.
Effect of binders on 500mg metformin hydrochloride tablets produced by wet granulation. Rev Cinc Farm Bsica
Apl., 2009; 30(2):17-24. ISSN 1808-4532. Documento electrnico disponible en:
http://200.145.71.150/seer/index.php/Cien_Farm/article/viewFile/614/800
28. U.S. Food and Drg Administration. Center for Drug Evaluation and Research. Guidance for Industry:
Bioavailability and Bioequivalence Studies for Orally Administered Drg Products. General Considerations. 2003
March.
http://www.fda.gov/downloads/Drgs/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/UCM070124.pdf
29. National Institutes of Health, Health & Human Services. U.S. National Library of Medicine. Daily Med
Current Medication Information. DIABETA (glyburide) tablet [Sanofi-Aventis U.S. LLC]. Revised: 2009 March.
Documento electrnico disponible en: http://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/drugInfo.cfm?id=9445

Estudio de Bioequivalencia de Metformina/Glibenclamida MK

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Metabolismo

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