Curva de Crecimiento de Bacterias (Lácticas)

UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMAN
CURVA DE CRECIMIENTO DE BACTERIAS

(LCTICAS)
CURVA DE SNTESIS DEL PRODUCTO (CIDO
LCTICO)
I.
OBJETIVO
II.
Estudiar la curva de crecimiento de bacterias lcticas y al

mismo tiempo construir la curva de sntesis de cido
lctico.
Comparar los resultados de una cepa con fecha de
vencimiento vencida con una de fecha no vencida.
FUNDAMENTO TERICO
LACTOBACILLUS BULGARICUS
Lactobacilos blgaros, nombre
comn con el que se conoce a las
colonias
de
las bacterias Lactobacillus
bulgaricus,
las
cuales
son
conglomerados
de bacterias lcticas
y levaduras de
asociacin simbitica estable
embebidas
en
una
matriz
de polisacridos, cuyo tamao vara de entre 5mm y 2.5 mm; de
consistencia elstica y de color blanco-amarillento (Ulloa- Lappe,
1993). A pesar de que fueron descubiertas por el blgaro Dr.
Stamen Grigorov en 1905 (1878 -1945), siendo an estudiante de
medicina, las bacterias Lactobacillus bulgaricus y Streptococcus
thermophilus , las responsables de la fermentacin de la leche, ya
eran conocidas por los antiguos tracios que vivan en el territorio de
la Bulgaria moderna desde 6000-7000 a. C. Las utilizaron para
inducir la fermentacin de la leche de oveja para obtener yogur,
queso, etc., y que seran los primeros alimentos probiticos en el
mundo.
BIOTECNOLOGIA DE ALIMENTOS
1
Los lactobacilos blgaros presentan tres formas estructurales

diferentes: laminar, enrollada y convoluta; los microorganismos que
las constituyen presentan una disposicin de estratos definida. La
forma laminar presenta dos superficies, una lisa, colonizada por
lactobacilos cortos y una rugosa, en la que predominan las
levaduras; entre ambas se encuentra una porcin intermedia, donde
existe una sustitucin de bacilos cortos por levaduras. La forma de
convoluta presenta tres capas: la externa, con predominancia de
lactobacilos cortos, la media con lactobacilos largos rectos,
lactobacilos largos curvos y algunas levaduras y la interna con
lactobacilos excrementus y abundantes levaduras embebidos en
una matriz cavernosa (Aguilar, 1997).
Se utiliza en la tecnologa tradicional de la fermentacin de

la leche empleando estas bacterias como cultivo iniciador, que
puede recuperarse por filtracin y usarse infinitamente, siempre y
cuando se observen algunas medidas mnimas de higiene. Estos
productos han sido importantes en la historia del hombre,
las fermentaciones han sido utilizadas por siglos en muchos pases y
su origen se pierde en los albores del tiempo. Se cree que
aparecieron como resultado del crecimiento espontneo de
microorganismos bajo condiciones adecuadas para efectuar la
fermentacin y as evitar la descomposicin.
RELACIONES ENTRE VELOCIDAD DE CRECIMIENTO Y TAMAO

CELULAR
Es fcil comprobar en los cultivos bacterianos que cuanto ms rico
es un medio, y por lo tanto menor es el tiempo de generacin (g),
mayor es el tamao medio de las clulas.
Bacterias creciendo en un medio relativamente pobre (supongamos
que en este medio g=60 min, C+D=g);si transplantamos una clula
recin dividida procedente del cultivo anterior a un medio ms rico
(por ejemplo, que permite un tiempo de generacin g=35 min)
podemos observar que:
2
a. la primera divisin ocurre C+D (60 minutos) despus; es

decir, con un tiempo idntico al que tena en el medio
anterior;
b.
pero como en este medio g=35 min, la

iniciacin de una nueva ronda de replicacin ocurre antes de
dicha replicacin celular (es decir, C y D se superponen);
c.
se observa que se alcanza un nuevo

equilibrio, con un tamao celular mayor que en el medio
pobre, y una masa de inicio (tras la divisin celular) mayor,
alterndose igualmente el tiempo de inicio.
III.
MATERIALES
Un vaso de precipitado de 1 lt. Estril
Pipetas de 10, 5,5,1 ml.
Placas Petri
Tubos de ensayo.
Cepas de Lactobacillus.
Agar Rogosa
Equipo de incubacin anaerbica
Equipo para determinacin de acidez titulable.
IV.
PROCEDIMIENTO
Sembrar la leche con Lactobacillus. Incubar a 43C. Controlar el

proceso de fermentacin. Realizar las siembras y titulaciones
necesarias.
Utilizar una cepa con fecha de vencimiento recientemente vencida.
Comparar con los resultados anteriores. Graficar los resultados vs.
Tiempo.
TABLA N1: Resultados de cepas con fecha de vencimiento no
vencida
3
Hora de
anlisis
D (acidez)
Recuento de
Ufc/ml
10:25
18
16*105
11:05
20
42*105
11:30
21
70*105
12:03
30
75*105
12:36
43
85*105
13:08
50
110*105
13:40
55
220*105
14:20
60
530*105
15:00
60
TABLA N 2: Curva de crecimiento de bacterias lcticas. (bioflora

,cepa comprada en Tienda Bocchio donde estuvo congelada). Con
fecha de vencimiento 2014
Hora
D
Produccin
de cido
lctico
9:05
9:40
10:20
18
18,5
20
Recuento
bacterias
lcticas ufc/ml
de leche (X).-----x106
1000000
0
1000000
11:00
32
4000000
11:40
50
6000000
12:20
64
17000000
13:00
72
34000000
13:50
78
68000000
14:20
80
75000000
Nota: La leche se tuvo que recalentar a las 11 :00 a 43 C . La

temperatura ambiente = 15-17 C, obteniendo buen resultado. En
un inicio la temperatura de incubacin era de 37-39 C, lo cual
impidi el buen desarrollo.
V.
CLCULOS:
4
Para la tabla n 1 tenemos:

X
10:25
Y
18
11:05
20
11:30
21
12:03
30
12:36
43
13:08
50
13:40
55
14:20
60
15:00
60
Ln de Y
2,89037
176
2,99573
227
3,04452
244
3,40119
738
3,76120
012
3,91202
301
4,00733
319
4,09434
456
4,09434
456
Grfico n 1:
4.5
4
3.5
3
2.5
tiempo vs. Ln D
2
1.5
1
0.5
0
09:36
10:48
12:00
13:12
14:24
5
15:36
De este primer grafico podemos decir que la cepa produjo su

mxima cantidad de acido lctico rpidamente hasta las 12:36 y se
fue equilibrando en el punto (Y 55) y a partir del penltimo tiempo
medio hasta el ltimo este se mantuvo constante.
Para hacer la comparacin tambin obtuvimos un grfico
para lo que es la segunda tabla:
X
10:25
11:05
11:30
12:03
12:36
13:08
13:40
14:20
15:00
Y
160000
0
420000
0
700000
0
750000
0
850000
0
110000
00
220000
00
530000
00
0
GRAFICO n 2: Tiempo vs. Cant. De producto.

60000000
50000000
40000000
30000000
Tiempo vs. producto
20000000
10000000
0
09:36
10:48
12:00
13:12
6
14:24
15:36
Del grfico se puede deducir que de acuerdo al lineamiento que

tiene la curva se puede decir que a horas 13:40 hasta la 14:20 se
dio la mayor produccin de ufc/ml de parte de la cepa. En tal caso a
este periodo se le denominara el periodo de crecimiento
exponencial.
(PinicialPfinal )
K=
( Tiempo finalTiempoinicial ) (Xm )
Xf Xi
Xm=
2
5300000+ 1600000
Xm=
=3450000
2
(1865)
K=
=1.879 106
( 3 :0010 :25 ) (3450000)
Para la segunda muestra con fecha de vencimiento 2014
se tiene que, de la primara tabla para esta muestra es:
X
9:05
Y
18
9:40
18,5
10:20
20
11:00
32
11:40
50
12:20
64
13:00
72
13:50
78
14:20
80
7
ln
2,89037
176
2,91777
073
2,99573
227
3,46573
59
3,91202
301
4,15888
308
4,27666
612
4,35670
883
4,38202
663
5
4.5
4
3.5
3
2.5
Tiempo vs. Ln
producto
2
1.5
1
0.5
0
08:24 09:36 10:48 12:00 13:12 14:24 15:36
Para hacer lectura de la cantidad de bacterias desarrolladas en cada

tiempo tomado tambin se hizo:
X
Y
9:05
100000
Grafico N 3 Tiempo vs.
Ufc/ml
0
9:40
0
10:20
100000
0
11:00
400000
0
11:40
600000
0
12:20
170000
00
13:00
340000
00
13:50
680000
De
lo
que
se
desprende
que
la
00
mayor
produccin 14:20
denominada
750000
logartmica est entre
el antepenltimo y
00
penltimo
punto;
despus de este como
que cesa un poco el crecimiento.
(PinicialPfinal )
K=
( Tiempo finalTiempoinicial ) (Xm )
Xf Xi
2
75000000+1000000
Xm=
=38000000
2
Xm=
8
K=
VI.
(1880)
=2.38187107
( 2 :209 :05 ) (38000000)
CONCLUSIONES
Se desarrollaron las curvas de desarrollo de cepa as
como tambin la produccin de cido lctico a partir de
dos cepas del mismo gnero sino que de diferentes
fechas de vencimiento; siendo su nombre Lactobacillus.
Al comparar las grficas de produccin de cido lctico
nos podremos dar cuenta que la relacin que guardan
son muy similares por lo que nose encuentra diferencias
en ello entre la cepa de fecha de vencimiento no vencida
con la cepa que vence el 2014.
Para el caso desde crecimiento o desarrollo exponencial
manifestado en ufc/ml se traduce de comparar ambos
ltimos grficos de cada tabla: En la cepa de fecha de
vencimiento no vencida este desarrollo ptimamente
hasta un penltimo punto y luego descendi
bruscamente quizs porque se dio la muerte progresiva
de la cepa. Para el segundo caso, el desarrollo de la cepa
tambin fue bueno e incluso al tomar el ltimo tiempo se
mostraba crecimiento aunque en el inicio se retras un
poco debido a que se dieron con la sorpresa que al
traerla de la estufa al laboratorio para sembrarla esta
haba sufrido un enfriamiento y se debi de nuevo
calentar la leche.La actividad especfica de las cepas (K)
resulta para cada uno de la siguiente manera:
Cepa1: 1,879*10-6
Cepa 2: 2,38*10-7
Lo que nos dice que la segunda cepa tuvo menor actividad

especfica.
VII.
BIBLIOGRAFA
9
http://www.hablemosclaro.org/Temas/5/40/Producci
%C3%B3n_de_Bacterias_%C3%81cido_L
%C3%A1cticas#.VGYnxsV5OE4
fuente.uan.edu.mx/publicaciones/03-07/1.pdf
https://micro.cornell.edu/.../fisin-binaria-e-otras-formas-dereproducco...
10

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