Optogentica

Un nematodo expresando el canal inico sensible a la luz Mac.

Mac es una bomba de protones aislada originalmente en el hongo
Leptosphaeria maculans y ahora expresada en las clulas musculares de C. elegans que se abren en respuesta a la luz verde y
causan inhibicin hiperpolarizantr. Es de destacar la extensin a
la que se somete la longitud del cuerpo del gusano cada vez que
se expone a la luz verde, que es de suponer que est causada por
los efectos relajantes musculares de Mac.[1]

Fig. 1: Ejemplo de la activacin optogentica de la corteza

prefrontal. La canalrodopsina-2 (ChR2) induce una actividad
impulsada por luz azul de gran precisin temporal en neuronas
corticales prefrontales prelmbicas de rata. a) Esquema in vitro (a la izquierda) que muestra la emisin de luz azul y el registro en clulas enteras de la actividad evocada por la luz de
neuronas piramidales en las que se expresa un CaMKll::ChR2EYFP uorescente (a la derecha), en un delgado corte de cerebro. b) Esquema in vivo (izquierda) que muestra la emisin de
luz azul (473 nm) y el registro de una sola unidad. (Abajo a la
izquierda) Corte coronal de cerebro que muestra la expresin de
CaMKll::ChR2-EYFP en la regin prelmbica. La echa celeste
muestra la punta de la bra ptica, la echa negra muestra la
punta del electrodo de registro (a la izquierda). Barra blanca, de
100 m, para comparacin. (Abajo a la derecha) Registro de luz
in vivo en neurona cortical prefrontal de una rata transducida
CaMKll::ChR2-EYFP mostrando picos evocados por la emisin
de pulsos de luz azul a 20 Hz (derecha). En detalle, Respuesta
representativa de una sola unidad, evocada por luz.[3]

La optogentica es la combinacin de mtodos genticos

y pticos para controlar eventos especcos en ciertas
clulas de tejidos vivos, incluso de mamferos y otros animales, con la precisin temporal necesaria (en la escala
temporal del milisegundo) para mantener el ritmo intacto de funcionamiento de los sistemas biolgicos. La razn
de este control tan rpido y preciso reside en el uso de la
luz como agente inductor.[2]
La optogentica abarca el desarrollo de protenas sensibles a la luz (naturales o modicadas qumicamente), las
estrategias para introducir los genes que codican dichas
protenas en las clulas o tejidos diana y, por ltimo, la
generacin de sistemas de deteccin de los cambios de
comportamiento producidos en dichas clulas y tejidos.[2]

ausencia de luz. La idea clave es la fusin en una protena

de dominios que absorben la luz con dominios efectores, capaces de una funcin. As se han creado variantes
sensibles a la luz de protenas efectoras fusionadas con
Estas tcnicas son especialmente tiles para su empleo protenas fotosensibles.
en la investigacin en neurociencias, donde no existan El empleo de opsinas procedentes de microorganismos
mtodos de estudio que permitiesen el estudio in vivo de (bacterias) y su adaptacin para su utilizacin como inclulas individualizadas.
terruptores celulares ha permitido una avance importan-

te de estas tecnologas. Estas opsinas combinan un dominio sensible a la luz y un canal inico en la misma
protena.[2] As, son necesarios cuatro etapas en un estudio optogentico:[4]

Fundamentos

Los mtodos optogenticos se basan en la introduccin en

ciertas clulas de genes exgenos que codican protenas
sensibles a la luz. Estas protenas permiten modicar el
comportamiento a nivel celular mediante la presencia o

Desarrollo de protenas fotosensibles, modulando el

potencial de membrana y dirigiendo la sealizacin
celular;
1

REFERENCIAS

Conduccin de genes a la clula diana, mediante Nagel.[15] Los grupos de Gottschalk y Nagel fueron los
transfeccin, transduccin viral o creacin de lneas primeros en extender la usabilidad de la canalrodopsina-2
animales transgnicas;
para controlar la actividad neuronal en animales intactos
al mostrar que los patrones motores en el gusano redondo
Iluminacin controlada; y
Caenorhabditis elegans podan ser evocados por la expresin dirigida y la estimulacin de canalrodopsina-2 en los
Anlisis de los resultados obtenidos.
circuitos nerviosos seleccionados (publicado en diciembre de 2005).[16]
En 2010, Karl Deisseroth de la Universidad de Stanford
fue premiado[17] por su trabajo pionero en el desarrollo
de mtodos optogenticos para estudiar la funcin de las
La posibilidad de utilizar la luz para controlar selectiva- redes neuronales subyacentes al comportamiento.
mente modelos de actividad neuronal especca (poten[18]
http://
ciales de accin) dentro de los diferentes subtipos de clu- En 2012, Gero Miesenbck fue premiado
www.inbevbailletlatour.com/index.cfm?ee=3|336
InBev
las del cerebro fue anticipada en 1999 por Francis Crick
Baillet
Latour
Premio
Internacional
de
la
Salud
]
por
sus
en sus Conferencias Kuer impartidas en la Universidad
[5]
pioneros
enfoques
optogenticos
para
manipular
la
actide California en San Diego. Un uso pionero de la luz
para activar las neuronas fue llevado a cabo por Richard vidad neuronal y para controlar el comportamiento de los
Fork[6] y ms tarde por Rafael Yuste,[7] que demostra- animales.
ron la activacin por lser de las neuronas en el tejido in- En 2013, Ernst Bamberg, Ed Boyden, Karl Deisseroth,
tacto, aunque no de una forma genticamente orientada. Peter Hegemann, Gero Miesenbck y Georg Nagel reciEl primer mtodo genticamente dirigido, que utilizaba bieron el Premio Mundial del Cerebro por su invencin
la luz para controlar neuronas genticamente sensibiliza- y perfeccionamiento de la optogentica.[19]
das, fue publicado en enero de 2002 por Boris Zemelman
(ahora en UT Austin) y Gero Miesenbck, que emplearon
los fotorreceptores para la rodopsina de Drosophila para 3 Importancia
controlar la actividad neuronal en neuronas cultivadas de
mamferos.[8] En 2003 Zemelman y Miesenbck desarroEn 2010, la optogentica fue elegda como el Mtodo del
llaron un segundo mtodo para la activacin dependiente
Ao, entre todos los campos de la ciencia y la ingeniede la luz de neuronas individuales en las que los canales
ra, por la revista de investigacin interdisciplinar Natuionotrpicos TRPV1, TRPM8 y P2X2 fueron cerrados
re Methods.[20]
[9]
por ligandos enjaulados en respuesta a la luz. A partir
de 2004, los grupos de Kramer e Isaco desarrollaron fo- Al mismo tiempo, la optogentica fue destacada en el artointerruptores orgnicos o compuestos enjaulados que tculo Insights of the Decade [21] (Los avances de la dpodran interactuar con los canales de iones genticamen- cada), publicado en la revista de investigacin cientca
te introducidos.[10][11] Sin embargo, estos enfoques pre- Science. Estas revistas tambin hacen referencia a revios no se aplicaron fuera de los laboratorios originales, cientes publicaciones en vdeo de inters general y acceso
probablemente a causa de problemas tcnicos en la en- pblico,[22] y a textos sobre la cuestin.[23]
trega de los mltiples componentes requeridos.

Historia

En abril de 2005 Susana Lima y Miesenbck hicieron pblico el primer uso de la fotoestimulacin genticamente orientada de P2X2 para controlar el comportamiento de un animal.[12] Demostraron que la fotoestimulacin
de grupos genticamente circunscritos de neuronas, tales
como los del sistema dopaminrgico, provocaban cambios de comportamiento caractersticos en moscas de la
fruta. En agosto de 2005, el laboratorio de Karl Deisseroth en el Departamento de Bioingeniera de la Universidad de Stanford junto a los estudiantes graduados Edward
Boyden y Feng Zhang (ambos ahora en el MIT) publicaron la primera demostracin de un sistema optogentico
de un solo componente, a partir de neuronas cultivadas
de mamferos[13][14] utilizando canalrodopsina-2, un canal catinico de un solo componente activado por la luz
procedente de algas unicelulares. La identidad molecular
y principales propiedades de la canalrodopsino la hacan
til para estudios de optogentica como haba publicado
anteriormente (en noviembre de 2003) el grupo de Georg

4 Referencias
[1] Husson, S. J.; Liewald, J. F.; Schultheis, C.; Stirman,
J. N.; Lu, H.; Gottschalk, A. (2012). Microbial LightActivatable Proton Pumps as Neuronal Inhibitors to Functionally Dissect Neuronal Networks in C. Elegans. In
Samuel, Aravinthan. PLoS ONE 7 (7): e40937. doi:
10.1371/journal.pone.0040937. PMC 3397962. PMID
22815873
[2] Optogentica. Medicina molecular FIBAO.
[3] Baratta M.V., Nakamura S, Dobelis P., Pomrenze M.B.,
Dolzani S.D. & Cooper D.C. (2012) Optogenetic control
of genetically-targeted pyramidal neuron activity in prefrontal cortex. Nature Preceedings, 2 de abril de 2012,
doi=10.1038/npre.2012.7102.1 http://www.neuro-cloud.
net/nature-precedings/baratta
[4] La Optogentica. La Salud y la Medicina, 20 de diciembre
de 2010

[5] Crick, F. (diciembre de 1999). The impact of molecular biology on neuroscience. Philosophical Transactions of the Royal Society B 354 (1392): 2021
25. doi:10.1098/rstb.1999.0541. PMC 1692710. PMID
10670022.
[6] Fork, R. L. (marzo de 1971). Laser stimulation of nerve cells in Aplysia. Science 171
(3974):
9078.
Bibcode:1971Sci...171..907F.
doi:10.1126/science.171.3974.907. PMID 5541653.
[7] Yuste,, R.; Nikolenko V; Poskanzer, K. E; (2007).
Two-photon photostimulation and imaging of
neural circuits. Nature Methods 4 (11): 943950.
doi:10.1038/nmeth1105. PMID 17965719.
[8] Zemelman, B. V.; Lee, G. A.; Ng, M.; Miesenbck, G.
(2002). Selective photostimulation of genetically chARGed neurons. Neuron 33 (1): 1522. doi:10.1016/
S0896-6273(01)00574-8. PMID 11779476

doi:10.1073/pnas.1936192100. PMC 283525. PMID

14615590.
[16] Nagel, G.; Brauner, M.; Liewald, J. F.; Adeishvili, N.; Bamberg, E.; Gottschalk, A. (diciembre de
2005). Light activation of channelrhodopsin-2 in excitable cells of Caenorhabditis elegans triggers rapid
behavioral responses. Curr. Biol. 15 (24): 227984.
doi:10.1016/j.cub.2005.11.032. PMID 16360690.
[17] HFSP Nakasone Award Premio HFSP Nakasone.
[18] InBev-Baillet Latour International Health Prize Premio
Internacional de Salud InBev-Baillet Latour.
[19] The Brain Prize 2013. Consultado el 3 de octubre de
2013.
[20] Method Of The Year 2010: MOTY Primer, MOTY Editorial. Nature Methods 8, 1 (2011) doi:10.1038/nmeth.f.
321. 20 de diciembre de 2010., MOTY Commentary.

[9] Zemelman, B. V.; Nesnas, N.; Lee, G.A.; Miesenbck, G. (2003). Photochemical gating of heterologous ion channels: Remote control over genetically designated populations of neurons. PNAS 100: 13527.
doi:10.1016/S0896-6273(01)00574-8. PMID 11779476.

[21] Stepping Away From the Trees For a Look at the Forest.
Insights of the Decade. Science, vol. 330, 1612, 17 de
diciembre de 2010.

[10] Banghart, M; Borges, K; Isaco, E; Trauner, R. H. (21

de noviembre de 2004). Light-activated ion channels for
remote control of neuronal ring. Nature Neuroscience
7 (12): 13811386. doi:10.1038/nn1356. PMC 1447674.
PMID 15558062.

[23] Optogenetics: Controlling the Brain with Light. Scientic

American, Karl Deisseroth, 20 de octubre de 2010.

[11] Volgraf,, M.; Gorostiza, P.; Numano, R.; Kramer, R. H.;

Isaco, E. Y. (11 de diciembre de 2005). Allosteric
control of an ionotropic glutamate receptor with an
optical switch. Nature Chemical Biology 2 (1): 47
52. doi:10.1038/nchembio756. PMC 1447676. PMID
16408092.
[12] Lima, S. Q.; Miesenbck, G. (2005). Remote Control of
Behavior through Genetically Targeted Photostimulation
of Neurons. Cell 121 (1): 141152. doi:10.1016/j.cell.
2005.02.004. PMID 15820685
[13] Boyden, E. S.; Zhang, F.; Bamberg, E.; Nagel, G.; Deisseroth, K. (2005). Millisecond-timescale, genetically targeted optical control of neural activity. Nat. Neurosci 8
(9): 12638. doi:10.1038/nn1525. PMID 16116447.
[14] Li,, X.; Gutierrez, D. V.; Hanson, M. G.; Han, J.;
Mark, M. D.; Chiel, H.; Hegemann, P.; Landmesser,
L. T.; Herlitze, S. (14 de octubre de 2005). Fast noninvasive activation and inhibition of neural and network activity by vertebrate rhodopsin and green algae channelrhodopsin. Proc Natl Acad Sci U S A
102 (49): 1781621. Bibcode:2005PNAS..10217816L.
doi:10.1073/pnas.0509030102. PMC 1292990. PMID
16306259.
[15] Nagel,, G.; Szellas, T.; Huhn, W.; Kateriya, S.;
Adeishvili, N.; Berthold, P.; Ollig, D.; Hegemann,
P.; Bamberg, E. (25 de noviembre de 2003).
Channelrhodopsin-2, a directly light-gated cationselective membrane channel. Proc Natl Acad Sci U S A
100 (24): 139405. Bibcode:2003PNAS..10013940N.

[22] Method of the Year 2010: Optogenetics. Nature Video

5 Enlaces externos
Optogenetics Resource Center, mantenido por Laboratorio de Karl Deisseroth.
Synthetic Neurobiology Group, MIT, Laboratorio
de Edward Boyden.
Laboratorio Sohal.
Laboratorio Nurmikko
Laboratorio Lee
Laboratorio Dr. Zhuo-Hua Pan,
OpenOptogenetics.org Wiki sobre optogentica,
Champalimaud Institute.
Laboratorio de Optosiologia de Tyler

6 TEXTO E IMGENES DE ORIGEN, COLABORADORES Y LICENCIAS

Texto e imgenes de origen, colaboradores y licencias

6.1

Texto

Optogentica Fuente: http://es.wikipedia.org/wiki/Optogen%C3%A9tica?oldid=81026136 Colaboradores: Magomandrake, ArmandoMartin, Wikielwikingo, GrouchoBot, ZroBot, Grillitus, MerlIwBot, KLBot2, Invadibot, YFdyh-bot y Annimos: 3

6.2

Imgenes

Archivo:Example_of_optogenetic_activation_of_prefrontal_cortex.jpg Fuente: http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/

15/Example_of_optogenetic_activation_of_prefrontal_cortex.jpg Licencia: CC BY-SA 3.0 Colaboradores: This is a recording of neural
activity taken in Don Coopers laboratory at the University of Colorado, Boulder
Previously published: http://www.neuro-cloud.net/nature-precedings/baratta Artista original: Doneuron; Collaborations: To use this gure
and/or collaborate with the Cooper laboratory please contact Don Cooper (dcooper@colorado.edu)

Archivo:Microbial-Light-Activatable-Proton-Pumps-as-Neuronal-Inhibitors-to-Functionally-Dissect-Neuronal-pone.
0040937.s007.ogv Fuente: http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/a/a1/Microbial-Light-Activatable-Proton-Pumps-as-Neuronal-Inhibitors-to-Functi
0040937.s007.ogv Licencia: CC BY 2.5 Colaboradores: Video S1 from Husson S, Liewald J, Schultheis C, Stirman J, Lu H, Gottschalk
A (2012). "Microbial Light-Activatable Proton Pumps as Neuronal Inhibitors to Functionally Dissect Neuronal Networks in C. elegans".
PLOS ONE. DOI:10.1371/journal.pone.0040937. PMID 22815873. PMC: 3397962. Artista original: Husson S, Liewald J, Schultheis C,
Stirman J, Lu H, Gottschalk A

6.3

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