UNIVERSIDAD TCNICA MACHALA

UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUMICAS Y DE LA SALUD

ESCUELA DE BIOQUMICA Y FARMACIA
PRCTICA DE LABORATORIO DE MICROBIOLGIA I

Tema:
Determinacin de coliformes totales y fecales presentes en jugos de
Bares, ubicados en la Unidad Acadmica de Ciencias Empresariales de la
Universidad Tcnica de Machala.
Integrantes:

Lady Rivera
Mishel Howard
Stephany Illescas
Katherine Zambrano
Pamela Aguilar
Karina Paltn
Katherine Macas
Jairo Guerrero
Jonathan Mian

Docente:
Dra. Carmen Silverio

Curso:
3ero Bioqumica y Farmacia A

Periodo lectivo:
2014-2015

OBJETIVOS

Verificar la presencia de crecimiento bacteriano en caldo de Lactosa y Agar

nutritivo de las muestras de jugos y dependiendo de los resultados en BVB
y EMB
Aprender las tcnicas de preparacin de diferentes medios de cultivo

FUNDAMENTO:
Con esta prctica se pretende aprender las tcnicas de preparacin de diferentes
medios de cultivo, su esterilizacin y su almacenaje, as como la importancia de
los diferentes medios de cultivo y su uso.
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos. Puesto que la diversidad metablica de los microorganismos es
enorme, la variedad de medios de cultivo es tambin muy grande. La mayora de
los medios de cultivo se comercializan en forma de liofilizados que es preciso re
hidratar. La preparacin de un medio de cultivo se reduce en general a pesar la
cantidad de medio y redisolverla en agua destilada (libre de inhibidores del
crecimiento) siguiendo las instrucciones del fabricante. Las sustancias termolbiles
se esterilizan por filtracin y se aaden al resto de los componentes previamente
esterilizados en la autoclave.
MATERIALES PARA LA OBTENCION DE LAS MUESTRAS
1. LUGAR DE LA OBTENCION DE LA MUESTRA
Las muestras se obtendrn de los bares, ubicado en la Facultad de Ciencias
Empresariales de la Universidad Tcnica de Machala
2. MATERIALES NECESARIOS PARA TOMAR MUESTRA
Frascos esterilizados
Termmetro
Ph
Guantes
Mascarilla
Bata de laboratorio
3. MATERIALES PARA TRANSPORTE DE MUESTRA
Caja de plumafn
Hielo
4. MATERIALES PARA CONSERVAR LA MUESTRA

Nevera

MATERIALES DE LABORATORIO
-

3 matraz Erlenmeyer.
3 vasos de precipitacin de 250ml.
3 agitadores.
3 pipetas de 10ml.
asas de platino de punta redonda.
gradilla.
5 tubos de ensayo del mismo tamao.
Pipetas de 1 ml

EQUIPOS:
-

Autoclave.
Balanza.
Incubadora.

SUSTANCIAS:
-

Caldo Lactosado
Agra Nutritivo
Bilis Verde Brillante

Muestra:
-

Jugo de mora
Jugo de maracuy
Jugo de limn

PARTE 1
CARACTERIZARIZACIN DE LAS MUESTRAS
1. MUESTRA # 1
- Nombre de muestra:
Jugo de Mora (bar de empresariales)
-

Caractersticas:
Color: Morado
Olor: Mora
Turbiedad: +
PH: 4
Temperatura: 19 C

CARACTERIZAR LA MUESTRA 2:
2. MUESTRA # 2
Jugo de Maracuy (bar de empresariales)
-

Caractersticas:
Color: Naranja
Olor: Maracuy
Turbiedad: Negativo
PH: 4
Temperatura: 23 C

3. MUESTRA # 3:
-

Nombre de muestra:

Jugo de Limn del (bar de empresariales)

-

Caractersticas:
Color: Translucido
Olor: Limn
Turbiedad: Negativo
PH: 3
Temperatura: 26 C

PARTE 2

PREPARACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

CALDO LACTOSADO
FUNDAMENTO:
El caldo Lactosado es un medio rico en nutrientes y no contiene inhibidores del
crecimiento bacteriano, su mayor importancia es para realizar cultivos de
salmonella y coliformes.
COMPOSICIN:

Extracto de carne
Peptona
Lactosa
pH: 6.9 +- 0.2

3.0
5.0
5.0

PREPARACION:
Constatamos que en la etiqueta del envase, la cual
contiene los
componentes necesarios para preparar caldo Lactosado sea la correcta as
como su pH, el cual es muy fundamental.
Para poder preparar 200 ml de caldo Lactosado, calculamos los gramos
necesarios.
Hacemos el siguiente clculo
13 gr de polvo
X gr

1000ml de caldo
200 ml de caldo

X=2.6 gr de polvo
Pesamos en la balanza analtica 2.6 gr, y lo trasvasamos a un vaso de
precipitacin de capacidad 250 ml, y diluimos con agua destilada de pH 7
Trasvasamos a un matraz Erlenmeyer de capacidad 200 ml y enrasamos
hasta 200 ml con agua destilada.
Agitamos la solucin, aplicamos calor en la cocineta hasta observar que se
vuelva translucido y que la solucin burbujea, a partir de all se deja hervir
por 5 minutos.
Retiramos y dejamos enfriar
Llevamos a la autoclave a una temperatura de 1210c por 15 minutos.
Retiramos de la autoclave y dejamos enfriar para luego almacenar en una
temperatura de 10 a 35oC.

 AGAR NUTRITIVO
FUNDAMENTO:
Es un medio de cultivo no selectivo, en el cual la pluripeptona y el extracto de
carne constituyen la fuente de carbn, nitrgeno y aportan nutrientes para el
desarrollo bacteriano.
COMPOSICIN:

Pluripeptona
Extracto de carne
Cloruro de sodio
Agar
pH: 6.8 +- 0.2

5.0
3.0
8.0
15.0

PREPARACION:

Constatamos que en la etiqueta del envase, estn los componentes

necesarios para preparar Agar nutritivo.
Para preparar 200 ml de Agar nutritivo, calculamos los grs necesarios
Valindonos de la informacin en la etiqueta, expuestos en la etiqueta.

Hacemos el siguiente clculo

26 gr Agar

1000ml

X gr

200 ml

X=4.6 gr de polvo de agar.

Pesamos en la balanza analtica 4.6 gr, y lo trasvasamos a un vaso de
precipitacin de capacidad 250 ml, y diluimos con agua destilada de pH 7
trasvasamos a un matraz erlenmeyer de capacidad 200 ml y enrasamos
hasta 200 ml con agua destilada.
Agitamos la solucin, aplicamos calor en la cocineta hasta observar que se
vuelva translucido, no dejar que la solucin burbujee.
Retiramos y dejamos enfriar
Llevamos a la autoclave a una temperatura de 1210c por 15 mins.

 Retiramos de la autoclave y dejamos enfriar para luego almacenar en una

temperatura de 10 a 35oC.

BILIS VERDE BRILLANTE

COMPOSICION:
Tejido animal pptico digerido 10 gr/lt
Lactosa 10 g/lt
Oxgal 20 gr/lt BILIS DE BUEY
Verde brillante 0.0133 gr/lt
Tcnica
Suspender 40 gr en 1 lt de agua destilado. Calentar si es necesario hasta disolver
el medio completamente distribuir en tubos de fermentacin que contienen tubos
Durham metido y esterilizar por autoclave 15lb de presin ( 121C ) por 15
minutos.
No se recomienda autoclavar si no se va a utilizar como medio para continuar el
proceso.
Calentar hasta punto de ebullicin y disolver el medio completamente.
Ajustar el Ph final de 25C ; 7,2

0.2

Almacenamiento:
Sustancia hidroscopia .mantener cerrado fuera del alcance de la luz.
Usos:
Recomendados para la deteccin y confirmacin de bacterias coliformes en agua,
agua contaminada; comida, leche y productos de uso diario.

 EMB (EOSINA METIL BLUE)

COMPOSICIN:
Agar
Gelatina peptona
Lactosa
Fosfato di potasio
Eosin y
Azul de metileno

15.0 gr
10.0 gr
10.0
2.0 gr
0.4 gr
65.0 mg

USO: se usa para el aislamiento selectivo y diferenciacin de Bacilo Gram

negativos.
PREPARACIN:
Combinar 37.5 gr de medio con un litro de agua desionizada, hasta una mezcla
completa.
Para preparar 200 ml de EMB, calculamos los gramos necesarios
Hacemos el siguiente clculo
37.5 gr EMB
X gr

1000ml
200 ml

X=7.5 gr de polvo de agar.

Pesamos en la balanza analtica 7.5 gr, y lo trasvasamos a un vaso de
precipitacin de capacidad 250 ml, y diluimos con agua destilada de pH 7
Trasvasamos a un matraz Erlenmeyer de capacidad 200 ml y enrasamos hasta
200 ml con agua destilada.
Ebullir completamente hasta disolver, no dejar al fuego
AUTOCLAVE: a 121C x 15 min
Ajustar a pH final 7.1 +/- 0.2 a 25C
TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO: 2 a 30C
Sustancia muy higroscpica para uso de laboratorio.

PARTE 3
DISPENSACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO E INOCULACIN DE LAS
MUESTRAS EN TUBOS DE ENSAYO

CALDO LACTOSADO
ROTULACION DE TUBOS DE ENSAYO (10 cm)
Para la rotulacin de los tubos de ensayo primero debemos darnos cuenta si los
tubos miden 10 cm o ms cm ya que si son pequeos no podremos realizar la
practica porque se nos regara la siembra.
Despus debemos flamear el tubo para que as ase mas fcil de rotularlos con el
lpiz graso, y lo hacemos de esta forma:

Tubo 1: 1/10
Tubo 2: 1/100
Tubo 3:1/1000
Tubo 4:1/10000
Tubo 5: 1/100000

REALIZAR TAPONES DE ALGODN

Realizamos los tapones haciendo bolitas de algodn y cubrindolas con gasas.

NOTA:

DISPENSACIN DEL CALDO LACTOSADO EN LOS TUBOS DE ENSAYO

Prender los mecheros y colocarlo cerca de los tubos y del caldo Lactosado
con el fin de que no se contamine.
Pasar la boca del erlenmeyer en el cual est contenido el caldo de lactosa
por el mechero.
Con una pipeta graduada medir 9 ml de caldo Lactosado y colocar en cada
tubo (9ml).

COLOCACION DE TUBOS DURGAN EN CADA TUBO Y ELIMINACION DEL

GAS CONTENIDO EN ELLOS.
Una vez que los tubos de ensayo estn llenos con 9 cm de caldo procedemos a
introducir los tubos Durham con la boca hacia abajo en cada uno de ellos,
asegurando que el gas que queda adentro sea liberado mediante una leve
agitacin aplicando una lmina pequea de papel aluminio en la boca del tubo
tapndolo. Realizar las veces que sea necesaria hasta que el gas sea eliminado
en su totalidad.

TECNICA DE DILUCION MUESTRA

1. TUBO 1 /10

Primero debemos homogenizar la muestra contenida en el erlenmeyer

cerca del mechero.
Con una pipeta previamente esterilizada coger 1ml de muestra y
colocarla en el primer tubo 1/10.

Una vez introducido el 1ml de muestra, procedemos a homogenizar el

tubo con la misma pipeta con el fin de mezclar bien la muestra con el
caldo Lactosado.

2. Tubo 1/100
Procedemos a homogenizar el caldo Lactosado 1/10 una vez realizado
eso, pipeteamos 1ml y lo traspasamos al tubo de 1/100, cabe recalcar
que debemos tener mucho cuidado cuando pipeteamos ya que contiene
la muestra que vamos analizar y no debemos asentar la pipeta en la
muestra que se encuentra en el tubo de ensayo.
3. Tubo 1/1000
Procedemos a homogenizar el caldo Lactosado 1/100 una vez hecho eso
pipeteamos 1ml y lo traspasamos al tubo de 1/1000
4. Tubo 1/10000
Coger una pipeta y con ella homogenizar la muestra contenida en el
tubo 1/1000, despus coger 1ml de muestra y traspasarlo al tubo
1/10000.
5. Tubo 1/100000
Una vez colocado 1 ml en el tubo de 1/10.000 cogemos una nueva
pipeta previamente esterilizada, homogenizamos en el tubo de 1/10.000
y luego tomamos 1 ml para agregar en el tubo de 1/ 100.000 y
finalmente tapamos en tubo con papel aluminio para homogenizar el
tubo de 1/100.000.

INCUBACION DE BACTERIAS
Para la incubacin bacteriana debemos tener la incubadora a una temperatura de
37 C, una vez que est en la temperatura correcta colocar los tubos dentro de la
incubadora, este proceso durara 48 horas en el cual cada 24 horas debemos
hacer una revisin.

 BVB (BILIS VERDE BRILLANTE)

DISPENSACIN DEL CALDO BVB EN LOS TUBOS DE ENSAYO
Responsables: Mishel Howard , Karina Paltn y Stephany Illescas

Prender los mecheros y colocarlo cerca de los tubos y del caldo de bilis
verde brillante con el fin de que no se contamine.
Pasar la boca del erlenmeyer en el cual est contenido el caldo de
lactosa por el mechero.
Con una pipeta graduada medir 9 ml de caldo de VBV y colocar en cada
tubo de ensayo.
Lo tapamos con el tapn

COLOCACION DE TUBOS DURGAN EN CADA TUBO Y ELIMINACION DEL

GAS CONTENIDO EN ELLOS.

Una vez que los tubos de ensayo estn llenos con 9 cm de caldo
procedemos a introducir los tubos Durham con la boca hacia abajo en
cada uno de ellos, asegurando que el gas que queda adentro sea
liberado mediante una leve agitacin aplicando una lmina pequea de
papel aluminio en la boca del tubo tapndolo. Realizar las veces que sea
necesaria hasta que el gas sea eliminado en su totalidad.

TECNICA DE DILUCION MUESTRA

TUBO 1 /10

Tomamos el tubo de ensayo 1/10 con caldo lactosado e insertamos el

asa previamente esterilizada a la llama al rojo vivo y tomamos la
muestra e introducimos en el tubo 1/10 de caldo verde bilis brillante

TUBO 1/100

Tomamos el tubo de ensayo 1/100 con caldo lactosado e insertamos el

asa previamente esterilizada a la llama al rojo vivo y tomamos la
muestra e introducimos en el tubo 1/100de caldo verde bilis brillante

TUBO 1/1000

Tomamos el tubo de ensayo 1/1000 con caldo lactosado e insertamos el

asa previamente esterilizada a la llama al rojo vivo y tomamos la
muestra e introducimos en el tubo 1/1000 de caldo verde bilis brillante

TUBO 1/10.000

Tomamos el tubo de ensayo 1/10.000 con caldo lactosado e insertamos

el asa previamente esterilizada a la llama al rojo vivo y tomamos la
muestra e introducimos en el tubo 1/10.000 de caldo verde bilis brillante

TUBO 1/100000

Tomamos el tubo de ensayo 1/100.000 con caldo lactosado e insertamos

el asa previamente esterilizada a la llama al rojo vivo y tomamos la
muestra e introducimos en el tubo 1/100.000 de caldo verde bilis
brillante

INCUBACION DE BACTERIAS
Para la incubacin bacteriana debemos tener la incubadora a una
temperatura de 37 C, una vez que est en la temperatura correcta colocar
los tubos dentro de la incubadora, este proceso durara 48 horas en el cual
cada 24 horas debemos hacer una revisin.

NOTA

DISPENSACION Y ESTRIADO EN CAJAS PETRI

AGAR NUTRITIVO
ROTULACION DE CAJAS PETRI
Realizado por: Stephany Illescas
1 CAJAS 1/10, 1/100, 1/1000,1/10.000, 1/100.000
Las cajas Petri esterilizadas se debe rotular con sus respectivos cdigos para
evitar confusiones esto se hace de la siguiente manera: se las debe coger de
debajo de la caja Petri y con un lpiz graso procedemos a realizar la respectiva
rotulacin, esto siempre se debe realizar con un mechero a lado para evitar
contaminacin:
Estriado
Fecha
Grupo
Curso

Nombre

DISPENSACION
Realizado por: Mishel Howard
Al medio de cultivo como en este caso es el Agar Nutritivo y se encuentra en
medio slido, procedemos a llevarlo a la cocineta por casi 30 minutos para que se
disuelva completamente.
Una vez listo el Agar se lo coloca en el mesn cerca de un mechero, para poder
flamear la boca del Erlenmeyer y verter el medio de cultivo a las cajas Petri, solo
hasta una tercera parte.
Por ltimo debemos esperar hasta que el agar se gelifique y guardarlo en una
refrigeradora.

NOTA:

SIEMBRA DE MUESTRA MEDIANTE ESTRIADO

Para proceder a realizar la siembra en el medio de cultivo, se debe tomar
cuidadosamente la caja petri previamente esterilizada y rotulada, y con un asa de
punta redonda flameada en la llama, esperar a que se enfrie e introducir en el tubo
de ensayo con la muestra y procedemos a sembrar en la respectiva caja.

1 ESTRIADO 1/10
Realizado por: Stephany Illescas
Para realizar la siembra en la caja petri procedemos a encender los mecheros, y
esterilizamos el asa de punta redonda hasta el rojo vivo para evitar contaminacin
en el medio, el tubo de ensayo con la muestra 1/10, la flameamos a la llama e
introducimos el asa, tomamos la muestra y seguidamente procedemos a realizar el
estriado en la caja petri semi abierta para evitar contaminacin, luego llevamos a
la incubadora.
2 ESTRIADO 1/100
Realizado por: Karina Paltin
Para el estriado en la caja petri debemos evitar cualquier contaminacin, para ello
debemos tener un mechero prendido y esterilizar el asa de platino de punta
redonda hasta que se forme un color rojo vivo, luego dejar enfriar el asa a un lado
del mechero.
Una vez lista el asa procedemos a coger el tubo 1/100, lo destapamos y
flameamos su boca con el fin de esterilizar.
Con el asa de platino homogenizamos el tubo y cogemos un poco de muestra para
proceder hacer el estriado en un solo plano en forma de Zigzag, debemos tomar
en cuenta que al abrir la caja debemos hacerlo cerca de un mechero y no abrir
mucho para que la siembra no se contamine con el ambiente.
Cuando terminamos el estriado cerrar la caja
3 ESTRIADO 1/1000
Realizado por: Mishel Howard
Procedemos a encender los mecheros, y esterilizamos el asa de punta redonda
hasta el rojo vivo para evitar contaminacin en el medio, el tubo de ensayo con la
muestra 1/1000, flameamos a la llama e introducimos el asa, tomamos la muestra
y seguidamente procedemos a realizar el estriado en la caja petri semi abierta
para evitar contaminacin, luego llevamos a la incubadora.
4 ESTRIADO 1/10000
Realizado por: Stephany Illescas

Primeramente se esteriliza el aza de platino, esto se lo hace en la llama del

mechero logrando que la punta del aza quede al rojo vivo y luego esperar a que se
enfre, despus procedemos a introducir el aza en el tubo de la muestra de
1/10000 y homogenizamos, luego abrimos la caja petri para poder realizar el
respectivo estriado en forma de zigzag.
5 ESTRIADO 1/100000
Realizado por: Karina Paltin
Esterilizamos el asa de inoculacin hasta rojo vivo con una lmpara de alcohol.
Esperamos a que se enfre el aza, luego introducimos el asa en el tubo 1/100000,
homogenizamos y cogemos la muestra.
Para hacer el estriado cogemos la caja petri y levantamos la tapa cuidadosamente
y sembramos la muestra en forma de plano 1 con ayuda del asa de punta
redonda, bajamos la tapa de caja Petri y dejamos esterilizamos el asa de
inoculacin asta rojo vivo para volver a utilizarla.

INCUBACIN DE BACTERIAS
Una vez terminada toda la siembra en las cajas petri mediante el estriado, las
llevamos a la incubadora por un tiempo de 48 horas a una temperatura adecuada,
para el crecimiento de los microorganismos.

 EMB (EOSINA METIL BLUE)

SIEMBRA DE MUESTRA MEDIANTE ESTRIADO
Para proceder a realizar la siembra en el medio de cultivo, se debe tomar
cuidadosamente la caja petri previamente esterilizada y rotulada, y con un asa
de punta redonda flameada en la llama, esperar a que se enfrie e introducir el
asa, en el tubo de ensayo con la muestra y procedemos a sembrar en la
respectiva caja.

1. ESTRIADO 1/10
Para realizar la siembra en la caja Petri procedemos a encender los mecheros, y
esterilizamos el asa de punta redonda hasta el rojo vivo para evitar
contaminacin en el medio, el tubo de ensayo con la muestra 1/10, la
flameamos a la llama e introducimos el asa, tomamos la muestra y
seguidamente procedemos a realizar el estriado en la caja Petri semi-abierta
para evitar contaminacin, luego llevamos a la incubadora.
2. ESTRIADO 1/100
Una vez lista el asa procedemos a coger el tubo 1/100, lo destapamos y
flameamos su boca con el fin de esterilizar.
Con el asa de platino homogenizamos el tubo y cogemos un poco de muestra
para proceder hacer el estriado
3. ESTRIADO 1/1000
Cogemos el tubo de ensayo con la muestra 1/1000, flameamos a la llama e
introducimos el asa, tomamos la muestra y seguidamente procedemos a
realizar el estriado en la caja petri semi abierta para evitar contaminacin,
luego llevamos a la incubadora.
4. ESTRIADO 1/10000

Primeramente se esteriliza el aza de platino, esto se lo hace en la llama del

mechero logrando que la punta del aza quede al rojo vivo y luego esperar a
que se enfre, despus procedemos a introducir el aza en el tubo de la muestra
de 1/10.000 y homogenizamos, luego abrimos la caja petri para poder realizar
el respectivo estriado en forma de zigzag.
5. ESTRIADO 1/100000
Cogemos el tubo 1/100.000, homogenizamos y cogemos la muestra. Para
hacer el estriado cogemos la caja petri y levantamos la tapa cuidadosamente y
sembramos la muestra en forma de plano 1 con ayuda del asa de punta
redonda, bajamos la tapa de caja Petri y dejamos esterilizamos el asa de
inoculacin asta rojo vivo para volver a utilizarla.

INCUBACIN DE BACTERIAS
Una vez terminada toda la siembra en las cajas petri mediante el estriado, las
llevamos a la incubadora por un tiempo de 48 horas a una temperatura
adecuada de 37 C, para el crecimiento de los microorganismos (coliformes
totales).

PARTE 4
RESULTADOS DE LA SIEMBRA BACTERIANA
CALDO LACTOSADO
Muestra #1: Jugo de mora

CARACTERSTICAS DE INCUBACIN EN CALDO

LACTOSADO
Tubo

24 horas
Turbidez

Gas

48 horas
Turbidez

Gas

1/10

++

++

1/100

++

++

1/1000

1/10.000

1/100.00
0

Muestra #2: Jugo de maracuy

Tubo 1/10

Presencia de turbiedad
Presencia de gas

Tubo 1/100

Presencia de turbiedad
Presencia de gas

+
-

Tubo 1/1000

Presencia de turbiedad
Presencia de gas

+
-

+
-

Tubo 1/10.000

Presencia de turbiedad
Presencia de gas

+
-

Tubo 1/100.000

Presencia de turbiedad
Presencia de gas

+
-

Muestra #3: Jugo de limn

Tubo 1/10
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

+
-

Tubo 1/100
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

+
-

Tubo 1/1000
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

Tubo 1/10.000
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

+
-

+
-

Tubo 1/100.000
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

+
-

 BVB (BILIS VERDE BRILLANTE)

Muestra # 1: Jugo de mora

CARACTERSTICAS DE INCUBACIN EN
CALDO BILIS VERDE BRILLANTE
Tubo

48 horas
Turbidez

Gas

1/10

++

+++

1/100

++

++

1/1000

1/10.000

1/100.000

Muestra # 2: Jugo de maracuy

Tubo 1/10
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

Tubo 1/100
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

+
-

Tubo 1/1000
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

++
-

Tubo 1/10.000
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

Tubo 1/100.000
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

Muestra #3: Jugo de limn

Tubo 1/10
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

Tubo 1/100
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

Tubo 1/1000
Presencia de turbiedad

Presencia de gas

Tubo 1/10.000
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

Tubo 1/100.000
Presencia de turbiedad
Presencia de gas

AGAR NUTRIENTE
Muestra # 1: Jugo de mora

Caja

RESULTADOS DE LA SIEMBRA EN AGAR NUTRIENTE

Numero de
Forma
Borde
Elevacin
UFC

1/10

1/100

1/1000

1/10.000

1/100.000

468

Ameboidea
Puntiforme
filamentosa

Lobulado
Ondulado
filamentoso

Umbonada

432

circulares
puntiforme
ameboide
filamentosa

Lobulado
Ondulado
Filamentoso

umbonada

Lobulado
Ondulado
Filamentoso

umbonada

351

puntiforme
ameboide
filamentosa

Entero
Lobulado
ondulado

umbonada

333

circulares
puntiforme
ameboide
puntiforme
ameboide

Entero
Lobulado
ondulado

umbonada

216

Muestra # 2: Jugo de maracuy

Caja 1/10

Cantidad

47 x 9 = 423 UCF

Forma

Puntiforme, ameboidea

Elevacin

Umbinada pulvinada

Borde

Entero, lobulado

Color

Blanca amarillenta

Caja 1/100

Cantidad

42 x 9 = 378 UCF

Forma

Puntiformes, circular

Elevacin

Umbinada pulvinada

Borde

Ondulado, entero

Color

Blanco amarillento

Caja 1/1000

Cantidad

44x 9 = 396 UFC

Forma

Puntiformes, filamentosa

Elevacin

elevada

Borde

Lobulado, umbonada

Color

amarillento

Caja 1/10.000

Cantidad

37 x 9= 333 UCF

Forma

Circular, fusiforme

Elevacin

Pulvinada, convexa

Borde

Entero

Color

Blanco amarillento

Caja 1/100.000

Cantidad

35 x 9 = 315 UFC

Forma

Circular, puntiforme

Elevacin

Convexa, pulvinada

Borde

Entero

Color

Amarillento

Muestra #3: Jugo de limn

Caja 1/10
Cantidad

44 x 9 = 396 UCF

Forma

Puntiforme, filamentosa

Elevacin

convexa

Borde

Entero, ondulado, crenado

Color

Blanca amarillenta

Caja 1/100
Cantidad

39 x 9 = 351 UCF

Forma

Puntiformes, ameboides

Elevacin

umbunada

Borde

Ondulado, entero

Color

Blanco amarillento

Cantidad

33 x 9 = 297 UFC

Forma

Puntiformes, circular

Caja 1/1000

Elevacin

elevada

Borde

Lobulado, entero

Color

amarillento

Caja 1/10.000
Cantidad

28 x 9= 252 UCF

Forma

Circular, puntiforme

Elevacin

plana

Borde

Entero

Color

amarillenta

Caja 1/100.000

Cantidad

16 x 9 = 144 UFC

Forma

Circular, puntiforme

Elevacin

elevada

Borde

Entero

Color

Amarillento

EMB ( EOSINA METIL BLUE)

Muestra # 1: Jugo de mora

RESULTADOS DE LA SIEMBRA EN EMB (EOSINA METIL BLUE)

Caja
Numero de
Forma
Borde
Elevacin
UFC
1/10
1/100
1/1000
1/10.000
1/100.000

324

circular
filamentosa

Lobulado
Ondulado

Umbonada

279

circular
filamentosa

Lobulado
Ondulado

umbonada

Lobulado
Ondulado

umbonada

234

circular
filamentosa
circular
filamentosa
circular
filamentosa

Lobulado
ondulado
Lobulado
ondulado

umbonada

216
180

umbonada

NOTA:

OBSERVACIONES:

Al momento de tomar la muestra con la asa se debe asegurar de que el circulo de

esta, este cerrado caso contrario no tomara muestra.
Cuando se est sembrando no se debe hablar ya que se puede contaminar el
medio.
En todo el proceso de dispensacin y siembra se deben tener los mecheros de
alcohol encendidos.

CONCLUSIONES:

Debido a los resultados obtenidos tanto en los tubos (Caldo lactosado muestra)
y en las cajas Petri (Agar-muestra) no hay presencia de bacterias. Pero si
preparamos el BVB para una confirmacin exacta, pero los resultados fueron
negativos lo cual no fue necesario cultivar en EMB ya que este medio selectivo
que confirmara si hay coliformes fecales o totales.
Entonces podemos decir que nuestra muestra (JUGO DE LIMN) no est
contaminada de dichas bacterias pero asumimos que si tiene otro tipo.

Esta prctica nos sirvi de mucha ayuda ya que hemos obtenido buenos
resultados y demostramos los conocimientos adquiridos en la hora clase.

Obtenidos a los resultados tanto en los tubos (Caldo lactosado muestra) y en las
cajas Petri (Agar-muestra) no hay presencia de bacterias. Procedimos ver los
resultados con el BVB para una confirmacin exacta, pero los resultados fueron
negativos en la cual no fue necesario cultivar en EMB ya que este medio selectivo
que confirmara si hay coliformes fecales o totales.
Podemos decir la muestra #2 (JUGO DE NARANJA) no est contaminada de
dichas bacterias pero se asumi que tiene otra clase de bacterias.