Membranas Biologicas

05/02/2010
Membranas
b biológicas
b l
1
05/02/2010
Estructura y composición de membranas biológicas
Organelos membranales de
Paramecium (50 – 80 A°).
Tinción con tetraoxido de osmio
(a) Célula corporal
(b) Cilio
(c) Mitocondria
(d) Vacuola digestiva
(e) Retículo endoplasmatico
(f) Vesícula secretora
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3
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Membranas biológicas
E t t y composición
Estructura i ió de
d membranas
b biológicas
bi ló i
Lípidos
Bicapas de lípidos
Estructura de los lípidos polares
Proteínas y carbohidratos membranales

Organización de las proteínas en la bicapa lipídica
Categorías de proteínas de membrana
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Definición;;
Definición
Las membranas biológicas son conjuntos organizados de

lípidos y proteínas con pequeñas cantidades de glúcidos
glúcidos..
No obstante, no constituyen barreras impermeables al paso
de materiales
materiales.. Por el contrario, regulan la composición del
medio
di intracelular
i t l l controlando
t l d ell flujo fl j de
d nutrientes,
ti t
productos de desecho, iones, etc
etc.., hacia dentro y hacia fuera
de la célula
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Son componentes esenciales de todas las células
Funciones principales:
i Forman limites físicos entre compartimentos celulares
ii Controlan el flujo de moléculas
iii Proveen un ambiente óptimo para el funcionamiento de moléculas
iv Energía de almacenamiento en tejidos adiposos.
v Hormonas –comunicación entre células-
células-
vi Vitaminas –regulación de procesos biológicos-
biológicos-
Membrana plasmática
i Interfase reactiva entre el medio externo y el citoplasma
ii Permeable para moléculas no ionizadas (agua, urea, oxígeno, etc).
iii Se requieren transportadores para glucosa y aminoácido
Membranas internas
i Mitocondria
ii Lisosomas
iii Peroxisomas
iv Membrana nuclear
v Retículo endoplásmico rugoso y liso
vi Aparto de golgi
vii Vesículas
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Propuesto por Singer y

Garth en 1972
1972..
La teoría postulaba que las proteínas se parecen a los icebergs flotando en un mar lipidíco
bidimensional y que estas proteínas difunden lateralmente en la matriz lipidíca.
lipidíca.
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Modelo de Mosaico fluido

Michael Edidi
Edidi;; desmostró la difusión
lateral de proteínas de membrana.
membrana.
Virus Sendai
Heterocarión
Inicio de la fusión
Demuestra la difusión de las proteínas existe a

lo largo de la membrana fluida, proceso que se
hace más lento al bajar la temperatura.
temperatura.
Entre el 30 y 90 % de estas proteínas son

Después de 40 min. 37 °C móviles sin restricción
restricción..
E t t y composición
Estructura i ió de
d membranas
b biológicas
bi ló i
Lípidos
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Los lípidos participan en:
Formación de bicapas líquidas cristalinas en las cuales están embebidas las proteínas y
por lo tanto pueden funcionar adecuadamente.
adecuadamente.
Participan activamente en el metabolismo y representan compuestos intermedios.

intermedios.
Cada vez existen evidencias de que los lípidos están involucrados en varias funciones
especializadas (Glucolipidos
Glucolipidos:: funciones de reconocimiento, diferenciación y
crecimiento celular
celular;; Isoprenoides
Isoprenoides:: funcionan como vitaminas, quinonas que estan
involucradas
l d en ell transporte de
d electrones
l y transducción
d ó de
d energía
energía.
í .
Lípidos
Lípidos
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Lípidos
Lípidos
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Lípidos
Lípidos
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Bicapa de lípidos anfipáticos
Membrana Glucolípidos Fosfolípidos Colesterol

Eritrocito humano 11 61 22
Mielina 28 41 22
Mitocondria de hígado <5 80 4
Retículo endoplásmico <5 75 8
Protoplasto bacteriano trazas 80 – 90 0
Lípidos
Lípidos
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Propiedades de los agregados lípidicos
•Glicerofosfolípidos
•Esfingolípidos
•Esteroles
Lípidos
En agua jabones y detergentes forman micelas

micelas..
Micelas: agregados globulares cuyos grupos

Micelas:
hidrocarbonados están fuera de contacto con el
agua..
agua
La formación de micelas es un proceso

cooperativo..
cooperativo
El numero de moléculas en una micela es

variada y depende de la sustancia, pero
alrededor esta en centenares
centenares..
Lípidos
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Los glicerofosfolipidos y los esfingolipidos

tienden a formar bicapas:
bicapas: Las dos colas
les confiere a las sustancias anfifílicas
formas rectangulares.
rectangulares.
La existencia de las bicapas fue propuesta

por E. Gorter el 1925
1925..
Lípidos
Liposomas son vesículas cerradas, autosellantes y

llenas de disolventes
disolventes;; limitadas por una bicapa
sencilla.. Tienen diámetros de varios centenares de
sencilla
Ao .
Una vez preparados los liposomas son estables y se

pueden separar de la solución que los contiene por
diálisis o por cromatografía de filtración en gel
gel..
Las bicapas lipidicas son impermeables a la mayoria

de sustancias polares
polares::
La permeabilidad de una bicapa se puede determinar

formando liposomas en una solución que contenga la
sustancia de interes en el interior
interior..
Lípidos
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Movilidad de los lípidos de la membrana
Dif ió
Difusión transversal
t l o flip fli -flop
flip- fl :
flop:
Acontecimiento extraordinariamente raro raro..
Este proceso se realiza en días
días..
A diferencias de las tasas de flip-

flip-flop los
lípidos son muy móviles en el plano de la
bicapa (difusión lateral
lateral)).
Lípidos
La fluidez de la bicapa varia con la temperatura
P debajo
Por d b j ded una temperatura
t t d
de
transición se da un cambio de fase,
denominada transición orden –
desorden que se transforma en un gel
gel..
La temperatura de transición aumenta

con la longitud de la cadena y el grado
de saturación de los restos de los ácidos
grasos que las componen.
componen.
El colesterol disminuye la fluidez de la

membrana por su rígido sistema anular
esteroide que interfiere en los
movimientos con las cadenas laterales
de los ácidos grasos
grasos..
Lípidos
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La fluidez de la bicapa varia con la temperatura
Lípidos
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PROTEINAS
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Clasificación operativa de las proteínas de membrana.
1.- Proteínas integrales

g o intrínsecas:
intrínsecas:
Estas están fuertemente unidas a las membranas mediante fuerzas hidrofóbicas

hidrofóbicas..
Se pueden separar mediante tratamiento con agentes que alteran la membrana:

membrana:
Disolventes orgánicos
orgánicos..
Detergentes y agentes caotrópicos.
caotrópicos.
2.- proteínas periféricas o extrínsecas:

extrínsecas:
Se disocian de las membranas mediante procedimientos suaves que dejan intacta a la

membrana..
membrana
Exposiciones de soluciones salinas 1 M de NaCl.

NaCl.
Agentes quelantes de metales o cambios de pH

pH..
Proteínas

Localización de las proteínas de membrana
Utilizando marcadores de superficie se ha demostrado

la presencia de proteínas de superficie y proteínas
transmembrana..
transmembrana
No se conoce alguna proteína que esté completamente

sumergida en la membrana;
membrana; es decir todas, están
expuestas de algún modo a la superficie acuosa
acuosa..
IEA = isoetionilacetimidato
EA = etilacetimidato Proteínas
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Organización de las proteínas en la bicapa lipidica
II
III IV
Existe cinco categorías de proteínas de membrana
Cl
Clase I:
Proteínas periféricas que carecen de

secuencias hidrofóbicas que las anclen a la
bicapa lipidica
lipidica..
Unidas por fuerzas electrostáticas y por

puentes de hidrogeno a los grupos polares de
los fosfolipidos o a otras proteínas
proteínas..
Pueden ser sacadas por tratamientos débiles

que interfieren con las interacciones
electrostáticas o con los puentes de hidrogeno
Proteínas
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Clase IIII::
Proteínas ancladas en parte de la bicapa
lipidica por medio de un péptido hidrofóbico.
hidrofóbico.
No existen evidencias de éste tipo de

proteínas en la parte externa de la
membrana plasmática
plasmática..
Proteínas
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Clase III:
III:
Glucoporina A: tiene tres dominios:

dominios:
Amino terminal de 72 residuos con 16 cadenas

glucoliticas..
glucoliticas
Secuencia de 19 residuos hidrofóbicos que

abarca la membrana celular eritrocitaria.
eritrocitaria.
Carboxilo terminal con 40 residuos que contiene

mayoritariamente residuos cargados
cargados..
Proteínas
Clase IV
IV::
Bacteriorodopsina::
Bacteriorodopsina
Siete pases transmembranales.

transmembranales.
Halobacter halobium
halobium,, hábita en NaCl 4.3 M.
La membrana esta compuesta por el 75 % de

proteína
t í y un 25 % de
d lípido
lí id y tiene
ti una estructura
t t
inusual comparada al de otras membranas
membranas..
Proteínas
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Solubilización de las proteínas en la bicapa lipidica
Proteínas integrales de clase III y IV se

separan por agentes que alteran las
membranas como:
como:
Disolventes orgánicos
orgánicos..
Detergentes
Agentes caotropicos
Clase V:
A i .
Anexinas.
Anexinas
Estructura propuesta de la anexina en asociación con

los grupos de cabeza polares de una membrana.
membrana.
Algunos receptores celulares de protozoarios y

mamíferos.
mamíferos.
Proteínas
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II
III IV
Existe cinco categorías de proteínas de membrana
La membrana del eritrocito
La sencillez y la facilidad de aislamiento de la membrana eritrocitaria han hecho que sea

la membrana biológica más estudiada y mejor conocida.
Constituye un modelo para las membranas mas complejas de otros tipos celulares.
Un eritrocito maduro de mamífero carece de orgánulos y realiza pocos procesos

metabólicos, es prácticamente una bolsa membranosa de hemoglobina.
Las membranas osmóticas se pueden obtener por lisis osmótica, donde sale el contenido
celular.
Lípidos
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La membrana del eritrocito

i Fosfolipidos
Distribución asimétrica
Lípidos
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Sus proteínas se separan por SDS.SDS.PAGE

después de solubilizar la membrana en una
solución al 1 %.
La proteína espectrina
espectrina,, da cuenta acerca del 75
% del esqueleto de la membrana eritrocitaria
eritrocitaria..
Esta formada por dos cadenas polipeptídicas

similares, cuya análisis secuencial indica que
cada una de ellas consiste de segmentos
repetitivos de 106 aminoácidos
aminoácidos..
La espectrina también se asocia con la

anquirina,, la cual se asocia con la proteína que
anquirina
forma el canal iónico.
iónico.
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Transporte de soluto a través de las membranas biológicas
Cinética y mecanismo de transporte
1. Transporte no mediado
Difusión simple
2. Transporte mediado
Transporte mediado pasivo o difusión facilitada.
Aquaporinas.
Transportador de glucosa en los eritrocitos.
Clasificación del transporte mediado:
En base a su estequiometria.
En base a su carga.
3 Transporte activo mediado por ATP.

3. ATP
La (Na+- K+)-ATPasa de membranas plasmaticas.
La Ca+-ATPasa
La (H+-K+)-ATPasa de mucosa gástrica.
4. Transporte activo impulsado por un gradiente de iones.

Simporte de Na+-glucosa
Lactosa permeasa
1.-- Transporte no mediado

1.
El movimiento se da por una difusión de alta

concentración a baja concentración.
concentración.
El movimiento de los solutos cargados depende de

el potencial químico (diferencia en concentración
de soluto) a través de la membrana.
membrana.
Difusión simple
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1.
Dos iones con cargas son separados por una

membrana, se da un gradiente eléctrico que
se le conoce como potencial de membrana
membrana..
Este potencial de membrana produce una

fuerza..
fuerza
El movimiento de los solutos cargados

depende de de:: el potencial químico (diferencia
en concentración de soluto) y el potencial
eléctrico (potencial de membrana) a través de
la membrana.
membrana.
A estos dos factores juntos se le conoce

como gradiente electroquímico o potencial
electroquímico..
electroquímico
Difusión simple

1.
Energía en el paso de una molécula hidrofílica a

través de la membrana biológica
biológica..
a). Una simple difusión

a). difusión;; es un proceso altamente
endergónico y la energía de activación para la
difusión a través de la membrana es muy alta.
alta.
b).. Proteína transportadora que reduce la energía

b)
de activación para la difusión a través de la
membrana del soluto.
soluto.
Difusión simple
28
05/02/2010
2.-- Transporte mediado pasivo

2.
Las moléculas fluyen desde una concentración elevada a una concentración baja (Equilibrio).
(Equilibrio).
No son enzimas en sentido estricto (sustrato no es alterado)
Transportadores o permeasas
permeasas..
Como ejemplo de este tipo de transporte mediado pasivo tenemos a:
Acuaporinas
Transportador de glucosa en los eritrocitos

2.
Acuaporinas
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2.
Proteínas clase IV
IV..
Seis pases transmembranales.

transmembranales.
Forman canales para el movimiento de

moléculas de agua a través de la
membrana plasmática en una variedad
de tejidos especializados.
especializados.
Las membranas plasmáticas de las

células del tubulo renal presentan
concentraciones altas de acuaporinas
las cuales reabsorben el agua durante
la formación de la orina.
orina.
Acuaporinas

2.
La AQP-
AQP-1 esta compuesta de cuatro monómeros
monómeros..
Estos cuatro monómeros forman un canal con un

diámetro de 3 Ao.
Permite el libre paso de moléculas de agua, con un
flujo de 5 X 108 moléculas por segundo
El eritrocito tiene 2 X 10 5 copias por célula
Acuaporinas
30
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2.
Acuaporinas

2.
31
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2.
5 mM glucosa
El transportador es llamado GluT

GluT11.
Proteína integral clase IV con con

12 pases transmembranales.
transmembranales.
El transportador eritrocitario de
glucosas tiene tres dominios:
dominios:
(1) Una región hidrofóbica
(2) un dominio citoplasmático, con

un elevado numero de cargas.
cargas.
(3) un dominio externo que

contiene carbohidratos
carbohidratos..
Transportador de glucosa de los eritrocitos

2.
La estructura no es del todo conocida.

conocida.
Modelos tridimensionales sugiere que el

ensamblamiento de las doce helices da un
canal transmembranal.
transmembranal.
Forma un cilindro hidrofóbico, que rodea

un canal hidrofílico por donde se
transporta la glucosa.
glucosa.
El transportador de glucosa constituye

aprox.. El 2 % de todas las proteínas de
aprox
membrana del eritrocito
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2. 5 mM glucosa
Modelo del transportador de glucosa.

glucosa.
Este mecanismo es generalmente

conocido como poro con puerta
puerta..
La entrada de glucosa a la célula por

éste transportador es 50 50,,000 veces
más alta que por difusión a través de la
membrana lipidica
lipidica..

2.
Se le conoce también como

proteína intercambiadora de
aniones..
aniones
Intercambiador Cloruro-
Cloruro- Bicarbonato de los eritrocitos
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2.
Intercambiador Cloruro-
Cloruro- Bicarbonato de los eritrocitos

2.
De acuerdo con la estequiometria

estequiometria::
1.- Uniporte
niporte:: transporte de glucosa.
glucosa.
2.- Simporte
importe:.:.
3.- Antiporte
ntiporte::
El carácter eléctrico
eléctrico::
1.- Electroneutro
Electroneutro:: neutralización
simultanea de cargas, sea por un
simporte de iones de carga opuesta o
por un antiporte.
antiporte.
2.- Electrogénico
Electrogénico:: Cuando resulta en
una separación de cargas a través de
la membrana.
membrana.
Clasificación de transportador mediado
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05/02/2010

3.-- Transporte activo mediado por ATP
3.
Las moléculas especificas se transportan desde una concentración baja a una

concentración alta
alta..
Van en contra de su gradiente de concentración

concentración..
Un proceso endergónico como éste debe de ser acoplado a una proceso exergónico
para que se efectué
efectué..
El transporte activo es un proceso endergónico que está a

menudo acoplado a la hidrólisis de ATP
ATP..
La Ca+-ATPasa

3.
35
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3.

3.
Esta pproteína transmembranal fue aislada

por vez primera por Jens Skou.
Skou.
Proteína integral con dos subunidades (Mr

de 5050,,000 y 110
110,,000
000),
), donde ambas
atraviesan la membrana.
membrana.
Acoplada al rompimiento de ATP y al

movimiento simultaneo de Na+ y K+ a
través del gradiente electroquímico.
electroquímico.
Se le denomina bomba de (Na+ - K+) .
Es un antiporte electrogenico, ya que salen

tres cargas positivas y entran dos cargas
positivas..
positivas
36
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Un mecanismo de reacción cinético

secuencial ordenado es el responsable del
acoplamiento del transporte activo con la
hidrólisis de ATP
ATP::

3.
La Ca2+ - ATPasa bombea activamente el calcio al exterior de la célula a expensas de

la hidrólisis de ATP.
ATP.
Es un polipéptido que atraviesa diez veces la membrana plasmática

plasmática..
Regulación de las actividades de sus bombas ionicas con precisión

precisión..
La regulación de la bomba de Ca2+ en la membrana plasmática es controlada por el

nivel del Ca2+, mediado por la calmodulina (CaM
CaM)).
A concentraciones
t i altas
lt ded Ca
C 2+, éste
é t se une a lla calmodulina,
calmodulina
l d li , lla cuall presenta
t cuatro
t
sitios de unión del calcio.
calcio.
Cuando se ha formado el complejo calmodulina calmodulina--Ca2+ ocurre un cambio

conformacional,, la cual activa a la Ca2+-ATPasa de las membranas plasmáticas
conformacional plasmáticas..
La Ca2+-ATPasa.
37
05/02/2010

3.
La Ca2+-ATPasa.

3.
La energía almacenada en un gradiente de potencial electroquímico puede aprovecharse para impulsar

varios procesos fisiológicos endergónicos
endergónicos..
38
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4.-- Transporte activo impulsado por un gradiente de iones
4.
100 veces mas alto en el

medio de cultivo a.-- Lactosa permeasa
a.

4.-- Transporte activo impulsado por un gradiente de iones
4.
b.-- Simporte de Na+-glucosa

b.
39
05/02/2010
4.-- Colapsadores del gradiente de iones

4.
Colapsan el gradiente de iones en

las membranas celulares, pueden
servir como antibióticos.
antibióticos.
Ionóforos
Valinomicina (Une K+)

Monesina (Une Na+)
La disipación del gradiente iónico

hace a los ionóforos unos potentes
antibióticos
4.-- Canales de iones

4.
Se distinguen de los transportadores por

por::
1.- La velocidad de flujo por los canales

puede ser ordenes de magnitud mayores que
el transportador.
transportador.
2.- Los canales iónicos no se saturan
3.- Son compuertas abiertas o cerradas en

respuesta a algún acontecimiento celular
celular..
Estructura del canal de K+ de Streptomyces lividans
40
05/02/2010
Resumen de transportadores
41

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Proteínas y carbohidratos membranales

Las membranas biológicas son conjuntos organizados de

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Son componentes esenciales de todas las células

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Propuesto por Singer y

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Modelo de Mosaico fluido

Demuestra la difusión de las proteínas existe a

Entre el 30 y 90 % de estas proteínas son

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Los lípidos participan en:

Participan activamente en el metabolismo y representan compuestos intermedios.

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Bicapa de lípidos anfipáticos

Membrana Glucolípidos Fosfolípidos Colesterol

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Bicapa de lípidos anfipáticos

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Propiedades de los agregados lípidicos

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Propiedades de los agregados lípidicos

En agua jabones y detergentes forman micelas

Micelas: agregados globulares cuyos grupos

La formación de micelas es un proceso

El numero de moléculas en una micela es

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Propiedades de los agregados lípidicos

Los glicerofosfolipidos y los esfingolipidos

La existencia de las bicapas fue propuesta

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Propiedades de los agregados lípidicos

Liposomas son vesículas cerradas, autosellantes y

Una vez preparados los liposomas son estables y se

Las bicapas lipidicas son impermeables a la mayoria

La permeabilidad de una bicapa se puede determinar

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Movilidad de los lípidos de la membrana

A diferencias de las tasas de flip-

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La fluidez de la bicapa varia con la temperatura

La temperatura de transición aumenta

El colesterol disminuye la fluidez de la

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1.- Proteínas integrales

Estas están fuertemente unidas a las membranas mediante fuerzas hidrofóbicas