PRACTICA #8

TITULO: DETERMINACION DE
CLORUROS POR EL METODO
VOLUMETRICO

Alumno: Correa Cortes

Francisco

Universidad Autnoma del Estado de

Morelos
Facultad de Medicina

LABORATORIO DE
BIOQUIMICA
Catedrtico: Leticia Garca Gmez

PRCTICA No. 8
DETERMINACIN DE PROTENAS TOTALES
EN SUERO (Tcnica de Biuret y Verde de
Bromosol)

PRACTICA #8
TITULO: DETERMINACION DE
CLORUROS POR EL METODO
VOLUMETRICO

Alumno: Correa Cortes

Francisco

Alumno: Correa Cortes Francisco

Equipo 6
Grupo: 1 A

OBJETIVOS
1. Conocer los mecanismos de absorcin y digestin de protenas.
2. Conocer las principales vas metablicas de las protenas.
3. Conocer algunas implicaciones clnicas de alteraciones en el metabolismo de las
protenas.

HIPTESIS
La cantidad de protenas en suero puede ser indicativo de ciertas enfermedades,
ms no puede dar su diagnstico. Para poder hacer un buen diagnstico debe
complementarse con otras pruebas.

INTRODUCCIN
Generalidades
Las protenas sricas constituyen un micro ambiente muy variado. Son fuente de
nutricin y un sistema amortiguador. Las inmunoglobulinas y protenas similares
funcionan como factores inmunolgicos. Las protenas transportadoras (por Ej.
Haptoglobina, prealbumina y transferina) acarrean ciertos iones y molculas hacia
su destino. Las antiproteasas (por Ej. Antitripsina alfa y macroglobulina alfa 2)
regulan la actividad de las enzimas proteolticas y de otros tipos de protenas que
ajustan la presin oncotica, las presiones del componente gentico (cromosmico)
y las sustancias metablicas (hormonas). El componente monoclonal de las
inmunoglobulinas se busca en el suero y la orina mediante electroforesis de
protena sericas (SPEP). Las inmunoglobulinas son el principal componente de la
fraccin de globulinas gama sericas. En el individuo sano, las inmunoglobulinas
son policlonales y no monoclonales. Cuando aparece una banda monoclonal,
significa que existe un proceso neoplsico, como mieloma mltiple o
macroglobulinemia de Waldenstrm. La SPEP facilita otras tcnicas de control,
como la cuantificacin especifica de ciertas inmunoglobulinas (IgA, IgG, IgM) y la
inmunofijacin. Constituye una de las mejores herramientas para precisar de
manera general la salud del ser humano.

Explicacin de la prueba.
Estas pruebas ayudan a diagnosticar algunas enfermedades inflamatorias y
neoplsicas, sndrome nefrtico, hepatopatias y disfunciones inmunolgicas y

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ayudan a valorar la nutricin y las presiones osmticas en el paciente edematoso y

desnutrido. La electroforesis de protenas sericas separa.

Descripcin
Las protenas sricas totales reflejan la cantidad total de albmina y de
globulinas en el suero. Las protenas sricas, que se producen en el hgado y en
el sistema reticuloendotelial, constituyen mas de 100 sustancias diferentes
agrupadas como albmina y globulinas. Las protenas sericas son esenciales para
la regulacin de la presin osmtica coloide y comprenden los factores de
coagulacin para la hemostasis, enzimas, hormonas, sustancias para la
reparacin y crecimiento tisular, y amortiguadores del pH. Son parte de
anticuerpos, de componentes transportadores sanguneos (bilirrubina, calcio,
lpidos, metales, oxigeno, esteroides, hormonas tiroideas y vitaminas) y de
conservadores de los cromosomas.

MATERIAL, REACTIVOS, EQUIPOS

4 Tubos de ensaye de 13 x 100
1 pipeta de Shal
1 Gradilla
1 boquilla
1 pipeta de 10 mL
Bao Mara
Centrifuga
Espectrofotmetro
Solucin de trabajo. (Reactivo de Biuret)
Estndar de Protenas
Suero problema

MTODO:
1.- Centrifugar la muestra para obtencin de suero.
2.- Preparar tres tubos de ensaye de 13 x 100, rotularlos como Blanco, Estndar y
Problema
3.- Colocar en cada tubo como se indica en el siguiente cuadro:
SOLUCIN
Reactivo de trabajo
Solucin Estndar
Problema

BLANCO
1.0 mL

ESTNDAR
1.0 mL
0.02 mL

PROBLEMA
1.0 mL
0.02mL

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Incubar a 37 C durante 10 min; Leer en el espectrofotmetro a 520 nm.

CLCULOS:
Pb: Lectura de D.O. problema
St: Lectura de D.O. Estndar.

PT= D.O. muestra X Valor del S T / D.O. Estndar

Obtenemos:

g/dl.

Valor normal de Protenas Totales: 6.0 a 8.3 g/dl.

RESULTADOS

( dlg ) ( 0.581 )=4 .067 g /dL

PT= 7

Rango normal: 6.6-8.3 mg/dL

DISCUSIN
De acuerdo al resultado, el donador de la muestra presenta una hipoproteinemia,
es decir, una concentracin de protenas ms baja que el rango normal. Esto
puede ser indicativo de agammaglobulinemia, ascitis, hemorragias, enfermedades
renales (glomerulonefritis, sndrome nefrtico, entre otros). Sin embargo, este
resultado puede estar errneo debido a una mala medicin de volmenes, error
comn para las personas que no estn acostumbradas a la medicin de
volmenes. Al trabajar con volmenes tan pequeos, del orden de micras, un
pequeo error, como una gota de ms o de menos, puede considerarse como un
aumento o disminucin del 50%, por mencionar un ejemplo. Como menciona la
hiptesis, esta prueba no es diagnstica, sino que simplemente da un indicativo
acerca de ciertas enfermedades, las cuales deben corroborarse con otras pruebas
de laboratorio, adems de un buen diagnstico clnico.

CONCLUSIN
La cuantificacin de protenas en suero es una prueba complementaria, que nos
ayudar con el diagnstico de ciertas enfermedades, ms no nos lo dar entero.

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Francisco

Como mdicos debemos ser capaces de ver al enfermo y distinguir los signos y
sntomas de las enfermedades, y despus corroborarlas con las pruebas de
laboratorio.

CUESTIONARIO
1.- Qu son las protenas?
Son macromolculas compuestas por aminocidos unidos entre s por enlace
peptdico. Tienen una estructura primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria.
2.-Cules son las funciones que desempean las protenas las principales?
Transporte, estructural, cataltica, defensiva, hormonal, homeosttica.
3.-Cmo estn constituidas la estructura y sus enlaces cules son?
Primaria: secuencia de aminocidos. Enlace peptdico.
Secundaria: alfa-hlices y plegamientos beta. Interacciones no covalentes.
Terciaria: motivo, dominio, subunidad. Enlaces no covalentes.
Cuaternaria: subunidades unidas por enlaces covalentes.
4.-En la naturaleza se encuentran cuantas aminocidos y cuantos
protenas?
20 aminocidos son los que se considera son usados en los organismos vivos,
aunque estos pueden sufrir ciertas alteraciones dando como resultado otros
aminocidos. Slo en el cuerpo humano, se han identificado ms de 486,000
protenas.
5.-Cules son los dos tipos de ismeros y a que depende?
Dextrgiros y levgiros, depende de su capacidad de desviar la luz polarizada,
aunque en realidad se clasifican tomando como base la estructura del glicerol.
6.-Cules son los aminocidos esenciales y no esenciales por lo menos
cuatro de cada uno?
Esenciales: Metionina, histidina, isoleucina, lisina, fenilalanina
No esenciales: cido glutmico, arginina, serina, alanina, tirosina.
7.-Menciona los mtodos de separacin de los aminocidos y en qu
consiste cada uno de ellos?
Electroforesis, se basa en el punto isoelctrico de cada aminocido.

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Cromatografa de capa fina. Este mtodo se basa en la separacin de las

molculas adsorbidas a una capa muy delgada de gel de slice, mediante el flujo
de una columna de solvente que se deja ascender mediante capilaridad. La
separacin se realiza en base a la polaridad de las molculas y la mezcla de
solventes ms empleada ha sido butanol- agua-acido actico.
Cromatografa lquida en columnas de intercambio aninico. Los aminocidos se
hacen pasar por una columna de resina con un grupo catinico.
Cromatografa lquida de alta resolucin en columnas de fase reversa. Este
mtodo consiste en aplicar los aminocidos disueltos en una fase acuosa
acidificada a una columna de slice unida a una cadena hidrocarbonada.
8.-Qu son los enlaces peptdicos?
Son los enlaces formados por el grupo carboxilo-terminal y amino-terminal de otro
aminocido.
9.-Qu es la albumina y donde se encuentra en el organismo?
La albmina es una protena producida por el hgado. El examen de albmina en
suero mide la cantidad de esta protena en la parte lquida y transparente de la
sangre. Se encuentra en suero sanguneo.
10.-Menciona la importancia de la estructura y la fisiologa celular ?
Las protenas tienen una funcin muy importante tanto en la estructura como en la
fisiologa de la clula, pues entre sus funciones se encuentran las que mantienen
a la clula viva. En primer lugar, el cdigo gentico se expresa a partir de
protenas, las cuales tienen muchas funciones. La funcin estructural es la que
forma al Citoesqueleto de la clula, adems de que inmersas en la membrana hay
muchas protenas. Funcionalmente, las protenas sirven como mensajeros
intercelulares, transportan a otras molculas, sirven de defensa contra agentes
extraos, entre otros.
11.-Describe la funcin biolgica de las protenas cinco de ellas en el
siguiente orden: tipos, ejemplos y funciones?
Tipos

Ejemplos

Funciones

Transporte

Hemoglobina, albmina

Transportan
macromolculas.

Estructurales

Colgeno

Son fibrosas, ayudan a

mantener la estructura
celular y de los tejidos.

Enzimas

Pepsina, tripsina

Catalizan
biolgicas,

otras

reacciones
rompen

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enlaces, etc.

Defensa

Inmunoglobulinas A, D, E, Defensiva,
M, G
inmunitario

Hormonal

Oxitocina

sistema

Son mensajeros qumicos

12.-Los aminocidos posee diferentes cargas cuales son y qu ocurre con

estas cargas?
Puede ser positiva (bsicos), negativa (cidos) o neutros. Estas cargas estn
dadas por las cadenas laterales de la estructura del aminocido.
13.-En la prctica que realizo nos ayuda en apoyo de diagnostico en las
enfermedades ?
Hipoproteinemia: agammaglobulinemia, ascitis, hemorragias,
renales como glomerulonefritis, sndrome nefrtico.

enfermedades

Hiperproteinemia: enfermedades inflamatorias crnicas, enfermedades infecciosas

crnicas.
14.-Menciona los diferentes Estructura y que clasificacin tienen cada una?
Primaria: secuencia de aminocidos. Enlace peptdico.
Secundaria: alfa-hlices y plegamientos beta. Interacciones no covalentes.
Terciaria: motivo, dominio, subunidad. Enlaces no covalentes.
Cuaternaria: subunidades unidas por enlaces covalentes.

15.-Cules son las Estructurales supramoleculares?

En ocasiones las protenas asociadas a otras molculas se ensamblan formando
estructuras ms complejas denominadas supramoleculares y que ofrecen ventajas
de una unidad funcional, teniendo en cuenta una complejidad intermedia entre la
conformacin cuaternaria de las protenas oligomricas por un lado y los
lisosomas o las mitocondrias por otro. Ejemplos son los virus y los ribosomas.

BIBLIOGRAFA

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http://demedicina.com/aminocidos-esenciales-y-no-esenciales/
http://depa.fquim.unam.mx/proteinas/estructura/EPamm2.html#AAcuant
http://es.wikipedia.org/wiki/Hormona_pept%C3%ADdica}
http://biologia.laguia2000.com/bioquimica/propiedades-de-los-aminoacidos

REPORTE:
1.

Hiperproteinemia: enfermedades inflamatorias crnicas, enfermedades

infecciosas crnicas.
La hiperproteinemia es una condicin que se caracteriza por el aumento de la
concentracin de protenas en suero. En la hiperproteinemia debida a deshidratacin,
la proporcin entre las diferentes fracciones proteicas se mantiene normal. En las
hiperproteinemias absolutas hay un incremento de una o varias fracciones. Las alfa
globulinas pueden estar aumentadas en cuadros inflamatorios agudos y en el inicio o
reagudizacin de procesos crnicos. Las beta y gamma globulinas pueden estar
incrementadas en forma de gammapata policlonal en cuadros inflamatorios crnicos
y como gammapata monoclonal en enfermedades linfoproliferativas (mieloma
mltiple, ciertos plasmocitomas, linfomas y leucemias). Debe hacerse pruebas
cuantitativas de protenas.
2.
Hipoproteinemia: agammaglobulinemia, ascitis, hemorragias, enfermedades
renales como glomerulonefritis, sndrome nefrtico.
Ascitis:
Recoleccin de orina en 24 horas
Creatinina y electrolitos
Pruebas de la funcin renal
Pruebas de enzimas hepticas, bilirrubina, coagulacin y protena en suero
Anlisis de orina
Sndrome nefrtico:
Examen de albmina en la sangre
Exmenes de qumica sangunea tales como grupo de pruebas metablicas bsicas
y el grupo de pruebas metablicas completas
Nitrgeno ureico en sangre (BUN)
Examen de creatinina en la sangre
Depuracin de creatinina, examen de orina
Anlisis de orina

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