EDUCACIN CONTINUADA EN EL LABORATORIO CLNICO

Ed Cont Lab Cln 2007; 10:41-49

MONITORIZACIN DE FRMACOS
Jacobo Daz Portillo
Servicio de Anlisis Clnicos, Hospital INGESA de Ceuta.

INTRODUCCION
El objetivo fundamental de la monitorizacin del
tratamiento farmacolgico, es el ajuste de la dosis
del frmaco en funcin de sus concentraciones
plasmticas, y se basa en la relacin proporcional
entre dichas concentraciones y la respuesta farmacolgica del frmaco cuando llega a la biofase
(Figura 1).

Figura 2. Interaccin del frmaco con los

receptores

PRINCIPIOS BASICOS DE FARMACOCINTICA

Figura 1. Relacin entre la dosis del frmaco, la

concentracin plasmtica y la respuesta farmacolgica.

El principal objetivo de la farmacocintica clnica

es la individualizacin posolgica u optimizacin
de los tratamientos, a fin de alcanzar la mxima
eficacia teraputica con la mnima incidencia de
efectos adversos.
Los principales parmetros farmacocinticos
son:
Intervalo teraputico

El medicamento llega al plasma, tras ser absorbido en el tracto gastrointestinal o directamente por
va parenteral, donde puede permanecer libre o
unirse a protenas. Cuando llega al lugar de accin
puede interaccionar con receptores no efectivos
o efectivos, originando su accin farmacolgica
solo cuando llega a la biofase (Figura 2).

Viene definido por la concentracin plasmtica

mnima txica (CmT) y la concentracin mnima
efectiva (CmE). Es el rango de concentraciones
plasmticas del frmaco que el tratamiento es
eficaz y se observa un mnimo de efectos adversos no deseados en la mayora de los pacientes.
Cuanto ms estrecho sea este intervalo, mayor
necesidad de monitorizacin (Figura 3).

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J. Daz Portillo. Monitorizacin de frmacos

Aclaramiento
Mide la eficacia con la que el organismo es capaz
de eliminar el frmaco. Se define como la cantidad de plasma que se encuentra libre del frmaco
en una unidad de tiempo.
Cl = v / [F] = Velocidad de eliminacin / concentracin del frmaco.
Cl = D / ABC = Dosis / ABC
ABC: es el rea bajo la curva que representa
la concentracin plasmtica frente al tiempo

Figura 3. Intervalo teraputico (IT): rango de

concentraciones entre las cuales el tratamiento
es eficaz (TE). (Cp = concentracin plasmtica)

Volumen de distribucin (Vd)

El volumen de distribucin representa el espacio
en el que se distribuye el medicamento. Se calcula mediante la relacin entre el aclaramiento (Cl) y
la constante de eliminacin (K); o por medio de la
relacin entre la dosis administrada (D) y la concentracin plasmtica del frmaco a tiempo cero
[F]:

Cuando un frmaco como la ciclosporina o tacrolimus se distribuye no slo por el compartimento

vascular, sino tambin por otros compartimentos
o es fijado por clulas (eritrocitos, leucocitos) o
molculas, se aprecia una dilucin del compartimento plasmtico por un aparente aumento de
volumen, ya que la dosis es constante (Vd=9 L/
Kg). La digoxina se fija adems a la musculatura
esqueltica y miocrdica, al hgado y al rin, lo
que justifica su elevado volumen de distribucin
(7-9 L/Kg). Los antidepresivos tricclicos (amitriptilina, nortriptilina, imipramina y desimipramina)
son muy lipoflicos, y por tanto tambin presentan
un gran volumen de distribucin (6-30 L/Kg). El
resto de los frmacos frecuentemente monitorizados (teofilina, lidocana, fenobarbital, fenitona,
carbamacepina, cido valproico, aminoglucsidos, metotrexate, y litio) presenta un volumen de
distribucin ms pequeo.

La eliminacin de algunos frmacos que saturan

los sistemas enzimticos, sigue el modelo de Michaelis-Menten. Es interesante establecer una
diferenciacin entre los frmacos que presentan
una cintica lineal y los que se ajustan a una cintica no lineal dependiente de la dosis administrada.
La mayora de los frmacos presentan una relacin lineal entre las dosis administradas y los
niveles plasmticos obtenidos (cintica lineal),
es decir, que aunque se modifique la dosis las
caractersticas farmacocinticas de absorcin,
distribucin, metabolizacin y eliminacin del frmaco no varan. Sin embargo, existen algunos
frmacos como la fenitona (difenilhidantona) que
saturan los sistemas enzimticos encargados de
su metabolismo a concentraciones prximas a las
teraputicas, es decir que al modificar la dosis
administrada se alteran dichas caractersticas farmacocinticas, presentando una cintica de tipo
NO LINEAL (cintica dependiente de la dosis). La
velocidad de eliminacin de estos frmacos es independiente de la concentracin, y su representacin frente a la velocidad es una parbola, por
lo que tambin se denomina cintica NO LINEAL
o cintica de ORDEN CERO (Figura 4).
El modelo para representar la eliminacin de estos frmacos es el de Michaelis-Menten, siendo
Vm la velocidad mxima de transformacin, y Km
la constante de Michaelis (concentracin de sustrato a la cual la velocidad enzimtica es la mitad
de la velocidad mxima).
La teofilina, digoxina, fenobarbital, carbamacepina y cido valproico son frmacos que presentan
una cintica lineal, mientras que la fenitona se
ajusta a un modelo no lineal dosis-dependiente,
y por tanto su eliminacin sigue la cintica de Michaelis-Menten. Sin embargo, si las concentraciones alcanzadas son muy altas, como ocurre en
la intoxicacin o sobredosificacin por teofilina

J. Daz Portillo. Monitorizacin de frmacos

tambin se puede alcanzar una saturacin de las

enzimas hepticas encargadas de la biotransformacin del frmaco (cintica NO LINEAL-ORDEN
CERO).

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La representacin grfica de la velocidad de metabolizacin-eliminacin del frmaco (v) frente

a la concentracin de sustrato [F] es una curva
hiperblica donde se observa como la velocidad
mxima de la reaccin (Vmax) se alcanzar cuando todo el enzima se encuentre unido al frmaco.
Del anlisis matemtico de la curva hiperblica
[F] frente a v se deduce una expresin que define
el comportamiento farmacocintico de algunos
frmacos;

Es la ecuacin de Michaelis-Menten, donde:

Figura 4. Diferencias en la concentracin plasmtica para una misma dosis de frmaco segn
siga una cintica lineal (de primer orden) o no
lineal (de orden cero).
La fenitona es el frmaco de eleccin en la epilepsia y en las crisis generalizadas tnico-clnicas (estatus epilptico). Su farmacocintica de
eliminacin no se ajusta a una cintica lineal (primer orden), por lo que es necesario conocer en
cada paciente la constante de Michaelis-Menten
(Km) y la velocidad mxima de metabolizacin
(Vmax)(cintica no lineal-orden cero).
Michaelis y Menten formularon la teora del estado estacionario para explicar la cintica de
reaccin de los enzimas no alostricos. En farmacocintica, se habla de cintica de MichaelisMenten al conjunto de ecuaciones que describen
la velocidad de metabolizacin de un frmaco en
un proceso saturable en funcin de dos constantes, la velocidad mxima (Vm) y la constante de
Michaelis (Km). Esta teora se puede aplicar a la
cintica de algunos medicamentos como la teofilina, que presenta una cintica de primer orden a
dosis teraputicas, y una cintica de saturacin
(orden cero) a dosis txicas (intoxicacin aguda).
Esta teora supone que cuando un substrato, en
este caso un frmaco (F) se transforma en un producto o metabolito (M) en presencia de un enzima
especfico (E), ste se une al frmaco formando
un complejo enzima-substrato (E-F), que se desdobla en E ms metabolito, segn la ecuacin:

Vm = velocidad mxima de metabolizacin y

representa el nmero de enzimas metabolizadoras
Km = constante de Michaelis
Km = K2 + K3 / K1
De igual forma, el aclaramiento de un frmaco se
define como el volumen de plasma que es totalmente liberado de frmaco por unidad de tiempo,
y se expresa por la ecuacin:

donde Cl es el aclaramiento y v es la velocidad

de eliminacin. Utilizando la expresin de la cintica de Michaelis-Menten, podemos expresar el
aclaramiento en funcin de la Km y Vm

Si igualamos ambas expresiones, obtenemos una

expresin matemtica que define el aclaramiento
en trminos generales;

La constante de Michaelis (Km) es una magnitud

caracterstica de cada frmaco. Es numricamente igual a aquella concentracin de frmaco con
la cual la velocidad de reaccin (v) es la mitad de
la velocidad mxima (Vm).

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J. Daz Portillo. Monitorizacin de frmacos

En la prctica, podemos diferenciar dos situaciones distintas en funcin de la concentracin de

frmaco.
Cuando trabajamos con pequeas concentraciones de frmaco ([F] 0), la ecuacin se simplifica, y como el valor de Km es mucho mayor que
[F], entonces Km + [F] = Km. En estas circunstancias la expresin se reduce a

Es decir, a bajas concentraciones de frmaco la

velocidad de la reaccin es directamente proporcional a su concentracin plasmtica, por tanto el
orden de la reaccin ser uno (PRIMER ORDEN)
e independiente de su aclaramiento plasmtico
(Cl). Es lo que ocurre con la teofilina a dosis teraputicas.
La cintica de PRIMER ORDEN es un proceso
en el cual la cantidad de frmaco metabolizado,
excretado o distribuido es directamente proporcional a la concentracin [F] de dicho frmaco.
En una cintica de primer orden la fraccin biodisponible, el aclaramiento, el volumen de distribucin y el tiempo de vida media son constantes
e independientes de la dosis administrada o de la
concentracin srica del frmaco.
En otras ocasiones la concentracin de frmaco
es muy alta, y por tanto el valor de Km es despreciable frente a [F]; Km + [F] [F]. Simplificando,
la velocidad de reaccin se hace prcticamente
constante, e igual a la velocidad mxima de metabolizacin (v Vm), por tanto en estas condiciones
la velocidad de reaccin se hace independiente de
la concentracin de frmaco, es decir se tratara
de una reaccin de ORDEN CERO. Por tanto, la
cintica de orden cero es un proceso que ocurre
con una velocidad constante, independiente de la
concentracin plasmtica del frmaco. En este
caso, la expresin matemtica del aclaramiento
se reduce a Cl = Vm / [F] (Figura 5). Es el caso de
la sobredosificacin o intoxicacin por teofilina.
La induccin enzimtica puede condicionar el tipo
de cintica. El fenobarbital induce su propio metabolismo (enzimas microsomales) de forma que
sus niveles de concentracin srica no siguen
una cintica de primer orden (orden cero).

Figura 5. Cintica de primer orden y cintica de

orden cero. (Vm = velocidad mxima de metabolizacin; Cl = aclaramiento del frmaco; Km =
constante de Michaelis; [F] = concentracin del
frmaco).
Tiempo de vida media
Es el tiempo necesario para que la concentracin
plasmtica del frmaco se reduzca a la mitad.
Viene definida por siguiente expresin matemtica en cintica lineal o de primer orden. Se calcula
a partir de la constante de eliminacin Ke:

Expresin matemtica que representa la cintica

de 1 Orden, para una concentracin C a tiempo
t1, siendo C0 la concentracin a t0.

Para una concentracin: C/2, tendremos que

multiplicando por -1 esta ecuacin y restando de

la anterior

pero (t2-t1) = t1/2 (vida media) 0,693 = ke x t1/2

de donde t1/2 = 0,693 /Ke (Figura 6).

J. Daz Portillo. Monitorizacin de frmacos

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La respuesta biolgica a un frmaco esta influenciada por una serie de factores o circunstancias
que pueden ser:
Falta de cumplimiento en el tratamiento

Figura 6. Concepto de tiempo de vida media.

(Co = concentracin a tiempo 0; Ct = concentracin a tiempo t; Ke = constante de eliminacin; t1/2
= tiempo de vida media)
PRINCIPIOS BSICOS DE MONITORIZACIN
La monitorizacin de frmacos, se basa en los
principios de farmacocintica, que es el estudio
del destino en el tiempo del frmaco y sus metabolitos. La determinacin de niveles plasmticos de frmacos se realiza en el llamado estado
de equilibrio estacionario (ingestin y excrecin
constantes), el cual se alcanza una vez transcurrido entre 4 y 5 veces el tiempo de semivida de
eliminacin o vida media del frmaco (Figura 7).
En el caso de la digoxina para un paciente con
funcin renal normal la vida media de la digoxina
es de unas 36 horas, por tanto ser necesario que
transcurran entre 5 y 7 das (36 x 4-5/24=6-7,5
das).

Figura 7. Estado de equilibrio estacionario. Se

produce cuando la cantidad de medicamento que
se administra durante un intervalo de tiempo es
igual a la que se elimina, mantenindose constantes los niveles plamticos del frmaco.

Ante un efecto teraputico insuficiente, con concentraciones plasmticas inferiores a las teraputicas hay que distinguir entre falta de cumplimiento y la malabsorcin o metabolismo acelerado del
frmaco. Para ello se efectuarn determinaciones
seriadas del frmaco durante un periodo de tiempo equivalente a 5 vidas medias. Si se observa un
aumento progresivo en la concentracin plasmtica, descartamos la malabsorcin o aceleracin
del metabolismo.
Absorcin
La absorcin de un frmaco en el tracto digestivo
est influida por: la forma galnica, la solubilidad,
pKa del frmaco, la administracin conjunta de
otros frmacos, etc. Cuando se sospecha trastornos en la absorcin de un determinado frmaco
se deben realizar determinaciones plasmticas
seriadas tras una dosis nica de administracin
parenteral, y compararlas con las obtenidas cuando el frmaco se administra por va oral. El clculo de la concentracin mxima (Cmax) y vida media plasmtica (t1/2) permiten excluir un problema
de malabsorcin. Esta grfica permite el clculo
de la biodisponibilidad, o rea bajo la curva AUC
(Figura 8).

Figura 8. Comparacin de la administracin de

un frmaco por via oral y por via parenteral para
calcular la biodisponibilidad. (Cp = concentracin
plasmtica; Cmx = concentracin mxima; tmx
= tiempo en el que se consigue la mxima concentracin; AUC = rea bajo la curva).

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Fijacin a protenas plasmticas

El frmaco, una vez absorbido pasa al plasma,
donde se une en mayor o menor grado a las protenas plasmtica, segn el siguiente equilibrio:

J. Daz Portillo. Monitorizacin de frmacos

los efectos teraputicos o txicos del mismo. Sin

embargo, esto tambin sucede para la concentracin de ciclosporina A en sangre total o plasma.
Por tanto, en humanos la actividad biolgica de
la ciclosporina A depende de las concentraciones
de lpidos plasmticos y, por tanto, de su unin a
las lipoprotenas.

La fraccin no unida a protenas (frmaco libre)

es la que puede atravesar la barrera endotelial
y alcanzar las clulas diana. La afinidad de los
frmacos por las protenas est condicionada por
las caractersticas fsico-qumicas tanto del frmaco como de las protenas plasmticas. As los
antidepresivos tricclicos (amitriptilina, nortriptilina
y imipramina) son muy lipoflicos, y por tanto poseen un gran volumen de distribucin aparente.
Se unen fuertemente a las protenas plasmticas,
sobre todo a la albmina, a los leucocitos, alfa1-glicoprotenas y lipoprotenas. Mientras que tacrolimus es altamente liposoluble y se distribuye
extensamente en tejidos, como refleja su elevado
volumen de distribucin (1300L). El componente farmacolgicamente activo del tacrolimus es
la fraccin plasmtica no unida a protenas. En
plasma, el frmaco se encuentra mayoritariamente unido a protenas plasmticas (88 %), principalmente albmina y alfa-1-glicoprotena cida.
En sangre, tacrolimus se une intensamente a los
eritrocitos de tal forma que las concentraciones
obtenidas en sangre total son de 10 a 30 veces
ms elevadas que en el plasma.

Casi todos los procedimientos analticos utilizados en este momento, miden concentraciones de
frmaco total (libre + unido), aunque a veces es
necesario determinar las dos fracciones. Esto se
consigue con mtodos cromatogrficos, o utilizando saliva como muestra (fraccin libre).

En la farmacocintica de la ciclosporina A juegan

un papel fundamental las lipoprotenas plasmticas y, probablemente, en el potencial teraputico y txico del frmaco. La ciclosporina A no es
directamente soluble en sangre por su superficie
hidrofbica. En el compartimiento extravascular la
ciclosporina A se une a los puntos hidrofbicos
de las protenas de la membrana celular y en el
compartimiento vascular en un 40 %, aproximadamente se une a los eritrocitos y leucocitos y el
resto, un 60 % circula unido a las lipoprotenas
plasmticas (HDL y LDL). Una pequea porcin
restante se asocia a la fraccin plasmtica proteica (no lipoproteica), y menos de un 5 % de la
ciclosporina A se encuentra libre en el plasma
acuoso. Contradiciendo un axioma farmacolgico
mediante el cual el efecto de un frmaco guarda
una relacin directa con el porcentaje del mismo
libre en plasma (no unido a protenas), en el caso
de la ciclosporina A no parece existir una correlacin entre la concentracin libre del frmaco y

Los lmites teraputicos de los frmacos en

los que se ha demostrado correlacin entre su
concentracin plasmtica y la eficacia clnica,
se basan en la concentracin plasmtica total.
Generalmente la fraccin libre del frmaco (FL)
permanece prcticamente constante, justificando
la determinacin de la concentracin plasmtica
total como gua teraputica. Sin embargo, en determinadas situaciones, se puede modificar notablemente el grado de unin de los frmacos a las
protenas plasmticas transportadoras, aumentando su fraccin libre, producindose una rpida disociacin entre sus concentraciones total y
libre. En estas circunstancias los lmites teraputicos establecidos pueden modificarse. Estas circunstancias que afectan a los lmites teraputicos
pueden ser: fisiolgicas, farmacolgicas y patolgicas.

La fraccin libre de un frmaco se define como la

proporcin del total del frmaco en el plasma que
no se encuentra unido a protenas. Es decir, es el
resultado del cociente entre las concentraciones
plasmticas libre y total
Fraccin libre (FL) =
[Frmaco libre] / [Frmaco total]
Su valor vara entre cero (todo el frmaco est
unido a las protenas), y 1 (no existe frmaco unido a las protenas). Hay frmacos muy unidos a
las protenas plasmticas, y por tanto con una
fraccin libre prxima a 0 como la ciclosporina
(FL=0,02), fenitona y cido valproico (FL=0,1),
carbamacepina (FL=0,25). Otros apenas unidos
como la digoxina (FL=0,75), aminoglucsidos
(FL=0,75-1,0), y el litio (FL=1,0).

J. Daz Portillo. Monitorizacin de frmacos

1.- Fisiolgicas
Descenso de la albmina plasmtica
(neonatos, gestantes y ancianos).
Aumentos de los cidos grasos libres
(ejercicio fsico, ayuno y embarazo).

2.- Farmacolgicas
Administracin simultnea por va intravenosa de frmacos que compiten por la
unin.
Utilizacin de frmacos cuya unin a protenas es concentracin-dependiente (disopiramida, cido valproico, paracetamol,
AAS o lidocana).

3.- Patolgicas

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Metabolismo del frmaco

Generalmente se metabolizan en hgado y rin,
por lo que variaciones fisiopatolgicas en estos
sistemas afectan el metabolismo del frmaco. El
conocimiento de la metabolizacin de los frmacos puede ser importante cuando sus metabolitos presenta una actividad farmacolgica similar
al frmaco original. As, la primidona es un profrmaco del fenobarbital. El principal metabolito
de la carbamacepina es el 10-11 epxido, que
presenta una actividad anticonvulsivante superior
a la carbamacepina. La procainamida se metaboliza a N-acetil-procainamida, metabolito activo
que presenta una vida media superior, y por tanto
pueden aparecer fenmenos de intoxicacin que
no se pueden confirmar analticamente si slo
monitorizamos la procainamida. La amitriptilina
es un antidepresivo tricclico cuyo principal metabolito, la nortriptilina es tambin activo.

Estados que cursan con hipoalbuminemia.

Sndrome nefrtico.

Excrecin del frmaco

Cirrosis heptica (insuficiencia heptica).

La ruta ms importante de excrecin es la va renal, por tanto una insuficiencia renal tiende a aumentar la concentracin plasmtica del frmaco.
Otra va de excrecin que puede variar la concentracin plasmtica es la va biliar (circulacin
enteroheptica) (Figura 9).

Quemaduras.
Aumento de la alfa-1-glicoprotena cida
(infarto agudo de miocardio, neoplasias y
enfermedades inflamatorias crnicas).
Aumento de compuestos endgenos (bilirrubina).
En estas circunstancias est justificada la determinacin de la concentracin plasmtica de la
fraccin libre en frmacos que se unen con gran
afinidad a las protenas plasmticas (fraccin libre
inferior al 0,20) es decir que se encuentran unido
en ms de un 80 % a las protenas plasmticas.
En algunas situaciones clnicas es fundamental la
monitorizacin de la fraccin libre del frmaco, el
ejemplo ms evidente aparece con la politerapia
cido valproico-fenitona. Estara indicada en los
casos siguientes:
1. Cirrosis heptica (hipoalbuminemia)
2. Sndrome nefrtico (hipoalbuminemia)
3. Insuficiencia renal (cambios de afinidad)
4. Administracin simultnea con cido acetilsaliclico (desplazamiento de la unin a protenas plasmticas)

Figura 9. Absorcin, biotransformacin y excrecin de los frmacos.

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J. Daz Portillo. Monitorizacin de frmacos

INDICACIONES PARA LA MONITORIZACIN

La monitorizacin de frmacos no es aconsejable
ni factible para todos los frmacos. Los criterios
a emplear para monitorizar las concentraciones
plasmticas de un frmaco deben basarse en las
propiedades intrnsecas del principio activo y del
estado clnico del paciente. La monitorizacin de
las concentraciones plasmticas de un frmaco
es de gran utilidad para valorar la efectividad clnica en los siguientes casos:
1. Elevada variabilidad interindividual.
2. Estrecho margen teraputico (como ocurre
con la digoxina)
3. Ausencia de correlacin dosis-eficacia teraputica.
4. Relacin entre las concentraciones de frmaco en fluidos biolgicos y su eficacia-toxicidad.
5. Factores patolgicos. Entre ellos los ms
importantes por su importancia en el metabolismo y excrecin de los medicamentos estn
las enfermedades hepticas y renales.
6. Vigilancia teraputica del tratamiento prescrito. Sospecha de incumplimiento de la prescripcin.
7. Interacciones farmacolgicas producidas
en la politerapia.
8. Sospecha de alteraciones en la biodisponibilidad de la forma farmacutica.
Sin embargo, si los datos suministrados por el laboratorio no se contemplan bajo una adecuada
perspectiva clnica, la monitorizacin de los niveles plasmticos de los frmacos pueden introducir ms confusin que claridad y llevar a tomar
decisiones arriesgadas sobre la dosificacin.

Toma de Muestra
1. La toma de muestra debe hacerse siempre en el valle (inmediatamente antes de la
prxima dosis).
2. El paciente debe de haber alcanzado el estado estacionario (5 vidas medias)

rar una completa distribucin del frmaco (las

muestras para la determinacin de digoxina
deben obtenerse despus de al menos 12 horas tras la ltima dosis oral).

TCNICAS ANALTICAS PARA LA MONITORIZACIN DE FRMACOS

Tcnicas inmunoqumicas
1. EMIT (Enzyme Multiplied Inmunoassay
Technique)
Es un ensayo donde se establece una competencia entre el frmaco marcado con enzima (F-E)
exgeno o trazador y el frmaco libre F (presente en el suero), por su unin con un anticuerpo
especfico (unin competitiva). La concentracin
del frmaco se determina midiendo la cantidad
del complejo F-E libre, sin unir al anticuerpo,
que queda en el medio de reaccin. La medida
se realiza por espectrofotometra visible, ya que
el complejo F-E libre reacciona con un sustrato
especfico coloreado cuya absorbancia es directamente proporcional a la concentracin del frmaco en la muestra.

2. Inmunoensayo de polarizacin de fluorescencia FPIA

Se incuban anticuerpos especficos (Ac), con frmaco del suero F y con el trazador T (frmaco
unido a la fluorescena). Esta mezcla de reaccin
se excita con luz polarizada. Se usa un sistema
emisor que emite luz polarizada vertical para
excitar el fluorforo, el cual emitir una fluorescencia con longitud de onda diferente de la original. El sistema ptico de deteccin solo mide
luz polarizada que retorna verticalmente que es
la que procede nicamente de la unin trazadoranticuerpo (T-Ac), que por su elevado volumen
molecular, rota lentamente. El trazador libre T
rota tan deprisa que emite fluorescencia en todas
las direcciones y no se capta. Al ser un ensayo
competitivo, existe una relacin inversa entre la
cantidad de frmaco en la muestra del paciente F
y la intensidad de la luz polarizada recibida por el
detector ptico del instrumento.

3. Las muestras obtenidas durante la perfusin

IV se deben obtener del miembro opuesto.

Tcnicas cromatogrficas

4. Para los frmacos de distribucin lenta (amplio volumen de distribucin), hay que espe-

1. HPLC (High presin liquid cromatography)

El especimen se inyecta en columnas de diferen-

J. Daz Portillo. Monitorizacin de frmacos

tes materiales que aportan una gran superficie de

absorcin, y se hace circular por la columna aplicando presin constante, que aumenta el flujo.
Las molculas del especimen, atraviesan la columna a diferente velocidad segn sus caractersticas de solubilidad y polaridad. Posteriormente,
mediante un detector (fluorescente, UV, electroqumico o incluso espectrometra de masas) unido a un ordenador, se mide el tiempo de retorno,
que es caracterstico de cada molcula en las
mismas condiciones de presin y temperatura.
La identificacin se realiza comparando el tiempo
de retorno obtenido con estndares internos. La
concentracin del analito se relaciona con el tamao del pico de actividad que mide el detector.

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compuestos se calientan a fase de gas. Despus

se pasan por una columna que contenga la fase
estacionaria (hidrocarburo, silicona). La separacin se basa en la capacidad de cada compuesto
para absorberse sobre la fase estacionaria, que
depender de sus caractersticas fsico-qumicas. Como sistema de deteccin se usa la espectroscopia de masas, en que la molcula se
bombardea con una corriente de electrones de
alta intensidad capaz de fragmentar la molcula.
El patrn de fragmentacin es caracterstico de
cada molcula y puede ser comparado con los
patrones de fragmentacin almacenados en un
ordenador.

2. Cromatografa de gases - espectroscopia

de masas
Implica dos tcnicas: cromatografa lquida de gases y espectroscopia de masas. En la primera, los

BIBLIOGRAFIA

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EDUCACIN CONTINUADA EN EL LABORATORIO CLNICO

COMIT DE EDUCACIN
M.C. Vill (presidenta), D. Balsells, M. Gass, J.A. Lillo, A. Merino, A. Moreno, M. Rodrguez
Marzo 2007