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Resumen
Las tinciones cumplen un papel muy importante en la observacin de microorganismos
microscpicos como es el caso de las bacterias, ya que permiten teir o fijar sus
estructuras morfolgicas ya sea en estado vivo o inerte. En la prctica realizada se
utiliz especficamente dos tipos de tincin: tincin simple y tincin gram para
diferenciar las formas bacterianas de varios cultivos puros de bacterias. En la primera
muestra por tincin simple se observaron bacilos, en la segunda y tercera muestra
ambas por tincin de Gram se observaron de igual manera bacilos siendo stos Gram
negativos.
Introduccin
Los microorganismos vivos o activos generalmente son incoloros (excepto algas y
cianobacterias), por lo que no se observaran con facilidad en un microscopio ptico de
campo claro debido a la falta de contraste entre las clulas y el medio circundante. La
tincin es un mtodo sencillo para incrementar el contraste entre la clula y su entorno
y por lo tanto contribuye a mejorar la imagen observada. Las tcnicas de tincin con
diversos colorantes facilitan la observacin al aumentar notablemente el contraste,
existen dos tipos de tinciones que son las ms utilizadas con las bacterias: tincin
simple y tincin diferencial de Gram (Ramos, Seplveda, Barragn & Gonzlez, 2012).
La tincin simple o directa utiliza un solo colorante, el cual deber se bsico para que la
clula bacteriana se tia, destacando la morfologa general de la clula de manera
rpida; al emplearse un nico colorante, todas las clulas se observarn del color del
colorante empleado. Los colorantes ms empleados son cristal violeta, azul de
metileno y fucsina fenicada, estos colorantes difieren en la velocidad y grado en que
tien (Cavallini, Coronado, Chavarra & Hidalgo, 2005).
La tincin de Gram es un procedimiento de gran utilidad empleado en los laboratorios
especficamente en donde se manejan pruebas microbiolgicas, se la define tambin
como tincin diferencial, ya que emplea dos colorantes y clasifica a las bacterias en
dos grandes grupos: bacterias Gram negativas y bacterias Gram positivas. La reaccin
Tabla N1: Forma y agrupacin de las clulas bacterianas por tincin simple
Bacteria TG022
Lente 100X
Forma: Bacilos
Agrupacin: Estreptobacilos
Tabla N2: Clasificacin de las bacterias por tincin diferencial de Gram
Bacteria TG024
Bacteria TG123
Lente 100X
Lente 100X
Forma: Bacilos
Gram negativo
Forma: Bacilos
Gram negativo
Discusin
Las tinciones juegan un papel muy importante en la observacin de microorganismos
microscpicos como las bacterias, ya que fijan o tien la estructura morfolgica de
stas. En los laboratorios que manejan principalmente muestras microbiolgicas se
utilizan dos tipos de tincin: la tincin simple y la tincin de Gram. En la presente
prctica al realizar el experimento de tincin simple se utiliz un nico colorante bsico
que fue el azul de metileno, con el fin de teir de manera uniforme a todas las clulas
bacterianas, la coloracin que adquieren stas clulas se debe a que el azul de
metileno es un colorante que posee iones cargados positivamente y las estructuras
celulares de los microorganismos poseen iones cargados negativamente por lo que se
atraen mutuamente y las clulas de los microorganismos se tien. Al observar la
bacteria TG022 (tincin simple) en el lente de inmersin 100x, las clulas bacterianas
presentaron forma cilndrica, forma caracterstica de los bacilos y agrupacin
estreptobacilos ya que consista en una cadena de bacterias unidas de punta a punta.
Tincin Simple
Se utiliza un solo colorante
Proporciona informacin acerca
microorganismos
(Gram
positivos
de los microorganismos.
Gram negativos).
las estructuras
misma tonalidad.
celulares
o
se
El lugol se emplea para retener el color cristal violeta, el I2 entra en las clulas y forma
con el colorante cristal violeta un complejo insoluble en agua.
Escriba las diferencias entre las bacterias Gram positivas y Gram negativas y 2
ejemplos de cada grupo.
Gram positivas
Se tien de color azul o violeta.
Poseen una capa gruesa de
Gram negativas
Se tien de color rosado.
Poseen una capa delgada de
peptidoglicano
Resistencia a la decoloracin.
peptidoglicano.
como el alcohol
Anthrasis.
typhi
Conclusiones
Se identific las diferentes formas y agrupaciones que poseen las bacterias,
principalmente utilizando la tcnica de tincin simple la cual utiliza un nico colorante
bsico, en este caso se utiliz el azul de metileno que tie de manera uniforme a las
clulas bacterianas. La forma que present la bacteria TG022 fue cilndrica es decir
bacilo y agrupacin estreptobacilos.
Se clasific a las bacterias como Gram negativas o Gram positivas, utilizando la tincin
de Gram, que se basa principalmente en la coloracin que presentan las clulas
bacterianas, Las bacterias TG024 y TG123 presentaron color rosado y con forma de
bacilos es decir son Gram negativas. No hubo presencia de bacterias Gram positivas
debido a que no se encontraron clulas bacterianas de color azul violeta.