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DISEO DEL PROCESO PARA LA

OBTENCIN DE CIDO ITACNICO A


PARTIR DE APERGILLUS TERRUS

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DISEO DEL PROCESO PARA LA OBTENCIN DE


CIDO ITACNICO A PARTIR DE ASPERGILLUS
TERRUS
Juanita Corredor Garca jucorredorga@unal.edu.co

Resumen
Se describe a continuacin el diseo del proceso empleado en la produccin de
cido itacnico, basado en el conocimiento biotecnolgico adquirido. Se realiza
el tratamiento para el microorganismo Aspergillus terrus NRRL 1960, y se
describen las consideraciones para las etapas de pretratamiento de corrientes
de alimentacin, de fermentacin y de salida del proceso. Se definen las
etapas de separacin requeridas, para obtener el producto requerido por el
mercado, y se realiza un anlisis sobre el desarrollo e innovacin que el
proceso va a requerir para que no pierda vigencia el proceso propuesto

Tabla de contenido
Resumen............................................................................................................. 1
cido itacnico y sus principales aplicaciones....................................................2
Definicin del proceso......................................................................................... 2
Seleccin del microorganismo............................................................................ 2
Medio de cultivo.................................................................................................. 3
Fermentacin...................................................................................................... 4
Procesos de separacin....................................................................................... 4
Balance de masa................................................................................................. 5
Alternativas del proceso...................................................................................... 6
Referencias......................................................................................................... 6

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cido itacnico y sus principales aplicaciones


El cido itacnico es un cido diprtico no saturada. La presencia del doble
enlace le aporta caractersticas qumicas activas, como por ejemplo
polimerizar. Es soluble en agua, etanol y otros disolventes.

Figura 1: Frmula molecular del cido itacnico

El cido itacnico tiene mltiples aplicaciones:

Tercer monmero de las fibras de acrilonitrilo, aportndole la capacidad


de teirse fcilmente
Es materia prima para obtener cido citracnico y cido mesacnico
Los steres del cido itacnico se pueden emplear en resinas de
intercambio catinico y como tensoactivos
El monopolmero del cido itacnico sirve para hacer gemas artificiales y
lentes especiales

Definicin del proceso


Se propone que el proceso se realice por lotes (Batch), porque los
microorganismos requieren un tiempo de regeneracin, y porque la cantidad
que se va a producir es pequeo (1000 ton/ao), dato basado en el reporte de
la produccin mundial aproximada (Mitsuyasu, 2009)
Seleccin del microorganismo
Se encuentran reportes en la literatura con estudios para diferentes
microorganismos. Se elige Aspergillus terrus NRRL 1960, en sustrato de
glucosa, porque las condiciones de operacin son relativamente sencillas de
llevar a cabo, y porque el rendimiento reportado al producto de inters es uno
de los mejores. (El-Imam, 2014)

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Se deben verificar 4 aspectos relevantes al recibir el microorganismo:

Identidad: se verifica que se tenga el A. terrus con la modificacin


adecuada NRRL 1960
Pureza: se debe verificar que el A. terrus no venga contaminado con
algn otro microorganismo, para evitar reacciones secundarias y
contaminantes en la reaccin. As mismo, se debe verificar que el
sustrato que mantiene con vida al organismo cuente con las
caractersticas descritas
Viabilidad: Verificar que el microorganismo este vivo
Productividad: Se toma una pequea muestra del organismo y se realiza
una pequea prueba para determinar que existe reproduccin del A
terrus bajo las condiciones de operacin que se proponen

Se realiza el tren de inculo para determinar el crecimiento de la cepa, que


cumpla con el objetivo de produccin que se plantea. Posteriormente se realiza
una liofilizacin, para sublimar el agua sin que se vea afectado el
microorganismo. La presin debe ser de vaco (0.01 mbar) y la temperatura de
(-50C)
Medio de cultivo
El medio de cultivo tiene los nutrientes principales para producir protenas,
fsforo y lo necesario para la proliferacin de los microorganismos. (ATCC,
2014)
La principal fuente de carbono y el compuesto orgnico que formar el sustrato
es la glucosa. (dimetro aproximado 0.5 nm)
Tabla 1: Nutrientes para el medio de cultivo

NaNO3
K2HPO4
MgSO4 7H2O
KCl
FeSO4 7H2O
Agar
Agua
destilada

3.0 g
1.0 g
0.5 g
0.5g
0.01g
15.0 g
900
ml

Para mantener el pH requerido en la solucin, se sugiere adicionar KOH 4mol/L,


para que el rendimiento del proceso Yi/S sea aproximadamente 0,53g/g
sustrato.

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Se deben verificar las condiciones de recepcin de las materias primas, para


saber si las condiciones que se requieren para la operacin son adecuadas. En
este mismo sentido, se realiza un anlisis de las condiciones de
almacenamiento de cada una. El anlisis se realiza a travs de las fichas de
seguridad reportadas en Sigma Aldrich.
Una vez se verifican las condiciones de recepcin y almacenamiento, se realiza
una mezcla de todas las materias primas, a condiciones de temperatura 35C y
tiempo de 24 horas, velocidad de mezclado de 200 rpm. El acondicionamiento
del pH es determinante en la reaccin, pues define el rendimiento de la
reaccin, para la obtencin del producto de inters, y adems, de la produccin
de biomasa. Se recomienda un pH de 3 para aumentar la transferencia de
oxgeno, y por lo tanto, el crecimiento de la biomasa. (United States Patente n
3162582, 1964)
Para que el microorganismo mantenga su identidad, y no existan interferencias
con otras posibles formas de vida existentes en las corrientes de alimento, se
realiza una esterilizacin a 121C durante un tiempo aproximado de 20
minutos.
El tiempo de reduccin logartimica esta descrito por la ecuacin:

log N=log N 0 +

1
t
D

( 0)

En donde N es la poblacin final, N 0 poblacin inicial, D el tiempo de reduccin


logartmica y t es el tiempo. En diferentes estudios se determina la
temperatura apropiada para el proceso de esterilizacin, obteniendo que a
121C el medio de cultivo no va a verse afectado, y se logra el principal
objetivo de la esterilizacin. (Riscaldati, 2000)
El potencial Redox es la capacidad del sustrato para aceptar o donar
electrones. Los ambientes oxidantes desarrollan metabolismos oxidativos. Los
ambientes reductores generan metabolismos fermentativos.
Con las caractersticas que se han descrito anteriormente, se determina que el
medio tiene un potencial Redox oxidativo.
Fermentacin
Para la fermentacin se requiere aire, que debe ser previamente filtrado y con
una demanda de Oxigeno de aproximadamente 20%. La reaccin consume 1.5
moles de O2 por cada mol de cido itacnico producido. La reaccin se favorece
a pH 3 aproximadamente, y una temperatura de 30C. (Riscaldati, 2000)

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El licor obtenido del proceso se filtra para retirar los slidos suspendidos y el
micelio. El micelio se lava con agua destilada, y se seca a temperatura de
102C durante 24 horas. (Lai, 2007)
Procesos de separacin
Los slidos suspendidos, que contienen el cido itacnico, pasan a un proceso
de microfiltracin, que tiene una membrana semipermeable de baja presin
para separar slidos suspendidos, dejando pasar sales y macromolculas. Con
este proceso se separan las sales inorgnicas (NO3, K, Cl, Na, Mg, Fe, SO4)
Se realiza evaporacin, para eliminar el exceso de agua, se propone un proceso
de extraccin lquido con etanol. Para sto, se realiza una evaluacin de la
solubilidad, de acuerdo a datos experimentales reportados en la literatura.
(Yang, 2012)

Solubilidad cido itacnico


0.11
0.1
0.09

Fraccin molar

0.08
0.07
0.06
280

290

300

310

320

330

340

Temperatura (K)

Grfico 1: Solubilidad de cido itacnico en etanol a diferentes temperaturas

Para realizar las operaciones finales de separacin, se propone realizar


cristalizacin, centrifugacin y secado. La condicin del producto final no debe
superar humedad de 0.2%, para poder ser almacenado en bolsas de
polipropileno de 25 kg.
Balance de masa

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Con el objetivo de producir 1000 toneladas/ao, se plantea el balance de masa,


con el rendimiento reportado para un pH 3; 86g/L.
La concentracin de azcar en el medio de cultivo debe ser inferior al 0,5%. De
acuerdo a los rendimientos propuestos en (Riscaldati, 2000), el balance de
materia resulta:
Tabla 2: Balance de masa

producto
Acido itaconico
Sacarosa
Oxigeno
Nutrientes
A. terrus

concentracin ton/ao
1000
540
369,2307692
500
80

Alternativas del proceso


Para reutilizar productos, el proceso podra realizarse en continuo, para as
reutilizar la sacarosa presente en el sustrato. Tambin se puede proponer un
fermentador diferente al tipo Air Lifter, con el fin de obtener mayores
rendimientos a la reaccin.
Aunque las condiciones de pH con el microorganismo A. terrus NRRL 1960
inhibe la produccin de productos no deseados, se puede pensar en una cepa
que opera a condiciones un poco ms extremas, en donde se consideren pH
diferentes, (ms neutrales), lo cual disminuira el costo en los equipos que se
requieren. La modificacin de la cepa podra incluso requerir menos nutrientes
en el proceso, para disminuir los costos asociados al proceso.
Tambin se pueden considerar procesos alternativos a la extraccin slidolquido, con procesos como la adsorcin, esto debido a la facilidad que tienen
los catalizadores (como el carbn activado) de regenerarse fcilmente y
producir un impacto ambiental menos fuerte.
Se requiere un estudio ms amplio para determinar la forma en la que el
micelio podra ser recuperado totalmente, para ser utilizado en el proceso
Referencias
ATCC. (15 de Abril de 2014). Aspergillus terreus Thom, anamorph (ATCC
10020). Obtenido de
http://www.atcc.org/Products/All/10020.aspx#culturemethod
Batti, M. (1964). United States Patente n 3162582.

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El-Imam, A. (2014). Fermentative Itaconic Acid Production. Biodiversity,


Biopospecting and Development, Volumen I Issue I.
Lai, L.-S. (2007). Effects of lactose and glucose on production of itaconic acid
and lovastatin by Aspergillus terreus ATCC 20542. lovastatin by
Aspergillus terreus ATCC 20542, Volume 104, Issue 1, Pag 9-13.
Mitsuyasu, O. (2009). Biotechnological production of itaconic acid and its
biosynthesis in Aspergillus terreus. Applied Microbiology and
Biotechnology, Volumen 84, Pag 597-606.
Riscaldati, E. (2000). Effect of pH and stirring rate on itaconate production by
Aspergillus terreus. Journal of Biotechnology, V 83, Issue 3, Pag 219-230.
Yang, W. (2012). Solubility of itaconic acid in different organic solvents:
Experimental measurement and thermodynamic modeling. Fluid Phase
Equilibria, Volumen 314, Pag 180-184.

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