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DE SAN MARCOS
PROFESORA:
QUIM. MARIA ANGELICA
RODRIGUEZ BEST
ALUMNOS:
NOEL EVANAN CASAVILCA
GLORY ESTHEFANNY ROJAS
CONTENIDO
I.
INTRODUCCIN........................................................................................................... 2
II.
OBJETIVOS....................................................................................................................2
III.
MARCO TERICO.....................................................................................................3
IV.
MATERIALES Y REACTIVOS....................................................................................8
a.
V.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.........................................................................11
VI.
CLCULOS............................................................................................................... 12
VII.
RESULTADOS........................................................................................................... 13
VIII.
DISCUSIN DE RESULTADOS................................................................................18
IX.
CONCLUSIONES......................................................................................................19
XI.
BIBLIOGRAFIA........................................................................................................21
XII.
GLOSARIO............................................................................................................... 22
XIII.
ANEXOS.................................................................................................................... 23
I.
INTRODUCCIN
II.
OBJETIVOS
Identificar compuestos bioqumicos (antocianinas) y determinar el espectro de absorcin del
maz morado natural y producto elaborado (chicha morada en sobre).
Aplicar y familiarizarse con conceptos tericos (Ley de Lambert-Beer).
MARCO TERICO
RADIACIN ELECTROMAGNTICA
La grfica muestra que la luz se hace pasar por un monocromador (un prisma, una rejilla de
difraccin o un filtro) para aislar una sola longitud de onda. Esta ltima de potencia radiante
Po,incide sobre una muestra de espesor b. La potencia radiante del haz emergente es P; la
muestra puede absorber una fraccin de la luz, de manera que P P0 .
T=
P
P0
P0
)=logT
P
Cuando no se absorbe luz, P=P0
0 T 1 ).
A=log 10 (
P=
y entonces
P0
. Con esto se tiene A=1 . Cuando solo se
10
A=bc
(Ley de Beer)
Parmetros visibles
ANTOCIANINAS
Las antocianinas son antioxidantes abundantes en la naturaleza, presentes especialmente
en frutas y vegetales. Wao et al. (2006) presentaron una tabla en la que demuestran todos
los alimentos en los que estn presentes las antocianinas.
A medida que la antocianina contiene ms grupos OH en su anillo benzoilo (B), su
coloracin va a ser ms azulada (Delgado y Paredes, 2003). Segn Miguel (2011) se puede
diversificar que las coloraciones para cada antocianina pueden variar, dando la amplia gama
de colores en la naturaleza. La cianidina y la peonidina generan una coloracin naranja a
roja, la delfinidina, petunidina y malvidina generan una coloracin azul a roja y por ltimo la
pelargonidina da un color naranja. Estos compuestos Antocianina pueden estar presentes
en diversas frutas y vegetales, usualmente en una mezcla de varias antocianinas, sin
embargo suele siempre predominar una.
IV.
MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales
Cloruro de cobalto
HCl
Etanol
Agua destilada
Maiz morado
Chicha morada de sobre
Reactivos
Muestras
GENESYS 20
ESPECIFICACIONES
Fuente de Luz
Lmpara de wolframio
Tungsteno-Halgeno (1000 hr)
Pantalla
Memoria de mtodos
Memoria de datos
No
Peso
4,5 Kg
Diseo optico
Haz simple
325 - 1100 nm
2.0 nm
0.5 nm
8 nm
Monocromador
Rango fotomtrico
Exactitud Fotomtrica
Requerimientos Elctricos
100-240V, 50-60HZ
Maz Morado
La coloracin morada que presentan las plantas, son
el resultado del trabajo realizado por genes, lo que da
como resultado la formacin de pigmentos
antocinicos de diferente color, los mismos que al
combinarse forman el color morado (combinacin de
pigmentos rojos y azules) (Manrique 2000).Los
colorantes
naturales
presentan
demanda
considerable en la industria alimentaria, cosmtica y
farmacutica para reemplazar a los colorantes sintticos, debido a su naturaleza qumica,
inocuidad y funcionalidad. Entre estos colorantes naturales se encuentran las antocianinas
que se distribuyen ampliamente en el reino vegetal y estn presentes en races, tallos,
hojas, flores y frutos de las plantas superiores. El maz morado es una variedad pigmentada
del Zea mays L., cuyos granos y coronta presentan color morado. Investigaciones recientes
han revelado la presencia de compuestos tales como: un dmero de cianidina, derivados
mono y di-glicosidados de cianidina, pelargonidina, peonidina y otros fenlicos. Las
caractersticas estructurales de las antocianinas, su relativa estabilidad en medio acuoso
segn el pH, con la presencia de estructuras tales como el catin flavilium, una base
quinoidal, una pseudo base carbinol y una chalcona , determinan una mayor estabilidad
frente a cambios de pH, temperatura y exposicin a la luz, debido a procesos de
copigmentacin y asociacin intermolecular e intramolecular que se desarrollan en el
medio , convirtiendo a estos compuestos en fuentes potenciales de colorantes naturales.
(max) nm
Rojo allura
645
Azul brillante
465
Azul indigotina
450
Rojo carmoisina
675
10
V.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
11
VI.
CLCULOS
max (nm)
Pelargonidina
520
Pelargonidina 3-glucsido
505
Cianidina
535
Cianidina 3-glucsido
523
Delfinidina
544
Delfinidina 3-glucsido
534
Soluto
Maiz morado
6.5
3.5
Maiz morado
Alcohol
pH
4.5
A=log(T )
Los datos obtenidos en el espectrofotmetro fueron porcentajes de transmitancia
para cada longitud de onda escogidas, y con la relacin anterior calculamos la
absorbancia.
Ejemplo de clculos:
para el CoCl2
= 450 nm el %T = 73.8
73.8
A=log
=0.1319
100
A=0.1319
VII.
RESULTADOS
12
%T
(nm)
%T
450
73.8
0,132
550
72.1
0,142
460
66
0,18
560
80.6
0,094
470
61.4
0,212
570
87.3
0,059
480
57.9
0,237
580
90.7
0,042
490
54.9
0,26
590
94.7
0,024
500
52
0,284
600
93.2
0,031
505
50.7
0,295
610
95
0,022
508
50.0
0,309
620
95.2
0,021
510
49.7
0,304
630
95.5
0,02
512
49.6
0,305
640
95.6
0,02
514
49.9
0,302
650
95.9
0,018
516
50.1
0,3
660
96.8
0,014
518
50.4
0,298
670
97.9
0,009
520
50.9
0,293
680
97.5
0,011
530
55.3
0,257
690
98.1
0,008
540
63
0,201
700
98.5
0,007
13
(nm)
%T
(nm)
%T
450
23.1
0,636
550
35.3
0,452
460
24.6
0,609
560
38.4
0,416
470
25.7
0,59
570
42.4
0,373
480
26.4
0,578
580
47.1
0,327
490
26.8
0,572
590
52.7
0,278
500
27.3
0,564
600
58.7
0,231
505
27.9
0,554
610
65.7
0,182
510
28.4
0,547
620
72.6
0,139
515
24.1
0,618
630
78.1
0,107
520
29.7
0,527
640
83.1
0,08
525
30.4
0,517
650
86.1
0,065
530
31.2
0,506
660
88.5
0,053
535
32
0,495
670
90.3
0,044
540
32.9
0,483
680
92.2
0,035
545
34
0,469
14
%T
(nm)
%T
450
30.4
0,517
560
27.1
0,567
460
21.5
0,668
570
44.5
0,352
470
13.6
0,866
580
61.5
0,211
480
8.3
1,081
590
70.4
0,152
490
5.8
1,237
600
76.1
0,119
500
4.7
1,328
610
71.2
0,148
505
4.6
1,337
620
63.1
0,2
510
4.5
1,347
630
59.4
0,226
515
4.9
1,31
640
65.4
0,184
520
5.1
1,292
650
78.1
0,107
525
5.6
1,252
660
88.5
0,053
530
6.4
1,194
670
94.2
0,026
535
7.5
1,125
680
97.7
0,01
540
1,046
690
98.3
0,007
545
11.5
0,939
700
98.7
0,006
550
15.1
0,821
15
%T
(nm)
%T
450
44.6
0,351
560
34
0,469
460
45
0,347
570
36.9
0,433
470
44.5
0,352
580
40.8
0,389
480
43.3
0,364
590
45.6
0,341
490
41.4
0,383
600
52.4
0,281
500
39.1
0,408
610
62.2
0,206
505
37.8
0,423
620
72.1
0,142
510
36.6
0,437
630
80.6
0,094
515
35.5
0,45
640
85.7
0,067
520
34.3
0,465
650
89.5
0,048
525
33.6
0,474
660
91.7
0,038
530
32.8
0,484
670
93.5
0,029
535
32.5
0,488
680
95
0,022
540
31.9
0,496
690
96.5
0,015
545
31.8
0,498
700
96.9
0,014
550
32.1
0,493
16
%T
(nm)
%T
450
58.3
0,234
560
44.8
0,349
460
51
0,292
570
32.6
0,487
470
40.8
0,389
580
76.9
0,114
480
33
0,481
590
85.2
0,07
490
26.8
0,572
600
88.1
0,055
500
22.5
0,648
610
86.9
0,061
505
21.6
0,666
620
82.3
0,085
510
20.4
0,69
630
79.9
0,097
515
20.1
0,697
640
83.3
0,079
520
20.3
0,693
650
89.7
0,047
525
20.7
0,684
660
94.7
0,024
530
21.2
0,674
670
97.6
0,011
535
22.3
0,652
680
99
0,004
540
24.1
0,618
690
99.6
0,002
545
26.9
0,57
700
99.8
0,001
550
31
0,509
17
VIII.
DISCUSIN DE RESULTADOS
*Para cada una de las tablas se tienen 2 grficas, adjuntas al final del presente informe se
encuentran 10 curvas correspondientes a %T vs (nm) y %A vs (nm).
Para todas las muestras se realiz un barrido entre longitudes de onda de 450 nm a 700
nm, de acuerdo a Wrolstad (2004) indica que las antocianinas tienen una banda de
absorcin entre 490 nm y 550 nm de regin de espectro visible.
Grfica N1
En esta grfica determinamos para el CoCl 2 una longitud de onda mxima de 512
nm para un porcentaje de transmitancia y absorbancia de
49.6 y 0.305
respectivamente, con lo cual logramos constatar la operatividad del
espectrofotmetro , ya que segn el catlogo del fabricante la longitud de onda
mxima viene a ser 510 nm.
Grfica N2
En esta grfica obtuvimos una longitud de onda mxima de 515 nm con un
porcentaje de transmitancia y absorbancia de 24.1 nm y 0.618 respectivamente, lo
cual indicaria la presencia de la antocianina pelargonidina (=520 nm). Sin embargo
segn Vasco et al (2009) , las antocianinas del tipo cianidinas tienen un rango
mximo de absorcin de 516 a 520 nm, lo que permite mencionar que las
antocianinas mayoritarias en el extracto del maz morado son las cianidinas ,
posiblemente la cianidina 3-glucsido el cual pertenece a las denominadas
antocianinas, pigmentos que dan color a las flores, frutas, vegetales (Callejo 2002).
Grfica N3
En esta grfica se observa 2 picos para longitudes de onda de 510 y 630 nm con
porcentajes de transmitancia y absorbancia de %T = 4.5 , A = 0.1347 y %T= 59.4 ,
A= 0.226 respectivamente. Para la longitud de onda de 510 nm corresponde segn
nuestra fuente a la antocianina Pelargonidina 3-glucsido (=505 nm).
Las antocianinas tienden a cambiar de color a medida que cambia el pH, sin
embargo estas son ms estables en medio cido que bsico (Rein, 2005).
Grfica N4
En esta grfica hallamos una longitud de onda mxima de 545 nm para un
porcentaje de transmitancia y absorbancia de 31.8 y 0.498 respectivamente ; de
acuerdo a la literatura corresponde a la antocianina delfinidina(=544 nm). Segn
Giusti(2004) la longitud de onda para la delfinidina dio 546 nm ; podemos ver que no
hay mucha variacin entre las fuentes consultadas y el dato obtenido en esta
prctica.
Pero segn Stanciuc (2011), reporta en su tratado, que obtuvo de un anlisis por
espectrofotometra UV Visible del colorante extrado de las corontas de maz
morado (Zea mays L.) una absorcin mxima a una longitud de onda = 537 nm,el
cual corresponde a las cianidina-b-glucsido.
18
Grfica N5
En esta grfica se pueden observar tres picos, en primera instancia (nm), %T, A,
515, 20.1, 0.697 la presencia de la antocianina pelargonidina (=520 nm); 570, 32.6,
0.487 ; 630, 79.9, 0.097, estos dos ltimos puntos que se encuentran ubicados
fuera de los rangos de longitud de onda que tenemos nosotros para las antocianinas
presentes en el maz morado.
IX.
CONCLUSIONES
19
RECOMENDACIONES
En esta prctica slo se mide un parmetro diferencial (pH) que nos dio muchas
variaciones, se recomienda que para una prxima prctica se tomen en cuenta ms
parmetros tales como concentracin, temperatura, etc. Esto debido a que las antocianinas
son compuestos bioqumicos muy sensibles a los cambios.
Se recomienda tambin la implementacin de columnas de destilacin que pueden ayudar a
una verdadera purificacin de las antocianinas y utilizar un equipo HPLC para comprobar
cul es la antocianina de mayor cantidad dentro de la matriz alimentaria.
Se intent medir la transmitancia en una muestra de cifrut sabor a chicha morada, no se
pudo por la opacidad de la muestra debido a la presencia de slidos en la muestra, esto por
la presencia de pulpa de manzana y membrillo muy comnmente utilizadas en este tipo de
productos. Se recomienda filtrar este tipo de muestras para tener una solucin con mayor
translucidez para que el haz de luz atraviesa y nos de una medida correcta.
20
BIBLIOGRAFIA
Aoki, H., Kuze, N., and Kato, Y. (2002). Anthocyanins isolated from purple corn (zea mays
L.). Foods & Food Ingredients Journal of Japan 199
Castaeda, A., Galan, C., Pacheco, M., (2006). Evaluacin del contenido de metales y su
efecto en la estabilidad de antocianinas extradas del maz criollo azul. Memorias in extenso
XX Congreso Nacional de Quimica Analitica. Mexico
Fennema, O. R. (2000). Qumica de los alimentos. Segunda Edicin. Editorial Acribia.
Zaragoza Espaa.
Hubberman, E, Heins, A, Stockmann, H y Schwarz, K. (2005). Influence of acids, salt,
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elderberry concentrates. Eur Food Res Technology.
Sierra exportadora. (2013). Perfil Comercial: Antocianina de Maz Morado. Extrado el 17 de
abril del 2014 desde:
http://www.sierraexportadora.gob.pe/perfil_comercial/ANTOCIANINA%20DE%20M
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Zambrano, J., Rojas Sarmiento, H., Borda Guerra, G., Hastamorir Caro, A., & Medina Riao,
M. (2011). Estabilidad de antocianinas en jugo y concentrado de agraz (vaccinium
meridionale
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Revista
Facultad
Nacional
De
Agronoma
Medelln.
http://www.revistas.unal.edu.co/ojs/index.php/refame/article/view/26411/37142
21
XII.
GLOSARIO
Absorbancia: es la cantidad de intensidad de luz que absorbe una muestra
Absorcin: de la radiacin electromagntica es el proceso por el cual dicha radiacin es
captada por la materia. Cuando la absorcin se produce dentro del rango de la luz visible,
recibe el nombre de absorcin ptica. Esta radiacin, al ser absorbida, puede, bien ser re
emitida o bien transformarse en otro tipo de energa, como calor o energa elctrica.
Efectividad o selectividad de una columna cromatogrfica: Se dice que una columna es
efectiva cuando las especies a separar se eluyen a velocidades relativas suficientemente
diferentes (los picos estn suficientemente separados).
Eficacia de una columna cromatogrfica: Se dice que una columna es tanto ms eficaz
cuanto menor sea el ensanchamiento de los picos. La eficacia ser mayor cuanto ms
pequeas es la altura de plato y mayor sea el nmero de platos.
Espectro: Es la imagen o registro grfico que presenta un sistema fsico al ser excitado y
posteriormente analizado
Ley de Beer: La ley de Beer-Lambert relaciona la intensidad de luz entrante en un medio
con la intensidad saliente despus de que en dicho medio se produzca absorcin.
Longitud de onda: La longitud de una onda es la distancia que recorre la onda en el
intervalo de tiempo transcurrido entre dos mximos consecutivos. Por ejemplo, la distancia
recorrida por la luz azul (que viaja a 299.792.458 m/s) durante el tiempo transcurrido entre
dos mximos consecutivos de su campo elctrico (o magntico) es la longitud de onda de
esa luz azul.
Transmitancia: La transmitancia o transmitencia es una magnitud que expresa la cantidad
de energa que atraviesa un cuerpo en la unidad de tiempo (potencia).
22
ANEXOS
Muestra de chicha en
sobre y alcohol.
23