Precauciones durante la recoleccion y envio de muestras

Publicado en Hematologa y Serologa

Precauciones durante la recoleccion y envio de muestras

1. Proteccin del personal

Las muestras biolgicas potencialmente pueden contener agentes patgenos
(VIH, hepatitis, meningitis).
Evitar contacto con la muestra mediante uso de guantes, mascarilla y bata.
Si es posible emplear material desechable
Prohibir comer, beber o fumar durante el proceso de recoleccin
Recomendar la vacunacin al personal que trabaje con este tipo de muestras
2. Proteccin de la muestra
2.1 Contaminacin por material biolgico humano:
Se debe a la aparicin en el propio indicio biolgico de un aporte de material
biolgico humano ajeno al propio indicio. Produce como resultado la mezcla de
perfiles genticos.
Contaminacin anterior o previa: Se debe a la aparicin de material biolgico
en el lugar donde luego aparecern los indicios. Es INEVITABLE y
generalmente DIFICULTA la valoracin de la prueba.
Contaminacin coetnea o paralela: El material gentico de un indicio se
mezcla con ADN de otro origen en el momento de los hechos. Es INEVITABLE

y FAVORECE la valoracin.
Contaminacin posterior: Debido al depsito de material gentico de diversos
orgenes en el indicio con posterioridad al momento de los hechos. Es
EVITABLE mediante estrictos protocolos de recoleccin, embalaje y envo de
las muestras, que se detallan en el presente documento.
2.2 Transferencia de indicios biolgicos:
Traslado accidental de los indicios de un lugar a otro, ocasionando
contaminacin o prdida de la muestra (por ej. pelos).
2.3 Contaminacin biolgica no humana:
Producida por microorganismos que acaban degradando el ADN por accin,
fundamentalmente de exonucleasas. (humedad y altas temperaturas).
Puede ocurrir a priori a la recoleccin de indicios (muestras expuestas a
condiciones que favorecen la proliferacin bacteriana).
Tras la recoleccin del indicio si el empaquetado y conservacin no es el
adecuado.
Produce la DEGRADACION DEL ADN y AUSENCIA DE RESULTADOS, pero
NUNCA la alteracin de los patrones genticos.
2.4 Contaminacin qumica:
Producida cuando las muestras se preservan (formol) o se tratan con
determinados productos qumicos. Por ejemplo, es nocivo cuando para el
estudio de huellas dactilares se utilizan lquidos reactivos; los polvos minerales
carbn, talco, etc- no producen alteracin alguna.
Afecta principalmente a las fases de extraccin y amplificacin del ADN, ya que
MODIFICAN la estructura qumica del mismo, lo cual se manifiesta como
AUSENCIA DE RESULTADOS EVALUABLES, pero nunca como modificacin

del patrn gentico.

QUE PRECAUCIONES ADOPTAR?
Aislar y proteger, lo ms rpidamente posible la escena del delito
Recoger, si es posible, en primer lugar los indicios biolgicos
Usar guantes limpios que deben cambiarse con frecuencia.
Evitar hablar o estornudar sobre las muestras. Usar mascarilla.
Usar bata u otro tipo de ropa protectora.
Utilizar material desechable, siempre que sea posible.
No aadir conservantes a las muestras.
Dejar secar a temperatura ambiente previamente a ser empaquetadas.
Empaquetar por separado las muestras.
Empaquetar en bolsas de papel o cartn, evitar las bolsas de plstico, que
condensan la humedad y favorecen la proliferacin de bacterias que degradan
el ADN.
Eliminar todo el material desechable empleado en la recogida de muestras.
TOMA DE MUESTRAS DE REFERENCIA
1. Personas vivas

Siempre con consentimiento informado.

Debe existir un documento firmado con la autorizacin expresa para

realizar el anlisis.
MUESTRA SANGUINEA

Existe la creencia popular de que en PERSONAS TRANSFUNDIDAS se

cambia el patrn gentico. Esto es as slo en teora, ya que en la prctica la

persona debera transfundirse un gran volumen de sangre (casi toda) y
concurrir inmediatamente a la toma de muestra para ADN, lo cual le producira
una debilidad y caractersticas fsicas fcilmente detectables por el personal
que realiza la toma. Un par de horas despus, ya aparece en la sangre el

patrn gentico real del individuo, al principio mezclado con el donante de la

sangre. De todos modos, en caso de duda pueden tomarse HISOPADOS
BUCALES.

Se sugiere realizar puncin dactilar, depositar una gota de

aproximadamente 1 cm de dimetro- en cualquier tipo de papel de filtro y dejar

secar a temperatura ambiente. Embalar en sobres de papel comn. En estas
condiciones la muestra dura ms de 10 aos.

No tomar sangre lquida ya que debe conservarse en freezer o se deteriora

rpidamente.
HISOPADOS BUCALES

No se trata de saliva sino de clulas epiteliales retiradas de la mucosa

bucal.

2 Hisopos de ambos carrillos, que se colocan en sobres de papel nunca

de polietileno- para evitar la proliferacin bacteriana. Los envoltorios de

polietileno o celofn, condensan la humedad y favorecen la degradacin.

PELOS CON BULBO

No se recomiendan como muestras de referencia, debe preferirse

hisopados bucales o muestras sanguneas.

De ser necesario, UN SOLO pelo con bulbo es suficiente, pero se

recomienda recolectar no menos de tres mediante arrancado, y fijarlos

mediante una cinta adhesiva a una placa de cartulina o plstico. Se sugiere no
usar portaobjetos de vidrio, ya que pueden romperse durante el traslado.
2. Cadveres
-

EN BUEN ESTADO DE CONSERVACION

SANGRE post-mortem: 200 microlitros (anticoagulante tipo EDTA), colocar

sobre papel de filtro.

MUSCULO ESQUELETICO: Aprox 1 gr. Se almacena en un recipiente de
plstico y tapn de rosca. Conservar en freezer.
PIEZAS DENTALES: 2 (molares). Dejar en reserva a temperatura ambiente,
con el fin de evitar la exhumacin si se requieren estudios de ADN meses o
aos despus.
-

EN AVANZADO ESTADO DE PUTREFACCION O ESQUELETIZADOS

HUESO LARGO: Fmur, hmero

PIEZAS DENTALES: 2 (molares). No daados externamente ni sometidos a
endodoncias.

QUEMADOS O PARCIALMENTE CARBONIZADOS

Cuando la carbonizacin no es total es posible analizar MSCULO

ESQUELTICO de zonas profundas.

Cuando la carbonizacin es total, es recomendable recolectar huesos o

dientes, seleccionando aquellos que a simple vista se encuentren en mejor

estado. De existir dudas, contactar con el laboratorio.
-

OTRAS MUESTRAS DE REFERENCIA DE INDIVIDUOS FALLECIDOS

En hospitales (muestras de sangre, biopsias en parafina, o preparaciones

histolgicas. No utilizar tejidos fijados en formol.
mbito familiar (peines, maquinillas de afeitar, saliva en sellos o sobres)
TOMA DE INDICIOS BIOLOGICOS en el lugar de los hechos
1. Manchas secas
En soportes pequeos y de fcil transporte:
Colillas, armas blancas, monedas, llaves, piedras, ramas, papeles. Recoger por

separado e introducirlas en bolsas de papel o cajas.

En soportes grandes no transportables:
A) Soporte no absorbente (cristal, metal): Recoger con un hisopo mojado en
agua destilada (dejar secar antes de guardar) o raspar con bistur y guardar en
bolsa de papel.
B) Soporte absorbente (telas, tapicerias): Recortar la mancha y guardar en
bolsa de papel.
2. Indicios hmedos
Ropas, tapiceras, toallas: Introducir por separado en bolsas de papel madera,
Trasladar rpidamente a instalaciones adecuadas, Dejar secar en lugar
protegido y sobre una superficie limpia y envolver en papel (por separado).
Guardar en bolsas de papel.
3. Indicios lquidos (guardar siempre en freezer)
Sangre
- En gran cantidad: recoger con pipeta de plstico y depositarla en un tubo con
EDTA
- En pequea cantidad: recoger con hisopo y dejar secar.
- Coagulada: recoger con una cucharita e introducir en tubo o frasco de
plstico.
Semen
- Preservativos con semen lquido: atar e introducir en un frasco de plstico.
- En escasa cantidad: recoger con hisopo y dejar secar.
Liq amniotico

- 10 ml, que se introducen en un tubo.

Orina
- Recoger con pipeta de plstico desechable y depositarla en un tubo o frasco.

4. Pelos
Recolectar cada pelo con pinzas (desechables o bien limpias) y guardarlo en
una bolsa de papel
5. Restos cadavricos
Buen estado de conservacin: Tejido muscular sin lquido fijador en frasco de
boca ancha y tapn de rosca.
Carbonizados: Msculo esqueltico de zonas menos afectadas sin lquido
fijador y en frasco de boca ancha y tapn de rosca
Avanzado estado de putrefaccin o esqueletizados: Hueso largo (limpio sin
putrlago) y dientes (2 molares).

TOMA DE INDICIOS BIOLOGICOS en el cuerpo de la vctima

1. Manchas de sangre, semen u otros fluidos biolgicos
Recoger con un hisopo hmedo (agua destilada) la mancha en cuestin, dejar
secar a TA y enfundar el hisopo.
2. Saliva en marcas de mordedura
Recoger con un hisopo hmedo (agua destilada) la mancha en cuestin, dejar
secar a TA y enfundar el hisopo
3. Uas
Recoger con una pinza posibles pelos o fibras. Posteriormente cortar el borde

superior de las uas para bsqueda de sangre o piel. Recoger en bolsas de

papel por separado.
4. Pelos dubitados
Recoger cada pelo con unas pinzas y colocar en un papel que ser doblado e
introducido en una bolsa de papel.
TOMA DE INDICIOS BIOLOGICOS en casos de agresin sexual
1. Dos tomas bucales mediante hisopos, pasando por debajo de la lengua,
encas y dientes.
2. Bsqueda de manchas de semen, saliva o mordeduras: segn se indic
anteriormente
3. Dos tomas cervicales, dos tomas vaginales y una de genitales externos, con
hisopos estriles limpiando cuello uterino, cavidad vaginal y la regin vulvar.
4. Lavado vaginal, empleando 10 ml de suero fisiolgico que se recoger en un
frasco o tubo de plstico.
5. Dos tomas anales, con hisopos estriles limpiando el conducto ano-rectal y
el margen anal.
6. Ropas que portaba la vctima: guardar en bolsas de papel por separado.
TOMA DE INDICIOS BIOLOGICOS en casos de investigacin biolgica de la
paternidad
1. Si presunto padre, madre e hijo estn vivos: descrito anteriormente
2. Si el presunto padre est fallecido
a) Restos seos o piezas dentales procedentes de la exhumacin del cadver.
b) Anlisis de muestras biolgicas del fallecido existentes en hospitales o en el
mbito familiar.
c) Anlisis de muestras biolgicas procedentes de familiares del fallecido.
3. A partir de restos fetales

Recogerlos con unas pinzas en un frasco de boca ancha y con tapn de rosca
(sin formol ni otros lquidos fijadores).
SISTEMAS DE EMPAQUETAMIENTO Y PRESERVACIN DE MUESTRAS
IMPORTANTE: MANTENER Y ENVIAR REFRIGERADAS Y POR UN MEDIO
DE TRANSPORTE RAPIDO CUANDO SE TRATA DE: indicios lquidos, tejidos
blandos y rganos, y otras muestras hmedas (que no puedan secarse).
ENVIAR TODA MUESTRA SECA SIN REFRIGERACION.
IDENTIFICACION DE LA MUESTRA
Tipo de muestra
Pertenencia y/o procedencia
N de referencia de la muestra
CUSTODIA DE LA MUESTRA
Identificacin y firma de la persona que recoge la muestra
Fecha y hora de recoleccin
EMPAQUETADO
1. Evitar el uso de bolsas de plstico
2. Evitar emplear frascos de cristal
3. Emplear cajas de cartn o sobre de papel
4. Cada muestra en un recipiente precintado o cerrado hermticamente.
RECEPCION DE MUESTRAS EN EL LABORATORIO
1 Rellenar la hoja de custodia:
Nombre de la persona que entrega las muestras

Fecha y hora de entrega

Nombre de la persona que recibe las muestras
Empresa que realiza el transporte
2 Chequear nmero de referencia de cada muestra y contrastar con el
formulario enviado.
3 Comprobar la integridad de los precintos
4 Al abrir los recipientes comprobar que identificacin y descripcin son
correctas
5 Si fuera posible, fotografiar las muestras.
Anotar discrepancias si las hubiera y establecer acciones correctoras.
RECOMENDACIONES DE LA SOCIEDAD LATINOAMERICANA DE
GENETICA FORENSE basadas en la International Society for Forensic
Genetics ISFG- y en el GEP-ISFG.