12.

- La molcula cGMP est ntimamente relacionada con la relajacin de estructuras que

estn conformadas por musculatura lisa, y una de esas estructuras son los vasos
sanguneos del pene en el hombre. El cGMP promueve entonces la ereccin. Una enzima
que podra estar relacionada con la regulacin de este proceso es la PDE5, la cual cataliza
la hidrlisis de sta molcula. Se ha estudiado el efecto de diferentes molculas en esta
enzima para determinar su relacin con el proceso, y una de ellas presenta el siguiente
efecto:
[S]
(M)
0.5
1
2
2.5
3.3

V0 (nmol/min) en
ausencia de la
droga
5,5
6,7
7,7
10
12,5

V0 (nmol/min) en
presencia de la
droga
2,4
3,3
5
5,9
6,7

Al respecto, explique:
a) La droga disminuye la actividad de la enzima?, si es as, Qu tipo de
inhibicin presenta?.
b) Cul es el valor de KM y Vmx en presencia y ausencia de la droga?
c) Qu velocidad es esperada cuando [S]=1,25 (uM) en ausencia y presencia de
la droga?
d) Se espera que la droga sea beneficiosa para la disfuncin erctil?
Respuesta:
a) Para esto es necesario calcular los valores de Vmax y Km, por lo que se requiere en
primera instancias transformar los datos a su forma recproca:
x

y1

1/[S]
(M-1)

1/V0 (min/nmol) 1/V0 (min/nmol)

en ausencia de en presencia de
la droga
la droga

2
0,181818182
1
0,149253731
0,5
0,12987013
0,4
0,1
0,303
03
0,08
Luego con la calculadora, obtenemos la ecuacin

Km
1
1 Vmax
1
=
+
Vo
[ s]
Vmax

y2

0,416666667
0,303030303
0,2
0,169491525
0,149253731
de la recta para cada uno, en dnde;

y=mx +n

y=bx +a
Sin droga

Con droga

y=0,0523 x +0,0841

1
1
Vmax= =
n 0,0841

y=0,1566 x +0,1160

1 1
Vmax= =
n n

= 11,8906 nmol/min

8,6207

nmol/min

Km=

m 0,0523
=
n 0,0841

Km=

= 0,6219 M

m 0,1566
=
n 0,1160

= 1,35 M

R: Ahora bien, al comparar los valores obtenidos entre la enzima sin droga y con
droga, se puede deducir inicialmente que la droga si afecta la actividad de la enzima
PDE5, ya que la Vmax de esta disminuye. Respecto al tipo de inhibicin, es posible
descartar claramente la inhibicin de tipo acompetitiva, ya que las pendientes
obtenidas entre ambas ecuaciones son distintas. Tambin se puede deducir que la
inhibicin mixta no es, ya que la Km no se mantiene constante; por otro lado, s se
puede decir que la inhibicin que presenta esta droga frente a la enzima PDE5 es de
tipo competitiva, solo porque su Km aumenta, y analticamente, los valores de Vmax
entre ambos resultados, son ms cercanos.
b) R: Anteriormente al calcular los parmetros enzimticos, podemos decir que cuando
la enzima se encuentra en ausencia de esta droga, presenta una Vmax de 11,8906
nmol/min, y una Km de 0,6219 M. En cambio al estar con la presencia de esta
droga, presenta una Vmax y un Km de 8,6207 nmol/min y 1,35 M respectivamente.
c) R: Para este caso ocupamos la frmula de Michaelis-Menten y remplazamos los
valores de Km y Vmax segn corresponda; en ausencia o presencia de la droga y
agregamos la [S] que nos estn dando:

Vo=

Vmax [S ]
Km+[S ]

Sin droga

Vo=

(11,8906 nMol/min1,25 uM )
( 0,6219uM +1,25 uM )

Vo=

14,8633 nMol/minuM
1,8719 uM uM

Vo=7,9402 nMol /min uM

Con droga

Vo=

Vo=

Vo=

(8.6207 nMol/min1,25uM )
(1.35 uM +1,25 uM )

10,7759 nMol/minuM
2,6 uM uM

4,1446 nMol /minuM

R: La velocidad esperada para la PDE5 con una concentracin de 1,25 uM aplicada

con droga y sin droga es de 7,9402 nMol/min uM y 4,1446 nMol/ min uM
respectivamente
d) R: S, porque la droga al presentar efectos inhibitorios sobre la enzima PED5, estara
favoreciendo la formacin de cGMP y por ende disminuira la relajacin de los vasos
sanguneos del pene, provocando como respuesta final la ereccin de este. Todo esto
se debe a la relacin de los parmetros enzimticos calculados anteriormente, (Km y
Vmax) que se ven afectados entre la enzima y la droga; provocando que al aumentar
su Km, la afinidad que tendra la PDE5 con la cGMP sea mucho menor, iniciando
todos los procesos nombrados anteriormente.

PDE5

cGMP

Relajacin

No hay Ereccin

PDE5

cGMP

Relajacin

Si hay Ereccin

Esquema del mecanismo de accin enzimtica de la PED5 sobre la

cGMP, de forma inhibida y sin inhibir.